鼻炎的動(dòng)物模型國(guó)內(nèi)研究進(jìn)展

1、鼻炎的動(dòng)物模型國(guó)內(nèi)研究進(jìn)展【摘要】對(duì)于醫(yī)學(xué)的研究開(kāi)展來(lái)說(shuō)，動(dòng)物模型的建立是不可或缺的局部。本文綜述了國(guó)內(nèi)近十年來(lái)包括變應(yīng)性鼻炎、萎縮性鼻炎和慢性鼻炎在內(nèi)的鼻炎動(dòng)物模型的研究進(jìn)展，討論其造模機(jī)制和理論根據(jù)，以供實(shí)驗(yàn)參考?！娟P(guān)鍵詞】變應(yīng)性鼻炎萎縮性鼻炎慢性鼻炎動(dòng)物模型動(dòng)物模型的建立對(duì)于醫(yī)學(xué)的研究開(kāi)展來(lái)說(shuō)有重要意義，對(duì)于疾病的成因、病理變化以及治療的研究都是以其為根底的，他是醫(yī)學(xué)研究不可或缺的組成局部。因?yàn)樵囼?yàn)動(dòng)物和人類(lèi)之間在生理學(xué)上沒(méi)有本質(zhì)差異，兩者都是通過(guò)釋放本質(zhì)上一樣的內(nèi)分泌激素來(lái)控制他們內(nèi)部的一系列勝負(fù)反響過(guò)程，都是從中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)出相似的化學(xué)傳遞介質(zhì)，都是以一樣的方式對(duì)感染或

2、組織損傷起反響的1。鼻炎是病毒、細(xì)菌、變應(yīng)原、各種理化因子以及某些全身性疾病引起的鼻腔粘膜的炎癥。根據(jù)不同的病因、發(fā)病機(jī)制、病理改變等可分為急性鼻炎、慢性鼻炎、萎縮性鼻炎、變應(yīng)性鼻炎等多種，困擾著大多數(shù)人的工作學(xué)習(xí)及休息。而鼻炎的動(dòng)物模型的建立為人類(lèi)探究和治療鼻炎提供了有力的保證。本文僅就鼻炎的動(dòng)物模型在國(guó)內(nèi)的研究進(jìn)展綜述如下。1變應(yīng)性鼻炎1.1真菌性抗原致敏根據(jù)張氏2試驗(yàn)，經(jīng)互隔交鏈孢菌為真菌性抗原。取安康白色斷毛豚鼠雌雄不限，45周齡，體重250g300g，清潔級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。每只豚鼠腹腔注射抗原1.0l加等量FA，第15天開(kāi)場(chǎng)鼻腔激發(fā)：豚鼠鼻腔分別滴注互隔交鏈孢霉40l激發(fā)，每日一次，共5次。激

3、發(fā)后采取記分法記錄鼻分泌物量、噴嚏次數(shù)及鼻癢程度。記錄評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)文獻(xiàn)3。自鼻腔激發(fā)開(kāi)場(chǎng)觀察30分鐘，采用疊加法記分，總分超過(guò)5分為動(dòng)物模型成功。1.2通過(guò)注射卵清蛋白VA變應(yīng)原致敏1.2.1經(jīng)典方法4istar大鼠，雌雄各半，體重150200g。將卵白蛋白0.3g，輔以氫氧化鋁30g作佐劑，加生理鹽水1l形成混懸液，行腹腔注射，隔日1次，共7次，為根底致敏。再用0.5%卵白蛋白的生理鹽水攻擊雙鼻腔，每側(cè)0.05l，每日1次，共7次。每次攻擊后均觀察30in，內(nèi)容包括噴嚏、搔抓、流涕，記錄評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)文獻(xiàn)3。按標(biāo)準(zhǔn)疊加法記總分，每只超過(guò)5分為模型成功。1.2.2腎陽(yáng)虛型變應(yīng)性鼻炎動(dòng)物模型的建立

4、根據(jù)邱氏5試驗(yàn)，選用34月齡安康雄性花色豚鼠，體重300400克，以卵清蛋白V0.3g，輔以氫氧化鋁30g作佐劑，加生理鹽水1l形成混懸液，行腹腔注射，隔日1次，共7次。腹腔注射完成后的第2天，行被動(dòng)皮膚免疫反響passive-utaneus-anapliylasis,PA試驗(yàn)，確定VIgE抗體效價(jià)升高后，將VV20g0.9%NS20ul用微量加樣器滴入雙側(cè)鼻腔，每側(cè)10ul，每日一次，共7次。同時(shí)每日肌注醋酸強(qiáng)的松龍注射液劑量為50g/kg體重，連續(xù)7天，第8天開(kāi)場(chǎng)將劑量減為40g/kg，連續(xù)7天，第15天將劑量減為30g/kg，連續(xù)7天。1.2.3經(jīng)鼻致敏根據(jù)趙氏6試驗(yàn)取成年Hattley

