實驗室個人防護

1、關(guān)于實驗室個人防護第1頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三病原體及其使用實驗室分級 危險群等級生物安全等級實驗室類型實驗室操作規(guī)范安全設(shè)備 11基礎(chǔ)教學、研究優(yōu)良微生物學技術(shù)無，開放式工作臺22初級衛(wèi)生服務(wù)、診斷服務(wù)、研究優(yōu)良微生物學技術(shù)加上防護衣、生物危害標志開放式工作臺加上防止氣霧外流之生物安全柜33特殊診斷服務(wù)、研究同第 2 等級加上特殊防護衣、進入管制及定向氣流生物安全柜及（或）其他所有實驗室工作所需要之基本防護裝備44具危險性之病原體同第 3 等級加上氣密門、出口淋浴及廢棄物之特殊處理級生物安全柜或級生物安全柜并穿著正壓防護衣、雙門高壓蒸氣滅菌器（穿墻式）及經(jīng)過

2、濾之空氣第2頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三分類基準(病原微生物危害性)等級說明例子第一級危險群(RG1)微生物與人類健康成人之疾病無關(guān) Bacillus subtilisEscherichia coli-K12adeno-associated virus Type 1-4第二級危險群(RG2)微生物在人類所引起的疾病很少是嚴重的，而且通常有預防及治療的方法 Measles virusSalmonellaeToxoplasma spp.Hepatitis B virus第三級危險群(RG3)微生物 在人類可以引起嚴重或致死的疾病，可能有預防及治療之方法 M. tube

3、rculosis SARS-associated CoronavirusesHantaan virus 第四級危險群(RG4)微生物在人類可以引起嚴重或致死的疾病，但通常無預防及治療之方法 Ebola virus Marburg virus第3頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三人為的疏失，不良的實驗室技術(shù)以及器具，裝備的錯誤使用是引起實驗室傷害和工作相關(guān)的感染。今天我們要討論是如何避免或減少在報告文獻上常提及發(fā)生的實驗室技術(shù)性問題。第4頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三個人安全防護 1.進入實驗室應穿白袍實驗衣，微生物中心人員加著隔離衣，戴外科手

4、術(shù)口罩，手戴手套，必要時戴眼罩或面罩。2.實驗之病原體如有疫苗可預防，沒有保護抗體之個人，必須事先施打疫苗， 如B型肝炎疫苗。 3.實驗室工作人員要事先留存血液檢體當Base line ，必要時定期采取，以利健康管理及追蹤監(jiān)視。(本院是每年定期做員工健康檢查)第5頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三實驗室內(nèi)檢體的安全處理 實驗室內(nèi)檢體的不適當搜集，傳送和處理將帶給工作人員暴露于感染的險境。第6頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三檢體容器 檢體的容器可用玻璃材質(zhì)、塑料材質(zhì)尤佳，容器要堅固，蓋子或塞子要蓋好，內(nèi)容物不能泄漏，不可以有檢體留在容器之外表，容

5、器外面要標示清楚，檢體名稱、編號、患者姓、采取日期等。檢體報表或檢驗請求表格不可以包在檢體管子外表，要另外放入防水之封套。 第7頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三實驗室內(nèi)檢體之傳送為避免意外的泄漏或溢出，檢體要直立挿在試管架上再挿入第二層容器內(nèi)(運送箱)，第二層容器之材質(zhì)可以是金屬或塑料材質(zhì)且可高溫蒸氣減菌或耐化學消毒劑，最好蓋子有彈性墊環(huán)，檢體運送箱要常作清消。第8頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三檢體的收受 收受多數(shù)之檢體要特別設(shè)立一個房間或區(qū)塊不可以跟一般辦公室混在一起。檢體收受人收到檢體應立即與醫(yī)令單或報表核對檢體件數(shù)、量(檢體收受人不可

6、任意打開檢體瓶)、保溫狀況、登記收到日期、時間、并依序分送各組，除非不耐冷溫的病原體否則分送時也要保持低溫狀態(tài)。檢驗人員收到檢體要在送驗簿(單)上簽收(若有的話)才算完成送驗程序。第9頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三打開檢體包裝 收受及打開檢體包裝的人員，應該了解對健康具有潛在的危險性，工作人員需接受訓練及熟悉標準操作步驟，尤其是遇到檢體容器破裂或泄漏之處理程序，盛檢體的容器一定要在生物安全柜(BSC)內(nèi)才能打開，而且一定要泡好消毒劑以備隨時之需。 第10頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三避免感染物之擴散避免細菌掉落，微生物接種環(huán)(白金耳)的直

7、徑限2-3mm，且環(huán)要完整，柄端長度不超過6cm，以減少振動。開放式本生燈有濺射感染物之險，不可使用。應采用有阻體之電氣焚燒器滅菌接種環(huán)。小心烘乾痰液檢體，避免造成氣膠。要丟棄之檢體及培養(yǎng)物應放進防漏之袋子內(nèi)，貼上滅菌指示帶，滅菌后置入棄物桶。工作完畢工作區(qū)域要用適當?shù)南緞┳髑逑懈腥拘砸簽R出或滴落立即以浸消毒液之厚紙巾覆蓋。第11頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三生物安全柜(BSC)之使用(I)向所有使用者說明BSC之使用限制，并訂定使用紀錄表、安全操作規(guī)范或使用操作程序書，發(fā)給屬員，尤須特別聲明，濺灑、破裂或不良之操作技術(shù)，無法保護操作者之生命安全啟動BSC電源及

