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文檔簡介

1、實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座某年9月某日晚上某院急診科來一病人,突然起病,寒戰(zhàn)、劇烈頭痛、惡心嘔吐,面色潮紅、眼結(jié)膜充血、咳嗽,左耳紅腫熱痛,體溫40。案例分析2實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座某年9月某日晚上某院急診科來一病人,突然起病,寒戰(zhàn)、劇烈頭痛醫(yī)生及時抽血進(jìn)行血液培養(yǎng),血常規(guī)白細(xì)胞增高及核左移。初步診斷敗血癥,收入院,使用泰能。但是使用泰能3天,病人癥狀沒有改善,血液培養(yǎng)陰性,給家屬下病危通知書。案例分析3實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座醫(yī)生及時抽血進(jìn)行血液培養(yǎng),血常規(guī)白細(xì)胞增高及核左移。案例分析請南方醫(yī)院專家會診,詳細(xì)詢問病史和仔細(xì)體查,得到重要線索,病人一周前爬過白云山,并躺

2、在草地上休息;病人左耳有似被蚊蟲叮咬后形成焦痂。案例分析4實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座請南方醫(yī)院專家會診,詳細(xì)詢問病史和仔細(xì)體查,得到重要線索,病懷疑恙蟲病,外裴試驗(yàn)陽性。恙蟲病立克次對頭孢菌素類耐藥,用四環(huán)素類抗生素,1天后退熱,繼續(xù)用藥1周,病人康復(fù)出院。病原體檢測重要性:明確臨床診斷和指導(dǎo)臨床用藥。案例分析5實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座懷疑恙蟲病,外裴試驗(yàn)陽性。恙蟲病立克次對頭孢菌素類耐藥,用四免疫室:酶鏈免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、膠體金層析試紙條、化學(xué)發(fā)光或電化學(xué)發(fā)光、乳膠凝集方法。檢測肝炎病毒、性病、呼吸系統(tǒng)病原體抗原或抗體。檢驗(yàn)科三個實(shí)驗(yàn)室合作進(jìn)行病原體檢查6實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座免疫

3、室:酶鏈免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、膠體金層析試紙條、化基因室:熒光定量PCR方法,定量檢測病原體基因。細(xì)菌室(重點(diǎn)):涂片檢查、培養(yǎng)鑒定和藥敏試驗(yàn),檢測細(xì)菌真菌。檢驗(yàn)科三個實(shí)驗(yàn)室合作進(jìn)行病原體檢查7實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座基因室:熒光定量PCR方法,定量檢測病原體基因。檢驗(yàn)科三個實(shí)第一部分 細(xì)菌真菌涂片檢查及臨床意義第二部分 細(xì)菌真菌培養(yǎng)鑒定及臨床意義第三部分 細(xì)菌真菌藥敏檢測及臨床意義第四部分 臨床各科科研工作結(jié)合本次課8實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座第一部分 細(xì)菌真菌涂片檢查及臨床意義8實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專Part 1 Morphological examinations of bacteria

4、 and fungi1 non-stained. 2 gram stain, bacteria and fungi.3 acid-fast stain, acid-fast bacillus.4 Indian ink stain, cryptococcus. 9實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Part 1 Morphological examinatisingle-celled, budding forms called yeast (spore).multicellular, filamentous forms called mold (spore and hypha).dimorphic fung

5、i, exist in two distinct morphologic forms. 1 Non-stained10實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座single-celled, budding forms cSkin scraping, nail scraping ,and observation of hairs directly by microscopy are also most helpful in diagnosing dermatophytic infections.Employing a drop of potassium hydroxide (15%) on a glass sli

6、de over the surface of the specimen.11實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Skin scraping, nail scrapinghairs12實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座hairs12實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Skin scraping13實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Skin scraping13實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Routine urine examination14實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Routine urine examination14實(shí)驗(yàn)診Basic principle? Procedure? Peptidoglycan.crystal violet, iod

7、ine, alcohol. carbofuchsin red.Results, G+ or G-, cocci or bacilli bacteria, fungi, in oil immersion field.2 Gram-stained15實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Basic principle? Procedure? 2 fungi in urine16實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座fungi in urine16實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座positive cultured blood17實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座positive cultured blood17實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)positive cul

