小檗堿對利血平誘導(dǎo)的抑郁癥小鼠行為學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)研究

1、PAGE 11 -小檗堿對利血平誘導(dǎo)的抑郁癥小鼠行為學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)研究王晴劉競元齊曉娟摘要目的探討小檗堿對利血平誘導(dǎo)的抑郁癥模型小鼠行為學(xué)變化的影響。方法將40只實(shí)驗(yàn)動物隨機(jī)分為正常對照組、模型組、小檗堿組及氟西汀組，每組各10只。模型組、小檗堿組及氟西汀組小鼠每日腹腔注射利血平200mg/kg（生理鹽水配制），正常對照組每日腹腔注射等量的生理鹽水，每組小鼠連續(xù)注射4周。造模4周后采用灌胃法給藥，每天1次，共21d。小檗堿組190mg/kg灌胃;氟西汀組3mg/kg灌胃;正常對照組和模型組每天給予同體積蒸餾水灌胃。采用強(qiáng)迫游泳、懸尾及高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)法觀察小鼠的行為學(xué)變化。結(jié)果與正常對照組比較，

2、模型組的懸尾不動時(shí)間及強(qiáng)迫游泳不動時(shí)間均明顯延長（P0.01）。與正常對照組比較，小檗堿組強(qiáng)迫游泳不動時(shí)間縮短（P0.05）。與模型組比較，小檗堿組的懸尾不動時(shí)間及強(qiáng)迫游泳不動時(shí)間均縮短（P0.05）;氟西汀組的懸尾不動時(shí)間及強(qiáng)迫游泳不動時(shí)間均明顯縮短（P0.01）。與正常對照組比較，模型組開臂區(qū)進(jìn)入次數(shù)明顯減少（P0.05）;與模型組比較，氟西汀組開臂區(qū)進(jìn)入次數(shù)明顯增多（P0.01）。與正常對照組比較，模型組開臂區(qū)滯留時(shí)間明顯縮短（P0.05）;與模型組比較，小檗堿組開臂區(qū)滯留時(shí)間明顯延長（P0.01），氟西汀組開臂區(qū)滯留時(shí)間明顯延長（P0.01）。結(jié)論小檗堿具有抗抑郁作用。關(guān)鍵詞小檗堿;抑

3、郁癥;小鼠;行為學(xué)中圖分類號R285.5文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號2095-0616（2022）05-0023-04Experimentalstudyoftheeffectofberberineonbehaviorsofmicewithreserpine-induceddepressionWANGQingLIUJingyuanQIXiaojuanStaffRoomofPhysiology，QiqiharMedicalUniversity，Heilongjiang，Qiqihar161006，ChinaAbstractObjectiveToinvestigatetheeffectofberberine

4、onthebehavioralchangesinamousemodelofreserpine-induceddepression.MethodsAtotalof40experimentalanimalswererandomlydividedintothenormalcontrolgroup，themodelgroup，theberberinegroupandthefluoxetinegroup，with10miceineachgroup.Themiceinthemodelgroup，theberberinegroupandthefluoxetinegroupwereintraperitonea

5、llyinjectedwith200mg/kgreserpine（preparedinnormalsaline）everyday，thenormalcontrolgroupwasintraperitoneallyinjectedwiththesameamountofnormalsalineeveryday，andtheinjectionineachgrouplastedfor4weeks.After4weeksofmodeling，thedrugwasadministeredbygavageonceadayfor21days.Theberberinegroupwasgiven190mg/kgb

6、ygavage;thefluoxetinegroupwasgiven3mg/kgbygavage;thenormalcontrolgroupandthemodelgroupweregiventhesamevolumeofdistilledwaterbygavageeveryday.Thebehavioralchangesofmicewereobservedbyforcedswimtest（FST），tailsuspensiontest（TST）andelevatedplus-mazetest.ResultsComparedwiththenormalcontrolgroup，theimmobil

