第九次實(shí)驗(yàn) 方法比較試驗(yàn)

1、第九次實(shí)驗(yàn) 方法比較試驗(yàn)第1頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日 方法比較試驗(yàn)是將候選方法與準(zhǔn)確度已知的方法做對(duì)比，以評(píng)價(jià)候選方法的準(zhǔn)確度。它同時(shí)可檢測(cè)候選方法的恒定誤差和比例誤差的大小。第2頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日教學(xué)目的與要求1.掌握方法比較試驗(yàn)的原理和評(píng)價(jià)。2.掌握己糖激酶法測(cè)血糖和氧化酶法測(cè)血糖的測(cè)定原理。3.熟悉己糖激酶法和氧化酶法測(cè)定血清血糖的操作過(guò)程。 第3頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日一、試劑與材料1.己糖激酶法測(cè)定血糖試劑盒（工作液：試劑A、試劑B按2：1混合） 。2.氧化酶法測(cè)定血糖試劑盒（

2、工作液：試劑A、試劑B按2：1混合 ）。3.半自動(dòng)生化分析儀。4.實(shí)驗(yàn)血清。第4頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日三、血糖的測(cè)定（己糖激酶法已講）（一）實(shí)驗(yàn)原理Trinder反應(yīng):GOD葡萄糖酸2H2O2氧化酶法葡萄糖2H2O O2 H2O2 4-AAP 酚 POD苯醌亞胺2H2O HCl第5頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日2.混勻，37水浴7分鐘，波長(zhǎng) 500nm比色。（二）操作方法 工作液1ml蒸餾水10ul 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)10ul血清10ul 1. 空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 測(cè)定管 工作液1ml混合混合第6頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)5

3、1分，星期日3.結(jié)果計(jì)算測(cè)定管吸光度GLU（mmol/L) 5.56標(biāo)準(zhǔn)管吸光度GLU（mmol/L) 5.56GLU（mmol/L) 5.56GLU（mmol/L) 5.56第7頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日4.注意事項(xiàng)1.新配制的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液須放置2h以上(最好過(guò)夜) ，待變旋平衡后方可應(yīng)用.2. 尿酸會(huì)干擾過(guò)氧化物酶反應(yīng)，使結(jié)果偏低。3.還原性物質(zhì)可競(jìng)爭(zhēng)H2O2,使結(jié)果偏低。4.嚴(yán)重黃疽、溶血及乳糜樣血清使結(jié)果偏高應(yīng)先制備無(wú)蛋白血濾液，然后再進(jìn)行測(cè)定。 第8頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日四、方法比較 以葡萄糖已糖激酶法作為參比方法，

4、葡萄糖氧化酶法為候選方法進(jìn)行比較。 第9頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日1.收集標(biāo)本 每天收集高、中、低不同濃度標(biāo)本8份，5天共40份。2.測(cè)定 將標(biāo)本編號(hào)，分別用兩種方法先從1-8順序測(cè)定，再?gòu)?-1順序測(cè)定，記錄測(cè)定結(jié)果。重復(fù)5天。 第10頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日 以對(duì)比方法的結(jié)果為橫坐標(biāo)被評(píng)價(jià)方法的結(jié)果為縱坐標(biāo)繪制散點(diǎn)圖。3.繪制散點(diǎn)圖YX第11頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日4.檢查散點(diǎn)圖有無(wú)明顯離群點(diǎn)（1）分別計(jì)算每對(duì)結(jié)果差值，如： X1-Y1、X2-Y2.（2）計(jì)算所有差值的平均差值。（3）離群判

5、斷 以4倍平均差值作判斷限。某對(duì)差值超出4倍平均差值則視為離群點(diǎn)，剔除，若有兩個(gè)離群點(diǎn)，則另做標(biāo)本補(bǔ)充8分結(jié)果。第12頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日5.回歸及相關(guān)分析 根據(jù)直線(xiàn)回歸分析，求出回歸方程y=a+bx及相關(guān)系數(shù)r。截距a反映恒定系統(tǒng)誤差的大小，斜率b反映比例系統(tǒng)誤差的大小，相關(guān)系數(shù)反映兩種方法相關(guān)性的密切程度，r0.975或r0.95，可接受。第13頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日6.計(jì)算系統(tǒng)誤差 根據(jù)回歸方程的a、b值，可以計(jì)算候選方法的系統(tǒng)誤差（SE）；并與不同醫(yī)學(xué)決定水平（Xc）的允許誤差（TEa）作比較。 要求SE=（a+bXc）-Xc 1/2TEa第14頁(yè)，共16頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)51分，星期日7.配對(duì)t檢驗(yàn) 通過(guò)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，t值是方法比較實(shí)驗(yàn)中系統(tǒng)誤差和隨機(jī)誤差的比值，若tt0.05(v)，表明兩種方法間的系統(tǒng)誤差和隨機(jī)誤差量相比相差不大，盡管有偏差，但可能由隨機(jī)誤差為主所致，不一定確實(shí)存在方法