8、tured blood18實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座positive cultured blood18實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)positive cultured blood19實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座positive cultured blood19實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)positive cultured blood20實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座positive cultured blood20實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)positive cultured blood21實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座positive cultured blood21實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)positive cultured blood22實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座positiv

9、e cultured blood22實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)sputum23實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座sputum23實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座sputum24實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座sputum24實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座sputum25實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座sputum25實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座sputum26實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座sputum26實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座sputum27實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座sputum27實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Fungi in leukorrhea, vaginitis28實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Fungi in leukorrhea, vaginitisDip

10、lococcus Neisseria gonorrhoeae29實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Diplococcus Neisseria gonorrhoBasic principle? Procedure? Lipid. carbolfuchsin red, hydrochloric acid 3% alcohol, methylene blue.Results, acid-fast bacteria red, other bacteria and background blue.3 acid-fast stain30實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Basic principle? Procedure?

11、3 The result report modeNegative, acid-fast bacilli not found,Positive (1 or 2), 1 or 2 whole visual field,Positive (+), 3 to 9 whole visual field,Positive (+), 10 to 99 whole visual field,Positive (+), 1 to 9 every visual field,Positive (+), 10 every visual field. 31實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座The result report mo

12、de31實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)acid-fast bacilli from sputum(+)32實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座acid-fast bacilli from sputum(Cryptococcus in cerebrospinal fluid.Basic principle, capsule.Procedure, sediment.Results. 4 the Indian ink stain 33實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Cryptococcus in cerebrospinal Cryptococcus neoformans34實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Cryptococcus neoform

13、ans34實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)germinative 35實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座germinative 35實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座36實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座36實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Advantages.cheap, rapid, diagnose primarily.Disadvantages.Not accurate.Part 1 Morphological examinations of bacteria and fungi37實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座Advantages.Part 1 Morphologica第二部分 細(xì)菌真菌培養(yǎng)鑒定及臨床意義一、血液二、中段尿三、糞便四、痰液五、咽拭子

14、六、穿刺液七、分泌物八、器械38實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座第二部分 細(xì)菌真菌培養(yǎng)鑒定及臨床意義一、血液二、中段尿一、血液的病原體檢查 Etiologic Examination of Blood and Bone Marrow目的和意義;采血指征;采血注意事項(xiàng);結(jié)果報告形式。39實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座一、血液的病原體檢查 Etiologic Examinat 目前我國社會老齡化日趨嚴(yán)重,慢性病及惡性腫瘤、器官移植、愛滋病和結(jié)核病病人不斷增多,侵襲性診療技術(shù)廣泛應(yīng)用,敗血癥發(fā)病率不斷增加。 敗血癥病死率30%以上;早期病原學(xué)診斷和合理抗生素治療,明顯降低敗血癥病死率。40實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座

15、 目前我國社會老齡化日趨嚴(yán)重,慢性病及惡性腫瘤、器官移血液培養(yǎng)的送檢指征:發(fā)熱38或低溫10109/L,“核左移”白細(xì)胞增多;粒細(xì)胞減少,成熟的多核白細(xì)胞90次/分;呼吸頻率20次/分;二氧化碳分壓38或低溫36;41實(shí)驗(yàn)診斷最好在抗生素使用前采集,若已用抗菌藥須,則盡量避開血藥濃度的高峰期,最好在下次用藥前。血液標(biāo)本采集時間42實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座最好在抗生素使用前采集,血液標(biāo)本采集時間42實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識血液標(biāo)本采集時間43實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座血液標(biāo)本采集時間43實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座理想狀態(tài):在發(fā)熱高峰期前半小時,建議第一次可在病人發(fā)熱初期或高峰期采集,根據(jù)病人發(fā)熱情況,在24

