遺傳病的中醫(yī)治療培訓(xùn)課件

1、遺傳病的中醫(yī)治療遺傳病的中醫(yī)治療教學(xué)要求1掌握：遺傳病治療的基本方法；基因治療的基本概念、策略、途徑和方法。飲食治療、藥物治療的一般原則。2了解：遺傳病的手術(shù)治療、藥物治療；基因治療目前存在的問(wèn)題和基因治療的臨床應(yīng)用。遺傳病的中醫(yī)治療2教學(xué)要求1掌握：遺傳病治療的基本方法；基因治療的基本概 手術(shù)治療 1 藥物治療 2 飲食治療 3 基因治療 4遺傳病的中醫(yī)治療3 手術(shù)治療 1 藥物治療 2 飲食治療 3 基因治療 第1節(jié) 手術(shù)治療遺傳病的中醫(yī)治療4第1節(jié) 手術(shù)治療遺傳病的中醫(yī)治療4遺傳病組織器官已出現(xiàn)損傷，用外科手術(shù)對(duì)病損器官進(jìn)行修復(fù)、切除或組織器官移植，可以有效改善某些癥狀。一、手術(shù)修復(fù)二、

2、手術(shù)去除三、組織器官移植遺傳病的中醫(yī)治療5遺傳病組織器官已出現(xiàn)損傷，用外科手術(shù)對(duì)病損器官進(jìn)行修復(fù)、切除Wilson病致病機(jī)制p104銅 銅藍(lán)蛋白 P型銅轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶 從膽汁排出 儲(chǔ)存于血漿、組織 銅肝細(xì)胞聚集 銅入血，沉積于腦、腎、角膜等組織致病 肝細(xì)胞壞死 遺傳病的中醫(yī)治療6Wilson病致病機(jī)制p104銅 銅藍(lán)蛋白 P型銅第2節(jié) 藥物治療遺傳病的中醫(yī)治療7第2節(jié) 藥物治療遺傳病的中醫(yī)治療7對(duì)癥治療原則：補(bǔ)其所缺、去其所余1、補(bǔ)其所缺（補(bǔ)充療法）針對(duì)病因，補(bǔ)充其所缺乏的物質(zhì)。如：補(bǔ)充代謝物、輔助因子、激素、酶等。遺傳病的中醫(yī)治療8對(duì)癥治療遺傳病的中醫(yī)治療8甲型血友病抗血友病球蛋白垂體性侏儒癥

3、者生長(zhǎng)激素家族性甲狀腺腫甲狀腺制劑免疫缺陷病人免疫球蛋白先天性睪丸發(fā)育不全睪酮先天性性腺不全患者雌激素遺傳病的中醫(yī)治療9甲型血友病抗血友病球蛋白遺傳病的中醫(yī)治療9對(duì)癥治療原則：補(bǔ)其所缺、去其所余1、補(bǔ)其所缺（補(bǔ)充療法）針對(duì)病因，補(bǔ)充其所缺乏的物質(zhì)。如：補(bǔ)充代謝物、輔助因子、激素、酶等。2、去其所余（排除療法）針對(duì)病因，排除其所堆積的物質(zhì)。遺傳病的中醫(yī)治療10對(duì)癥治療遺傳病的中醫(yī)治療10用理化方法將多余物質(zhì)清除或排除：如：用青霉胺或鋅劑加速銅離子的清除來(lái)改善肝豆?fàn)詈俗冃缘陌Y狀；血漿置換和血漿過(guò)濾治療家族性高膽固醇血癥。用代謝抑制劑降低代謝缺陷病的代謝率：如：別嘌呤醇可抑制黃嘌呤氧化酶，減少尿酸形

4、成，治療原發(fā)性痛風(fēng)和自毀容貌綜合征。減少對(duì)所忌物質(zhì)的吸收：如：苯酮尿癥患者口服苯丙氨酸氨酶膠囊，使苯丙氨酸轉(zhuǎn)化成苯丙烯酸而減少吸收。 遺傳病的中醫(yī)治療11用理化方法將多余物質(zhì)清除或排除：遺傳病的中醫(yī)治療11第3節(jié) 飲食治療遺傳病的中醫(yī)治療12第3節(jié) 飲食治療遺傳病的中醫(yī)治療12一、飲食控制的一般原則 禁其所忌（1）制定特殊食譜半乳糖血癥患兒（避免乳類食品的攝入）家庭性高膽固醇血癥患者（低膽固醇飲食治療）苯丙酮尿癥患兒（低苯丙氨酸奶粉及飲食）（2）減少患者對(duì)所忌物質(zhì)的吸收家族性高膽固醇血癥患者（服用糠麩）遺傳病的中醫(yī)治療13一、飲食控制的一般原則 禁其所忌遺傳病的中醫(yī)治療13二、把握時(shí)機(jī) （一）

