一種阿維菌素制劑對(duì)大中華鳋殺滅效果的觀察

1、一種阿維菌素制劑對(duì)大中華鳋殺滅效果的觀察目錄目錄.i摘要.iabstratii1前言.12材料與方法.22.1材料.3結(jié)果與分析.64討論.10參考文獻(xiàn).12致謝.13摘要目的主要研究草魚中寄生的大中華鳋的藥物防治，對(duì)新阿維菌素制劑殺滅大中華鳋進(jìn)展平安性和療效評(píng)價(jià)。水產(chǎn)受試藥物對(duì)黃顙魚、大口鯰、白鰱的急性毒性實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果說明黃顙魚平安濃度s為0.0842g/l，大口鯰平安濃度為0.2163g/l，白鰱平安濃度為0.2304g/l。因?yàn)辄S顙魚的平安濃度范圍較低，故在一個(gè)池塘中施藥時(shí)可以以其做根據(jù)。在平安濃度下該藥對(duì)離體大中華鳋的殺滅效果較為顯著，大多數(shù)死亡，而在高濃度條件下，雖可有效殺滅大中華鳋

2、，但此時(shí)對(duì)魚體亦有較大影響。因此詳細(xì)應(yīng)用到消費(fèi)上，有必要進(jìn)展進(jìn)一步的研究，從而合理開發(fā)使用藥物。關(guān)鍵詞阿維菌素制劑；平安濃度；大中華鳋keyrdsaveretin；safenentratin；sinergasilus；1前言中華鳋病的病原體有大中鳋和鰱中華鳋。中華鳋雌雄異體，雌蟲營寄生生活，雄蟲營自由生活。大中華鳋的雌蟲寄生在草魚鰓上，鰱中華鳋寄生在鰱鰓上。雌蟲用大鉤鉤在魚的鰓絲上，像掛著許多小蛆，所以中華鳋病又叫“鰓蛆脖。中華鳋寄生在魚的鰓上，除了它的大鉤鉤破鰓組織，奪取魚的營養(yǎng)以外，它還可能分泌一種酶的物質(zhì)，刺激鰓組織，使組織增生，病魚的鰓絲末端腫脹發(fā)白、變形，嚴(yán)重時(shí)，整個(gè)鰓絲腫大發(fā)白，甚

3、至潰爛，使魚死亡。每年59月為流行盛期劉國勇等，2021。大中華鳋主要危害2齡以上的草魚，病魚在水中跳躍不安，食欲減退或不食，體發(fā)黑；嚴(yán)重時(shí)或并發(fā)其它病時(shí)，呼吸困難，離群獨(dú)游，或停留近岸水體中，不久死亡。揭開鰓蓋，可見許多帶有卵囊的雌鳋掛在腫脹發(fā)白的鰓絲末端上，形似白色小蛆。目前對(duì)大中華鳋病的治療還沒有特效方法，大中華鳋病一旦發(fā)生，就難以控制，常常造成水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)宏大的經(jīng)濟(jì)損失。阿維菌素為一種觸殺，胃毒，浸透力強(qiáng)的魚病藥物。它是一種大環(huán)內(nèi)酯雙糖類化合物。是從土壤微生物中別離的天然產(chǎn)物。但它對(duì)葉片有很強(qiáng)的浸透作用，可殺死表皮下的害蟲，且殘效期長，它不殺卵suzukiket.al,1999)。它屬于

4、新型廣譜、高效、低毒抗生素類抗寄生蟲藥，對(duì)體內(nèi)外寄生蟲特別是線蟲和節(jié)肢動(dòng)物均有良好效果。本品對(duì)害蟲的驅(qū)殺作用，在于增加蟲體的抑制性遞質(zhì)r-氨基丁酸gaba的釋放,以及翻開谷氨酸控制的氯通道，增強(qiáng)神經(jīng)膜對(duì)氯的通透性，從而阻斷神經(jīng)信號(hào)的傳遞，最終神經(jīng)麻木，使肌肉細(xì)胞失去收縮才能，從而導(dǎo)致蟲體死亡。阿維菌素是由日本北里大學(xué)大村智等和美國erk公司在1979年首先開發(fā)的一類具有殺蟲、殺螨、殺線蟲活性的十六元大環(huán)內(nèi)酯化合物，由鏈霉菌中灰色鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)生。原藥為白色或黃白色結(jié)晶粉，有效成分含量75%-80%，常溫下不易分解，在25、ph6-9的溶液中無分解現(xiàn)象。主要通過胃毒和觸殺作用來殺滅害蟲。阿維菌素對(duì)