8、馬達開關(guān)待BSC之氣流穩(wěn)定后(約5分鐘)以紙條測試BSC操作口氣流是否形成氣幕(Air curtain)功能故障的BSC不可以使用BSC臺面鋪浸消毒液厚紙巾或抗污紙墊使用操作中不可打開窗口玻璃BSC臺面盡可能少擺放器械及耗材，后方之氣柵不可堵塞第12頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三生物安全柜(BSC)之使用(II)BSC內(nèi)不可使用本生燈，因熱氣擾亂氣流，且可能損壞HEPA，可以電氣焚燒器替代，最好使用丟棄式滅菌接種環(huán)所有感染性實驗操作必須在BSC內(nèi)之中間或后方臺面上，操作者由窗口向內(nèi)透視減少人員在操作者后面走動操作者之手、肘進出不能影響到氣流方向注意檢體或?qū)嶒灢牧喜豢?/p>

9、堵到氣柵，因為這樣擾亂氣流方向，會造成檢體污染及操作者暴露險境使用真空馬達吸引潛藏感染性液必須裝Trap及空氣過濾器第13頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三生物安全柜(BSC)之使用(III)決不可在BSC臺面作紀錄工作實驗操作中不慎濺出或滴出感染性液，立即以浸消毒劑之吸水性厚紙巾覆蓋實驗操作中突然遇到停電或BSC故障，工作人員應立即離開實驗操作前及工作完成后BSC風扇馬達至少繼續(xù)運轉(zhuǎn)5分鐘工作完畢BSC要用適當?shù)南緞┎潦枚ㄆ诓潦肬V燈管開UV燈設(shè)置開燈時間BSC每年定期檢測第14頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三避免感染性物刺傷 小心操作避免

10、玻璃器具類之破裂碎片導致意外接種或割傷，盡可能使用塑類器皿替代意外刺傷都由尖銳物品如注射針、玻璃毛細管或玻璃器皿破裂所導致減少使用注射筒或使用特別設(shè)計之安全針筒及開瓶器以降低傷害注射針使用后絕不可把針套套回去，用過之針筒棄置于有蓋子之堅固容器內(nèi)處理破裂之玻璃碎片一定要用掃把及鑷子以塑料品替代玻璃品 第15頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三避免吞入感染性物及皮膚、眼睛之接觸微生物實驗操作中大的顆粒和小液滴(直徑5um)很快就落到工作臺面上和操作者的手上所以操作者要戴拋棄式手套，并避免口、眼及臉部接觸感染性物實驗室內(nèi)不可貯放或飲食、食物實驗室內(nèi)嘴巴不可含鉛筆，咀嚼口香糖不可

11、以在實驗內(nèi)化妝任何可導致濺灑的可能潛藏感染性物操作，臉部、眼睛、口都要有防護 第16頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三血清分離 經(jīng)過適當訓練的人員才能從事這項工作戴手套及眼、粘膜之防護良好的實驗操作技術(shù)才能避免或減少濺射及氣膠之形成，血液及血清要利用自動吸管吸取，不可用倒的或以口吸取分離血清用之全血注意試管之放置，避免血液碰到試管蓋(塞子)欲丟棄之血液檢體管應置于有蓋之感染性垃圾桶內(nèi)，由清潔人員打包秤重之后專人焚燒備妥適當之消毒劑以備處理污染及濺灑之需血清檢體管盛量要適當，過量易造成污染 第17頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三離心機之使用(I)

12、 良好的機械操作是實驗室安全使用離心機之要件離心機應依照制造廠商之說明書操作使用離心機放置之高度要使操作人員能看清楚腔室之離心頭及離心管套以利操作離心管及檢體管之管壁要厚質(zhì)玻璃、塑料材質(zhì)更好，使用前要查看有無瑕疵注意離心管之材質(zhì)是能耐你所要的離心力及轉(zhuǎn)速離心管之檢體裝量要按生產(chǎn)廠商之使用說明裝填離心管及離心管套蓋子必須蓋緊檢體之裝填及吸取必須小心勿使濺灑在外，必要時在BSC內(nèi)操作離心管套及其套環(huán)要配對，放好檢體后確實稱重平衡第18頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三離心機之使用(II) 用角型轉(zhuǎn)子(Angle rotor)，離心管檢體不能裝過量，否則會溢出，造成污染離心第

