運脾中藥復方制劑降低厭食大鼠下丘腦腹內(nèi)側(cè)區(qū)神經(jīng)元的興奮性

1、運脾中藥復方制劑低落厭食大鼠下丘腦腹內(nèi)側(cè)區(qū)神經(jīng)元的快樂性運脾中藥復方制劑低落厭食大鼠下丘腦腹內(nèi)側(cè)區(qū)神經(jīng)元的快樂性【關鍵詞】運脾復方y(tǒng)unpipresriptinreduesexitabilityfvnneurnsinanrexirats【abstrat】ai:texplretherlefyunpi,atraditinalhinesepresriptin,inreduingthesensitivityfthevnneurnsttheperipheralafferentsignalinanrexiaratsethds:theanrexiratdelasestablishedbyfeedingrat

2、sithspeiallypreparedfragefr1eekflledbydailyintragastriadinistratinfliquidextratfyunpipresriptinfr3eeks.theextraellularrerdingfrratvnasthenndutedtharaterizetherespnsesfstiulatinggastrivagalnerveandintravenusinjetinfsulfatedhlystkinintapeptide(k8)inthentrl,delandyunpitreatedgrups.results:theduratinfth

3、evnneurnalexitatintthegastrivagalnervestiulatinindelgrupassignifiantlylngerthanthatinntrlgrup(p0.05)andthenuberfksensitiveneurnssignifiantlyinreasediththedereasefstiulatinintensityindelgrupparediththatinntrlgrup(p0.05).hever,thereasnsignifiantdiffereneintherespnsesfvnneurnstthestiulatinfgastrivagaln

4、erveandthekadinistratinbeteentheyunpitreatedgrupandthentrlgrup.nlusin:yunpipresriptinanreduethesensitivityfvnneurnstthenegativefeedbaksignalfrtheperipheryandiprvetheappetiteftheanrexiarats.【keyrds】yunpiplexpresriptin;anrexia;ventredialhypthalainuleus;stah;vagusnerve;hleystkinin【摘要】目的：證明運脾中藥復方兒寶顆粒低落厭

5、食大鼠下丘腦腹內(nèi)側(cè)核vn神經(jīng)元對外周傳入信號的敏感性.要領：用特制飼料喂養(yǎng)大鼠1k制備厭食模子，再用運脾復方灌胃治療3k，然后用細胞外記載法，記載大鼠vn神經(jīng)元的自覺放電，不雅察其對電刺激胃迷走神經(jīng)、靜脈注射八肽膽囊緊縮素k8的反響，比力比較組、模子組和治療組3組間的差異.效果：模子組大鼠vn神經(jīng)元對胃迷走神經(jīng)刺激的快樂性反響時程延伸p0.05，刺激強度低落p0.05，這些迷走快樂的vn神經(jīng)元對靜脈注射k的敏感率也增長p0.05；而治療組大鼠vn對胃迷走神經(jīng)刺激和靜脈注射k的反響與正常組無明顯差異.結(jié)論：運脾復方兒寶顆粒可以或許低落vn神經(jīng)元對外周傳入的攝食負反響信號的敏感性，從而到達促進食欲

6、的目的.【關鍵詞】運脾復方；厭食；下丘腦腹內(nèi)側(cè)核；胃；迷走神經(jīng)；膽囊緊縮素0弁言近20年的臨床理論證明運脾復方兒寶顆粒治療嬰幼兒厭食有可靠療效1.其機制研究表白，該復方能在外周程度上調(diào)治與攝食操縱相干的多種因素2，如促進胃腸道蠕動、加強消化酶的活性、促進小腸汲取成效、調(diào)治胃腸道激素水同等，而我們比年來的研究效果表白，兒寶顆粒還能在中樞程度上影響攝食舉動的操縱3-4.我們通過不雅察厭食大鼠下丘腦腹內(nèi)側(cè)核神經(jīng)元ventredialhypthalainulear,vn對胃迷走神經(jīng)刺激和靜脈注射k的反響，進一步闡發(fā)了運脾復方對vn神經(jīng)元快樂性的影響.1質(zhì)料和要領1.1質(zhì)料日齡3540d的sd大鼠45只

7、，體質(zhì)量6010g第四軍醫(yī)大學實行動物中央提供，隨機分為比較組、模子組和治療組，每組15只.全部動物均單籠豢養(yǎng)，自由進食水.1.2要領1.3胃迷走神經(jīng)刺激和vn神經(jīng)元自覺放電的記載實行第28日晚禁食，越日用細胞外記載法不雅察大鼠vn神經(jīng)元對刺激胃迷走神經(jīng)和靜脈注射k8的反響.手術(shù)步調(diào)：經(jīng)大鼠腹腔注射烏拉坦0.8g/kg和氯醛糖65g/kg混淆鎮(zhèn)痛劑，麻醉后施行頸外靜脈插管術(shù)，以備追加鎮(zhèn)痛劑、注射k810g/kg，美國siga公司產(chǎn)物和生理鹽水.沿左肋弓切開腹腔，分散胃迷走神經(jīng)前干與后干，掛于鉤狀雙極刺激電極以備刺激.縫合腹腔，用電熱板維持動物體溫于(37.00.5).然后，將動物結(jié)實于腦立體定