7、itytimeinTSTandimmobilitytimeinFSTinthemodelgroupweresignificantlylonger（P0.01）.Comparedwiththenormalcontrolgroup，theimmobilitytimeofforcedswimmingintheberberinegroupwasshortened（P0.05）.Comparedwiththemodelgroup，theimmobilitytimeinTSTandimmobilitytimeinFSTintheberberinegroupwereshorter（P0.05）;theimm

8、obilitytimeinTSTandimmobilitytimeinFSTinthefluoxetinegroupweresignificantlyshorter（P0.01）.Comparedwiththenormalcontrolgroup，thenumberofentriesintotheopenarmsinthemodelgroupwassignificantlyreduced（P0.05）.Comparedwiththemodelgroup，thenumberofentriesintotheopenarmsinthefluoxetinegroupincreasedsignifica

9、ntly（P0.01）.Comparedwiththenormalcontrolgroup，thetimespentintheopenarmsinthemodelgroupwassignificantlyshorter（P0.05）.Comparedwiththemodelgroup，thetimespentintheopenarmsintheberberinegroupwassignificantlylonger（P0.01）;andthetimespentintheopenarmsinthefluoxetinegroupwassignificantlylonger（P0.01）.Concl

10、usionBerberinehasantidepressanteffects.KeywordsBerberine;Depression;Mouse;Behavior抑郁癥是一種常見的精神障礙性疾病，以顯著而持久的情緒低落為主要臨床表現(xiàn)，嚴(yán)重者會出現(xiàn)悲觀厭世的情緒和自殺行為，患者自殺率高達(dá)12%14%1。近年來由于人們生活和工作壓力的增大，該病發(fā)病率逐年上升且發(fā)病人群越發(fā)廣泛，嚴(yán)重影響人們的身心健康2。在臨床上，抑郁癥還會繼發(fā)或伴發(fā)其他疾病，甚至?xí)谝欢ǔ潭壬霞又仄洳∏?-4。因此，人們對抑郁癥的治療越來越重視。西藥治療抑郁癥主要選用丙咪嗪、氟哌噻噸美利曲辛片及新型抗抑郁焦慮藥物鹽酸帕羅西汀等，

11、但存在禁忌證多、成癮性大、副作用明顯、停藥后易復(fù)發(fā)、有效率較低、患者依從性較差等問題5-6。因此，研究者將研究重點(diǎn)逐漸聚焦在具有廣闊前景的植物藥領(lǐng)域，特別是我國傳統(tǒng)的中藥領(lǐng)域，當(dāng)前研究并開發(fā)安全且有效的抗抑郁中草藥已成為研究者的共識，是目前一個(gè)新的研究熱點(diǎn)7。本實(shí)驗(yàn)研究了中藥小檗堿對小鼠抑郁癥模型行為學(xué)改變的影響，為臨床抑郁癥的治療探討新思路并提供相應(yīng)的數(shù)據(jù)支撐。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動物40只清潔級ICR小鼠，購于哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物部，動物許可證號為SCXK（黑）2022-001，雌雄各半，體重（20.452.23）g，所有實(shí)驗(yàn)動物均飼養(yǎng)在齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心，動物許可證號為SYX

12、K（黑）2022-001。所有小鼠均自由進(jìn)食和飲水，分籠飼養(yǎng)，每日日光燈照明時(shí)間為12h，溫濕度條件分別為（22.322.16）和40%60%，實(shí)驗(yàn)動物的使用嚴(yán)格遵循3R原則。1.2試劑與儀器利血平注射液購自天津金耀藥業(yè)有限公司（國藥準(zhǔn)字H12022905），鹽酸小檗堿購自武漢遠(yuǎn)成共創(chuàng)科技有限公司，鹽酸氟西汀片購自禮來蘇州制藥有限公司（國藥準(zhǔn)字J20220226），高架十字迷宮為成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)。1.3方法將實(shí)驗(yàn)動物隨機(jī)分為正常對照組、模型組、小檗堿組及氟西汀組，每組10只，每組小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后造模，正常對照組小鼠每日腹腔注射等量的生理鹽水，模型組、小檗堿組及氟西汀組小鼠每日腹腔注