5、豚鼠，體重400600g，以每側(cè)鼻孔20nl卵白蛋白+0.5gAIH3膠+0.1l生理鹽水，每天2次，連續(xù)10天予豚鼠雙鼻孔噴滴，每次噴滴前用4%利多卡因先噴鼻腔，以抑制鼻腔纖毛運(yùn)動(dòng)，延長(zhǎng)過(guò)敏原在鼻腔停留時(shí)間。間隔5天后，以1%卵白蛋白生理鹽水溶液，每側(cè)鼻腔0.10.5l激發(fā)，每3天激發(fā)一次，連續(xù)激發(fā)11次。1.3豚草花粉變應(yīng)原致敏根據(jù)余氏7實(shí)驗(yàn)，取清潔級(jí)近交系Strain2豚鼠，雌雄各半，鼠齡10周，體重350450g，42只，每只豚鼠用豚草花粉變應(yīng)原0.75l與等量的佛氏完全佐劑FA進(jìn)展人工免疫接種。先采用變應(yīng)原加佛氏完全佐劑于腹腔注射0.5l，四肢皮下腋下、腹股溝各注射0.25l共1.5

6、l。兩周后改為豚草花粉變應(yīng)原加佛氏不完全佐劑免疫，每周一次，連續(xù)兩周，注射劑量、部位與首次一樣。免疫后第四周行鼻腔過(guò)敏原激發(fā)，配置0.5%豚草花粉變應(yīng)原生理鹽水溶液，用加樣器滴入致敏組豚鼠雙側(cè)鼻孔每側(cè)10ul，每日一次，連續(xù)5天。從鼻腔滴入變應(yīng)原開(kāi)場(chǎng)觀察，記錄評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)文獻(xiàn)3。1.4以甲苯2，4二異氰酸脂TDI致敏1.4.1根據(jù)趙氏3試驗(yàn)方法，取豚鼠雌雄各半，體重250g300g。10%TDI溶液滴入豚鼠鼻腔致敏，每次0.3l，每日一次，連續(xù)7天，然后每2日一次，共4次，致敏時(shí)間共15天，從第一次給藥開(kāi)場(chǎng)觀察，記錄評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)文獻(xiàn)3。所致敏動(dòng)物于用藥第7日后得分均超過(guò)5分，說(shuō)明動(dòng)物模型制作成

7、功。1.4.2根據(jù)張氏8試驗(yàn)方法取豚鼠雌雄各半，體重270g330g。用小棉簽點(diǎn)10%TDI涂雙鼻腔，對(duì)照組用乙酸乙酯，每日1次，連續(xù)4天，休息2周后再每周2次激發(fā)，共5周。2萎縮性鼻炎根據(jù)戚氏9造模方法，選用安康、雌性SD大鼠，月齡23月，體重250g300g。動(dòng)物麻醉后行雙側(cè)卵巢切除術(shù)。術(shù)前15d心臟穿刺采血2l，術(shù)后15、30、45、60天分批斷頭處死，每次15只。動(dòng)物處死后，立即斷頭取鼻粘膜，以10%福爾馬林液固定，石蠟包埋，切片，HE染色，光鏡觀察。雙側(cè)卵巢切除術(shù)后15天，鼻粘膜未發(fā)生明顯的形態(tài)學(xué)改變。鼻粘膜的萎縮性改變發(fā)生于術(shù)后30天，與術(shù)后45天、60天鼻粘膜萎縮性改變一致。轉(zhuǎn)貼

8、于論文聯(lián)盟.ll.3慢性鼻炎3.1二氧化硫肺氣虛慢性鼻炎模型的建立。根據(jù)熊氏試驗(yàn)10，取安康花斑豚鼠，體重350g400g，雌雄各半。將豚鼠放入染毒箱染毒5分鐘，1次/日。每7天休息1次，共30天，至23天在染毒同時(shí)開(kāi)場(chǎng)肌注苯甲酸雌二醇。3.2二氧化氮肺氣虛慢性鼻炎模型的建立。根據(jù)楊氏11試驗(yàn)，取istar大鼠32只，體重8090g，雌雄各半，其試驗(yàn)過(guò)程與熊氏試驗(yàn)一樣，但以0.092l/3的二氧化氮代替0.5%濃度的二氧化硫染毒。4討論綜上所述，在國(guó)內(nèi)對(duì)鼻炎動(dòng)物模型的研究中，以變應(yīng)性鼻炎模型的研究最多。變應(yīng)性鼻炎是發(fā)生在鼻黏膜的變態(tài)反響性疾病，屬于型變態(tài)反響12。以此理論為根據(jù)，其造模過(guò)程均可

