免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件

1、免疫化學(xué)相關(guān)實驗技能免疫化學(xué)相關(guān)實驗1、定義用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學(xué)成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)( immunohistochemistry)技術(shù)或免疫細胞化學(xué)( immunocytochemistry)技術(shù)。1、定義2、原理根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理組織切片或細胞標本中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標記生物素、熒光素等的二抗進行反應(yīng),最后通過呈色反應(yīng)或熒光來顯示細胞或組織中化學(xué)成分,在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。

2、2、原理常用的標記物有光膏、和性網(wǎng)健:標記熒光素的稱為兔光造,常用的熒光素有異硫氰酸熒光素(FTC)、羅丹明( rhodamine)等。標記酶的稱為兔,常用的酶有辣根過氧化物酶( horseradish peroxidase)等。標記同位素的稱為兔,常用的同位素有3H、c、32s和P等。常用的標記物有光膏、和性網(wǎng)健:講解提綱石蠟切片/冰凍切片二、免疫酶/免疫熒光、酶朕免疫吸附試驗講解提綱(1)石蠟切片的制作取材、固定洗滌蒸餾水洗滌2遍50%70%、80%酒精各15min,95%酒精脫水酒精I、各15min,無水乙醇I、各15min,無水乙醇/二甲苯(1:1)15min選明、浸二甲米約2mBn元

3、甲石蠟(:13mn純蠟I各30r包、切片常規(guī)石蠟切片,切片厚度為7m晨片、烤片于干凈載玻片上進行展片,37烤千(1)石蠟切片的制作Q取材根據(jù)不同的實驗?zāi)康?選擇相應(yīng)的材料,材料要求新鮮、準確、完整,材料要避免擠壓、挫傷、千枯。所采集材料應(yīng)立即放入固定液,并編號,注明采集時間、名稱、組織部位,所取組織塊要大小適當,即要能說明問題,又要考慮固定劑的穿透能力如:角膜、TEHC等組織材料細胞材料肝臟、魚卵Q取材國固定取材后,應(yīng)立即進行固定。固定是制片極為關(guān)鍵的一個步驟,制片質(zhì)量的優(yōu)劣除與材料的新鮮程度有關(guān)外,還取決于最初的固定是否適當和完全。固定的意義新鮮的組織被割取后,由于細胞內(nèi)酶的作用和細菌的繁殖

4、,可引起組織的自溶和腐敗。因此,割取組織塊后,應(yīng)立即采用一種方法.將組織盡可能保持原有的形態(tài)結(jié)構(gòu),且有利于保存和適于制片的操作,這一步驟稱為固定。國固定固定的目的和作用在于防止組織自溶和腐敗;使細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、糖、脂肪等各種成分沉淀保存下來從而保存細胞的各種組成成分使其保持與生活時相近似的形態(tài)和結(jié)構(gòu);因沉淀及凝固的關(guān)系,使細胞內(nèi)不同的成分產(chǎn)生不同的折光率,造成光學(xué)上的差別,使原來在生活情況下看不清楚的結(jié)構(gòu)變得清晰易見,且有的固定劑還有助染作用(如醋酸、苦味酸),從而使細胞各部易于染色;固定劑還兼有硬化作用,使柔軟組織硬化而不易變形,有利于操作。固定的目的和作用在于名稱10%甲醛4%多聚苦味酸冰

5、醋酸鋨酸甲醛固定效果好好沉淀一對染色好切蛋白質(zhì)固定好組織收縮大小大小小主要用途常規(guī)病理免疫化不單獨不單獨電鏡切片使用使用核型缺點長期用其固定的滲透力使組織價格昂固定的組時間不弱,對膨脹,貴;有織變?yōu)樗嵋颂L,組織收一般不性不利于以24小縮大單獨使染色,特時以內(nèi)用別是細胞為宜核的著色名稱10%甲醛4%多聚苦味酸冰醋酸鋨酸免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共7

6、8張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗

7、技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫

8、細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78張課件免疫細胞化學(xué)實驗技能總結(jié)共78