5、害蟲、害螨的藥效雖不如有些神經(jīng)毒劑那么快，但它能麻木害蟲，使之極少取食，到達(dá)使作物免遭蟲害的目的王廣成等，2022。就其消費(fèi)現(xiàn)狀而言阿維菌素價(jià)格自2001年以后波動(dòng)幅度較大。2021年阿維菌素價(jià)格上漲，阿維菌素油膏市場(chǎng)價(jià)從2021年12月份的700元kg到2021年5月的1050元kg，上漲了50左右。目前中國阿維菌素產(chǎn)能近2500t年，實(shí)際產(chǎn)量在1800t左右。自2022年以來年需求增幅為50。預(yù)計(jì)2021年年需求量在2300t左右，實(shí)際消費(fèi)產(chǎn)量在1800t左右，500t供求缺口要靠價(jià)格上漲抑制。隨著阿維菌素價(jià)格上漲，眾多消費(fèi)企業(yè)有新增和擴(kuò)建的跡象，阿維菌素又將迎來一波大幅度的擴(kuò)產(chǎn)潮。預(yù)計(jì)到

6、2021年6月份阿維菌素原藥產(chǎn)能將到達(dá)6000t以上，出現(xiàn)供大于求的場(chǎng)面。2021年阿維菌素的市場(chǎng)需求量預(yù)計(jì)25002800t之間。阿維菌素原藥有望在2021年的下半年再次創(chuàng)出600元kg以下的新低價(jià)，并在較長的一段時(shí)間內(nèi)維持較低的價(jià)格。預(yù)計(jì)阿維菌素原藥在近幾年還會(huì)出現(xiàn)一次供不應(yīng)求場(chǎng)面，之后國內(nèi)外市場(chǎng)將全面進(jìn)入成熟期，原藥價(jià)格將趨于平穩(wěn)孫娟，孟水強(qiáng)，2021。草魚tenpharyngdnidellus屬鯉形目鯉科雅羅魚亞科草魚屬，棲息于平原地區(qū)的江河湖泊，一般喜居于水的中下層和近岸多水草區(qū)域。草魚性活潑，游泳迅速，常成群覓食，為典型的草食性魚類。因其生長迅速，飼料來源廣，是中國淡水養(yǎng)殖的四大家

7、魚之一。而其培養(yǎng)過程中會(huì)感染大中華鳋病等，本實(shí)驗(yàn)主要研究阿維菌素對(duì)寄生于魚體的大中華鳋的殺滅作用，并預(yù)先測(cè)出對(duì)魚類本身的平安濃度，以便于在魚體平安濃度下用藥并證明最終查殺效果。玻璃缸或白色泡沫箱：15個(gè)，規(guī)格303050，水族箱：1個(gè)，用于暫養(yǎng)實(shí)驗(yàn)藥物：阿維菌素制劑器材：解剖剪、鑷子、解剖針、標(biāo)簽紙、量筒10、100、1000l、包埋器、燒杯250l、解剖盤試驗(yàn)藥物：阿維菌素制劑，生理鹽水，器材：光學(xué)顯微鏡，六孔板，量筒，燒杯，蓋玻片，載玻片，鑷子，水族箱，實(shí)驗(yàn)分四步：第一步：預(yù)實(shí)驗(yàn)確定24h魚苗全部存活的藥物最高濃度和魚苗全部死亡的最低濃度。第二步：設(shè)置假設(shè)干濃度梯度，每濃度設(shè)三個(gè)平行組。第

