縮略ch2糖和苷課件

1、 一、概述 二、單糖的立體化學(xué) 三、糖和苷的分類 四、苷類化合物的物理性質(zhì) 五、苷類化合物的化學(xué)性質(zhì) 六、苷鍵的裂解 七、糖的提取分離 第 二 章 一、概述第 二 章一、概述單糖（Monosaccharides）：不能水解成更小分子的、最簡(jiǎn)單的多羥基內(nèi)半縮醛(酮)。 如葡萄糖等。低聚糖（Oligosaccharides） ：多糖（Polysaccharides）：化學(xué)結(jié)構(gòu)：多羥基內(nèi)半縮醛(酮)及其縮聚物。根據(jù)其分子水解反應(yīng)的情況，可以分為一、概述單糖（Monosaccharides）：不能水解成更 苷 類種類繁多，結(jié)構(gòu)不一，其生理活性也多種多樣，在心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)以及抗

2、菌消炎、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抗腫瘤等方面都具有不同的活性，苷類已成為當(dāng)今研究天然藥物中不可忽視的一類成分。 許多常見的中藥例如人參、甘草、柴胡、黃芪、黃芩、桔梗、芍藥等都含有苷類。一、概述 苷 類種類繁多，結(jié)構(gòu)不一，其生理活性也多種多樣，在二、單糖的立體化學(xué)（一） 糖的表示式（二） 糖的絕對(duì)構(gòu)型（D、L）（三） 環(huán)的構(gòu)象 二、單糖的立體化學(xué)（一） 糖的表示式二、單糖的立體化學(xué)單糖結(jié)構(gòu)的表示方法單糖是多羥基醛或酮。從三碳糖至八碳糖天然界都有存在。 成環(huán)狀結(jié)構(gòu)后，多了一個(gè)手性碳端基碳Fisher式Haworth式二、單糖的立體化學(xué)單糖結(jié)構(gòu)的表示方法成環(huán)狀結(jié)構(gòu)后，多了一個(gè)二、單糖的立體化學(xué) 單糖在水溶

3、液中形成半縮醛環(huán)狀結(jié)構(gòu)，具有六元環(huán)結(jié)構(gòu)的糖吡喃糖（pyranose）具有五元環(huán)結(jié)構(gòu)的糖呋喃糖（furanose） 糖處游離狀態(tài)時(shí)用Fischer式表示 苷化后成環(huán)用Haworth式表示 二、單糖的立體化學(xué) 單糖在水溶液中形成半縮醛環(huán)狀結(jié)構(gòu)，差向異構(gòu)體：端基碳(anomeric carbon)的相對(duì)構(gòu)型 型型(Haworth式限于羰基碳與 該原子成環(huán)的）二、單糖的立體化學(xué)差向異構(gòu)體：端基碳(anomeric carbon)的相對(duì)構(gòu)如何判斷單糖的相對(duì)構(gòu)型？在Haworth式中只要看C1-OH與最后一個(gè)取代基之間的關(guān)系： 在同側(cè)的為型； 在異側(cè)的為 型； 限于與最遠(yuǎn)的不對(duì)稱碳原子成環(huán)者； 二、單糖的

4、立體化學(xué)如何判斷單糖的相對(duì)構(gòu)型？在Haworth式中只要看C1-OH二、單糖的立體化學(xué)（二）糖的絕對(duì)構(gòu)型（D、L） Fischer式中最后第二個(gè)碳原子上-OH向右的為D型，向左的為L(zhǎng)型。Haworth式中C5向上為D型，向下為L(zhǎng)型。 二、單糖的立體化學(xué)（二）糖的絕對(duì)構(gòu)型（D、L） Fisch絕對(duì)構(gòu)型：離端基碳最遠(yuǎn)的碳原子的構(gòu)型 D型 L型 (Haworth式限于羰基碳與該原子成環(huán)的）二、單糖的立體化學(xué)絕對(duì)構(gòu)型：離端基碳最遠(yuǎn)的碳原子的構(gòu)型 二、單糖的立體化學(xué)二、單糖的立體化學(xué)（三）環(huán)的構(gòu)象絕大多數(shù)二、單糖的立體化學(xué)（三）環(huán)的構(gòu)象絕大多數(shù)分類： 按單糖個(gè)數(shù)分為單糖、二糖、三糖等； 按有無(wú)游離的醛基

