尿液分析儀檢驗(yàn)課件

1、第六章 尿液分析儀檢驗(yàn)第六章 尿分析儀檢驗(yàn)質(zhì)量控制尿有形成分分析儀尿干化學(xué)分析儀本 章 內(nèi) 容尿分析儀檢驗(yàn)質(zhì)量控制尿有形成分分析儀尿干化學(xué)分析儀本 章 內(nèi)第一節(jié) 干化學(xué)尿液分析儀檢驗(yàn)第一節(jié) 干化學(xué)尿液分析儀檢驗(yàn)干化學(xué)尿液分析的發(fā)展史法國(guó)Maumene采用羊毛纖維作為試帶，檢測(cè)尿液中葡萄糖。1850美國(guó)人用單試紙條檢測(cè)尿蛋白和葡萄糖，開創(chuàng)了干化學(xué)法。1956干化學(xué)尿液分析儀已能在1條試帶上同時(shí)測(cè)定8-14個(gè)項(xiàng)目，檢測(cè)更迅速，結(jié)果更準(zhǔn)確。目前干化學(xué)尿液分析的發(fā)展史法國(guó)Maumene采用羊毛纖維作為試帶5干化學(xué)尿液分析的自動(dòng)化程度5干化學(xué)尿液分析的自動(dòng)化程度干化學(xué)尿液分析儀組成干化學(xué)尿液分析儀組成將

2、待檢的試帶傳送到檢測(cè)區(qū)，儀器檢測(cè)后將試帶傳送到廢料盒內(nèi)或手動(dòng)取下試帶機(jī)械系統(tǒng)將待檢的試帶傳送到檢測(cè)區(qū)，儀器檢測(cè)后將試帶傳送到廢料盒內(nèi)或手8圖7-1-1 光電系統(tǒng)檢測(cè)原理圖示意圖光線照射到試帶反應(yīng)物表面產(chǎn)生反射光反射光的強(qiáng)度與反應(yīng)顏色成反比不同強(qiáng)度的反射光再經(jīng)光電轉(zhuǎn)換器件轉(zhuǎn)化為電信號(hào)進(jìn)行處理光源單色處理光電轉(zhuǎn)換光學(xué)系統(tǒng)8圖7-1-1 光電系統(tǒng)檢測(cè)原理圖示意圖光線照射到試帶反應(yīng)反圖7-1-2 電路系統(tǒng)工作簡(jiǎn)圖將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)放大，經(jīng)模/數(shù)轉(zhuǎn)換，再用電腦進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，打印結(jié)果電路系統(tǒng)圖7-1-2 電路系統(tǒng)工作簡(jiǎn)圖將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)放大，經(jīng)模干化學(xué)尿液分析儀試帶結(jié)構(gòu)圖7-1-3 干化學(xué)尿液分析儀

3、試帶結(jié)構(gòu)圖單項(xiàng)試帶發(fā)展初期基本形式多項(xiàng)試帶含同一試帶上多種檢測(cè)項(xiàng)目的試劑模塊，可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)項(xiàng)目。干化學(xué)尿液分析儀試帶結(jié)構(gòu)圖7-1-3 干化學(xué)尿液分析儀試膜結(jié)構(gòu)主要作用尼龍膜層保護(hù)作用，防止大分子物質(zhì)污染反應(yīng)絨制層包括試劑層和碘酸鹽層。試劑層含有試劑成分，主要與尿液中的化學(xué)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化。碘酸鹽層可防止維生素C等物質(zhì)的干擾吸水層使尿液均勻快速滲入，并抑制尿液滲透到相鄰反應(yīng)區(qū)支持層支持作用，由尿液不浸潤(rùn)的塑料片制成尿液干化學(xué)法試帶多層膜結(jié)構(gòu)組成及主要作用膜結(jié)構(gòu)主要作用尼龍膜層保護(hù)作用，防止大分子物質(zhì)污染反應(yīng)絨制層干化學(xué)尿液分析儀檢測(cè)原理圖7-1-3 干化學(xué)尿液分析儀試帶結(jié)構(gòu)圖 試帶中

