高效液相色譜法在藥品質(zhì)量分析中的應(yīng)用進展

1、 摘要 高效液相色譜法一種能夠?qū)^為復(fù)雜的混合進行分離的技術(shù)，因此， 被廣泛應(yīng)用于藥品質(zhì)量分析中。本文主要對高效液相色譜法的分離原理、高效液相色譜技術(shù)的發(fā)展及其在藥品質(zhì)量分析中的應(yīng)用等進行闡述。 關(guān)鍵詞 高效液相色譜法；藥品質(zhì)量分析；靈敏度 TOC o 1-5 h z 引言 2 HYPERLINK l bookmark0 o Current Document .高效液相色譜法的分離原理及特點 3 HYPERLINK l bookmark2 o Current Document 高效液相色譜技術(shù)的發(fā)展 3高效液相色譜法在藥品質(zhì)量分析中主要應(yīng)用 4藥品有效成分含量的檢測。 4 HYPERLINK

2、l bookmark7 o Current Document 藥品中雜質(zhì)含量的檢測。 4 HYPERLINK l bookmark9 o Current Document 抗生素含量的檢測。 4高效液相色譜法在藥品質(zhì)量控制中的應(yīng)用進展 5超高效液相色譜的到來 5參考文獻 6引言高效液相色譜是一種具有迅速和高度分辨能力的柱色譜技術(shù)。它是20 世紀(jì)70 年代以來迅速發(fā)展起來的分離分析生化樣品最有效的技術(shù)手段。是在經(jīng)典的液相柱色譜的基礎(chǔ)上，引入氣相色譜的理論，在技術(shù)上采用高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測器，實現(xiàn)了分析速度快、分離效率高和操作自動化，這種柱色譜技術(shù)被稱為高效液相色譜法或稱高壓液相色譜法

3、、高速液相色譜法、現(xiàn)代液相色譜法等。（ highperformance liquid chromatography ， HPLC。雖然氣相色譜的）應(yīng)用領(lǐng)域十分廣泛，但仍不能解決大量的恢復(fù)性差和熱不穩(wěn)定的化合物的分離難題。經(jīng)典的液相色譜仍然是用于分析這類化合物的手段。直到20 世紀(jì) 60 年代后期， 由于新型柱填料高壓輸液泵和高靈敏度檢測器的出現(xiàn)，才使液相色譜快速發(fā)展起來，并發(fā)展成為高效液相色譜。高效液相色譜可分為多種，按照固定相的不同可分為高效凝膠色譜、疏水性高效液相色譜、反相高效液相色譜、高效離子交換液相色譜、高效親和液相色譜以及高效聚焦液相色譜等類型1 。高效液相色譜在藥品質(zhì)量分析的應(yīng)用中

4、具有分離快速、分離效果好及靈敏度高等優(yōu)勢2 ，本文主要對高效液相色譜法的分離原理、高效液相色譜技術(shù)的發(fā)展及其在藥品質(zhì)量分析中的應(yīng)用等進行闡述。. 高效液相色譜法的分離原理及特點高效液相色譜法是根據(jù)混合物中的各個組成成分在固定相和流動相之間的分配比例的不同，實現(xiàn)成分之間的分離的3 。高效液相色譜儀根據(jù)檢測器的不同，分為紫外檢測器、示差檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、二極管陣列檢測及熒光檢測器等4 ，適用于不同特點混合物的分析，擴大了高效液相色譜法的分析范圍，使此方法應(yīng)用更加廣泛。此外，由于可以通過改變流動相的種類、配比、調(diào)節(jié)流動相的酸堿度達到改善色譜峰峰型的目的，進一步提高高效液相色譜的分離效果、 提

5、高檢測靈敏度，保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確性。高效液相色譜檢測器由于可以保證被分離物質(zhì)的完整性，可以作為分離、純化的手段，進一步與質(zhì)譜儀連用，互為優(yōu)勢，為藥品質(zhì)量分析提供更加可靠、方便的檢測方法。高效液相色譜技術(shù)的發(fā)展高效液相色譜法是一種新近發(fā)展起來的一種分離檢測方法，通過近些年的不斷發(fā)展， 可以作為一種穩(wěn)定的分離技術(shù)廣泛應(yīng)用于制藥領(lǐng)域及其他多個領(lǐng)域。經(jīng)統(tǒng)計，已知化合物的70%-80%都可用于液相色譜法進行分析5 ，理論上適用于高沸點、 熱穩(wěn)定性差及分子量較大的化合的分析。隨著技術(shù)的不斷完善，自動化、高效能、 高靈敏度、高選擇性等方向的發(fā)展已經(jīng)逐漸成為高效液相色譜技術(shù)的主要發(fā)展方向。3 高效液相色譜法在藥

6、品質(zhì)量分析中主要應(yīng)用藥品有效成分含量的檢測。高效液相色譜法是藥品有效成分含量檢測的常見分析方法。需要測定合成藥或制劑藥品的含量時，通常除主成分外還含有其他雜質(zhì)和附加成分，通過高效液相色譜法檢測，可以消除共存成分間的干擾。天然藥物通常具有復(fù)雜的成分，有效成分也可能是多種，由于成分的彼此影響，不同的檢測方法結(jié)果差別較大。例如，羅漢果的有效成分主要采用比色法定量檢測6 ，但是，檢測結(jié)果的偏差較大，采用液相色譜法檢測，就可以避免成分間的干擾，達到良好的準(zhǔn)確度，關(guān)于這方面的研究，陳維軍等做了詳細的研究，證明高效液相色譜法有效分離各成分，檢測結(jié)果準(zhǔn)確。藥品中雜質(zhì)含量的檢測。隨著國家對藥品質(zhì)量的控制加強，藥