5、或酮基分為還原糖和非還原糖。若兩個(gè)糖均以端基脫水縮合形成的聚糖就沒有還原性。三、糖和苷分類 分類：三、糖和苷分類 三、糖和苷分類 （一） 單糖（monosaccharides） 已發(fā)現(xiàn)200多種, 3C-8C, 多以結(jié)合態(tài)存在.分為 1 、五碳醛碳 有L-阿拉伯糖，D-木糖，D-來(lái)蘇糖，D-核糖等。 L-阿拉伯糖的結(jié)構(gòu)如下：三、糖和苷分類 （一） 單糖（monosaccharides2、六碳醛糖 常見的有D-葡萄糖，D-甘露糖，D-阿洛糖，D-半乳糖等。其中以D-葡萄糖最為常見。三、糖和苷分類 2、六碳醛糖三、糖和苷分類 3、六碳酮糖 如 D-果糖，L-山梨糖等。 下圖為-D-果糖的結(jié)構(gòu)：三、

6、糖和苷分類 OOHOH3、六碳酮糖三、糖和苷分類 OOHOH4、甲基五碳醛糖 常見的有L-鼠李糖，L-夫糖 和D-雞納糖。 如L-鼠李糖的結(jié)構(gòu)。三、糖和苷分類 O4、甲基五碳醛糖三、糖和苷分類 O5、支碳鏈糖 糖鏈中含有支鏈，如D-芹糖和D-金縷梅糖,后者結(jié)構(gòu)如下：三、糖和苷分類 OHOH2C H5、支碳鏈糖三、糖和苷分類 OHOH2C H6、氨基糖單糖的一個(gè)或幾個(gè)醇羥基置換成氨基。 如 慶大霉素三、糖和苷分類 6、氨基糖單糖的一個(gè)或幾個(gè)醇羥基置換成氨基。三、糖和苷分類 三、糖苷分類7、去氧糖 單糖分子的一個(gè)或二個(gè)羥基被氫原子取代的糖，常見的有6-去氧糖、甲基五碳糖、2,6-二去氧糖及其3-O

7、-甲醚等。 該類糖在強(qiáng)心苷和微生物代謝產(chǎn)物中多見，并有一些特殊的性質(zhì)。 如L-黃花夾竹桃糖是2，6-二去氧糖的3-O-甲醚。三、糖苷分類7、去氧糖如L-黃花夾竹桃糖是2，6-二去氧糖的8、糖醛酸 單糖分子中的伯醇基氧化成羧基，常結(jié)合成苷類或多糖存在，常見的如葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。糖醛酸易環(huán)合成內(nèi)酯，在水溶液中呈平衡狀態(tài)。三、糖和苷分類 8、糖醛酸 三、糖和苷分類 三、糖和苷分類葡萄糖 glucose Glc半乳糖 galactose Gal甘露糖 mannose Man鼠李糖 rhamnose Rha木 糖 xylose Xyl果 糖 fructose Fru阿拉伯糖 arabinose A

8、ra葡萄糖醛酸： Glu A三、糖和苷分類葡萄糖 glucose Glc（二）低聚糖(oligosaccharides，寡糖)：由2-9個(gè)單糖通過苷鍵鍵合而成的直鏈或支鏈聚糖蕓香糖、槐糖、蔗糖（D-葡萄糖-D果糖） 麥芽糖（葡萄糖14葡萄糖）三、糖和苷分類（二）低聚糖(oligosaccharides，寡糖)：三、（三）多聚糖(polysaccharides, 多糖) 是由10個(gè)以上的單糖基通過苷鍵連接而成。如：淀粉、纖維素等. 許多多糖有生物活性，引起醫(yī)學(xué)界重視。香菇多糖、靈芝多糖（抗 癌）黃芪多糖、人參多糖（增強(qiáng)免疫）銀耳多糖（保護(hù)肝細(xì)胞） 聚合度：100以上至幾千 性質(zhì)：與單糖和寡糖不同