4、各試劑模塊與尿液中相應(yīng)成分進(jìn)行獨(dú)立反應(yīng)，顯示不同的顏色。 顏色的深淺與尿液樣本中的各種成分的濃度成正比。干化學(xué)尿液分析儀檢測(cè)原理圖7-1-3 干化學(xué)尿液分析儀試影響+試帶上的各檢測(cè)試劑塊尿液中相應(yīng)成分產(chǎn)生顏色發(fā)生化學(xué)反應(yīng)顏色深淺與光的吸收與反射相關(guān)尿液中相應(yīng)的被檢測(cè)成分成比例關(guān)系+吸收光值越大,反射光值越小,被檢成分的濃度越高尿液本身的顏色空白試劑(補(bǔ)償墊)采用球面積分儀接受雙波長(zhǎng)反射光的方式測(cè)定試帶上的顏色變化進(jìn)行半定量測(cè)定。雙波長(zhǎng)的作用：消除背景光 和雜散光測(cè)定波長(zhǎng)：被測(cè)試劑塊 的靈敏特征波長(zhǎng) 620nm：蛋白質(zhì)、葡萄糖、 pH、維生素C、隱血 550nm：膽紅素、尿膽原、 亞硝酸鹽、酮體

5、參考波長(zhǎng)：被測(cè)試劑塊不敏感的波長(zhǎng)，用于消除背景光和其他雜散光的影響,720nm影響+試帶上的尿液中產(chǎn)生顏色發(fā)生化學(xué)反應(yīng)顏色深淺尿液中相應(yīng)的將測(cè)定的每種試劑區(qū)反射光的光亮值與空白塊的反射光量值進(jìn)行比較，通過(guò)計(jì)算求出反射率儀器根據(jù)反射率確定尿液中生化成份的含量12R反射率；Tm試劑塊對(duì)檢測(cè)波長(zhǎng)的反射強(qiáng)度；Ts試劑塊對(duì)參考波長(zhǎng)的反射強(qiáng)度；反射率計(jì)算公式如下：Cm空白塊對(duì)檢測(cè)波長(zhǎng)的反射強(qiáng)度；Cs空白塊對(duì)參考波長(zhǎng)的反射強(qiáng)度。將測(cè)定的每種試劑區(qū)反射光的光亮值與空白塊的反射光量值進(jìn)行比較干化學(xué)尿液分析儀檢測(cè)參數(shù)及原理干化學(xué)尿液分析儀檢測(cè)參數(shù)及原理參數(shù)英文縮寫反應(yīng)原理參考區(qū)間pHpH酸堿指示劑法隨機(jī)尿：pH

6、4.58.0比重SG多聚電解質(zhì)離子解聚法1.0151.025蛋白質(zhì)PROpH指示劑蛋白質(zhì)誤差法陰性葡萄糖GLU葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶法陰性膽紅素BIL偶氮反應(yīng)法陰性尿膽原URO醛反應(yīng)、重氮反應(yīng)法陰性或弱陽(yáng)性酮體KET亞硝酸基鐵氰化鉀法陰性亞硝酸鹽NIT亞硝酸鹽還原法陰性隱血或紅細(xì)胞BLD血紅蛋白亞鐵血紅素類過(guò)氧化物酶法陰性白細(xì)胞LEU酯酶法陰性維生素CVitC吲哚酶法陰性尿液干化學(xué)分析儀主要檢測(cè)參數(shù)及原理參數(shù)英文縮寫反應(yīng)原理參考區(qū)間pHpH酸堿指示劑法隨機(jī)尿：pH尿液干化學(xué)分析儀試帶及結(jié)果判斷尿液干化學(xué)分析儀試帶及結(jié)果判斷干化學(xué)尿液分析法方法學(xué)評(píng)價(jià)優(yōu)點(diǎn)標(biāo)本用量較少適用于大批量標(biāo)本的篩檢速度快