16、h內(nèi)再取2-3次標(biāo)本,最好每次“雙套”“雙瓶”,“雙套”指不同采血部位,“雙瓶”指樹脂瓶和厭氧瓶。血液標(biāo)本采集時間44實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座理想狀態(tài):在發(fā)熱高峰期前半小時,血液標(biāo)本采集時間44實(shí)驗(yàn)診斷45實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座45實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座標(biāo)準(zhǔn)血培養(yǎng)瓶(藍(lán)色帽):帽子和標(biāo)簽紙左上方為藍(lán)色,“Standard 10 Aerobic/F”,用于成人需氧菌和真菌培養(yǎng),血液量3-10ml ,8-10ml最佳。 46實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座標(biāo)準(zhǔn)血培養(yǎng)瓶(藍(lán)色帽):46實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座中和抗生素的樹脂瓶(灰色帽):帽子和標(biāo)簽紙左上方為灰色,“PLUS+Aerobic/F” ,血液

17、量3-10ml ,8-10ml最佳。47實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座中和抗生素的樹脂瓶(灰色帽):47實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座厭氧瓶(黃色或橘紅色帽):帽子和標(biāo)簽紙左上方為黃色,“Standard Anaerobic/F”,血液量3-7ml ,5-7ml最佳。 48實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座厭氧瓶(黃色或橘紅色帽):48實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座中和抗生素的兒童瓶(粉紅色帽):帽子和標(biāo)簽紙左上方為粉紅色,“PEDS PLUS/F”, 血液量1-3ml。 49實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座中和抗生素的兒童瓶(粉紅色帽):49實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座采集標(biāo)本前先開申請單,到檢驗(yàn)科細(xì)菌室或門診領(lǐng)取血培養(yǎng)瓶;采血前

18、先在培養(yǎng)瓶標(biāo)簽紙左側(cè)空白處(箭頭所指處)填寫抽血時間和病人科別、床號和姓名;不要在培養(yǎng)瓶條形碼上涂寫,以免影響掃描。50實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座采集標(biāo)本前先開申請單,到檢驗(yàn)科細(xì)菌室或門診領(lǐng)取血培養(yǎng)瓶;50將標(biāo)簽紙上條形碼右側(cè)部分(含數(shù)字)撕下貼于檢查申請單上;而其它標(biāo)本均是將申請單上雙聯(lián)號碼撕下貼于標(biāo)本上。51實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座將標(biāo)簽紙上條形碼右側(cè)部分(含數(shù)字)撕下貼于檢查申請單上;51注射器采血后,將血培養(yǎng)瓶帽子揭下,橡皮由金屬皮(圍脖)固定于瓶上;將橡皮塞用70%酒精消毒,注射器針頭刺穿橡皮塞將血注入培養(yǎng)瓶內(nèi);橡皮塞裸露即可。52實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座注射器采血后,將血培養(yǎng)瓶帽子揭

19、下,橡皮由金屬皮(圍脖)固定于 細(xì)菌室接到已采集血液的培養(yǎng)瓶后,立即放入自動血液培養(yǎng)檢測儀,自動培養(yǎng)及實(shí)時檢測。53實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座 細(xì)菌室接到已采集血液的培養(yǎng)瓶后,立即放入自動血液54實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座54實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座陽性初步結(jié)果報告:儀器陽性報警,90%以上陽性標(biāo)本24h內(nèi)檢出;取出陽性瓶,對血液涂片及革蘭氏染色;立即將涂片結(jié)果(G+、G-細(xì)菌,球菌或桿菌,或真菌)電話通知相應(yīng)科室,并在網(wǎng)上發(fā)出;利用陽性血液進(jìn)行K-B法藥敏試驗(yàn),第二天將初步藥敏結(jié)果電話通知相應(yīng)科室。結(jié)果報告形式55實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座陽性初步結(jié)果報告:結(jié)果報告形式55實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座

20、陽性最終結(jié)果報告:將陽性血液接種血平板培養(yǎng)細(xì)菌;第二天將血平板上生長的細(xì)菌鑒定及MIC法藥敏試驗(yàn);第三天發(fā)鑒定及MIC法藥敏結(jié)果的正式報告。陰性結(jié)果報告:如培養(yǎng)5天仍為陰性,再接種血平板培養(yǎng)一天,核實(shí)為陰性后再發(fā)報告。結(jié)果報告形式56實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座陽性最終結(jié)果報告:結(jié)果報告形式56實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座二、中段尿標(biāo)本病原體檢查 Etiologic Examination of Urine目的和意義;采集方法;結(jié)果報告形式。57實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座二、中段尿標(biāo)本病原體檢查 Etiologic Examin檢測泌尿系統(tǒng)感染;一般進(jìn)行細(xì)菌和真菌培養(yǎng)、菌落計(jì)數(shù)和藥敏;也可離心后對沉渣進(jìn)