9、，無(wú)甜味，非還原性 分類：三、糖和苷分類（三）多聚糖(polysaccharides, 多糖) 三1. 按功能分直糖鏈型， 水不溶的，主要形成動(dòng)植物的支持組織。ex. 纖維素，甲殼素 多支鏈型，溶于熱水, 形成膠體溶液，動(dòng)植物的貯存養(yǎng)料。ex. 淀粉，肝糖元三、糖和苷分類2. 按組成分均多糖(homosaccharide) :由一種單糖組成 雜多糖 (heterosaccharide): 由二種以上單糖組成1. 按功能分三、糖和苷分類2. 按組成分系統(tǒng)命名：均多糖：在糖名后加字尾-an， 如葡聚糖為glucan。雜多糖：幾種糖名按字母順序排列后,再加字尾-an， 如葡萄甘露聚糖為glucoma

10、nnan.三、糖和苷分類glucose系統(tǒng)命名：三、糖和苷分類glucose三、糖和苷分類（四）苷類 (glycoside) (又稱配糖體)苷的定義: 糖與非糖組成的化合物苷類化合物的命名： 以 -in 或 oside 作后綴。如 紅景天苷 rhodioloside; 毛莨苷 ranunculin三、糖和苷分類（四）苷類 (glycoside) (又稱配糖三、糖和苷分類苷的分類： 1按苷原子不同分類 氧苷 如：紅景天苷 見p65三、糖和苷分類苷的分類：三、糖和苷分類 氮苷：如巴豆苷 。 硫苷：如蘿卜苷。 碳苷：如牡荊素。 巴豆苷三、糖和苷分類 氮苷：如巴豆苷 。巴豆苷三、糖和苷分類2按苷元不同

11、分類如：黃酮苷、蒽醌、香豆素、強(qiáng)心苷、皂苷3按連接單糖個(gè)數(shù)分 1個(gè)糖單糖苷 2個(gè)糖雙糖苷 3個(gè)糖叁糖苷 三、糖和苷分類2按苷元不同分類三、糖苷分類4按苷鍵不同分類 醇苷：通過醇羥基與糖端基羥基脫水而成的苷。如紅景天苷。 酚苷：通過酚羥基而成的苷。如天麻苷。 酯苷：苷元以-COOH和糖的端基碳相連接的是酯苷。如山慈菇苷A。 氰苷：是指一類羥腈的苷。如野櫻苷。 三、糖苷分類4按苷鍵不同分類三、糖和苷分類三、糖和苷分類三、糖苷分類5按糖鏈個(gè)數(shù)分 1個(gè)位置成苷單糖鏈 2個(gè)位置成苷雙糖鏈6按生物體內(nèi)存在分 原生苷, 次生苷三、糖苷分類5按糖鏈個(gè)數(shù)分四、苷的物理性質(zhì) （一）形 苷類化合物多數(shù)是固體，其中糖

12、基少的可成結(jié)晶，糖基多的則呈吸濕性的無(wú)定形粉末。（二）味 一般是無(wú)味的，少數(shù)有苦、甜味等 （人參皂苷）（甜菊苷）從甜葉菊葉子中提取得到，比蔗糖甜300倍，臨床上用于糖尿病患者作甜味劑，無(wú)不良反應(yīng)四、苷的物理性質(zhì) （一）形（二）味 一般是無(wú)味的四、苷的物理性質(zhì) （三）色苷類的顏色由苷元決定。糖部分沒有顏色 。（四）溶解性 苷親水性(與連接糖的數(shù)目有關(guān)） 苷元親脂性 （五）旋光性 具有多個(gè)不對(duì)稱碳原子用于苷鍵構(gòu)型的測(cè)定（即、苷鍵）。多數(shù)苷類呈左旋。 四、苷的物理性質(zhì) （三）色（四）溶解性 苷親水性(與連接五、糖的化學(xué)性質(zhì)氧化反應(yīng) 單糖的分子有醛（酮）、伯醇、仲醇和鄰二醇等結(jié)構(gòu)，氧化條件不同其產(chǎn)物也

13、不同。 如： （一）氧化反應(yīng)（二）糠醛形成反應(yīng)（Molish反應(yīng)） 五、糖的化學(xué)性質(zhì)氧化反應(yīng) （一）氧化反應(yīng)五、糖的化學(xué)性質(zhì) 氧化反應(yīng)以過碘酸反應(yīng)為例來(lái)了解糖的氧化反應(yīng)的應(yīng)用過碘酸反應(yīng) 主要作用于： 鄰二醇、-氨基醇、-羥基醛（酮）、鄰二酮和某些活性次甲基等結(jié)構(gòu)。 用途： 對(duì)糖的結(jié)構(gòu)的推測(cè)，如糖和苷中氧環(huán)的形式，碳原子的構(gòu)型，多糖中糖的連接位置和聚合度的決定，都有很大的用處。五、糖的化學(xué)性質(zhì) 氧化反應(yīng)以過碘酸反應(yīng)為例來(lái)了解糖的氧化五、糖的化學(xué)性質(zhì) 糠醛形成反應(yīng) 糠醛形成反應(yīng)（Molish反應(yīng)）p73Molish反應(yīng)： 樣品 + 濃H2SO4 + -萘酚 棕色環(huán)多糖、低聚糖、單糖、苷類Molis