7、，項(xiàng)目多，重復(fù)性好，準(zhǔn)確性較高干化學(xué)尿液分析法方法學(xué)評(píng)價(jià)優(yōu)點(diǎn)標(biāo)本用量較少適用于大批量標(biāo)本的局限性：與含硝酸鹽還原酶的某些細(xì)菌反應(yīng)，對(duì)于假單胞菌屬和革蘭氏陽(yáng)性菌等無(wú)反應(yīng)，易出現(xiàn)尿道感染漏診。NIT尿蛋白 只對(duì)白蛋白敏感，對(duì)球蛋白不敏感，對(duì)本周蛋白不反應(yīng)；易造成對(duì)IG型腎病、骨髓瘤漏診；RBC對(duì)完整RBC及HGB均有反應(yīng)；不穩(wěn)定酶、肌紅蛋白、菌尿會(huì)引起假陽(yáng)性；高滲性紅細(xì)胞易漏檢。WBC只測(cè)脂酶，對(duì)中性粒細(xì)胞有反應(yīng)，對(duì)淋巴細(xì)胞無(wú)反應(yīng)；容易漏診腎移植早期排異反應(yīng)。不能代替病理性尿液標(biāo)本的顯微鏡檢查，對(duì)白細(xì)胞、管型和結(jié)晶的檢測(cè)屬于間接檢測(cè)。 形態(tài)檢查局限性：與含硝酸鹽還原酶的某些細(xì)菌反應(yīng)，對(duì)于假單胞菌屬

8、和革蘭Vit C : GLU、ERY假陰性；青霉素：LEU 、PRO假陰性。 藥物影響 SG比重膜塊只能反映尿中陽(yáng)離子多少與比重計(jì)結(jié)果不一；對(duì)嬰兒等低比重尿則不敏感。BIL UBG 膽紅素及尿膽原膜塊靈敏度比Harrison手工法低得多。KET 酮體膜塊對(duì)乙酰乙酸最敏感，丙酮次之對(duì)-羥丁酸不反應(yīng)。GLU只對(duì)葡萄糖產(chǎn)生反應(yīng),對(duì)乳糖、半乳糖、果糖及蔗糖不反應(yīng)。Vit C : GLU、ERY假陰性； 藥物影響 SG比重膜只做尿干化學(xué)分析可能造成：我們是儀器做的，你的尿檢正常尿檢報(bào)告單昨天在另家醫(yī)院手工做說(shuō)有問(wèn)題？RBC、WBC易出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性有病理意義的尿有形成分漏檢前后結(jié)果不一致結(jié)果不可通用性

9、尿干化學(xué)應(yīng) 為初篩試驗(yàn)！只做尿干化學(xué)分析可能造成：我們是儀器做的，你的尿檢正常尿昨天參數(shù)假陽(yáng)性假陰性比重尿蛋白尿素10g/L、尿液pH6.5蛋白質(zhì)喹寧、嘧啶、聚乙烯、吡咯酮、氯已定、磷酸鹽、季銨類消毒劑、尿液pH9.0，大量青霉素尿、尿液pH500mg/L）、氟化鈉、高比重尿、尿酮體（0.4g/L）膽紅素吩噻嗪類或吩嗪類藥物維生素C（500mg/L）、亞硝酸鹽、光照尿膽原吲哚、吩噻嗪類、維生素K、磺胺藥亞硝酸鹽、光照、重氮藥物、對(duì)氨基水楊酸尿液干化學(xué)分析儀檢測(cè)假陽(yáng)性、假陰性常見的原因參數(shù)假陽(yáng)性假陰性比重尿蛋白尿素10g/L、尿液pH6.5參數(shù)假陽(yáng)性假陰性酮體酞、苯丙酮、左旋多巴代謝物試帶受潮、

10、陳舊尿液亞硝酸鹽陳舊尿液、亞硝酸鹽或偶氮?jiǎng)┪廴?、含硝酸鹽豐富的食物尿膽原、尿液pH6.0、維生素C、尿量過(guò)多、食物含硝酸鹽過(guò)低、尿液在膀胱中貯存100mg/L）白細(xì)胞甲醛、毛滴蟲、氧化劑、高濃度膽紅素、呋喃妥因蛋白質(zhì)、維生素C、葡萄糖、頭孢氨芐尿液干化學(xué)分析儀檢測(cè)假陽(yáng)性、假陰性常見的原因參數(shù)假陽(yáng)性假陰性酮體酞、苯丙酮、左旋多巴代謝物試帶受潮、陳舊第二節(jié) 尿液有形成分分析儀檢驗(yàn)第二節(jié) 尿液有形成分分析儀檢驗(yàn)?zāi)蛞河行纬煞址治霭l(fā)展史1983年美國(guó)一家公司推出以電視攝像模式獲取尿中有形成分圖像并進(jìn)行分析的尿液有形成分檢查工作站1995年日本將流式細(xì)胞術(shù)和電阻抗技術(shù)結(jié)合起來(lái)，研制了新一代全自動(dòng)尿液有形成