8、位儀上，施第4腦室腦脊液引流.根據(jù)paxins和astn鼠腦立體定位圖譜6，于vna-2.3-2.8,l0.51,h89上方開顱直徑約1.5.以負相矩形雙脈沖100500a,0.5s,100hz刺激胃迷走神經(jīng)干，用充以含10g/l滂胺天藍的0.5l/l醋酸鈉溶液的玻璃微電極直流阻抗510細胞外記載vn神經(jīng)元單元放電.神經(jīng)元的放電信號經(jīng)放大器放大后輸入窗口甄別器，觸發(fā)窗口甄別器輸出的尺度矩形脈沖5v,1.0s，通過模/數(shù)轉(zhuǎn)換器輸入盤算機舉行及時數(shù)據(jù)闡發(fā).由盤算機網(wǎng)羅的神經(jīng)元放電信號主動天生刺激前后時間直方圖，闡發(fā)細胞對刺激胃迷走神經(jīng)采樣隔斷2s，每次采樣800點，重復采樣100次和靜脈注射k采樣

9、隔斷1s，每次采樣900點，采樣1次的反響.比力刺激后反響時間段內(nèi)刺激后窗口神經(jīng)元的放電頻率與刺激前雷同時間段內(nèi)刺激前窗口神經(jīng)元的底子放電頻率，假設刺激后窗口內(nèi)的放電頻率低落到刺激前窗口內(nèi)底子放電頻率的30%以下，或增長到200%以上，那么以為該細胞對刺激產(chǎn)生了按捺或快樂反響.1.4構(gòu)造學定位每次實行竣事時，用陰極電流20a,10in將玻璃微電極內(nèi)的滂胺天藍染料微量滲析到電極尖端的記載點，然后取腦結(jié)實.1k后用冰凍切片機制備80厚的腦切片，查抄記載點位置圖1，凡現(xiàn)實記載點偏離vn者，所獲數(shù)據(jù)棄之不消.sd大鼠前囟后2.56橫切面，上方箭頭指示電極尾部陳跡，下方箭頭指示電極記載位置處于vn地區(qū).

10、2效果2.13組大鼠日攝食量在實行歷程中28d，3組大鼠日均勻攝食量變革趨勢差異p0.05；實行第17日內(nèi)，模子組與治療組大鼠日均勻攝食量較比較組落落快，表白造模樂成.經(jīng)兒寶顆粒治療后，治療組日均勻攝食量上升較快，模子組日均勻攝食量上升較慢圖2.表白運脾復方兒寶顆粒有促進食欲的作用.2.23組大鼠vn神經(jīng)元對刺激胃迷走神經(jīng)的反響3組大鼠共記載328個vn神經(jīng)元，此中比較組106個，模子組110個，治療組112個.胃迷走神經(jīng)刺激引起的vn神經(jīng)元反響范例有快樂性和按捺性反響兩種，即按捺性反響圖3a和快樂性反響圖3b，但以快樂性反響為主.比較組、模子組和治療組的vn神經(jīng)元對刺激胃迷走神經(jīng)的反響性無明

11、顯性差異p0.05，表1.3組大鼠按捺性反響的vn神經(jīng)元反響暗藏期、反響時程和刺激強度亦無明顯性差異表2.但是，模子組vn神經(jīng)元的快樂性反響時程顯著高于比較組p0.05和治療組(p0.05)，其所需的刺激強度卻明顯低于比較組(p0.05)和治療組(p0.05).這就使模子組大鼠vn神經(jīng)元快樂性反響的反響時程明顯大于其按捺性反響的反響時程p0.05，前者所需刺激強度卻明顯小于后者p0.05.而在比較組和治療組，vn神經(jīng)元的反響暗藏期、反響時程和刺激強度在快樂性反響和按捺性反響之間無明顯性差異.表1vn神經(jīng)元對刺激胃迷走神經(jīng)的反響性略表2胃迷走神經(jīng)刺激引起的大鼠vn神經(jīng)元的反響特性略2.23組大鼠

12、vn神經(jīng)元對靜脈注射k的反響我們對自覺放電比力不變的vn神經(jīng)元包羅對胃迷走神經(jīng)刺激有反響和沒有反響的細胞做了k敏感性測試，假設被檢測細胞對靜脈注射k出現(xiàn)出特異且明顯的快樂性反響，而對生理鹽水不出現(xiàn)反響，那么以為該細胞為k敏感神經(jīng)元.在對胃迷走神經(jīng)刺激無反響的vn細胞中,各組間k敏感神經(jīng)元比例無明顯性差異表3.而在對胃迷走神經(jīng)刺激有反響的vn神經(jīng)元中，模子組k敏感神經(jīng)元顯著高于比較組(p0.05)和治療組(p0.05).表33組大鼠vn神經(jīng)元的k敏感性測試個數(shù)(略)我們在7只大鼠上正常組2個，模子組2個，治療組3個創(chuàng)造堵截胃迷走神經(jīng)明顯衰減靜脈注射k引起的vn神經(jīng)元快樂性反響圖2d.2.4構(gòu)造學