14、h反應(yīng) = ？ 五、糖的化學(xué)性質(zhì) 糠醛形成反應(yīng) 糠醛形成反應(yīng)（Moli六、苷鍵的裂解 研究苷類的化學(xué)結(jié)構(gòu)，必須了解苷元結(jié)構(gòu)、糖的組成、糖和糖的連接方式，以及苷元和糖的連接方式等。 為此必先使用某種方法使苷鍵切斷。 酸催化水解反應(yīng) 堿催化水解 酶催化水解反應(yīng) 氧化開裂法（Smith降解法） 六、苷鍵的裂解 研究苷類的化學(xué)結(jié)構(gòu)，必須了解六、苷鍵的裂解 酸催化水解反應(yīng) 酸催化水解反應(yīng) 苷鍵屬于縮醛結(jié)構(gòu)，易為稀酸催化水解。 反應(yīng)一般在水或稀醇溶液中進(jìn)行。 常用的酸：HCl, H2SO4, 乙酸和甲酸等。 反應(yīng)的機(jī)理：苷原子先質(zhì)子化，然后斷裂生成苷元和陽(yáng)碳離子或半椅式的中間體，在水中溶劑化而成糖。 P7

15、8 有利于苷原子質(zhì)子化的因素，就可使水解容易進(jìn)行。主要包括兩個(gè)方面的因素： (1) 苷原子上的電子云密度 (2) 苷原子的空間環(huán)境六、苷鍵的裂解 酸催化水解反應(yīng) 酸催化水解反應(yīng) 六、苷鍵的裂解 酸催化水解反應(yīng)酸水解的規(guī)律： 苷原子不同，酸水解難易順序：N-苷 O-苷 S-苷 C苷 原因：N易接受質(zhì)子，而C無(wú)孤對(duì)電子，不能質(zhì)子化； 呋喃糖苷較吡喃糖苷易水解，速率大50 100倍。原因：呋喃環(huán)平面性，各鍵重疊，張力大六、苷鍵的裂解 酸催化水解反應(yīng)酸水解的規(guī)律： 呋喃糖苷六、苷鍵的裂解 酸催化水解反應(yīng)（3） 吡喃糖苷中：吡喃環(huán)C5上取代基越大越難水解，水解速度為：五碳糖 甲基五碳糖 六碳糖 七碳糖

16、C5上接-COOH的糖六、苷鍵的裂解 酸催化水解反應(yīng)（3） 吡喃糖苷中：六、苷鍵的裂解酸催化水解反應(yīng)強(qiáng)酸水解：得到糖，苷元易破壞弱酸水解：得到次級(jí)苷，確定糖的連接順序兩相酸水解：保護(hù)苷元六、苷鍵的裂解酸催化水解反應(yīng)六、苷鍵的裂解 堿催化水解 一般苷鍵對(duì)稀堿穩(wěn)定，但特殊苷易為堿水解， 如：酯苷,酚苷,烯醇苷,-吸電子基取代的苷用途：主要用于水解酯鍵苷。 酶催化水解反應(yīng)優(yōu)點(diǎn): 專屬性高,條件溫和. (P83) 酶水解苷鍵可獲知苷鍵的構(gòu)型，可保持苷元的結(jié)構(gòu)不變，還可以保留部分苷鍵得到次級(jí)苷或低聚糖，以便獲知苷元和糖、糖和糖之間的連接方式。 酶專屬性高，選擇性地催化水解某一構(gòu)型的苷。六、苷鍵的裂解 堿