21、行涂片檢查,革蘭氏染色或抗酸染色;也可用于淋球菌培養(yǎng)和涂片檢查。目的和意義58實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座檢測泌尿系統(tǒng)感染;目的和意義58實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座最常采集中段尿,晨起第一次尿送檢最佳;先用肥皂水、或1:1000高錳酸鉀水溶液沖洗女性外陰部及尿道口或男性尿道口,再用滅菌水清洗,最后用滅菌紗布檫拭;排尿棄去前段尿,留取中段尿約10ml于無菌容器內(nèi)加蓋送檢。采集方法59實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座最常采集中段尿,晨起第一次尿送檢最佳;采集方法59實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)尿道病原菌可在溫暖尿液中繁殖,中段尿標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送檢,否則將影響病原菌計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性;排尿困難者可導(dǎo)尿,避免多次導(dǎo)尿所致尿路感染,導(dǎo)尿包

22、必須為無菌的合格產(chǎn)品。采集方法60實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座尿道病原菌可在溫暖尿液中繁殖,中段尿標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送檢,否“培養(yǎng)出3種以上細(xì)菌,疑采集污染,重留標(biāo)本”:如培養(yǎng)出3種或以上細(xì)菌,且無優(yōu)勢菌;約10%的標(biāo)本不合格,采集時污染,采集中段尿(尤其女性)最好由專門醫(yī)護(hù)人員指導(dǎo)采集,以減少污染。結(jié)果報告形式61實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座“培養(yǎng)出3種以上細(xì)菌,疑采集污染,重留標(biāo)本”:結(jié)果報告形式6“培養(yǎng)出少量某種細(xì)菌、菌落計(jì)數(shù)結(jié)果”:如菌量較少 105ml ,且必須有優(yōu)勢,才可以確定為感染,對優(yōu)勢菌進(jìn)行鑒定和藥敏。104ml至105ml,也有意義。 結(jié)果報告形式63實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座“培養(yǎng)出

23、某種細(xì)菌、菌落計(jì)數(shù)結(jié)果、藥敏結(jié)果”:結(jié)果報告形式63三、糞便標(biāo)本病原體檢查 Etiologic Examination of Stool目的和意義:對腸道疾病進(jìn)行病原學(xué)診斷;涂片染色:查真菌、弧菌、球菌/桿菌比;培養(yǎng)病原菌和藥敏:培養(yǎng)沙門氏和志賀菌;培養(yǎng)弧菌;培養(yǎng)真菌;菌群失調(diào)病人,對占優(yōu)勢細(xì)菌進(jìn)行鑒定藥敏。64實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座三、糞便標(biāo)本病原體檢查 Etiologic Examina標(biāo)本采集:挑取含膿、血或粘液糞便約2-3g;置于清潔容器或置于保存液中送檢;排便困難者或嬰幼兒可用直腸拭子采集。65實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座標(biāo)本采集:65實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座檢查上下呼吸道感染痰液(下

24、呼吸道)和咽拭子(咽喉部);可進(jìn)行涂片查細(xì)菌、真菌或抗酸桿菌;可進(jìn)行細(xì)菌、真菌或結(jié)核桿菌培養(yǎng);上述檢查只要一口痰即可,在一張檢查申請單上選上述多個項(xiàng)目。四和五、呼吸道標(biāo)本的病原體檢查66實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座檢查上下呼吸道感染四和五、呼吸道標(biāo)本的病原體檢查66實(shí)驗(yàn)診斷采集深部痰(sputum),不是唾液和口水;自然咳痰法(Expectorated sputum);最好為清晨第一口痰,用清水反復(fù)漱口用力咳出第一口痰于無菌容器內(nèi);支氣管鏡采集法(Bronchoscopy)。采集方法 67實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座采集深部痰(sputum),不是唾液和口水;采集方法 67報“正常菌群”:培養(yǎng)出的均為

