變態(tài)反應(yīng)原（變應(yīng)原）制品質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則

1、 變態(tài)反應(yīng)原（變應(yīng)原）制品質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則一、定義變態(tài)反應(yīng)原（變應(yīng)原）：是指能夠引起人類變態(tài)反應(yīng)（過敏反應(yīng)）性疾病的物質(zhì)。包括：粉塵、昆蟲類、動物皮毛、植物及植物花草、食物等。變態(tài)反應(yīng)原制品：是指用于診斷或治療人類變態(tài)反應(yīng)性疾病的產(chǎn)品。二、質(zhì)量控制原則（一）初始原材料的控制1原材料應(yīng)詳細說明變應(yīng)原的原材料，包括其特殊的收集方式、預(yù)處理及保存方法，提供其質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)（如外購，可由供應(yīng)商提供）。原材料的質(zhì)量和組成應(yīng)盡可能一致。質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)包括對原材料的鑒別和純度分析等。確定一種適宜的保存條件，以保證原材料在運輸和保存過程中質(zhì)量不變。常見變應(yīng)原的原材料的技術(shù)要求如下，其他原材料參照執(zhí)行。（1）花粉類花

2、粉類變應(yīng)原應(yīng)在最佳的生態(tài)環(huán)境下收集。說明花粉的收集方式，并檢測其異種花粉、孢子、同種植物的其它無關(guān)成分。以上檢測結(jié)果應(yīng)滿足質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)的要求。花粉收集應(yīng)在植物學(xué)專業(yè)人員指導(dǎo)下進行。采用顯微顆粒記數(shù)的方法，其它無關(guān)花粉的含量應(yīng)限制在2%以下，能檢測到的孢子不能超過1%?；ǚ弁獾钠渌s質(zhì)的顯微顆粒不得超過10%。特殊情況，應(yīng)予于說明。（2）真菌類說明真菌的株或系，詳細說明培養(yǎng)基的組成及培養(yǎng)方法，優(yōu)先選擇人工合成且不含致敏原的培養(yǎng)基。說明分離得到的原材料中真菌的形態(tài)特征（菌絲體和孢子體/只有孢子體/只有菌絲體）及培養(yǎng)基質(zhì)。提供相關(guān)資料證明其培養(yǎng)方法不會促進真菌毒素（如aflatoxins和/或ochra

3、toxins）的產(chǎn)生。真菌的培養(yǎng)應(yīng)在真菌學(xué)專業(yè)人員的指導(dǎo)下進行。應(yīng)選擇高抗原性、低毒性和無致突變作用的原材料。（3）螨類應(yīng)說明選用螨蟲的種、屬和飼養(yǎng)物的組成及培養(yǎng)方法。飼養(yǎng)物的抗原性應(yīng)盡可能低。對來源于人或動物的飼養(yǎng)物應(yīng)當(dāng)進行處理，以確保對可能存在的傳染性病原體進行滅活。螨蟲的培養(yǎng)應(yīng)在專業(yè)人員指導(dǎo)下進行。（4）動物來源的變應(yīng)原應(yīng)明確動物的品系，選擇健康的動物。說明被處死動物的保存條件和動物變應(yīng)原的收集方法，并應(yīng)在專業(yè)人員的指導(dǎo)下進行收集。動物毛發(fā)或皮屑的收集，必須采用既不損傷動物皮膚，又能獲得大量上皮材料的方法。不能采用磨碎整張皮膚/毛皮的辦法。如處死動物取皮，必須在幾個小時內(nèi)取好皮或者將動物