11、分分析儀尿液有形成分分析發(fā)展史1983年美國(guó)一家公司推出以電視攝像模尿液有形成分分析發(fā)展史2000年尿液有形成分?jǐn)?shù)字影像拍攝系統(tǒng)則開啟了數(shù)字圖像尿液有形成分分析的先例現(xiàn) 今全自動(dòng)尿液有形成分分析儀已普遍用于臨床，且大多數(shù)可連接或合并干化學(xué)分析儀尿液有形成分分析發(fā)展史2000年尿液有形成分?jǐn)?shù)字影像拍攝系統(tǒng)尿液有形成分分析儀分類尿液有形成分分析儀分類（一）流式細(xì)胞技術(shù)尿液有形成分分析儀流式細(xì)胞技術(shù)尿液有形成分分析儀結(jié)合半導(dǎo)體激光技術(shù)、鞘流技術(shù)和核酸熒光染色技術(shù)以及電阻抗原理為一體（一）流式細(xì)胞技術(shù)尿液有形成分分析儀流式細(xì)胞技術(shù)尿液有形成分流式細(xì)胞技術(shù)尿液有形成分分析流程流式細(xì)胞技術(shù)尿液有形成分分析

12、流程光學(xué)檢測(cè)光學(xué)檢測(cè)信號(hào)檢測(cè)信號(hào)檢測(cè)信號(hào)處理信號(hào)處理2022/9/292022/9/27核酸熒光染色染料菲啶 核酸成分染色羧花氰 與細(xì)胞膜 核膜和線粒體的脂層成分結(jié)合核酸熒光染色染料菲啶 核酸成分染色流式細(xì)胞技術(shù)尿液有形成分分析儀的檢測(cè)參數(shù)分類參數(shù)分析參數(shù)紅細(xì)胞（RBC)、白細(xì)胞（WBC）、上皮細(xì)胞（EC）、管型（CAST）、細(xì)菌（BACT）標(biāo)記參數(shù)病理性管型（P-CAST）、小圓上皮細(xì)胞（SRC）、類酵母細(xì)胞（YLC）、結(jié)晶（CRYSTAL）、精子其他參數(shù)紅細(xì)胞信息和紅細(xì)胞分析參數(shù)、白細(xì)胞分析參數(shù)、電導(dǎo)率、散點(diǎn)圖、直方圖等流式細(xì)胞技術(shù)尿液有形成分分析儀的檢測(cè)參數(shù)分類參數(shù)分析參數(shù)紅細(xì)散點(diǎn)圖S1

13、散點(diǎn)圖S2散點(diǎn)圖散點(diǎn)圖S1散點(diǎn)圖S2散點(diǎn)圖散點(diǎn)圖S3散點(diǎn)圖B1散點(diǎn)圖FLWFSCW散點(diǎn)圖S3散點(diǎn)圖B1散點(diǎn)圖FLWFSCWRBC-FscWBC-Fsc直方圖RBC-FscWBC-Fsc直方圖紅細(xì)胞信息RBC-P70Fsc100ch，且RBC-Fsc-DW50ch，提示為非腎小球性血尿70chRBC-P70Fsc100ch，且RBC-Fsc-DW50ch，為混合性紅細(xì)胞紅細(xì)胞信息主要提示紅細(xì)胞的均一性，對(duì)鑒別血尿來(lái)源有一定過(guò)篩作用70%RBC-P70Fsc 70ch，且RBC-Fsc-DW 50ch，提示為 腎小球性血尿紅細(xì)胞RBC-P70Fsc70chRBC-紅細(xì)胞信息主要 （二）流動(dòng)式數(shù)字影

