痛覺研究與阿片系統(tǒng)課件

痛覺及其控制(kòngzhì)以及阿片系統(tǒng)研究進展陳強2009年3月第一頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)一、痛覺的機理(jīlǐ)和控制疼痛是一種令人不快的感覺和情緒上的感受，伴隨著現(xiàn)有的或潛在的組織損傷。疼痛是一種知覺體驗(tǐyàn),痛本質(zhì)至今仍是難解之謎。迄今我們知道痛是一種自身保護機制,但過度的痛反應(yīng)能使機體產(chǎn)生一系列生理病理反應(yīng),重者甚至導(dǎo)致體克、死亡。第二頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)疼痛(téngtòng)的意義疼痛是一種警戒信號,表示機體已經(jīng)發(fā)生組織損傷或預(yù)示即將遭受損傷，通過神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，引起一系列防御反應(yīng)，保護機體避免傷害。疼痛長期持續(xù)不止，便失去警戒意義，反而對機體構(gòu)成難以忍受的精神(jīngshén)折磨，嚴重影響學(xué)習(xí)、工作、飲食和睡眠，降低生活質(zhì)量，產(chǎn)生一種不可忽視的經(jīng)濟和社會問題。第三頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)疼痛(téngtòng)的產(chǎn)生由一定的刺激（傷害性刺激）作用于外周感受器（傷害性感受器），換能后轉(zhuǎn)變成神經(jīng)沖動（傷害性信息），循相應(yīng)的感覺傳入通路（傷害性傳入通路）進人中樞神經(jīng)系統(tǒng)，經(jīng)脊髓、腦干、間腦中繼后直到大腦邊緣系統(tǒng)和大腦皮質(zhì)，通過(tōngguò)各級中樞整合后產(chǎn)生疼痛感覺和疼痛反應(yīng)。第四頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)第五頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)傷害性感受器通常是指接受身體和內(nèi)臟傷害刺激的第一級神經(jīng)元。它們大多數(shù)是游離神經(jīng)末梢少數(shù)帶有附屬結(jié)構(gòu)，分布在皮膚、肌肉、關(guān)節(jié)和內(nèi)臟器官。目前已確定的傷害性感受器主要有以下三類：（1）與C類纖維(xiānwéi)有關(guān)的機械－熱傷害性感受器，對高強度的機械、物理（冷和熱）和化學(xué)刺激均可發(fā)生反應(yīng)，又稱多模式傷害性感受器。（2）與A類纖維有關(guān)的機械－熱傷害性感受器，信號傳導(dǎo)速度比第一種快。（3）非機械傷害性感受器，大多位于關(guān)節(jié)部位，正常時對機械性刺激不敏感，有炎癥時可對機械刺激發(fā)生反應(yīng)。第六頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)游離的神經(jīng)末梢，廣泛分布于機體的皮膚、肌肉、關(guān)節(jié)和內(nèi)臟(nèizàng)等不同組織。第七頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)傷害性感受器一般是由傷害性脊神經(jīng)節(jié)（dorsalrootganglion,DRG）神經(jīng)元發(fā)出(fāchū)，這種傷害性DRG神經(jīng)元的動作電位具有明顯的特征，即在動作電位的下降支有一“駝峰”，這是Ca2＋離子緩慢內(nèi)流所致，也是判斷一個神經(jīng)元是否為傷害性神經(jīng)元的重要依據(jù)。第八頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)第九頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)第十頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)傷害信息(xìnxī)的傳入主要是Aδ和C纖維沿背根進入脊髓背角(bèijiǎo)再將傷害信息傳向脊髓以上的結(jié)構(gòu)，最后到達大腦皮層。第十一頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)傷害性信號的上行通路(tōnglù)主要有以下幾條：軀干、四肢的痛覺通路：脊髓－丘腦束