17、催化水解 酶催化水解反應(yīng)六、苷鍵的裂解 酶催化水解反應(yīng) 酶催化水解反應(yīng)酶降解反應(yīng)的效果取決于酶的純度以及對(duì)酶的專一性的認(rèn)識(shí). 轉(zhuǎn)化糖酶水解-果糖苷鍵苦杏仁酶水解-葡萄糖苷鍵纖維素酶同上 麥芽糖酶水解-葡萄糖苷鍵六、苷鍵的裂解 酶催化水解反應(yīng) 酶催化水解反應(yīng)蔗糖酶半乳糖苷酶棉籽糖半乳糖苷酶六、苷鍵的裂解 酶催化水解反應(yīng)酶解反應(yīng)的專一性蔗糖酶半乳糖苷酶棉籽糖半乳糖苷酶六、苷鍵的裂解 酶催化水解六、苷鍵的裂解 酶催化水解反應(yīng)苦杏仁酶只水解-六碳醛糖苷鍵苦杏仁酶水解-葡萄糖苷鍵(前三頁(yè))六、苷鍵的裂解 酶催化水解反應(yīng)苦杏仁酶只水解-六碳醛糖六、苷鍵的裂解 氧化開裂法 氧化開裂法（Smith降解法） 用

18、過碘酸氧化1,2-二元醇的反應(yīng)可以用于苷鍵的水解,稱為Smith裂解,是一種溫和的水解方法. 適用的情況:苷元結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定, C-苷優(yōu)點(diǎn)：室溫，條件溫和，可得到原生苷元。C-苷難以酸水解，可用Smith裂解水解（P85）。試劑：過碘酸(HIO4)、四氫硼鈉(NaBH4)、稀酸反應(yīng)過程：見page 85 六、苷鍵的裂解 氧化開裂法 氧化開裂法（Smith降解七、糖的提取分離 提取 主要為溶劑法水、稀醇(單糖、低聚糖、多糖）糖類依其對(duì)乙醇和水的溶解度不同，而采用冷熱水、冷熱稀醇等條件。苷類極性隨糖基增多而增大。根據(jù)其極性大小，來(lái)選擇相適應(yīng)的溶劑。注意 破壞或抑制植物體內(nèi)水解苷類的酶： 采集新鮮材料迅

19、速加熱干燥冷凍保存等. 加入CaCO3,或用甲醇、乙醇或沸水提取. 勿與酸或堿接觸，以免苷類水解. 明確提取的目的（原生苷、次生苷或苷元），然后根據(jù)要求進(jìn)行提取。七、糖的提取分離 提取 主要為溶劑法水七、糖的提取分離 提取因苷元的結(jié)構(gòu)不同，所聯(lián)接的糖也不一樣，難有統(tǒng)一的苷的提取方法. 以下是最常用的提取方法：七、糖的提取分離 提取因苷元的結(jié)構(gòu)不同，所聯(lián)接的糖七、糖的提取分離 分離 分離1分級(jí)沉淀或分級(jí)溶解法 2. 活性炭柱色譜3離子交換樹脂柱色譜4. 纖維素和離子交換纖維素層析法 5凝膠柱色譜6季銨氫氧化物沉淀法7透析法 8. 蛋白質(zhì)除去法 七、糖的提取分離 分離 分離 1. 分級(jí)沉淀法-按分

20、子量的不同做粗略的分離乙醇溶液(三糖以下可溶) 糖的濃水溶液 (糖類多數(shù)可溶)乙醇逐增為5%，10%，15%.90%,逐步析出沉淀: 聚合度大的先析出 極性低于糖的糖衍生物，如甲醚、乙酸酯, 可在有機(jī)溶劑中分級(jí)沉淀，如先溶于丙酮，逐加乙醚，低沸點(diǎn)石油醚 熱的糖溶液逐步冷卻 逐加無(wú)機(jī)鹽，如硫酸銨等作鹽析 改變酸度的方法一般PH7穩(wěn)定; 酸多糖調(diào)PH2-4，操作應(yīng)小量，迅速，避甙鍵水解 1. 分級(jí)沉淀法-按分子量的不同做粗略的分離乙醇溶液(三七、糖的提取分離 分離2活性炭柱色譜概述用途分離水溶性物質(zhì)較好 如：氨基酸、糖類及某些苷類。特點(diǎn)： 上樣量大，分離效果較好，不受糖濃度改變或無(wú)機(jī)鹽的存在的影響