4、于適當(dāng)條件下保存，以確保不致因尸體腐敗而影響上皮。（5）食品類應(yīng)選擇在良好生態(tài)環(huán)境下生長的X鮮食品，其農(nóng)藥殘留應(yīng)符合相關(guān)的食品標(biāo)準(zhǔn)。食品原料的加工應(yīng)采用適宜工藝，以確保抗原性不被破壞。2輔料和相關(guān)材料輔料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合對藥品的一般性規(guī)定。變應(yīng)原制品中所含成分如緩沖液、穩(wěn)定劑、防腐劑，制備過程所用試劑如脫脂劑、提取液，以及稀釋液等，應(yīng)符合對一般藥品生產(chǎn)所用原輔材料的要求。不能使用對人有免疫原性或過敏性的物質(zhì)。（二）包裝材料所用包裝材料應(yīng)符合對藥品包裝材料的相關(guān)要求。（三）生產(chǎn)工藝應(yīng)說明生產(chǎn)過程，用一個圖表（流程圖）逐步地簡要說明過程的原理，并配有解釋文字。應(yīng)清楚說明生產(chǎn)過程的不同階段，例如粉碎

5、、提取、過濾、凈化、透析、濃縮、分離、滅菌和凍干等。應(yīng)說明純化和分離的原理，而且應(yīng)清楚并明顯的看出過程的哪一步使用了特殊生化技術(shù)。詳細說明在生產(chǎn)過程中對中間體和半成品的鑒定，以及如何進行生產(chǎn)過程中的質(zhì)控。（四）變應(yīng)原組分分析采用適宜的化學(xué)和免疫化學(xué)方法分析所有變應(yīng)原成分，詳細說明所采用的方法及其可靠性，并附上相關(guān)參考文獻。（五）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究應(yīng)建立有關(guān)產(chǎn)品的鑒別、純度、生物活性和制劑等方面，用于質(zhì)控的所有檢測方法和標(biāo)準(zhǔn)。廠家應(yīng)規(guī)定抽檢率和對中間產(chǎn)物及成品分別采用的檢測方法等。一般情況下，下列試驗對控制產(chǎn)品質(zhì)量是可以采用的。1總蛋白含量測定用適宜的蛋白含量分析方法對總蛋白含量進行測定。如：蛋白氮測

6、定（PNU）等。2蛋白組分的測定采用聚丙稀酰胺凝膠電泳，等電聚焦等適宜的方法檢測其蛋白組分。3主要致敏蛋白含量測定應(yīng)采用適宜的分析方法，對制品中穩(wěn)定的抗原成分進行檢測，并與內(nèi)部參考品（IR）進行比較?？刹捎玫姆椒ㄓ校航徊婷庖唠娪?、交叉放射免疫電泳或免疫印跡試驗，或其它適宜方法。4變應(yīng)原總生物活性測定應(yīng)制定對每批變應(yīng)原制品的總生物活性要求?？偵锘钚詼y定方法應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化。可選用體外的放射變應(yīng)原吸附抑制實驗（RAS抑制試驗）、直接RAS試驗，或體內(nèi)皮膚點刺實驗（按藥品注冊的相關(guān)規(guī)定申請臨床研究）。需詳細說明操作方法、試劑和抗血清標(biāo)準(zhǔn)等。還要對檢測樣品和參考品的平行性關(guān)系進行檢測。應(yīng)以IR為標(biāo)準(zhǔn)，對每批

7、產(chǎn)品進行總生物活性測定，并以生物活性單位表示效價。如果已有國際標(biāo)準(zhǔn)品（IS），則每批制品的總生物活性應(yīng)以國際單位（IU）表示。如產(chǎn)品是由一種或幾種明確的變應(yīng)原組成，可選用其它相關(guān)的方法，對變應(yīng)原活性進行測定，如放射免疫擴散法、定量免疫電泳法或其它定量檢測技術(shù)等。以上檢測，也應(yīng)采用生物活性單位系統(tǒng)進行校正。要求所測得的抗原效價應(yīng)在標(biāo)示效價的50%-200%之間，方法學(xué)研究應(yīng)證實效價測定的標(biāo)準(zhǔn)差小于等于20%。（六）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)變應(yīng)原制劑的標(biāo)準(zhǔn)化要求建立一個有準(zhǔn)確定義的、經(jīng)全面鑒定且性質(zhì)穩(wěn)定的參照品。1內(nèi)部參考品（IR）應(yīng)制備具有代表性的變應(yīng)原制劑作為IR，并以之作為對其它各批變應(yīng)原制劑（包括中間體和

