血涂片染色及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)教材課件

1、臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)六血涂片染色白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)六血涂片染色1.瑞氏染色1.1試劑成分：伊紅酸性嗜堿性染料亞甲藍(lán)（美藍(lán)）堿性嗜酸性染料甲醇固定 溶劑磷酸緩沖液（pH: 6.4-6.8）1.瑞氏染色1.2著色原理：化學(xué)親和作用+物理的吸附作用伊紅+細(xì)胞中的堿性物質(zhì)紅色亞甲藍(lán)+酸性物質(zhì)藍(lán)色中性物質(zhì)+伊紅和亞甲藍(lán)淡紫色1.2著色原理：1.3 pH對(duì)細(xì)胞染色影響pH過(guò)低 PI 負(fù)電荷增多易與亞甲藍(lán)結(jié)合偏藍(lán)最適環(huán)境：弱酸（pH6.4-6.8）1.3 pH對(duì)細(xì)胞染色影響pH過(guò)低 PI 血涂片： 淡紫紅色 鏡 下： 成熟紅細(xì)胞粉紅色 白細(xì)胞胞質(zhì) 呈現(xiàn)其特有的色彩 細(xì)胞核 紫紅色 染色質(zhì)結(jié)構(gòu)清楚判別

2、方法判別方法染色偏酸: 紅細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞顆粒偏紅 白細(xì)胞核 淡紫紅色或不著色染色偏堿： 紅細(xì)胞 灰藍(lán)色 中性粒細(xì)胞顆粒 深暗、偏粗，紫黑色 嗜酸性粒細(xì)胞 暗褐色或紫黑色、藍(lán)色染色偏酸:血涂片染色及白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)教材課件1.4器材 載玻片、推玻片、洗耳球1.5試劑 瑞氏染液（商品） I液：瑞特染料、純甲醇、甘油 I液：磷酸鹽緩沖液（KH2PO4 Na2HPO4） 1.4器材1.6 操作制備血涂片（待完全晾干） 加I液數(shù)滴覆蓋整個(gè)血膜0.5-1min 滴加等量或稍多的II液（洗耳球混勻）5-10min 沖洗（注意） 干燥 1.6 操作注意事項(xiàng)1.血涂片干后方可染色2.加染液不能過(guò)少3.沖洗時(shí)應(yīng)以

3、流水沖洗4.染色過(guò)淡可復(fù)染，先加緩沖液再加染液5.染色過(guò)深可用水沖洗或浸泡一定時(shí)間，也可用甲醇脫色6.染色時(shí)間與染液濃度、室溫及細(xì)胞多少有關(guān)。應(yīng)在具體實(shí)踐中摸索合適的時(shí)間。 注意事項(xiàng)2.WBC分類(lèi)計(jì)數(shù)2.1原理2.2器材:顯微鏡、香柏油、拭鏡紙、清潔劑2.3操作步驟 1.采末梢血染色 2.低倍鏡下選擇細(xì)胞分布均勻、著色良好的域， 滴香柏油一滴 3.油鏡下分類(lèi)，分類(lèi)時(shí)要有秩序的連續(xù)進(jìn)行（“幾” 字形），避免主觀選擇視野。通常分類(lèi)100個(gè)白細(xì)胞，計(jì) 數(shù)并報(bào)告各種白細(xì)胞所占百分比。 4.計(jì)算 5.報(bào)告方式：XX細(xì)胞：XX%2.WBC分類(lèi)計(jì)數(shù)2.1原理2.4 外周血正常白細(xì)胞形態(tài)特征:中性粒細(xì)胞：桿+

4、分10-15 m圓形胞質(zhì)粉紅胞質(zhì)內(nèi)顆粒量多、細(xì)小、均勻、紫紅色核彎曲呈桿、帶狀染色質(zhì)粗糙，紫紅色分葉核：核分2-5葉2.4 外周血正常白細(xì)胞形態(tài)特征:中性粒細(xì)胞：桿+分10-113-15 m圓形胞質(zhì)著色不清胞質(zhì)內(nèi)顆粒粗大、整齊、均勻、充滿胞質(zhì)、桔紅色核多分2葉染色質(zhì)粗糙，紫紅色嗜酸性粒細(xì)胞+淋巴細(xì)胞13-15 m嗜酸性粒細(xì)胞+淋巴細(xì)胞10-12 m圓形胞質(zhì)著色不清胞質(zhì)內(nèi)顆粒量少、大小不勻、排列零亂、紫黑色，可蓋核上核形不清染色質(zhì)粗糙，紫紅色嗜堿性粒細(xì)胞10-12 m嗜堿性粒細(xì)胞6-15 m圓形/橢圓形胞質(zhì)透明、淡藍(lán)色胞質(zhì)內(nèi)多無(wú)顆粒核形 圓/橢圓/腎形染色質(zhì)粗緊成塊，深紫紅色，核外緣光滑淋巴細(xì)胞6-15 m淋巴細(xì)胞12-15 m圓/橢圓/不規(guī)則胞質(zhì)半透明、灰藍(lán)色或灰紅色胞質(zhì)內(nèi)有細(xì)小、塵土樣紫紅色顆粒核形 不規(guī)則/山字/腎/馬碲形，扭曲折疊染色質(zhì)疏松網(wǎng)狀，淡紫紅色，有膨脹感和立體起伏感12-15 m2.5注意事項(xiàng)：1.分類(lèi)最佳區(qū)域?yàn)轶w、尾交界處2.分類(lèi)時(shí)要有秩序地連續(xù)進(jìn)行3.白細(xì)胞總數(shù)與分類(lèi)個(gè)數(shù)4.分類(lèi)中如見(jiàn)幼紅細(xì)胞，不計(jì)入100個(gè)細(xì)胞內(nèi)，以分類(lèi)100個(gè)白細(xì)胞過(guò)程中見(jiàn)到幼紅細(xì)胞多少個(gè)來(lái)報(bào)告，并應(yīng)注明其所屬階段。