21、，適合大量制備； 來(lái)源容易，價(jià)格廉； 缺點(diǎn)：無(wú)測(cè)定其吸附力級(jí)別的理想方法。 適宜于分離低聚糖的混合物七、糖的提取分離 分離2活性炭柱色譜適宜于分離低聚七、糖的提取分離 分離分類： 粉末狀活性炭顆粒細(xì)，總表面積大，吸附力及吸附量大。 顆粒狀活性炭顆粒較上者大，吸附力及吸附量也較上者次之。 綿綸-活性炭以錦綸為粘合劑，將粉末狀活性炭制成顆粒，吸附力最弱。 七、糖的提取分離 分離分類：七、糖的提取分離 分離活性炭對(duì)物質(zhì)的吸附規(guī)律 對(duì)分子量大的化合物吸附力大于分子量小的化合物，即：多糖 單糖 活性炭在水溶液中的吸附力最強(qiáng)，在有機(jī)溶劑中吸附力較弱。洗脫順序： H2O、 10%、 20%、 30%、 50

22、%、 70%乙醇液 無(wú)機(jī)鹽 二糖 三糖 多糖 單糖等七、糖的提取分離 分離活性炭對(duì)物質(zhì)的吸附規(guī)律 3. 離子交換樹脂層析法 除水提液中的酸、堿性成分和無(wú)機(jī)離子； 陽(yáng)離子交換樹脂可使酸性糖類和中性糖類分離。 中性糖硼酸絡(luò)合酸性脂上強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂柱以濃度遞增的硼酸鹽溶液 分別洗出單糖，雙糖，三糖等洗脫順序: D-果糖、D-半乳糖和D-葡萄糖濾液蒸干，殘留物加甲醇反復(fù)蒸去硼酸甲酯，得不含硼酸的糖速以強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹脂振搖去無(wú)機(jī)離子3. 離子交換樹脂層析法 除水提液中的酸、堿性成分和無(wú)機(jī)離七、糖的提取分離 分離4. 纖維素和離子交換纖維素層析法離子交換纖維素 (用于多糖分離效果好)陽(yáng)離子交換纖

23、維素CM-celluloseP-celluloseSE-CelluloseSM-cellulose陰離子交換纖維素DEAE-celluloseECTE-OLA-cellulosePAB-celluloseTEAE-cellulose適于分離酸性,中性,粘多糖適于分離七、糖的提取分離 分離4. 纖維素和離子交換纖維七、糖的提取分離 分離5凝膠柱色譜常用商品名稱及型號(hào)：葡聚糖凝膠（商品名：Sephadex G） G-10、G-15、G-200等10表示吸水量乘以10，即1.0ml/g的吸水量瓊脂糖凝膠（Sepharose，Bio-Gel A）聚丙烯酰胺凝膠（Bio-Gel P）羥丙酰基交聯(lián)葡聚糖凝

24、膠（Sephadex LH-20）（親脂性，可在有機(jī)溶劑中進(jìn)行分離的分子篩） 七、糖的提取分離 分離5凝膠柱色譜七、糖的提取分離 分離操作過程：酶催化水解方法將凝膠在適當(dāng)?shù)娜芤褐薪荩ǘ酁橄疵搫?；待充分膨脹后裝入層析柱；用洗脫液洗脫；收集、回收溶液，干燥。 七、糖的提取分離 分離操作過程：七、糖的提取分離 分離洗脫溶劑的選擇：分離中性物質(zhì)水及電解質(zhì)溶液 （酸、堿、鹽溶液及緩沖液）阻滯較大的組分水+有機(jī)溶液 （水-甲醇、水-乙醇、水-丙酮等）LH-20可用有機(jī)溶液進(jìn)行溶脹（如：CHCl3、丁醇、二氧六環(huán)等）(適用：有機(jī)物質(zhì)的分離，如：脂類、固醇類等) 七、糖的提取分離 分離洗脫溶劑的選擇： 最

25、緩和方法 Sevag 法: 多糖的水溶液(最好用pH4-5緩沖液)七、糖的提取分離 分離氯仿,少量正丁醇或正戊醇, 振搖乳化液，蛋白質(zhì)變性成凝膠離心, 蛋白質(zhì)凝膠在氯仿和水二層中間而除去缺點(diǎn): 只能去少量蛋白質(zhì)，且須重復(fù)多次。多糖常損失;不能用于脂蛋白，因其溶于氯仿。8. 蛋白質(zhì)除去法 最緩和方法 Sevag 法: 七、糖的提取分離 三氟三氯乙烷法 用三氯乙酸法或用蛋白質(zhì)水解酶法去蛋白質(zhì)。 七、糖的提取分離 分離8. 蛋白質(zhì)除去法Sevag法和三氟三氯乙烷常用于微生物多糖。三氯乙酸法常用于植物多糖。多糖水溶液 三氟三氯乙烷 冷卻下高速攪動(dòng)數(shù)分鐘反復(fù)離心Molish試劑呈色，茚三酮試劑呈陰性水相