8、三步：統(tǒng)計(jì)各梯度24h、48h、72h和96h平均死亡率，觀察中毒和死亡個(gè)體的病癥。第四步：計(jì)算24h、48h和96h的l50，并根據(jù)相關(guān)公式計(jì)算受試物的平安濃度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果取重復(fù)組的平均值，死亡率p的計(jì)算公式為p1/1，其中p1為觀察死亡百分?jǐn)?shù)，為對(duì)照組死亡百分?jǐn)?shù)。采用sas8.1軟件以濃度的常用對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，死亡率的概率單位為縱坐標(biāo)進(jìn)展統(tǒng)計(jì)處理，擬合回歸方程，用f檢驗(yàn)法檢驗(yàn)回歸方程的顯著性。根據(jù)死亡率、死亡時(shí)間及相應(yīng)的藥物濃度采用半對(duì)數(shù)直線內(nèi)插法求出24h、48h和96h的l50及95可信限。平安濃度s是指對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物完全生命周期都無有害影響的毒物濃度。其計(jì)算公式如下經(jīng)歷公式：平安濃度96hl

9、500.1tubell公式：s48hl500.3/24hl50/48hl502張金彪等，2021周劍等，2021。半致死濃度l50是指：一定條件下，某藥物能引起試驗(yàn)生物群體中半數(shù)個(gè)體死亡的劑量。其測(cè)量暫沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。1觀察不同濃度的新阿維菌素制劑對(duì)離體大中華鳋的殺滅效果用鑷子夾取魚的鰓部到蘸有蒸餾水的載玻片上，取搜集顯微鏡視野下可見的大中華鳋，置于對(duì)照組蒸餾水和不同濃度藥液中，10in、1h、2h、6h、12h、24h后顯微鏡下觀察，記錄成熟期大中華鳋存活情況。2觀察不同溫度下的新阿維菌素制劑對(duì)離體大中華鳋的殺滅效果夾取魚鰓于蘸有蒸餾水的載玻片上，取搜集顯微鏡視野下可見的大中華鳋，置于對(duì)照組蒸

10、餾水和不同溫度下的藥液中，10in、1h、2h、6h、12h、24h后顯微鏡下觀察，記錄成熟期大中華鳋存活情況3結(jié)果與分析3.1急性毒性試驗(yàn)結(jié)果與分析注：黃顙魚平均體長和平均體重為1.1000,0.0502g本實(shí)驗(yàn)由于24h和48h時(shí)的半致死濃度差異較大，因此采用平安濃度s的計(jì)算公式為tubell公式：s48hl500.3/24hl50/48hl502。半致死濃度l50是指：一定條件下，某藥物能引起試驗(yàn)生物群體中半數(shù)個(gè)體死亡的劑量。通過實(shí)驗(yàn)，得到阿維菌素對(duì)黃顙魚的平安濃度s為0.0842g/l，對(duì)大口鯰的平安濃度為0.2163g/l，對(duì)白鰱的平安濃度為0.2304g/l?？梢缘弥?，魚類對(duì)阿維菌

11、素制劑比擬敏感，而黃顙魚的平安濃度最低，并以其為標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)來對(duì)池塘進(jìn)展用藥。3.2新阿維菌素制劑對(duì)草魚魚鰓上寄生的大中華鳋殺滅觀察結(jié)果與分析表3-3水溫20下不同濃度阿維菌素對(duì)離體大中華鳋的作用效果table3-3effetfdifferentnentratinfaveretinnsinergasilusat20時(shí)間tie成活率濃度nentratin10in1h2h6h12h24h0.008g/l100%100%100%90%90%90%0.040g/l100%100%90%90%90%90%0.080g/l100%90%80%80%70%70%0.160g/l70%40%20%10%5%0%0

12、.800g/l10%5%5%0%0%0%對(duì)照組ntrlgrup100%100%100%100%100%100%表3-4水溫23下不同濃度阿維菌素對(duì)離體大中華鳋的作用效果table3-4effetfthedifferentnentratinfaveretinnsinergasilusat23時(shí)間tie濃度存活率nentratin10in1h2h6h12h24h0.008g/l100%100%100%90%90%90%0.040g/l100%100%90%90%90%90%0.080g/l100%90%90%80%80%80%0.160g/l80%50%30%10%5%5%0.800g/l20%5

13、%5%0%0%0%對(duì)照組ntrlgrup100%100%100%100%100%100%在一個(gè)池塘里，放養(yǎng)魚類為了符合生態(tài)系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)一般較多樣，在測(cè)定平安濃度時(shí)應(yīng)考慮所有魚中能承受的最低平安濃度，在24h、48h和96h的l50中黃顙魚、大口鯰、白鰱依次增大，因此取黃顙魚的l50為上限，在低于黃顙魚48h時(shí)的半致死濃度0.4373g/l時(shí)均可行。而黃顙魚的48h平安濃度為0.0842g/l，為較低者，因此以其為根據(jù)進(jìn)展整體用藥。根據(jù)表3和表4可以發(fā)現(xiàn)非常之一平安濃度下的殺滅效果和對(duì)照組沒有區(qū)別，二分之一平安濃度下對(duì)魚的殺滅也不明顯，平安濃度下殺蟲率也不及百分之三十。兩倍和十倍平安濃度下，作用比