14、像拍攝技術(shù)分析儀 （二）流動(dòng)式數(shù)字影像拍攝技術(shù)分析儀分析儀工作原理分析儀工作原理高速頻閃光源和顯微攝像的光學(xué)系統(tǒng)每標(biāo)本攝取500個(gè)視野的圖片 電腦處理將每一個(gè)畫面中的單獨(dú)的微粒的圖像分割開自動(dòng)顆粒識(shí)別分析技術(shù)（APRTM）對(duì)單個(gè)有形成分圖像歸類高速頻閃光源和顯微攝像的光學(xué)系統(tǒng)每標(biāo)本攝取500個(gè)視野的圖片自動(dòng)顆粒識(shí)別分析技術(shù)（APRTM）根據(jù)顆粒的大小、對(duì)比度、形狀、質(zhì)地四個(gè)條件對(duì)其進(jìn)行分析，得到一系列描述該粒子特征的相應(yīng)數(shù)值。自動(dòng)顆粒識(shí)別分析技術(shù)（APRTM）根據(jù)顆粒的大小、對(duì)比度、形27項(xiàng)可進(jìn)一步分類參數(shù)結(jié)晶體、病理管型、上皮細(xì)胞、酵母及毛滴蟲、脂肪滴、異性紅細(xì)胞等12項(xiàng)自動(dòng)分類參數(shù)紅細(xì)胞、

15、白細(xì)胞、白細(xì)胞團(tuán)、鱗狀上皮細(xì)胞、非鱗狀上皮細(xì)胞、透明管型、病理管型等APRTM識(shí)別的有形成分27項(xiàng)可進(jìn)一步分類參數(shù)結(jié)晶體、病理管型、上皮細(xì)胞、酵母及毛滴（三）靜止式數(shù)字影像拍攝技術(shù)分析儀（三）靜止式數(shù)字影像拍攝技術(shù)分析儀參 數(shù)紅細(xì)胞白細(xì)胞上皮細(xì)胞管型結(jié)晶粘液絲等電導(dǎo)率參 數(shù)紅細(xì)胞白細(xì)胞上皮細(xì)胞管型結(jié)晶粘液絲等電導(dǎo)率 （三）方法評(píng)價(jià)顯微鏡檢查是尿液有形成分檢查的金標(biāo)準(zhǔn)。 （三）方法評(píng)價(jià)顯微鏡檢查是尿液有形成分檢查的金標(biāo)準(zhǔn)。2022/9/292022/9/27第三節(jié) 尿液分析儀檢驗(yàn)的質(zhì)量控制第三節(jié) 尿液分析儀檢驗(yàn)的質(zhì)量控制質(zhì)量控制分析中質(zhì)量控制分析后質(zhì)量控制分析前質(zhì)量控制質(zhì)量控制分析中質(zhì)量控制分析

16、后質(zhì)量控制分析前質(zhì)量控制患者告知非正確采集方法對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響尿液樣本必須新鮮 指從醫(yī)生工作站申請(qǐng)至將尿液送到檢驗(yàn)科的質(zhì)量控制，包括標(biāo)本的采集運(yùn)送和保存等環(huán)節(jié)（一）分析前質(zhì)量控制患者告知 指從醫(yī)生工作站申請(qǐng)至將尿液送到檢驗(yàn)科的質(zhì)量控制，包52尿液標(biāo)本放置過(guò)久對(duì)尿液干化學(xué)分析儀檢驗(yàn)結(jié)果的影響項(xiàng)目結(jié)果原因pH升高細(xì)菌繁殖產(chǎn)氨葡萄糖降低細(xì)菌繁殖分解利用糖酮體假陰性酮體揮發(fā)膽紅素、尿膽原假陰性膽紅素陽(yáng)光照射變?yōu)槟懢G素；尿膽原氧化成尿膽素亞硝酸鹽假陽(yáng)性體外細(xì)菌繁殖蛋白質(zhì)假陽(yáng)性或假陰性尿液pH改變時(shí)尿液過(guò)堿或過(guò)酸隱血假陰性，尿試帶陽(yáng)性而鏡檢陰性過(guò)氧化物酶活性減弱紅細(xì)胞破壞細(xì)胞假陰性，尿試帶陽(yáng)性而鏡檢陰性白