13、三及第四等級危險之病原體必須用有氣密蓋之安全離心管套每日查看離心機腔室內(nèi)轉(zhuǎn)子旋轉(zhuǎn)高度處之污穢，如有污穢應重新評估protocol使用前查看轉(zhuǎn)子及離心管套是否有腐蝕或線狀龜裂每次使用后離心管套、轉(zhuǎn)子及離心機腔室要作清潔消毒離心時轉(zhuǎn)速不可加速太快用蒸餾水或70%propanol平衡空離心管套(Empty buckets)，不可用生理食鹽水或次氯酸鈉液因為會腐蝕金屬離心機定期安全檢測第19頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三高壓蒸氣滅菌鍋 (I)1.欲滅菌之液狀物容器不可裝滿超過三分之二以上的容量且不可緊閉容器口。2.用過耗材要裝進內(nèi)襯耐高溫滅菌袋之不銹鋼桶才可送進高壓蒸氣滅菌

14、鍋內(nèi)。3.滅菌物貼滅菌溫度指示帶。4.隨時緊閉鍋門。6.滅菌完成欲打開鍋門必先確認內(nèi)鍋壓力已歸零才可打開鍋門。 第20頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三高壓蒸氣滅菌鍋 (II)7.排氣過濾8.安全閥檢查9.定期清洗10.年度安全檢查第21頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三二氧化碳培養(yǎng)箱1.培養(yǎng)容器外面應標示2.水盤定期清洗及更換蒸餾水3.注意二氧化碳桶氣體量4.定期檢測及校正培養(yǎng)箱內(nèi)CO25.紀錄培養(yǎng)箱溫度及CO2厚度6.有培養(yǎng)物滲漏、污染立即清除消毒第22頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三恒溫水槽注意水位不可以低于電熱管

15、，隨時添加水量定期清洗恒溫水槽下班之前關(guān)閉不用的水槽加熱器有感染物污染時水溫調(diào)高到75持續(xù)加溫一小時，待溫度降下后加適量維康粉(約1%)消毒，清洗，更換蒸餾水第23頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三冰箱、冰柜之使用與管理冰箱、冰柜要定期清理，貯存中容器如有破裂立即處理，清理時戴面罩及厚橡膠手套、清理完，冰箱、冰柜內(nèi)面要消毒超低溫冰柜要定期更換溫度紀錄紙及散熱風扇濾網(wǎng)冰箱、冰柜內(nèi)要放溫度計，并每日作溫度紀錄超低溫冰柜內(nèi)保存物少時應放些冰寶以維溫度之穩(wěn)定所有保存于冰箱、冰柜內(nèi)之容器外表要清楚標示內(nèi)容物、保存者姓名、日期、未標示及過期的材料滅菌、棄置易燃性液體不可以存放在冰箱

16、(柜)內(nèi)冰柜內(nèi)保存物必須列列表保存超低溫冰柜需加鎖且專人管理第24頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三玻璃及尖銳物 盡可能以塑料裝品替代玻璃品，只有Borosilicate glass可以用，有裂痕或瑕疵品都不可以用注射針筒不可當吸管使用欲推出注射筒內(nèi)(有感染性液體)之空氣，針頭必須置于紗布上，注射筒才緩緩推出空氣 第25頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三凍結(jié)乾燥安瓶(裝感染性材料)之開封 開凍結(jié)乾燥安瓶一定要特別小心，因內(nèi)容物可能是在負壓狀態(tài)折斷安瓶突然間空氣進入可能有些內(nèi)容物會沖出，開安瓶一定要在BSC內(nèi)操作步驟如下:消毒安瓶外表2 手戴雙層手

17、套(手術(shù)手套外加防切割手套)3 在安瓶上端之適當位置以安瓶切割器割一下，切割處消毒后，安瓶挿入塑料試管，切割部位露出管口，再取一支塑料試管套在安瓶上端使安瓶切割部位介于兩支試管之間，安瓶覆蓋數(shù)層滅菌紗布后放入塑料袋，手在塑料袋外面，兩手握試管輕輕用力一折安瓶就斷4 慢慢注入滅菌蒸餾水或緩沖液溶解內(nèi)容物。避免產(chǎn)生氣泡第26頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三顯微鏡觀察之抹片 血液之染色、固定，痰、糞便之顯微鏡觀察不一定殺死所有在玻片上的微生物、病毒，這些抹片之處理要使用鋏子，在作清消、高壓滅菌棄置之前要做適當?shù)谋４?第27頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三生物安全柜(感染性物)污染之處理1.先以厚紙巾或吸水性良好之抹布覆蓋污染處 2.消毒液傾注于覆蓋紙巾上 3.以電話向?qū)嶒炇邑撠熑思吧锇踩芾砣藞蟾?4.30分鐘后，清除紙巾及破裂物(玻璃片用鑷子夾取， 細碎片用刷子處理)，廢棄物置入生物安全柜內(nèi)之 棄物容器內(nèi)5.用浸消毒液厚紙巾擦拭污染區(qū)域二次 (不可用手直接擦拭)6.數(shù)分鐘后用清水擦拭第28頁，共31頁，2022年，5月20日，22點14分，星期三7.更換外層手套，脫下之手套放入生物安全柜內(nèi)之 棄物容器內(nèi)8.先打開高壓滅菌鍋門9.廢棄物連同容器送進