14、擬明顯，濃度越大，效應(yīng)時(shí)間越短。溫度的不同，阿維菌素對(duì)大中華鳋的作用效果也是不同的。在一定程度上，溫度高，成蟲活性越明顯。從而可以存活時(shí)間相對(duì)長一些。而溫度低，成蟲活性不明顯，從而存活時(shí)間比溫度高時(shí)短。另外從藥動(dòng)學(xué)方面看，推測(cè)溫度變高時(shí)，阿維菌素藥效降低，從而一樣時(shí)間內(nèi)殺滅效果降低。當(dāng)溫度較高時(shí)，大中華鳋體內(nèi)酶活性在一定程度上升高，對(duì)藥物抵抗力也同時(shí)升高，因此藥效降低。4討論通過觀察表3-2阿維菌素對(duì)黃顙魚、大口鯰、白鰱急性毒性試驗(yàn)特征分析本實(shí)驗(yàn)中阿維菌素染毒24h、48h、72h和96h時(shí)黃顙魚的l50分別為0.5457、0.4373、0.3838g/l，大口鯰的l50分別為0.9829、0

15、.8864、0.7601g/l，白鰱的l50分別為0.9836、0.9058、0.8880g/l。故黃顙魚的黃顙魚的半致死量濃度最低，因此對(duì)于一個(gè)池塘以其為施藥根據(jù)。而經(jīng)查閱相關(guān)資料得知阿維菌素染毒24h、48h、72h和96h時(shí)異育銀鯽魚種的l50分別為0.21、0.14、0.08、0.06g/l，s為0.006g/l王錫珍和陸宏達(dá)，2021。比照結(jié)果顯示對(duì)異育銀鯽魚在48h內(nèi)的半致死濃度較低，因此在對(duì)池塘用藥時(shí)要多加考慮對(duì)異育銀鯽的影響。經(jīng)查閱得知阿維菌素對(duì)異育銀鯽魚苗和魚種、食蚊魚、鰱魚苗、青蝦、幼蟹、圓田螺96h的l50分別為0.018、0.06、0.08、0.02、0.52、0.25

16、、0.57g/l，平安濃度分別為0.0018、0.006、0.008、0.002、0.052、0.025、0.057g/l王錫珍，陸宏達(dá)，2021?？芍⒕S菌素對(duì)體積較小型動(dòng)物毒害較大，因此用藥時(shí)還要多加考量一個(gè)池塘的其他物種。本實(shí)驗(yàn)由于24h和48h時(shí)的半致死濃度差異較大，因此采用平安濃度s的計(jì)算公式為tubell公式：s48hl500.3/24hl50/48hl502。根據(jù)平安濃度公式：s48hl500.3/24hl50/48hl502得出在24h、48h和96h的l50中黃顙魚、大口鯰、白鰱依次增大，因此取黃顙魚的l50為上限，在低于黃顙魚48h時(shí)的半致死濃度0.4373g/l時(shí)均可行。

17、而黃顙魚的48h平安濃度為0.0842g/l，為較低者，因此以其為根據(jù)進(jìn)展整體用藥。本實(shí)驗(yàn)的缺乏之處在于有關(guān)阿維菌素制劑的開發(fā)和應(yīng)用目前還不夠深化，缺乏毒理學(xué)和治療方面的研究，而針對(duì)大中華鳋這種特定病原的研究相對(duì)更少。并且試驗(yàn)中用新阿維菌素制劑，討論藥效，僅討論了其對(duì)死亡率的影響，并沒有涉及到對(duì)療效的影響。同時(shí)，阿維菌素的藥物動(dòng)力學(xué)和藥物代謝研究也不多。藥物體外殺蟲只是水產(chǎn)藥物評(píng)價(jià)和挑選的一個(gè)方面，其結(jié)果和數(shù)據(jù)的參考價(jià)值是有限的。并且有關(guān)大中華鳋詳細(xì)種屬的問題也沒深化研究，只是觀察了大中華鳋。另外，實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)忽略了外界環(huán)境的干擾，試驗(yàn)得出的數(shù)據(jù)與實(shí)際消費(fèi)中的情況有相當(dāng)?shù)牟町悾@要求我們以后的試