脊髓－網(wǎng)狀

脊髓－中腦束

后索-內(nèi)側(cè)丘系

脊髓固有束

頭面部的痛覺通路：

三叉神經(jīng)→三叉丘系內(nèi)臟痛覺通路：

交感神經(jīng)→脊髓丘腦束

第十二頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)丘腦內(nèi)有三組核群與痛覺有關(guān)(yǒuguān)；它們是生腦腹側(cè)基底復(fù)合體、后核群和內(nèi)側(cè)核群。大腦皮層的第二體感區(qū)與痛覺有很大的關(guān)系，并可引起情緒反應(yīng)。痛覺(tòngjié)的整合中樞第十三頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)痛覺(tòngjié)的整合中樞第十四頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)第十五頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)疼痛的中樞(zhōngshū)機制閘門控制學(xué)說閘門控制學(xué)說是由Melzac&Wall在1965年提出來的該學(xué)說設(shè)想在脊髓后角存在一種神經(jīng)調(diào)節(jié)機制，使神經(jīng)信號在誘發(fā)痛知覺和痛反應(yīng)前就受到閘門控制，這個閘門可以(kěyǐ)增強或減弱傷害性信號的傳遞。第十六頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)傳導(dǎo)(chuándǎo)疼痛的神經(jīng)纖維有二，即直徑大的粗纖維和直徑小的細纖維。前者傳導(dǎo)(chuándǎo)淺表性的銳痛，后者傳導(dǎo)(chuándǎo)深部性鈍痛和灼痛。這兩種纖維傳到閘門外的信號的對比可以決定閘門的開和關(guān)。當粗纖維（Aδ

）傳導(dǎo)時，形成閘門關(guān)閉效應(yīng)，而細纖維（C）傳達時，形成閘門開放效應(yīng)。閘門的活動可以受到來自大腦的下行性影響?，F(xiàn)已證明高位腦的下行抑制系統(tǒng)至少包括內(nèi)源性阿片肽、5-羥色胺(5-HT)和去甲腎上腺素(NA)三種遞質(zhì)系統(tǒng)。脊髓背角的第二層,被認為是閘門所在第十七頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)NNN+-PainfibreSensoryfibreAscendingpain‘C’Descending