13、經(jīng)構(gòu)造學查抄，對胃迷走神經(jīng)刺激有反響的神經(jīng)元以及對靜脈注射k敏感的神經(jīng)元記載位點散在漫衍于vn中.3討論運脾復方兒寶顆粒選用輕清之劑調(diào)和脾胃，既不消克削通導之藥，也不消呆補滋膩之品，關鍵在“調(diào)和，其促進食欲的作用機制應是和諧機體各體系間的成效平衡，而不但僅是對外周或中樞個體因素的伶仃影響.本研究著眼于攝食中樞神經(jīng)元活動與外周攝食因素間的信息接洽，不雅察了厭食大鼠vn神經(jīng)元對胃迷走神經(jīng)刺激和血中k濃度這兩個緊張的外周抑食因素的反響，從而探究運脾法促進食欲的團體作用機制.vn是攝食操縱環(huán)路中的一個緊張核團，因其明顯的抑食作用被稱為飽中樞7.胃腸道迷走神經(jīng)是外周攝食信息通報入腦的重要通路.胃迷走神經(jīng)

14、傳入纖維可將攝食負反響信號傳入vn，vn再通過胃迷走神經(jīng)傳出纖維按捺胃腸活動，停頓攝食舉動8-9.本研究創(chuàng)造模子組大鼠vn神經(jīng)元快樂性反響的反響時程明顯大于比較組和治療組，而所需刺激強度卻明顯低于后兩者.這一效果表白模子組大鼠vn神經(jīng)元更輕易被胃迷走神經(jīng)傳入信號所激活，提示其擔當?shù)降臄z食負反響信號比別的兩組猛烈.這大概是模子組大鼠攝食量落落的重要緣故原由，同時也提示運脾治療有用地削弱了模子大鼠vn神經(jīng)元對胃迷走神經(jīng)刺激的快樂性反響，使神經(jīng)元產(chǎn)生快樂性反響的閾值增高，反響時程收縮.固然vn神經(jīng)元擔當胃迷走神經(jīng)傳入信息后重要通過其快樂性反響發(fā)出飽信號，但本研究表現(xiàn)仍有約20%vn神經(jīng)元對胃迷走神經(jīng)

15、傳入信號表示出按捺性反響，這些按捺性反響的神經(jīng)元與快樂性反響神經(jīng)元的反響暗藏期、反響時程和刺激強度均無明顯性差異.我們推測，這一小部門按捺性反響的神經(jīng)元，大概對快樂性神經(jīng)元的活動起拮抗作用，以便vn能發(fā)出適度的飽信號，不致于過快和太過猛烈地按捺進食.但在模子組，這種平衡嚴峻失調(diào)：模子大鼠vn神經(jīng)元快樂性反響的時程明顯高于按捺性反響的時程，而刺激強度明顯低于后者.這一征象同樣提示厭食大鼠vn發(fā)出的飽信號比正常大鼠猛烈，而運脾治療大概通過低落厭食大鼠vn神經(jīng)元對胃迷走神經(jīng)刺激的快樂性反響，從而和諧vn的團體活動，發(fā)出適度的飽信號.我們研究效果表白，運脾復方兒寶顆粒通過低落厭食大鼠vn神經(jīng)元對胃迷走

16、神經(jīng)傳入信息的敏感性，按捺厭食大鼠胃迷走神經(jīng)傳入信息對外周k飽信號的介導，同時也和諧了vn快樂性神經(jīng)元和按捺性神經(jīng)元的活動，這種直接針對機體自身調(diào)治紀律的研究，大概更有利于展現(xiàn)中醫(yī)藥療效的團體機制.【參考文獻】1汪受傳，尤汝娣，郁曉維，等.運脾方藥治療小兒厭食癥的臨床及實行研究j.中西醫(yī)結(jié)合雜志,1991,11(2):75-78.2萬力生,汪受傳.小兒厭食的中醫(yī)藥治療近況與預測j.南京中醫(yī)藥大學學報,2000,16(1):63-64.3杜永平，張月萍，胡三覺.運脾復方對幼齡厭食大鼠lh,vh神經(jīng)元自覺放電的影響j.神經(jīng)剖解學雜志，2001,17(2):183.4duyp,zhangyp,ang

17、s,etal.alteratininhypthalausandperipheryfbraingutpeptidesinanrexiinfantileratdelandtheregulatinbyerbagranulej.rldjgastrenterl,2001,7(2):275-280.5汪受傳,張月萍,陶勇,等.特制飼料喂養(yǎng)幼齡大鼠創(chuàng)立小兒厭食癥模子j.南京中醫(yī)藥大學學報，1999,15(3):148-150.6paxinsg,astn.theratbraininsteretaxirdinates.sandieg:aadeipress,1988:29-31.7張月萍，王建軍.攝食操縱的神經(jīng)體液機制研究希望j.中國神經(jīng)科學雜志,2