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關(guān)于結(jié)核感染細胞檢測第1頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五1、結(jié)核病的疫情結(jié)核病是一種慢性傳染病,可在身體各個器官發(fā)病,其中以肺結(jié)核最為常見,因此肺結(jié)核病是一種嚴重危害人類健康的傳染病,得了肺結(jié)核病如果不能徹底治療就會完全喪失勞動能力,而且還會傳染他人,對個人、家庭和社會都是極大的危害。我國是全球22個結(jié)核病高負擔國家之一,活動性肺結(jié)核病人數(shù)僅次于印度,居世界第二位。結(jié)核病仍是目前嚴重影響我國人民健康的公共衛(wèi)生問題,而且影響到社會和經(jīng)濟的發(fā)展,是我國重點控制的疾病之一。第2頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五1.3結(jié)核診斷
2結(jié)核診斷
細菌培養(yǎng)不能區(qū)分非結(jié)核分枝桿菌敏感度低,近半肺結(jié)核陰性肺外結(jié)核取材難結(jié)核桿菌生長緩慢,培養(yǎng)周期長,不利于早期診斷第3頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五3.TSPOT檢測原理結(jié)核感染的免疫應(yīng)答反應(yīng)以細胞免疫為主,結(jié)核感染后體內(nèi)長期存在抗原特異性的記憶性T細胞。當再次遇到抗原刺激時,能迅速活化增殖,釋放γ干擾素γ干擾素是結(jié)核分枝桿菌感染后機體免疫應(yīng)答中最重要的細胞因子。第4頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五T-SPOT.TB技術(shù):利用結(jié)核桿菌感染者外周血單個核細胞(PBMC)中存在結(jié)核特異性T細胞,這些淋巴細胞在受到結(jié)核特異抗原刺激后分泌γ干擾素而設(shè)計的T細胞免疫斑點試驗。檢測外周血中受結(jié)核特異抗原刺激釋放γ干擾素的T淋巴細胞,經(jīng)酶聯(lián)免疫顯色后,通過ELISPOT分析系統(tǒng)對斑點進行計數(shù),1個斑點代表一個分泌細胞,計算出抗原特異性細胞的頻率。第5頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五第6頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五第7頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五第8頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五空白對照孔內(nèi)斑點數(shù)小于10且陽性對照孔內(nèi)斑點數(shù)大于20時視為試驗有效T-SPOT.TB試驗結(jié)果用每106PBMCs中斑點形成細胞(SFCs)的數(shù)目來描述,即SFCs/106PBMCs第9頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五5.T-SPOT.TB的臨床意義T-SPOT.TB高靈敏度第10頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五種類內(nèi)容摘要受試者數(shù)量文獻發(fā)表活動性結(jié)核/靈敏度將T-SPOT.TB的檢測結(jié)果與最后通過涂片和培養(yǎng)確診的結(jié)果進行比較。包括牛型結(jié)核桿菌和非洲型結(jié)核桿菌感染的患者。T-SPOT.TB的靈敏度為97.2%。(CI90.3-99.7%)72MeieretalEurJMicrobiolInfectDis(2005);24:529-536在經(jīng)培養(yǎng)確診的活動性結(jié)核受試者中,T-SPOT.TB的靈敏度為96.6%。其中29例免疫力低下患者,T-SPOT.TB的靈敏度為100%87Leeetal.ERJ2006;28:24–30在確診病例(涂片或培養(yǎng)陽性)和臨床診斷病例(有臨床癥狀和抗癆治療有效)中,T-SPOT.TB的靈敏度為90.3%,并且不受CD4細胞數(shù)量影響。30Clarketal.Clin.Exp.Imm.2007;150(2):238-44在經(jīng)痰培養(yǎng)或肺部病變組織病理活檢確診的結(jié)核患者中,T-SPOT.TB的靈敏度為92%。140KangetalChest.2007Sep;132(3):959-65在確診的肺結(jié)核患者和疑似肺外結(jié)核患者中,T-SPOT.TB的陽性率94%。32Kimetal.ArchInternMed.2007;167;20:2255-2259在免疫力正常和免疫力低下的受試人群中,T-SPOT.TB的靈敏度分別為94%和95%。所有受試者中,42%為肺外結(jié)核患者。186Kimetal.AmJMed2009;122,189-195經(jīng)培養(yǎng)確診、抗癆治療不超過2周的結(jié)核患者用T-SPOT.TB檢測,陽性率98%(57/58)。58JanssensetalERJ2007;30(4):722-8在經(jīng)培養(yǎng)確診的活動性結(jié)核患者中,T-SPOT.TB的靈敏度為94%。32DominguezetalClinVaccImmunol2008;15;168-71第11頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五T-SPOT.TB高特異性
檢測所用的ESAT-6&CFP10抗原均來自結(jié)核分枝桿菌基因組RD1區(qū)域,RD1區(qū)基因僅存在于結(jié)核分枝桿菌復合群(人型、牛型、非洲型)??ń槊绾痛蠖鄶?shù)環(huán)境分枝桿菌缺失RD1區(qū)基因因此T-SPOT.TB不會受卡介苗或者非結(jié)核分枝桿菌影響。第12頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五種類內(nèi)容摘要受試者數(shù)量文獻發(fā)表特異性用T-SPOT.TB檢測14例鳥分枝桿菌感染者,13例陰性,1例為臨界值,復查也為陰性。14AdamsetalSc.JInf.Dis..2008;40(3):196-203.經(jīng)過結(jié)核篩查的無癥狀的受試者,T-SPOT.TB檢測結(jié)果全部為陰性,特異性100%。47Clarketal.Clin.Exp.Imm.2007;150(2):238-44在德國用T-SPOT.TB對健康的衛(wèi)生保健工作者進行篩查。僅1例陽性(1/95)
,為影像學工作者,接觸病人超過35年。
TST檢測假陽性結(jié)果34%(32/95)。
95Barsegianetal.JofHospitalInf2008;69(1):69-76在接觸結(jié)核的健康醫(yī)務(wù)工作者和健康對照受試者中用TST和T-SPOT.TB檢測。155健康醫(yī)務(wù)工作者中,TST陽性的27例,而T-SPOT.TB僅3例陽性。健康對照組T-SPOT.TB全部陰性而TST有3例陽性。
218
Storlaetal.BMCInfectiousDiseases2009,9:60
第13頁,共14頁,2022年,5月20日,19點36分,星期五6.結(jié)論T-SPOT.TB在診斷結(jié)核感染方面具有良好的敏感性和特異性,在現(xiàn)有結(jié)核診斷方法
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