25、不致病的細(xì)菌;培養(yǎng)出的細(xì)菌種類較多且無優(yōu)勢菌;分離出少量嗜血桿菌,也報告鑒定及藥敏。結(jié)果報告形式 68實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座報“正常菌群”:結(jié)果報告形式 68實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座報“無菌生長”:病人抗生素使用過度導(dǎo)致;可能病毒、支原體、衣原體等血平板無法培養(yǎng)。結(jié)果報告形式 69實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座報“無菌生長”:結(jié)果報告形式 69實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座報“分離出某種細(xì)菌或真菌,比例,藥敏”:分離出致病菌,而不是常見的正常菌群,且具有優(yōu)勢,約占血平板菌群總數(shù)的百分比%;同一病人如痰中連續(xù)分離出同一種菌,3天內(nèi)如果已經(jīng)做過藥敏試驗(yàn),則不再做藥敏;同一病人痰中細(xì)菌的種類和比例,會隨著治療

26、情況變化,也受留取痰標(biāo)本的質(zhì)量影響。結(jié)果報告形式 70實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座報“分離出某種細(xì)菌或真菌,比例,藥敏”:結(jié)果報告形式 70六、穿刺液(腦脊液)病原體檢查 Etiologic Examination of Cerebrospinal Fluid目的和意義:判斷是否為感染性疾病腦脊液采集:通過腰椎穿刺術(shù)(Lumber puncture)以無菌操作采集腦脊液3-5ml于無菌小瓶或無菌試管中,一般第一管用于微生物學(xué)檢查;71實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座六、穿刺液(腦脊液)病原體檢查 Etiologic Exa六、穿刺液(腦脊液)病原體檢查 Etiologic Examination of C

27、erebrospinal Fluid引起腦膜炎的病原體腦膜炎奈瑟菌等抵抗力弱,不耐冷,故采集的腦脊液應(yīng)立即保溫送檢或床邊接種;可查一般細(xì)菌真菌、隱球菌、抗酸桿菌。72實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座六、穿刺液(腦脊液)病原體檢查 Etiologic Exa其它穿刺液:如胸腹水、關(guān)節(jié)腔液等,穿刺針注入無菌拭子管送檢或?qū)⒆⑸淦髦苯铀蜋z;如為多管穿刺液或相關(guān)組織,請?jiān)谏暾垎紊献⒚魇欠穸甲雠囵B(yǎng)鑒定;采集注意事項(xiàng):注意無菌操作;如培養(yǎng)出類白喉?xiàng)U菌,常為采集時污染所致;可用血液培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。73實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座其它穿刺液:如胸腹水、關(guān)節(jié)腔液等,穿刺針注入無菌拭子管送檢或七、分泌物(傷口或膿液)病原體檢查開放

28、性化膿灶:應(yīng)先用滅菌生理鹽水沖洗表面污染菌,再用棉拭子蘸取或注射器吸取膿性分泌物;瘺管內(nèi)膿液:先用滅菌棉拭子擠壓瘺管棄去前端膿液,再收集膿汁;74實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座七、分泌物(傷口或膿液)病原體檢查開放性化膿灶:應(yīng)先用滅菌生七、分泌物(傷口或膿液)病原體檢查封閉性膿腫:可用注射器穿刺抽取;疑為厭氧菌感染者:取膿液后立即排凈注射器內(nèi)空氣,針頭插入無菌橡皮塞送檢;如為液體,最好床旁接種厭氧血培養(yǎng)瓶;外界相通部位的標(biāo)本,如痰不能作厭氧菌培養(yǎng)。75實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座七、分泌物(傷口或膿液)病原體檢查封閉性膿腫:可用注射器穿刺七、分泌物(生殖道)病原體檢查 Etiologic Examina