5、飲食治療越早越好應(yīng)盡量在損害發(fā)生前進(jìn)行治療。（二）飲食治療適應(yīng)病情飲食治療應(yīng)隨病情的發(fā)展而有所改變以有效的控制疾病。遺傳病的中醫(yī)治療14二、把握時(shí)機(jī) （一）飲食治療越早越好遺傳病的中醫(yī)治療14第4節(jié) 基因治療遺傳病的中醫(yī)治療15第4節(jié) 基因治療遺傳病的中醫(yī)治療15基因治療（gene therapy）：是運(yùn)用DNA重組技術(shù)修復(fù)患者細(xì)胞中有缺陷的基因，使細(xì)胞恢復(fù)正常功能而達(dá)到治療遺傳病的目的。遺傳病的中醫(yī)治療16基因治療（gene therapy）：是運(yùn)用DNA重組技術(shù)修一、基因治療的策略和途徑（一）基因治療的策略2基因置換 3基因增補(bǔ)4基因干預(yù)1基因修正遺傳病的中醫(yī)治療17一、基因治療的策略和途

6、徑（一）基因治療的策略2341遺傳病的一、基因治療的策略和途徑（二）基因治療的途徑1生殖細(xì)胞基因治療 2體細(xì)胞 基因治療遺傳病的中醫(yī)治療18一、基因治療的策略和途徑（二）基因治療的途徑1生殖細(xì)胞基因治二、基因治療的方法直接體內(nèi)療法：將目的基因直接導(dǎo)入體內(nèi)有關(guān)的組織或器官，使其進(jìn)入相應(yīng)的細(xì)胞并進(jìn)行表達(dá)。（未廣泛運(yùn)用）間接體內(nèi)療法：將目的基因?qū)牒线m的靶細(xì)胞，經(jīng)過(guò)篩選并增殖，回輸給患者，使該基因在患者體內(nèi)有效表達(dá)相應(yīng)產(chǎn)物。（常用方式）遺傳病的中醫(yī)治療19二、基因治療的方法直接體內(nèi)療法：將目的基因直接導(dǎo)入體內(nèi)有關(guān)的間接體內(nèi)療法的基本過(guò)程（一）克隆正?；?（二）靶細(xì)胞的選擇 （三）目的基因的轉(zhuǎn)移 （

7、四）基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選（五）基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞的鑒定（六）回輸體內(nèi) 遺傳病的中醫(yī)治療20間接體內(nèi)療法的基本過(guò)程（一）克隆正常基因 （二）靶細(xì)胞的選擇方法：人工合成、從基因組或通過(guò)RNA反轉(zhuǎn)錄等方法獲得。間接體內(nèi)療法（一）克隆正?；?遺傳病的中醫(yī)治療21方法：間接體內(nèi)療法（一）克隆正?；?遺傳病的中醫(yī)治療21靶細(xì)胞（target cell）是指接受轉(zhuǎn)移基因的體細(xì)胞。靶細(xì)胞應(yīng)滿足下列條件：易于取材；具有增殖優(yōu)勢(shì)，生命周期長(zhǎng)，便于體外培養(yǎng)；便于進(jìn)行遺傳技術(shù)操作，易受外源DNA轉(zhuǎn)化；安全回輸；靶向性。目前使用得較多的是造血干細(xì)胞、皮膚成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和肌細(xì)胞等。 （二）靶細(xì)胞的選擇 間接

