數(shù)字PCR文獻之naica?®微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)探尋過往肝病石蠟樣本與新發(fā)現(xiàn)病毒關(guān)系

1、數(shù)字PCR文獻速遞 | naica微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)幫助探尋過往肝病石蠟樣本與新發(fā)現(xiàn)病毒關(guān)系維也納獸醫(yī)大學(xué)的研究者們進行了一項回顧性研究，用以評估馬細小肝炎病毒EqPV-H在蒂勒氏病以外的組織病理學(xué)異常的馬和驢肝臟中是否存在及其相關(guān)性，研究者們希望通過該研究確認新發(fā)現(xiàn)不久的EqPV-H是否會導(dǎo)致其他的肝臟疾病，并且通過EqPV-H的感染情況進一步分析EqPV-H病毒的感染模式。亮點：1.通過采用新技術(shù)的回顧性研究，對之前收集的樣本進行分析，找到EqPV-H病毒可能與腫瘤性疾病存在關(guān)聯(lián)。2. 憑借naica微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)的直接絕對定量和對抑制劑的高耐受性，快速、高效的進行拷貝數(shù)的檢測

2、，確定組織樣本中的病毒含量。3.通過對不同部位病毒含量的檢測進一步佐證了EqPV-H病毒的嗜肝性，以及其慢性感染的可能性。馬細小肝炎病毒是什么？蒂勒氏病是一種與馬相關(guān)的急性、爆發(fā)性肝壞死疾病，該疾病1918年在南非發(fā)現(xiàn)，后續(xù)也不斷有馬出現(xiàn)該病，且主要與馬源性生物制品如馬血漿、破傷風(fēng)和肉毒中毒抗毒素的給藥有關(guān)，因此推測該病應(yīng)該與一種傳染性的病原體相關(guān)，但一直沒有找到該病原體。直到2018年，科學(xué)家在一匹接受破傷風(fēng)抗毒素后死于蒂勒病的馬的血清和肝臟樣本中檢測到一種未知病毒，新發(fā)現(xiàn)的病毒被命名為馬細小病毒肝炎EqPV-H。通過對最近的蒂勒氏病例檢測發(fā)現(xiàn)，該病毒在染病馬匹中均存在。且該病毒具有嗜肝性，

3、血清和肝中的病毒載量最高。其他方面的研究也支持了該病毒是蒂勒氏病的病原體的假說。本文則主要通過對之前的標本進行分析，探尋EqPV-H作為一種新發(fā)現(xiàn)的病毒，其是否還有一些其他的病理作用，是否與其他肝臟疾病相關(guān)？回顧性的EqPV-H檢測結(jié)果如何？研究者們收集了各類因肝組織病理學(xué)異常的臨床樣本，將其分為7組，包括腫瘤疾病，炎癥性疾病、肝硬化、循環(huán)障礙、毒性和肝代謝疾病、多種疾?。?-5組中2種以上的病理學(xué)特征）和正常肝組織。在這些收集到的92例肝臟樣本中，只有2例發(fā)現(xiàn)了EqPV-H病毒，且兩例均診斷為腹部腫瘤。但癌癥與機會性感染的高易感性是相關(guān)的，因為腫瘤性疾病伴隨的全身虛弱和免疫抑制可能促進EqP

4、V-H繼發(fā)感染，所以EqPV-H是否可能是馬科動物原發(fā)性肝腫瘤發(fā)生的誘因，需要進一步的研究來評估。通過對這兩例樣本的進一步分析發(fā)現(xiàn)，在這匹馬的脾臟組織（腫瘤轉(zhuǎn)移部位）以及心臟和肺組織中也可以檢測到非常低的EqPV-H。這與之前的研究相一致，肝臟中病毒載量最高，其他組織中含量較低但也可持續(xù)存在，這意味著該病毒可能存在慢性感染。進一步通過naica微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)對病毒的載量進行絕對定量分析，EqPV-H核酸陽性的兩個肝臟樣本，病毒載量分別為5103和9.5103GE/百萬細胞，略低于其他研究中肝臟樣本1.26104GE/百萬細胞到2.04109GE/百萬細胞的病毒載量，這可能是慢性感染的另

5、一個跡象。naica微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)檢測肝臟1號和2號樣本中EqPV-H和細胞校正基因TTC17絕對定量結(jié)果。由于這項研究是回顧性的，所有的組織樣本在室溫下被石蠟包埋1至17年，這可能會影響可檢測病毒的數(shù)量。但仍然在其中2匹腫瘤性疾病的馬樣本中檢測到EqPV-H病毒，這表明EqPV-H感染和腫瘤性疾病之間可能存在關(guān)聯(lián)甚至相互作用。盡管這篇文章最終并未得出某種疾病與EqPV-H的確切關(guān)系，但是通過naica微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)這樣的新技術(shù)和新發(fā)現(xiàn)的病毒EqPV-H對以前的樣本進行回顧性研究，仍然發(fā)現(xiàn)了一些之前從未了解到的新內(nèi)容，也為其他的研究提供了新的思路和方向。文章詳情：/10.339

6、0/v13081599期刊virusesViruses (ISSN 1999-4915) 是一個國際性開放獲取期刊， 至今已被SCIE、PubMed 、Scopus等各類數(shù)據(jù)庫索引，其最新影響因子為3.465。作為病毒學(xué)研究的高級論壇，該期刊旨在幫助研究人員細致的展示他們的前沿發(fā)現(xiàn)和觀點，并使其迅速傳播。naica微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)法國Stilla Technologies公司的naica微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)在進行核酸檢測時具有獨特的優(yōu)勢。該系統(tǒng)利用cutting-edge微流體創(chuàng)新型芯片Sapphire芯片（或高通量Opal芯片）作為數(shù)字PCR過程的耗材。樣品通過毛細通道網(wǎng)格以30,000個微滴的形式進入2D芯片中。3色熒光檢測儀器，整個流程只需要2.5小時，并可進行數(shù)據(jù)的質(zhì)控和結(jié)果追溯分析，獲得的數(shù)據(jù)真實可靠。naica六通道微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)法國Stilla Technologies公司naica六通道