13、射利血平200mg/kg（生理鹽水配制），每組小鼠連續(xù)注射4周。造模4周后采用灌胃法給藥，給藥劑量按動物體重折算系數(shù)公式換算。氟西汀組3mg/kg灌胃;小檗堿組190mg/kg灌胃;每天給予模型組及正常對照組同體積的蒸餾水灌胃。每天1次，共21d。1.3.1懸尾實(shí)驗(yàn)將膠帶粘住尾巴的小鼠倒掛于水平木棍上，保持小鼠頭部與地面距離為56cm，分別記錄每只小鼠在實(shí)驗(yàn)6min內(nèi)的后4min累積不動的時(shí)間。1.3.2強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)將小鼠置于高25cm、直徑18cm柱形器皿內(nèi)，內(nèi)裝有清水，溫度保持在（25.001.00），分別記錄每只小鼠在實(shí)驗(yàn)6min內(nèi)的后4min累積不動的時(shí)間。1.3.3高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)測

14、試前將待測小鼠置于一個(gè)鼠籠內(nèi)，先任其自由探索5min，然后迅速置于高架十字迷宮的中央平臺處，使其頭部正對其中任一開放臂，釋放后即開始測試，每只小鼠測試5min。取出小鼠后，用酒精棉球徹底擦拭箱底，待酒精完全揮發(fā)后，繼續(xù)下一只小鼠的測試8。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法2結(jié)果2.1懸尾實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較由于實(shí)驗(yàn)過程中部分小鼠死亡，最終各組小鼠數(shù)量見表1所列。與正常對照組比較，模型組、小檗堿組及氟西汀組的懸尾不動時(shí)間明顯延長，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=7.080，P=0.001）;與正常對照組比較，模型組懸尾不動時(shí)間明顯延長，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000），與正常對照組比較，小檗堿組懸尾不動時(shí)間延長，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

15、（P=0.275），與正常對照組比較，氟西汀組懸尾不動時(shí)間延長，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.246）。與模型組比較，小檗堿組懸尾不動時(shí)間明顯縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.005）;與模型組比較，氟西汀組懸尾不動時(shí)間明顯縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.002）。見表1。2.2強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較與正常對照組比較，模型組、小檗堿組及氟西汀組的強(qiáng)迫游泳不動時(shí)間有明顯改變，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=11.916，P=0.000）;與正常對照組比較，模型組強(qiáng)迫游泳不動時(shí)間明顯延長，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.002），與正常對照組比較，小檗堿組強(qiáng)迫游泳不動時(shí)間縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.014），與正常對

16、照組比較，氟西汀組強(qiáng)迫游泳不動時(shí)間縮短，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.352）。與模型組比較，小檗堿組強(qiáng)迫游泳不動時(shí)間明顯縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000）;與模型組比較，氟西汀組強(qiáng)迫游泳不動時(shí)間明顯縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000）。見表2。2.3高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較與正常對照組比較，模型組、小檗堿組及氟西汀組開臂區(qū)進(jìn)入次數(shù)有改變，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=3.300，P=0.034）;與正常對照組比較，模型組開臂區(qū)進(jìn)入次數(shù)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.023），與正常對照組比較，小檗堿組開臂區(qū)進(jìn)入次數(shù)減少，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.179），與正常對照組比較，氟西汀組開臂區(qū)進(jìn)入次

17、數(shù)增多，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.726）。與模型組比較，小檗堿組開臂區(qū)進(jìn)入次數(shù)增多，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.366）;與模型組比較，氟西汀組開臂區(qū)進(jìn)入次數(shù)增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.009）。與正常對照組比較，模型組、小檗堿組及氟西汀組開臂區(qū)滯留時(shí)間明顯改變，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=4.528，P=0.010）;與正常對照組比較，模型組開臂區(qū)滯留時(shí)間減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.010），與正常對照組比較，小檗堿組開臂區(qū)滯留時(shí)間延長，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.648），與正常對照組比較，氟西汀組開臂區(qū)滯留時(shí)間延長，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.648）。與模型組比較，小檗堿組開臂區(qū)滯留時(shí)間