8、體內(nèi)療法遺傳病的中醫(yī)治療22靶細(xì)胞（target cell）是指接受轉(zhuǎn)移基因的體細(xì)胞。（ 基因轉(zhuǎn)移是指將外源基因?qū)氚屑?xì)胞內(nèi)。1、化學(xué)法應(yīng)用磷酸鈣沉淀法改變細(xì)胞膜通透性，以加強(qiáng)細(xì)胞從培養(yǎng)液中攝取DNA的能力。轉(zhuǎn)移效率低，成功率約為1/102103。（三）目的基因的轉(zhuǎn)移 間接體內(nèi)療法遺傳病的中醫(yī)治療23 基因轉(zhuǎn)移是指將外源基因?qū)氚屑?xì)胞內(nèi)。（三）目的基因的轉(zhuǎn)2、物理法（1）電穿孔法借助電流穿擊靶細(xì)胞膜使其對(duì)DNA通透性增加。有可能使細(xì)胞受到損傷。（2）顯微注射法用顯微技術(shù)向細(xì)胞核內(nèi)直接注射外源基因。主要應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉(zhuǎn)移 遺傳病的中醫(yī)治療242、物理法間接體內(nèi)療法

9、（三）目的基因的轉(zhuǎn)移 遺傳病的中醫(yī)治療2、物理法（3）微粒子轟擊法利用亞微粒鎢或金吸附DNA，包裹形成微粒，利用基因槍技術(shù)使微粒高速進(jìn)入靶細(xì)胞。間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉(zhuǎn)移 遺傳病的中醫(yī)治療252、物理法間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉(zhuǎn)移 遺傳病的中醫(yī)治療2、物理法（1）化學(xué)法（2）顯微注射法（3）微粒子轟擊法間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉(zhuǎn)移 遺傳病的中醫(yī)治療262、物理法間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉(zhuǎn)移 遺傳病的中醫(yī)治療3、載體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移載體能將外源基因特異的轉(zhuǎn)移至靶細(xì)胞。分為：病毒載體非病毒載體間接體內(nèi)療法（三）目的基因的轉(zhuǎn)移 遺傳病的中醫(yī)治療273、載體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移病毒載體非病毒載體

10、間接體內(nèi)療法（三）目的病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時(shí)具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。 病毒介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移(virus mediated gene transfer)是指以病毒為載體，將外源性目的基因通過(guò)基因重組技術(shù)，組裝到病毒載體上，并使重組病毒感染受體宿主細(xì)胞，完成基因轉(zhuǎn)移。病毒載體間接體內(nèi)療法遺傳病的中醫(yī)治療28病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時(shí)具有攜帶目病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時(shí)具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。 病毒載體間接體內(nèi)療法種類：（1）反轉(zhuǎn)錄病毒載體（2）腺 病 毒（3）腺病毒相關(guān)病毒（腺伴隨病毒）遺傳病的中醫(yī)治療

11、29病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時(shí)具有攜帶目病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時(shí)具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。 病毒載體間接體內(nèi)療法優(yōu)點(diǎn)：轉(zhuǎn)染效率高缺點(diǎn)：存在疫原性、細(xì)胞毒作用、攜帶外源基因的大小受限、病毒滴度不易提高。遺傳病的中醫(yī)治療30病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時(shí)具有攜帶目非病毒載體間接體內(nèi)療法缺點(diǎn)：轉(zhuǎn)染效率較低優(yōu)點(diǎn)：安全、制備簡(jiǎn)單和攜帶外源基因較大。 種類：（1）脂質(zhì)體（2）真核細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒載體（3）非生物性聚合載體（4）人工染色體遺傳病的中醫(yī)治療31非病毒載體間接體內(nèi)療法缺點(diǎn)：種類：遺傳病的中醫(yī)治療31間接體內(nèi)療法1、克隆正

12、常基因 2、靶細(xì)胞的選擇 3、目的基因的轉(zhuǎn)移 4、基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選5、基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞的鑒定6、回輸體內(nèi) 遺傳病的中醫(yī)治療32間接體內(nèi)療法1、克隆正?；?2、靶細(xì)胞的選擇 3、目的基因四、基因治療的臨床運(yùn)用1.腺苷脫氨酶缺乏嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病（adenosine deaminase-deficient severe combined immunodeficiency ， ADA-SCID）遺傳病的中醫(yī)治療33四、基因治療的臨床運(yùn)用1.腺苷脫氨酶缺乏嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病（重癥聯(lián)合免疫缺陷（Severe combined immunodeficiency disease，簡(jiǎn)稱SCID），患者缺乏正常