26、膠凍狀蛋白質(zhì)加乙醇或丙酮沉淀多糖，重復(fù)溶于水，透析，凍干 三氟三氯乙烷法 用三氯乙酸法或用蛋白質(zhì)水解酶法去蛋白七、糖的提取分離 分離 糖的提取分離實(shí)例地黃根中單糖和低聚糖的分離取鮮根熱EtOH、H2O提陰陽(yáng)離子交換樹脂（除酸堿成分）得中性成分 活性炭柱（15%HOAc處理） 以H2O、稀EtOH（5、10、15、 25% 順次洗脫）,經(jīng)PC檢定，合并D-葡萄糖 D-半乳糖 D-果糖 蔗糖 棉子糖 甘露三糖 水蘇糖(四糖) 毛蕊糖(五糖) 七、糖的提取分離 分離 糖的提取分離實(shí)例八、糖的鑒定和糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定 糖的鑒定1紙層析展開系統(tǒng)：常用水飽和的有機(jī)溶劑展開。 如：正丁醇：醋酸：水（4：1：5上

27、層）BAW 水飽和苯酚等溶劑系統(tǒng)。顯色劑：鄰苯二甲酸苯胺、硝酸銀試劑(使還原糖顯棕黑色)、三苯四氮唑鹽試劑（單糖和還原性低聚糖呈紅色）、3,5-二羥基甲苯鹽酸試劑（酮糖呈紅色） 等。八、糖的鑒定和糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定 糖的鑒定八、糖的鑒定和糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定2薄層層析3氣相層析 將糖制備成三甲基硅醚（增加其揮發(fā)性）4液相色譜 填充材料化學(xué)修飾的硅膠優(yōu)：不必制備成衍生物。 適合分析對(duì)熱不穩(wěn)定、不揮發(fā)的低聚糖和多糖。缺：分析單糖和低聚糖，其靈敏度不及氣相層析。 八、糖的鑒定和糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定2薄層層析4液相色譜八、糖的鑒定和糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定5離子交換層析 糖的硼酸絡(luò)合物可進(jìn)行離子交換層析優(yōu)：不必制成衍生物，而直

28、接用水溶液進(jìn)行分離糖自動(dòng)分析儀： 顯 色：3,5-二羥基甲苯-濃硫酸 波 長(zhǎng)：425nm 上樣量：每種組成不超過1mg 洗脫劑：四硼酸鉀的緩沖溶液 八、糖的鑒定和糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定5離子交換層析八、糖的鑒定和糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定 主要解決的問題單糖的組成、糖之間的連接位置和順序、苷鍵構(gòu)型1單糖的組成 2單糖之間連接位置的確定3糖鏈連接順序的確定4苷鍵構(gòu)型的確定513C-NMR在糖鏈結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用 八、糖的鑒定和糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定糖鏈結(jié)構(gòu)的測(cè)定例 枸杞多糖的制備及其結(jié)構(gòu)研究張民，張聲華. 食品研究與開發(fā). 2007.Vol.28.NO.07枸杞子具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、減肥、細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)、調(diào)節(jié)生

29、長(zhǎng)發(fā)育、抗腫瘤和抗衰老等作用。被認(rèn)為與枸杞多糖有關(guān).例 枸杞多糖的制備及其結(jié)構(gòu)研究張民，張聲華. 食品研究與開枸杞子烘干粉碎乙醇水溶液處理蒸餾水100 浸提4 次過濾，浸提液真空濃縮乙醇沉淀丙酮- 石油醚脫脂提取物溶于水聚酰胺色譜柱水洗脫. 洗脫液真空濃縮枸杞多糖制備方法DEAE-cellulose（OH-）柱0.1 M , 0.25 M NaCl 水溶液洗脫收集0.25 m NaCl 洗脫液真空濃縮Sephadex G-200柱透析真空濃縮，凍干水洗脫收集得LBP- 4枸杞子烘干粉碎乙醇水溶液處理蒸餾水100 浸提4 次過濾，中性糖含量28.78% (苯酚- 硫酸法)；單糖:木糖、半乳糖、甘