29、tion of STDs性傳播疾病,簡稱性病,是一組通過性行為傳播的,侵犯皮膚、性器官和全身多臟器損害的感染性疾病;標(biāo)本采集:常取生殖道分泌物,男性取尿道口分泌物或前列腺液,女性取外陰糜爛面病灶邊緣分泌物、陰道宮頸口分泌物等。76實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座七、分泌物(生殖道)病原體檢查 Etiologic Exa淋?。╣onorrhea)涂片染色鏡檢:急性淋菌性尿道炎敏感度和特異度高達(dá)90%以上;對慢性無癥狀淋病的女性患者涂片檢查漏診率達(dá)40%,故必須同時進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)鑒定及藥敏結(jié)果準(zhǔn)確,診斷金標(biāo)準(zhǔn)。77實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座淋?。╣onorrhea)77實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座解脲/人型支原

30、體:細(xì)菌室開展了培養(yǎng)鑒定及藥敏方法;需注意的是標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送檢。診斷試劑和方法要符合衛(wèi)生部相關(guān)規(guī)定;注意保護(hù)病人的隱私。78實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座解脲/人型支原體:78實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座八、器械病原體檢查 Etiologic Examination of other specimens靜脈插管等標(biāo)本:放入無菌拭子管中送檢;無菌試驗(yàn):懷疑醫(yī)療用品被污染時送檢;空氣培養(yǎng):到細(xì)菌室取培養(yǎng)平皿置于待測地點(diǎn),打開平皿蓋10min,蓋上后送檢;醫(yī)護(hù)人員手培養(yǎng)和物表培養(yǎng):到細(xì)菌室取含消毒劑中和液的無菌試管,用棉簽涂抹后放入試管中送檢。79實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座八、器械病原體檢查 Etiolog

31、ic Examinati第三部分 細(xì)菌真菌藥敏檢測及臨床意義藥敏結(jié)果檢驗(yàn)報告的解讀,細(xì)菌分布及藥敏結(jié)果分析。80實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座第三部分 細(xì)菌真菌藥敏檢測及臨床意義藥敏結(jié)果檢驗(yàn)報告的解藥敏結(jié)果檢驗(yàn)報告的解讀81實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座藥敏結(jié)果檢驗(yàn)報告的解讀81實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座MIC稀釋法(dilution method)K-B紙片擴(kuò)散法(Kirby-Bauer method)E-test藥敏檢測常用藥敏試驗(yàn)方法82實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座MIC稀釋法(dilution method)常用藥敏試驗(yàn)方K-B法是將含有定量抗菌藥物的紙片,貼在已接種測試菌的瓊脂平板上,紙片中所含藥物吸

32、收瓊脂中水分溶解后,不斷向紙片周圍擴(kuò)散形成遞減的梯度濃度。K-B紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)83實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座K-B法是將含有定量抗菌藥物的紙片,貼在已接種測試菌的瓊脂平K-B法藥敏試驗(yàn)不同的抗生素紙片細(xì)菌接種于MH平板量取直徑84實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座K-B法藥敏試驗(yàn)不同的抗生素紙片細(xì)菌接種于MH平板量取直徑8MIC稀釋法一般在瓊脂或肉湯中將抗菌藥物系列對倍稀釋,定量接種待檢菌, 35培養(yǎng)18至24小時后觀察結(jié)果;抑制檢測菌肉眼可見生長的最低藥物濃度,即最小抑菌濃度;MIC稀釋法結(jié)果以MIC(g/ml)數(shù)值報告,數(shù)值越小越敏感,與K-B法相反;MIC稀釋法藥敏檢測85實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講

33、座MIC稀釋法一般在瓊脂或肉湯中將抗菌藥物系列對倍稀釋,定量接86實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座86實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座稀釋法的結(jié)果比K-B法的更準(zhǔn)確。本實(shí)驗(yàn)室利用細(xì)菌自動鑒定和藥敏儀,為稀釋法藥敏試驗(yàn),由儀器自動判斷藥敏結(jié)果。 藥敏檢測的方法87實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座稀釋法的結(jié)果比K-B法的更準(zhǔn)確。藥敏檢測的方法87實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)BD Phoenix 100 細(xì)菌自動鑒定及藥敏分析儀88實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座BD Phoenix 100 細(xì)菌自動鑒定及藥敏分析儀88實(shí)MIC稀釋法藥敏鑒定孔生化試驗(yàn)細(xì)菌鑒定孔89實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座MIC稀釋法生化試驗(yàn)89實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座E-test