13、人體免疫功能，其染色體上編碼腺苷脫氨酶（簡(jiǎn)稱ADA）的基因發(fā)生突變所致。由于ADA是嘌呤代謝中的一種酶，該基因缺陷將導(dǎo)致患者身體細(xì)胞中脫氧腺苷的累積，達(dá)到高濃度時(shí)脫氧腺苷將對(duì)免疫系統(tǒng)細(xì)胞（如T-細(xì)胞和B-細(xì)胞）產(chǎn)生毒性。Ashanti DiSilva, the first person to be treated by gene therapy. 遺傳病的中醫(yī)治療34重癥聯(lián)合免疫缺陷（Severe combined immun將正常ADA基因與反轉(zhuǎn)錄病毒載體相連，構(gòu)建重組病毒表達(dá)載體。從患體體內(nèi)分離有免疫缺陷的T淋巴細(xì)胞。用重組病毒感染體外培養(yǎng)的T淋巴細(xì)胞，使正常ADA基因插入到T淋巴細(xì)胞基因

14、組中。培養(yǎng)細(xì)胞并確認(rèn)該基因正常表達(dá)。將含有正?；虻腡淋巴細(xì)胞回輸?shù)交颊叩墓撬杞M織中。經(jīng)5-6個(gè)月治療，患者體內(nèi)T淋巴細(xì)胞的數(shù)量恢復(fù)到正常水平，體內(nèi)ADA酶幾乎達(dá)到正常水平，免疫功能得到恢復(fù)。1990年，美國(guó)第一次對(duì)SCID病人作基因治療，其步驟為：遺傳病的中醫(yī)治療35將正常ADA基因與反轉(zhuǎn)錄病毒載體相連，構(gòu)建重組病毒表達(dá)載體。四、基因治療的臨床運(yùn)用2、血友病B 血漿中缺乏凝血因子所致我國(guó)人體基因治療第一成功的個(gè)例子。1991,薛京倫 (復(fù)旦大學(xué))攜帶人F因子cDNA 的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(HBSF - F)皮膚成纖維細(xì)胞Factor IX: 5%遺傳病的中醫(yī)治療36四、基因治療的臨床運(yùn)用2、血友

15、病B 1991,薛京倫 (復(fù)旦細(xì)胞因子19841987年，淋巴激活的殺傷細(xì)胞(LAK)3、腫瘤的基因治療1986年，腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)結(jié)合IL-21991年，腫瘤壞死因子(TNF)治療黑色素瘤四、基因治療的臨床運(yùn)用遺傳病的中醫(yī)治療37細(xì)胞因子19841987年，淋巴激活的殺傷細(xì)胞(LAK)3細(xì)胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運(yùn)用1992年，單純庖疹病毒（HSV）-胸腺嘧啶激酶（TK） 和 GCV（Ganciclovir藥物）“自殺基因”遺傳病的中醫(yī)治療38細(xì)胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運(yùn)用1992年，單純細(xì)胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運(yùn)用“自殺基因”腫瘤抑制基

16、因pRB, p53, p16, p21, p27遺傳病的中醫(yī)治療39細(xì)胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運(yùn)用“自殺基因”腫瘤細(xì)胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運(yùn)用“自殺基因”腫瘤抑制基因應(yīng)用納米顆粒傳遞基因阻斷腫瘤新生血管生成 2002年，美國(guó)Hood等人應(yīng)用陽(yáng)離子納米顆粒轉(zhuǎn)導(dǎo)目的基因，阻斷腫瘤組織新生血管生成。遺傳病的中醫(yī)治療40細(xì)胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運(yùn)用“自殺基因”腫瘤123存在的問(wèn)題導(dǎo)入基因的持續(xù)表達(dá)導(dǎo)入基因的高效表達(dá)安全性問(wèn)題遺傳病的中醫(yī)治療41123存在的問(wèn)題導(dǎo)入基導(dǎo)入基安全性遺傳病的中醫(yī)治療41小 結(jié)掌握：基因治療的定義、策略和途徑基因治療的基本方法：克

17、隆正常基因方法、基因轉(zhuǎn)移方法和載體、靶細(xì)胞選擇。藥物治療和飲食治療的基本原則了解：目前基因治療存在的問(wèn)題遺傳病的中醫(yī)治療42小 結(jié)掌握：遺傳病的中醫(yī)治療42復(fù)習(xí)思考題1、傳統(tǒng)的遺傳病治療包括哪幾個(gè)方面，各有什么優(yōu)缺點(diǎn)？2、何謂基因治療？目的基因轉(zhuǎn)移有哪幾種方法？各有何優(yōu)缺點(diǎn)？3、反轉(zhuǎn)錄病毒和腺病毒作為基因治療的載體各有何優(yōu)缺點(diǎn)？遺傳病的中醫(yī)治療43復(fù)習(xí)思考題1、傳統(tǒng)的遺傳病治療包括哪幾個(gè)方面，各有什么優(yōu)缺點(diǎn)遺傳病的中醫(yī)治療培訓(xùn)課件唇 裂手術(shù)前手術(shù)后遺傳病的中醫(yī)治療45唇 裂手術(shù)前手術(shù)后遺傳病的中醫(yī)治療45多 指并指合并多指 遺傳病的中醫(yī)治療46多 指并指合并多指 遺傳病的中醫(yī)治療46 基因修正