30、露糖、鼠李糖、葡萄糖和阿拉伯糖(4.45:1.20:1.0:0.98:0.90:0.85摩爾)；半乳糖醛酸含量為55.45%(咔唑- 硫酸法), 以13 連接為主。枸杞多糖（LBP-4）測(cè)定單糖組成- 消去反應(yīng)、紅外光譜、高碘酸氧化法研究多糖結(jié)構(gòu)激光掃描共聚焦顯微鏡, 掃描電鏡觀察多糖結(jié)晶結(jié)構(gòu)毛細(xì)管GC, FID中性糖含量28.78% (苯酚- 硫酸法)；枸杞多糖測(cè)定單糖糖類的作業(yè)1.常見的幾種單糖的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是什么？2.糖的化學(xué)性質(zhì)有哪些？這些反應(yīng)的條件及在分離或分析、結(jié)構(gòu)測(cè)定工作中的意義是什么？3.苷鍵的裂解反應(yīng)有哪些？ 各有何特點(diǎn)？4. 5、用0.02-0.05mol/L鹽酸水解時(shí)，下列苷

31、中最易水解的是（） 、2,6-二去氧糖苷 、6-去氧糖苷 、葡萄糖苷 、葡萄糖醛酸苷 糖類的作業(yè)1.常見的幾種單糖的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是什么？一 、單選題 1、 屬 于 碳 苷 的 是 （ ）2、屬 于 S 苷 的 是 （ ）一 、單選題 1、 屬 于 碳 苷 的 是 （ ）3、下列吡喃糖苷最容易被酸水解的是（）、七碳糖苷 、五碳糖苷 、六碳糖苷 、甲基五碳糖苷4、天然產(chǎn)物中，最難水解的苷是（）、C 苷 、S 苷 、N 苷 、O苷5、用0.02-0.05mol/L鹽酸水解時(shí)，下列苷中最易水解的是（） 、2,6-二去氧糖苷 、6-去氧糖苷 、葡萄糖苷 、葡萄糖醛酸苷 3、下列吡喃糖苷最容易被酸水解的是（）

32、6、 Smith裂解法所使用的試劑是（） 、NaIO4 、NaBH4 、均是 、均不是 7、能使-葡萄糖苷鍵水解的酶是（ ）。 A、麥芽糖酶 B、苦杏仁苷酶 C、均可以 D、均不可以 二、多選題：苷類化合物確定糖鏈結(jié)構(gòu)要解決的問題是A糖鏈中糖的元素比 B糖鏈中糖的種類和比例C糖之間的連接位置 D糖之間的連接順序E糖之間苷鍵的構(gòu)型 6、 Smith裂解法所使用的試劑是（）二、多選題：三、填空題1、苷類多具有一定的（ ），因?yàn)樗鼈兊慕Y(jié)構(gòu)中含有糖。 2、苷類的酶水解具有()性，是緩和的水解反應(yīng)。3、凡水解后能生成（ ）化合物的物質(zhì)，都稱為苷類。如蘆丁加酸水解生成（ ）、( ）和（ ） 。4、Molish反應(yīng)的試劑是（ ），反應(yīng)現(xiàn)象是（）。三、填空題四、簡(jiǎn)述下列各題 1、解釋下列名詞含義： 苷 、苷元 、苷鍵 、原生苷 、次生苷 低聚精 、多聚糖、苷化位移、什么是苷類化合物？該類化合物有哪些共性？ 五、 判斷題 1多羥基化合物與硼酸絡(luò)合后，原來(lái)中性的可以變成酸性，因此可進(jìn)行酸堿中和滴定。2D-甘露糖苷，可以用1H-NMR中偶合常數(shù)的大小確定苷鍵構(gòu)型。四、簡(jiǎn)述下列各題 五、 判斷題 1.常見的幾種單糖的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是什么？答: 單糖是不能水解成更小分子的、最簡(jiǎn)單的多羥基內(nèi)半縮醛(酮)。水溶液中主要以半縮醛(酮)的環(huán)狀結(jié)構(gòu)形式存在，具有六元環(huán)結(jié)構(gòu)吡喃糖或五