34、藥敏檢測結(jié)合K-B法和稀釋法的優(yōu)點(diǎn);原理同稀釋法檢測,操作同K-B法簡單;試紙條上含干化、穩(wěn)定、濃度由高到低呈指數(shù)梯度分布的某種抗菌藥物;主要用于少數(shù)抗生素結(jié)果的驗(yàn)證。 90實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座E-test藥敏檢測結(jié)合K-B法和稀釋法的優(yōu)點(diǎn);90實(shí)驗(yàn)診斷E-test藥敏檢測91實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座E-test藥敏檢測91實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(clinical laboratory standards of institute, CLSI)標(biāo)準(zhǔn)判斷敏感(susceptible,S):推薦使用;中介(intermediate,I):藥物MIC接近體液或組織可達(dá)到藥

35、物濃度,但反應(yīng)低于敏感株;耐藥(resistant,R);指常規(guī)用藥劑量不能達(dá)到MIC,臨床療效不可靠。藥敏檢測的方法92實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(clinical laborator抗菌藥物的作用靶位93實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座抗菌藥物的作用靶位93實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座氨基糖甙類:阿米卡星Amikacin、慶大霉素Gentamicin1代頭孢:頭孢唑啉Cefazolin2代頭孢:頭孢呋辛鈉Cefuroxime sodium3代頭孢:頭孢他啶Ceftazidime、頭孢噻肟Cefotaxime、頭孢吡肟(馬斯平)Cefepime細(xì)菌室藥敏試驗(yàn)中常選用的抗生素種類94實(shí)

36、驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座氨基糖甙類:阿米卡星Amikacin、慶大霉素Gentami單環(huán)-內(nèi)酰胺類:氨曲南Aztreonam廣譜青霉素類:氨芐西林Ampicilin、青霉素G Penicillin、苯唑西林Oxacillin 抗假單胞菌廣譜青霉素:哌拉西林Piperacillin95實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座單環(huán)-內(nèi)酰胺類:氨曲南Aztreonam95實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知復(fù)方-內(nèi)酰胺類:阿莫西林-克拉維酸(奧格門?。〢moxicilin/clavelanate氨芐西林-舒巴坦(優(yōu)力新)Ampicillin/Sulbactam哌拉西林-他唑巴坦(特治星)Pioeracillin/Tazobactam頭孢哌

37、酮-舒巴坦(舒普深)efoperazone/Sulbactam碳青霉烯類:亞胺培南Imipenem、美羅培南Meropenem96實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座復(fù)方-內(nèi)酰胺類:96實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座多肽類:多粘菌素E Colistin E、替考拉寧Teicoplanin、萬古霉素Vancomicin磺胺類:復(fù)方新諾明(甲氧芐唑-磺胺甲唑)Timethoprim/Sulfamethoxazole林可霉素類:克林霉素Clindamycin大環(huán)內(nèi)脂類:紅霉素Erythromycin97實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座多肽類:多粘菌素E Colistin E、替考拉寧Teico氯霉素:氯霉素Chloramph

38、enicol三代喹諾酮:環(huán)丙沙星Ciprofloxaxin 、氧氟沙星Ofloxaxin 、左旋氧氟沙星Levofloxacin 、莫西沙星Moxifloxacin四環(huán)素類:四環(huán)素Tetracycline利福平Rifampin 98實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座氯霉素:氯霉素Chloramphenicol98實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué) 產(chǎn)超廣譜-內(nèi)酰胺酶(extended spectrum-lactamase,ESBL):該酶水解青霉素、頭孢菌素及單胺類的超廣譜-酶,主要由肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌等腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)生。99實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座 產(chǎn)超廣譜-內(nèi)酰胺酶(extended spect 耐甲氧西林葡萄球菌(methecillin resistance staphylococcus,MRS), CLSI規(guī)定,葡萄球菌如對苯唑西林(或甲氧西林)耐藥:對青霉素類、頭孢菌素類、碳青霉烯類和含酶抑制劑的復(fù)方制劑均應(yīng)報告耐藥,而不考慮體外藥敏結(jié)果。100實(shí)驗(yàn)診斷醫(yī)學(xué)知識專題講座 耐甲氧西林葡萄球菌(methecillin re 耐高濃度

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