17、細(xì)胞酯酶失活粒細(xì)胞破壞，特異性酯酶釋放入尿液52尿液標(biāo)本放置過(guò)久對(duì)尿液干化學(xué)分析儀檢驗(yàn)結(jié)果的影響項(xiàng)目結(jié)果（二）分析中質(zhì)量控制（二）分析中質(zhì)量控制1. 性能評(píng)價(jià) 評(píng)價(jià)指標(biāo)：符合率精密度線性攜帶污染率相關(guān)性生物參考區(qū)間驗(yàn)證1. 性能評(píng)價(jià) 評(píng)價(jià)指標(biāo)：符合率精密度線性攜帶相關(guān)性生物2. 結(jié)果驗(yàn)證和顯微鏡復(fù)檢泌尿系統(tǒng)疾病患者、糖尿病患者、應(yīng)用免疫抑制劑患者及妊娠婦女等醫(yī)生提出顯微鏡檢查要求尿液有形成分分析儀結(jié)果異?；騼x器報(bào)警等情況顯微鏡復(fù)檢原則2. 結(jié)果驗(yàn)證和顯微鏡復(fù)檢泌尿系統(tǒng)疾病患者、糖尿病患者、應(yīng)用尿液有形成分分析儀結(jié)果異?；騼x器報(bào)警尿干化學(xué)與有形成分分析儀結(jié)果不相符合或者RBC、WBC的結(jié)果相差量

18、級(jí)2級(jí)以上時(shí)尿有形成分分析儀各項(xiàng)結(jié)果有報(bào)警信息時(shí)應(yīng)分析結(jié)果之間的關(guān)聯(lián)性，注意臨床診斷和檢查結(jié)果的符合性尿液有形成分分析儀結(jié)果異常或儀器報(bào)警尿干化學(xué)與有形成分分析儀顯微鏡復(fù)核注意事項(xiàng)以鏡檢結(jié)果為診斷依據(jù)或觀察療效時(shí)不宜使用干化學(xué)過(guò)篩要結(jié)合臨床表現(xiàn)判斷結(jié)果，絕對(duì)不可只看干化學(xué)結(jié)果，忽略鏡檢結(jié)果當(dāng)尿液外觀異常時(shí)，應(yīng)注意顯微鏡檢查干化學(xué)試帶的質(zhì)量、穩(wěn)定性及質(zhì)量控制與過(guò)篩的準(zhǔn)確性密切相關(guān)每個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)都應(yīng)建立自己的篩選標(biāo)準(zhǔn)，篩選規(guī)則使用之前，必須經(jīng)過(guò)驗(yàn)證顯微鏡復(fù)核注意事項(xiàng)以鏡檢結(jié)果為診斷依據(jù)或觀察療效時(shí)不宜使用干參數(shù)干化學(xué)顯微鏡鏡檢法原因白細(xì)胞+尿液在膀胱中貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，致白細(xì)胞破壞、粒細(xì)胞酯酶釋放+尿液以淋巴細(xì)胞或單核細(xì)胞為主，見于腎移植患者紅細(xì)胞+尿液紅細(xì)胞被破壞，釋放Hb，尿液中含易熱性觸媒，肌紅蛋白尿（將尿液煮沸冷卻后再檢測(cè)可以排除酶的影響）+少見，見于維生素C100mg/L或試帶失效時(shí)干化學(xué)尿液分析儀法和顯微鏡鏡檢不符合情況與原因參數(shù)干化學(xué)顯微鏡原因白細(xì)胞+尿液在膀胱中貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，致白3. 室內(nèi)質(zhì)控每工作日至少檢測(cè)1次，任意一個(gè)試劑塊的檢測(cè)結(jié)果與 “靶值”偏差不超過(guò)1個(gè)等級(jí)每天用質(zhì)控物尿液進(jìn)行質(zhì)量控制監(jiān)測(cè)超過(guò)或結(jié)果在“正常”與“異?！敝g波動(dòng)均視為失控3. 室內(nèi)質(zhì)控每工作日至少檢測(cè)1次，任意一個(gè)試劑塊的檢測(cè)結(jié)果干化學(xué)尿液分析儀室內(nèi)質(zhì)控干化學(xué)尿