9、分為根底致敏和激發(fā)兩步。國(guó)內(nèi)變應(yīng)性鼻炎的造模以注射VA和TDI兩種致敏為主，也有采用諸如豚草花粉等其他過(guò)敏。張氏2即以互隔交鏈孢菌為真菌性抗原，成功制出豚鼠變應(yīng)性豚鼠模型。以VA作為變應(yīng)原致敏過(guò)程中，可分為腹腔注射致敏和經(jīng)鼻致敏兩種途徑。其中徐叔云主編的?藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)?4所記載的腹腔注射致敏方案被作為經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方案而廣泛沿用，其造模方法簡(jiǎn)便，時(shí)間一個(gè)月。而邱氏5將此方法與經(jīng)典的腎陽(yáng)虛造模方法加以有機(jī)結(jié)合，造成了帶有中醫(yī)證型的變應(yīng)性鼻炎模型，使中國(guó)的傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)和西方醫(yī)學(xué)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的根底上得以結(jié)合，為中醫(yī)對(duì)該病的治療提供了開(kāi)展空間。經(jīng)鼻致敏以趙氏6的實(shí)驗(yàn)方法為代表。但無(wú)論是腹腔注射或者是經(jīng)鼻致敏，都

10、是采用VA為變應(yīng)原，以氫氧化鋁作佐劑，所不同之處只是根底致敏的部位和致敏時(shí)間，所以不同的實(shí)驗(yàn)也應(yīng)該按照各自實(shí)驗(yàn)的特性而選擇實(shí)驗(yàn)方法。另外，余氏7根據(jù)豚草花粉成為我國(guó)許多地區(qū)的變應(yīng)性鼻炎的主要病因之一，而采用豚草花粉致敏，以其與FA做根底致敏同樣造模成功。這個(gè)實(shí)驗(yàn)為我們研究不同的變應(yīng)原所致的變態(tài)反響模型研究帶來(lái)重大提示，無(wú)論是方法還是研究思路都是值得借鑒的。變應(yīng)性鼻炎的另外一個(gè)較常用的造模方案就是TID致敏。趙氏3和張氏8以此涂鼻為根底致敏。不同的是趙氏的致敏時(shí)間短，致敏激發(fā)一共15天，而張氏在此根底上調(diào)整致敏過(guò)程，研究出慢性變應(yīng)性鼻炎模型，更接近人類(lèi)實(shí)際的發(fā)病過(guò)程。萎縮性鼻炎是一種以鼻黏膜萎縮

11、或退行性變?yōu)槠洳±硖卣鞯穆匝装Y12。戚氏9通過(guò)摘除雌性大鼠雙側(cè)卵巢的方法而巧妙的成功制出此模型，值得以后的類(lèi)似實(shí)驗(yàn)借鑒。慢性鼻炎是鼻腔黏膜和黏膜下層的慢性炎癥性疾病，臨床表現(xiàn)以鼻腔黏膜腫脹、分泌物增多，無(wú)明確致病微生物感染，病程持續(xù)4周以上或反復(fù)發(fā)作為特征12。熊氏10以中醫(yī)理論“久病咳喘，耗傷肺氣為理論根底，而二氧化硫是空氣中的主要污染物，且空氣污染是慢性鼻炎的主要原因之一，故采用二氣化硫熏的方法成功的做出了肺氣虛慢性鼻炎模型。而楊氏11以同樣為大氣中主要污染物之一的二氧化氮重復(fù)實(shí)驗(yàn)，得出同樣結(jié)果，更加驗(yàn)證了熊氏的理論。但這樣的實(shí)驗(yàn)，包括上面所提及的腎陽(yáng)虛型變應(yīng)性鼻炎動(dòng)物模型，其意義不僅僅

12、是一個(gè)模型的建立，更是西醫(yī)的實(shí)驗(yàn)方法同中醫(yī)理論的嚴(yán)密結(jié)合?？偠灾茄讋?dòng)物模型近年來(lái)在國(guó)內(nèi)的迅速開(kāi)展為疾病的病因病理討論和治療提供了更有利的保障。我們?cè)谑褂眠@些既有模型的同時(shí)也應(yīng)該考慮怎樣改進(jìn)它們，使之更符合疾病的發(fā)生開(kāi)展過(guò)程，使之與中醫(yī)的證型更好的結(jié)合，為攻破醫(yī)學(xué)上的壁壘發(fā)揮更大作用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1enzies-A,RbinsnDS.Esinphilisesinp:hilisyt-kines(interleukin-5)andantiesinphilitherapyinasthaJ.urrpined,2002,8:3338.2張志明真菌性抗原致變應(yīng)性鼻炎豚鼠模型建立J中國(guó)耳鼻咽喉頭頸外科，2022，125：3133張秀杰，董震，楊占鼻超敏反響實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒中華耳鼻喉科雜志，1993，281：174徐叔云，卞如廉，陳修藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)第2版北京：人民衛(wèi)生出版社，1994，25邱寶珊，王士貞腎陽(yáng)虛型變應(yīng)性鼻炎動(dòng)物模型的建立J中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合耳鼻咽喉科雜志，2002，101：166趙宇卵白蛋白經(jīng)鼻致敏建立變應(yīng)性鼻炎動(dòng)物模型J中華耳鼻咽候頭頸外科雜志，2022，403：1767余洪猛，文三立豚草花粉變應(yīng)性過(guò)敏性鼻炎豚鼠模型的建立J上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)，2001，214：2128張世平，程靖，何步東慢性變應(yīng)性鼻炎的新型動(dòng)物模型研制J廣東醫(yī)學(xué)，2022，233：2