18、（gene correction）： 指通過(guò)特定方法，將致病基因的突變堿基序列糾正,對(duì)突變DNA進(jìn)行原位修復(fù)。操作困難。遺傳病的中醫(yī)治療47 基因修正（gene correction）： 指通過(guò)特定方基因置換：在原位定點(diǎn)導(dǎo)入外源正?；颍嫱蛔兓虻闹苯盈煼?。目的：糾正突變基因，進(jìn)行精確的原位修復(fù)而不涉及基因組其他任何的改變。是理想的基因治療策略，已用于的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，但尚未應(yīng)用于臨床，基因治療的遠(yuǎn)期目標(biāo)。 遺傳病的中醫(yī)治療48基因置換：在原位定點(diǎn)導(dǎo)入外源正?；颍嫱蛔兓虻闹苯盈煼ɑ蛟鲅a(bǔ)（基因添加）：非定點(diǎn)導(dǎo)入外源正?；颍鴽](méi)有真正去除或修復(fù)突變基因。外源正常基因?qū)塍w內(nèi)后，可代替突變

19、基因表達(dá)具有正常功能的蛋白而發(fā)揮治療作用，屬于間接治療。增：向靶細(xì)胞中導(dǎo)入其原本不表達(dá)的基因；補(bǔ)：導(dǎo)入突變基因的正?；?。目前應(yīng)用最為廣泛和深入的一種方法，并已付諸臨床實(shí)踐。 遺傳病的中醫(yī)治療49基因增補(bǔ)（基因添加）：非定點(diǎn)導(dǎo)入外源正?；?，而沒(méi)有真正去除基因干預(yù)：用特定的方式抑制某個(gè)基因的表達(dá)或破壞某個(gè)基因使之不能表達(dá)，以達(dá)到治療疾病的目的。常用方法：應(yīng)用反義核苷酸、核酶或RNA干擾技術(shù)抑制體內(nèi)過(guò)度表達(dá)的基因。靶基因一般都是過(guò)度表達(dá)的癌基因或是病毒基因。 遺傳病的中醫(yī)治療50基因干預(yù)：用特定的方式抑制某個(gè)基因的表達(dá)或破壞某個(gè)基因使之不生殖細(xì)胞基因治療 (germ cell gene ther

20、apy)將正常基因轉(zhuǎn)移到患者的精子、卵子或受精卵校正遺傳缺陷，使其發(fā)育成正常個(gè)體。特點(diǎn)：能將新的正?；騻鹘o下一代，從而使遺傳病得到根治，有害基因不再在人群中散布。 理想，但目前尚難在人類實(shí)現(xiàn)。遺傳病的中醫(yī)治療51生殖細(xì)胞基因治療 (germ cell gene thera體細(xì)胞基因治療 (somatic cell gene therapy)將基因轉(zhuǎn)移到個(gè)體體細(xì)胞基因組上的隨機(jī)座位，使該基因有效表達(dá)其，達(dá)到治療的目的。特點(diǎn)：能使患者癥狀消失或緩解，但有害基因仍能傳給后代。 是目前人類基因治療的基本方案遺傳病的中醫(yī)治療52體細(xì)胞基因治療 (somatic cell gene the脂質(zhì)體法用人工脂質(zhì)體包裝外源基因，通過(guò)脂質(zhì)體與靶細(xì)胞融合或直接注射到病灶區(qū)，將外源基因?qū)?。?yōu)點(diǎn)：無(wú)毒性和免疫原性，不在體內(nèi)堆積，大小適合，可適應(yīng)不同的細(xì)胞膜和生理要求。 缺點(diǎn)：轉(zhuǎn)染效率低，瞬時(shí)表達(dá)。遺傳病的中醫(yī)治療53遺傳病的中醫(yī)治療53真核細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒載體主要用于直接體內(nèi)治療，