8、半成品）進行質(zhì)控的參考品。其它常規(guī)生產(chǎn)的變應(yīng)原制劑應(yīng)以IR為標(biāo)準(zhǔn)，進行變應(yīng)原成分鑒別及效價測定。需采用適當(dāng)?shù)姆椒▽R進行鑒定，并確定其特異的生物活性（體內(nèi)、體外生物活性）?？赏ㄟ^與數(shù)批初提取物進行比較，說明IR中存在所有相關(guān)變應(yīng)原。應(yīng)采用適當(dāng)?shù)谋４娣椒?，以確保IR的穩(wěn)定。建議將IR分裝凍干并于低溫（-20）條件下存放。IR的熱穩(wěn)定性研究可通過加速降解試驗進行，即通過比較保存于高溫條件下變應(yīng)原與持續(xù)保存于-20下變應(yīng)原的相對降解率進行分析。穩(wěn)定性考察項目包括對變應(yīng)原制劑總活性的分析及相關(guān)變應(yīng)原含量的檢測。2國際標(biāo)準(zhǔn)品（IS）如果已有IS，需進行IR與IS的比較研究（包括定性和定量分析）。應(yīng)進行

9、IS和IR總活性測定的平行線分析，如結(jié)果成立（呈平行關(guān)系），則可以用IS按國際單位校正IR的效價。IS的使用需參照國際免疫學(xué)會（IUIS）變應(yīng)原標(biāo)準(zhǔn)化分會的建議。（七）經(jīng)修飾或其它處理的變應(yīng)原制劑如果變應(yīng)原經(jīng)過化學(xué)修飾、沉淀或吸附等處理后，制劑中的變應(yīng)原成分已經(jīng)不再可溶，不能按常規(guī)方法進行檢測。在這種情況下，就應(yīng)該對處理前的中間產(chǎn)品質(zhì)量進行檢測并制定相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)。（八）制檢記錄及復(fù)檢報告應(yīng)提供連續(xù)三批變應(yīng)原制品的制檢記錄，以及中國藥品生物制品檢定所的檢定報告。（九）穩(wěn)定性變應(yīng)原制劑的穩(wěn)定性研究應(yīng)重點考察樣品存放期間的活性變化（應(yīng)明確可接受的活性下降幅度），如需再配制（reconstituted p

10、roducts），需提供稀釋后的穩(wěn)定性，以及稀釋液本身的相關(guān)技術(shù)資料。三、臨床前藥理學(xué)和毒理學(xué)研究（一）藥效學(xué)研究應(yīng)在可能的前提下，盡量提供藥效學(xué)的實驗數(shù)據(jù)。（二）毒理學(xué)研究從毒理學(xué)角度評價變應(yīng)原制劑的安全性，原則上與其它注射用藥物的要求一致。毒理學(xué)資料應(yīng)包括急性毒性試驗（診斷和治療用制劑）和亞急性毒性試驗（治療用制劑）研究。由于變應(yīng)原制劑可能引起的免疫性副作用難以與一般的毒理相區(qū)別，所以傳統(tǒng)的毒理試驗方法不一定是恰當(dāng)和可行的。四、臨床研究（一）變應(yīng)原免疫治療（脫敏治療）的適應(yīng)證只限于呼吸道過敏性疾病，如過敏性哮喘和過敏性鼻炎。（二）確定療效所需的臨床試驗應(yīng)采用多中心、隨機、對照的方法，病例數(shù)應(yīng)不少于50對。（三）臨床研究時間可隨試驗?zāi)康暮妥儜?yīng)原制品性質(zhì)的不同而不同，考慮到變應(yīng)原免疫治療（脫敏治療）特點，治療用制劑的臨床試驗療程應(yīng)足夠長，以制劑說明書的推薦時間為準(zhǔn)，一般應(yīng)不少于3年。（四）對于已制備供應(yīng)多年（十年以上），有的臨床資料證明其制劑安全有效者，可免做臨床研究，但應(yīng)按規(guī)范要求，整理有關(guān)