7、品中雜質(zhì)含量的檢測要求也越來越嚴(yán)格。藥品在生產(chǎn)過程中由于工藝、生產(chǎn)環(huán)境引入或藥品自身降解產(chǎn)生的一些非有效成分， 超過標(biāo)準(zhǔn)要求的范圍，不僅會影響藥品的質(zhì)量，還會給用藥者帶來安全隱患，因此， 必須嚴(yán)格控制此類物質(zhì)的含量。高效液相色譜法由于具有較高的檢測靈敏度，適用于定量監(jiān)測藥品中附加成分的含量，即便只是微量。抗生素含量的檢測。抗生素在臨床應(yīng)用中經(jīng)常會出現(xiàn)不良反應(yīng)，后果嚴(yán)重，危及患者生命安全。出現(xiàn)不良反應(yīng)的主要原因是藥品在生產(chǎn)過程中產(chǎn)生了一些雜質(zhì)，這些雜質(zhì)主要為降解產(chǎn)物、中間體及聚合物等。高效液相色譜法可以檢測抗生素中雜質(zhì)的含量，保證藥品質(zhì)量及患者用藥安全。前些年， 我國抗生素濫用嚴(yán)重，引起人類及動

8、物耐藥性的產(chǎn)生。為避免產(chǎn)生耐藥性，目前，國家加強了對抗生素的使用的控制，尤其對一般消炎藥中抗生素的含量要求更加嚴(yán)格。高效液相色譜法由于具有較高的檢測靈敏度，在這類檢測中發(fā)揮了重要作用。例如， 對復(fù)方利福平膠囊中抗生素含量的檢測7 ，采用高效液相色譜法測定，得到超過99%回收率，重復(fù)性測定相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于1.0%。此外，高效液相色譜法也可應(yīng)用于測定動物性食品中的抗生素含量。利用高效液相色譜技術(shù)幫助控制食品安全，降低抗生素濫用風(fēng)險，避免由于誤食含有抗生素的食品而引起耐藥性的產(chǎn)生。高效液相色譜法在藥品質(zhì)量控制中的應(yīng)用進展隨著我國醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，藥品檢測的手段也不斷發(fā)展和完善。隨著高效液相色譜技術(shù)

9、的不斷發(fā)展，應(yīng)用范圍也不斷擴大，在藥品、食品、生物、化工等多個領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用。我國為保證患者用藥安全，關(guān)于藥品質(zhì)量控制的要求也逐步提高，高效液相色譜法憑借自身在檢測方面的優(yōu)勢，逐步替代了其他檢測準(zhǔn)確度不高的檢測方法，例如，在2000 版中國藥典中，常用薄層色譜法進行定性鑒別，但是由于薄層色譜法是一種容易被外界環(huán)境干擾的開放系統(tǒng)，很多時候不容易做出正確判斷，近些年來，在藥典中高效液相色譜法逐漸取代了薄層色譜法 8 。該技術(shù)不僅可獨立應(yīng)用于各成分的分離和分析，還可與質(zhì)譜等其他技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用9 ，在藥品分析領(lǐng)域作用更加顯著。近些年，不斷出現(xiàn)關(guān)于藥品質(zhì)量問題影響用藥者生命安全的報道，國家針對此類事件采

10、取一系列措施，提高藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，嚴(yán)把質(zhì)量關(guān)。同時，為保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠，檢測技術(shù)也在不斷提高， 尤其是高效液相色譜技術(shù)的應(yīng)用。隨著國家對制藥行業(yè)監(jiān)管力度的加大，為保證檢測結(jié)果更準(zhǔn)確、更可靠， 各項檢測技術(shù)仍在持續(xù)發(fā)展中，高效液相色譜技術(shù)也會不斷發(fā)展和完善。超高效液相色譜的到來。超高效液相色譜（UPLC）是近年來發(fā)展的以超高速度、超高分離度、超高靈敏度為特點的新型液相色譜技術(shù)，是基于高效液相色譜法的基礎(chǔ)上形成的藥物分析新技術(shù)，它由高壓輸液泵、高效固定相、信息化、機械化以及高靈敏度的檢測機械構(gòu)成，具有分離速度快、分析效率高，靈敏度高且能反復(fù)測試的優(yōu)點，已被廣泛應(yīng)用于各種藥物質(zhì)量檢測中。10 超高

11、效液相色譜法在藥物分析中顯示出廣闊的應(yīng)用前景和強勁的生命力，同時也有一定的缺點。超高效液相色譜儀器造價高影響了超高效液相色譜儀的進一步推廣使用；而且超高效液相色譜技術(shù)對色譜柱的要求高，一般廠家很難生產(chǎn); 其進樣量少又采用半環(huán)方式進樣，峰面積重復(fù)性差，填充色譜柱的顆粒細，色譜柱容易堵塞，這就導(dǎo)致對樣品的要求更高。隨著色譜技術(shù)的發(fā)展，這些問題會得到克服。超高效液相色譜法在藥物分析中將會發(fā)揮越來越重要的作用。參考文獻：余 小 波 , 胡 志 雄 , 張 維 農(nóng) 等 . 二 茂 鐵 鍵 合 硅 膠 液 相 色 譜 固 定 相 的 制 備 與 評 價 J. 山 東 化 工 ,2016,45(10):1-

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