18、驗(yàn)盡量模擬消費(fèi)條件，并做好病魚治療試驗(yàn)，以求更加貼近消費(fèi)實(shí)際。與此同時(shí)在實(shí)驗(yàn)過程中也發(fā)現(xiàn)一些問題，比方新的阿維菌素制劑在強(qiáng)光下易分解失效，不能有效殺滅大中華鳋，所以在配置藥液時(shí)需在光線比擬溫和，沒有太陽光直射的情況下進(jìn)展。并且新配置的藥液不可放置太遠(yuǎn)，否那么會(huì)失去藥效，條件答應(yīng)時(shí)，應(yīng)做到現(xiàn)配現(xiàn)用。如今隨著高毒漁藥的全面的被制止使用，再加上我國正在逐步加大對(duì)漁業(yè)病蟲害防治投入的力度，因?yàn)榘⒕S菌素這種高效低毒生物殺蟲劑具有對(duì)人畜平安，對(duì)作物害蟲殺滅效果好，不易產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)。因此研究其在水產(chǎn)方面是否也具有高效、低毒、殺滅效果好等特點(diǎn)具有非常廣闊的應(yīng)用前景。本研究通過研究草魚大中華鳋病的治療，對(duì)常

19、用魚類大中華鳋病防治藥物進(jìn)展了初步評(píng)價(jià)，為挑選效果良好而又平安的防治藥物給予參考。通過治療對(duì)新的阿維菌素制劑進(jìn)展評(píng)價(jià)和研究，希望得出的試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以為阿維菌素合理使用提供幫助。從而為魚類大中華鳋病的防治方法和藥物選擇提供參考。近年研發(fā)了一系列含阿維菌素的混合殺蟲劑，如與各種菊酯類藥劑混用，與毒死蜱混用等等，往往可以起到加速害蟲死亡速度；增加觸殺或其他作用方式；延緩害蟲產(chǎn)生耐藥性的效果，值得應(yīng)用。另外，從藥品開發(fā)上，一種叫做甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽，另一種叫做富表甲氨基阿維菌素的類似藥劑已經(jīng)經(jīng)過試驗(yàn)證實(shí)比阿維菌素的殺蟲活性更高，對(duì)人畜毒性更低，有很好的應(yīng)用前景buhannket.al,2021)。從

20、整個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果說，新阿維菌素制劑對(duì)魚中寄生的大中華鳋的殺滅是有效果的，并且效果比擬明顯。但是在平安濃度下對(duì)魚中寄生的大中華鳋的殺滅作用較顯著，魚中寄生的大中華鳋根本死亡。由此可知，阿維菌素新制劑對(duì)成活魚體大中華鳋殺滅效果較理想，在消費(fèi)理論環(huán)節(jié)可以適當(dāng)投入使用，而草魚在本實(shí)驗(yàn)中因?yàn)樵囼?yàn)品原因沒有進(jìn)展毒性實(shí)驗(yàn)，而以黃顙魚為參照標(biāo)6.王廣成，張忠阿維菌素的作用機(jī)理及其應(yīng)用現(xiàn)狀植物醫(yī)生，2022，19(1)：4-67.楊成輝魚類寄生蟲病常用防治藥物上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2022，12：18-198.周劍，周波幾種常用藥物對(duì)南方大口鲇的急性毒性實(shí)驗(yàn)水生態(tài)學(xué)雜志，2021，2(1)：25-339.張金彪，肖溫溫三種常用化學(xué)消毒劑對(duì)牙鲆仔幼魚的急性毒性研究河北漁業(yè)，2021，8：12-1810.張耀武，陳萬光5種常用漁藥對(duì)黃顙魚魚種的急性毒性實(shí)驗(yàn)水生態(tài)學(xué)雜志，2021，2(1)：45-5311.vaitnenetandkeranenalihthyphthiriusisfatlantisaln，salsalarfishdiseases，1981，4：405-41112.ahlit，atthesraihth