18、延長，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.005）;與模型組比較，氟西汀組開臂區(qū)滯留時(shí)間延長，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.003）。見表3。3討論抑郁癥是一種常見的精神類疾病，主要癥狀一般表現(xiàn)為長期情緒低落、思維遲鈍、意志力缺乏，嚴(yán)重時(shí)可表現(xiàn)為自殺行為9。流行病學(xué)調(diào)查顯示，抑郁癥已經(jīng)成為繼冠心病之后影響人類健康的第二大類疾病，對人類的健康產(chǎn)生極大的危害，嚴(yán)重影響人們的日常生活及工作，因而受到越來越多的關(guān)注10-11。行為學(xué)測試方法有很多種，目前常見且被多數(shù)學(xué)者公認(rèn)的最標(biāo)準(zhǔn)的行為學(xué)測試方法是強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和懸尾實(shí)驗(yàn)，由Isingrini等12發(fā)明，這兩種測試方法是通過記錄動物在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和懸尾實(shí)驗(yàn)中的相對客

19、觀指標(biāo)即不動時(shí)間來量化反映動物在實(shí)驗(yàn)過程中的絕望程度13，因其實(shí)驗(yàn)操作簡單以及條件容易控制，且多種抗抑郁藥急性給藥后其反應(yīng)較為敏感，故常用于抗抑郁藥物的初篩11，14-15。此外，高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)也是一種比較常見的評估動物行為學(xué)的測試方法。通常情況下，正常小鼠在實(shí)驗(yàn)中進(jìn)入開放臂較進(jìn)入閉合臂的次數(shù)更多、滯留時(shí)間也更長，表示其探索新環(huán)境的行為能力更強(qiáng)，而抑郁模型小鼠進(jìn)入開放臂的次數(shù)及滯留時(shí)間較正常小鼠明顯減少16-17。小檗堿是中草藥如黃連、刺檗、白毛茛等的根莖和皮中的重要成分之一，研究顯示其具有多種藥理作用，如抑菌、抗炎、抗病毒等，且對多種疾病具有較好的治療作用，如腫瘤、糖尿病、心血管疾病、消化

20、道疾病等18-19。目前多項(xiàng)研究表明小檗堿可顯著縮短動物在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中的不動時(shí)間，并具有抗焦慮作用，其作用機(jī)制可能與某些神經(jīng)遞質(zhì)如單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及5-羥色胺受體等有關(guān)7，20-23。本研究顯示，小檗堿能明顯縮短動物的強(qiáng)迫游泳及懸尾不動時(shí)間，與文獻(xiàn)研究結(jié)果一致20-22。高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與模型組比較，小檗堿組開臂區(qū)滯留時(shí)間更長，表明該實(shí)驗(yàn)組小鼠在行為上具有較強(qiáng)的探索新環(huán)境的能力，與文獻(xiàn)研究結(jié)果一致23。但模型組與小檗堿組開臂區(qū)進(jìn)入次數(shù)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），可能與本研究觀察的動物數(shù)量有限有關(guān)，今后應(yīng)擴(kuò)大研究動物數(shù)量，進(jìn)一步觀察小檗堿的抗抑郁效果。綜合所述，提示小檗堿在利

21、血平誘導(dǎo)的抑郁模型小鼠中有抗抑郁作用，其作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。參考文獻(xiàn)1SaveanuRV，NemeroffCB.Etiologyofdepression：GeneticandenvironmentalfactorsJ.ThePsychiatricClinicsofNorthAmerica，2022，35（1）：51-71.2郝銀麗.抗抑郁中藥組分研究進(jìn)展J.西部中醫(yī)藥，2022，32（11）：139-144.3于珍，鄒開力，張小琴.高血壓伴抑郁癥與SCF及c-kit表達(dá)水平的關(guān)系研究J.湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2022，16（5）：74-76.4楊宇彤，周洪丹，高陽，等.冠心病患者合并

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