inhibitionPainSensationDescending

facilitation-NTouch‘A’第十八頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)第十九頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)疼痛(téngtòng)的效應(yīng)疼痛可使機體各系統(tǒng)發(fā)生相應(yīng)的改變，如疼痛刺激心血管系統(tǒng)，使脈博加快，血壓升高，心肌耗氧量增加，對老年或有心臟病者就注意疼痛可能引起冠狀動脈供血中足而產(chǎn)生心絞痛，組織缺血甚至心缺梗塞。在內(nèi)分泌系統(tǒng)，疼痛使可的松（腎上腺皮質(zhì)激素）釋放增加，物質(zhì)代謝增強，病人出現(xiàn)消瘦，傷口(shāngkǒu)愈合緩慢。第二十頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)疼痛與心理活動(huódòng)的關(guān)系不同的病人疼痛的反應(yīng)不同。病人的心理狀態(tài)如病人的個性、對疼痛的耐受力、對疼痛的理解等均可影響病人的疼痛行為。焦慮和疼痛通常難以分清，疼痛病人?？杀憩F(xiàn)出與焦慮有關(guān)的行為，如出汗、發(fā)顫、畏縮(wèisuō)等；而與焦慮有關(guān)的感覺如恐懼等?？捎绊懲吹母杏X。有證據(jù)顯示，生活充滿焦慮的人，表達疼痛的計分比較少焦慮的人為高。第二十一頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)疼痛(téngtòng)的控制麻醉性鎮(zhèn)痛藥如嗎啡，非類固醇抗炎癥藥物如阿司匹林都具有明顯的緩解疼痛的作用，但是有很多類型的疼痛仍然很難控制，并且這些藥物的也有較大副作用。由于神經(jīng)科學(xué)的快速發(fā)展，在痛覺(tòngjié)和鎮(zhèn)痛方面的研究也已取得了很大成績，關(guān)于鎮(zhèn)痛藥物的研究也已顯露出了曙光。第二十二頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)階梯用藥止痛法：WHO提出止痛治療的框架方案是依疼痛程度使用止痛藥的系統(tǒng)方法。第一階梯為非麻醉止痛藥，如非類固醇類抗炎藥非那西丁、阿斯匹林等，適用于因高度炎癥性反應(yīng)所致的外周性輕、中度疼痛、慢性疼痛，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、頭痛、腰痛等。這類藥物能抑制外同周前列腺素合成中的關(guān)鍵酶――環(huán)加氧酶的活性，使受損傷細胞列腺素的產(chǎn)生和釋放減少，從而(cóngér)使傷害性感受器的活動減弱。副作用為使?jié)儾∪说臐兗觿∩踔脸鲅?。第二十三頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)第二階梯為弱效麻醉性藥物，如可待因等，可與非類固醇類抗炎藥共用，兩者有協(xié)同鎮(zhèn)痛作用。適用于中等疼痛或第一階梯止痛藥效果不理想的病人。副作用為連續(xù)使用可發(fā)生耐受性及成癮性，宜控制使用。第三階梯為強效麻醉性止痛藥，如度冷丁、嗎啡等。適用于中重度疼痛如內(nèi)臟(nèizàng)痙攣性疼痛、手術(shù)后疼痛、癌癥疼痛等。此類藥物能與脊髓及腦內(nèi)的阿片受體結(jié)合，提高痛閾，還可改善疼痛心理反應(yīng)，抑制焦慮情緒，止痛效果明顯。副作用有惡心、嘔吐頭暈、呼吸抑制等，易產(chǎn)生成癮性及耐受性。第二十四頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)鎮(zhèn)痛藥（analgesics）是指作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在不影響患者意識(yìshí)狀態(tài)下選擇性地解除或減輕疼痛的藥物。鎮(zhèn)痛(zhèntònɡ)藥物第二十五頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)阿斯匹林：屬于非固醇類抗炎藥nonsteroidalanti-inflammatorymedications(NSAIDs)的一種。人們一直希望找到一種具有多種功能的藥，阿司匹林就是。它抑制機體的一個中間過程，即阻礙前列腺素（用于攜帶局部信息的關(guān)鍵激素）的產(chǎn)生。大多數(shù)激素是由專門的腺體產(chǎn)生，然后通過血液運送到全身。而前列腺素不同，它是由細胞產(chǎn)生，在被分解之前(zhīqián)，只作用于周圍區(qū)域。它傳遞和增強疼痛信號，并緩解炎癥。前列腺素有多種，但都由一種普通的前體分子產(chǎn)生。第二十六頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)環(huán)氧合酶完成脂肪酸產(chǎn)生前列腺素的第一步。它把2分子氧加到花生四烯酸上，從而激活一系列的反應(yīng)，最后產(chǎn)生大量不尋常的分子。在環(huán)氧合酶的活性部位，阿斯匹林抑制花生四烯酸的聚合。由于這些普通的信號不被傳遞，所以(suǒyǐ)我們感覺不到疼痛，也不會引起炎癥反應(yīng)。第二十七頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)實際上，我們?yōu)椴煌挠猛緲?gòu)造了兩種環(huán)氧合酶（環(huán)氧合酶—1和環(huán)氧合酶—2）。環(huán)氧合酶—1在許多不同的細胞內(nèi)存在，用來產(chǎn)生處理全身基本信息的前列腺素。第二種酶只存在于專門的細胞內(nèi)，用來發(fā)出疼痛和炎癥信號?？上У氖牵⑺蛊チ謱煞N酶都攻擊。一旦環(huán)氧合酶—1被攻擊，阿斯匹林就能導(dǎo)致令人討厭的并發(fā)癥狀，如胃出血。但可喜的是，我們現(xiàn)在可以得到一些特殊(tèshū)的藥物，它們只抑制環(huán)氧合酶—2，使環(huán)氧合酶—1可以執(zhí)行它的基本功能。這些新藥是選擇性的止痛藥和退燒藥，并沒有副作用。第二十八頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)塞來昔布(Celecoxib)

新型非甾體抗炎藥、新型COX-2專一性抑制劑，由Pharmacia和Pfizer公司共同開發(fā)，1999年1月上市，上市當年即成為“重磅炸彈”級藥物，一直位居全球藥品銷售額前十名，年銷售額超過30億美金。最近，該藥用于家族(jiāzú)性結(jié)腸息肉的新適應(yīng)癥獲得又FDA通過；其用于老年癡呆癥的研究也已進入Ⅱ期臨床階段。一項新的研究表明，Celecoxib能夠通過促進細胞死亡、抑制細胞增殖。Peoplewhotakenonsteroidalanti-inflammatorymedications(NSAIDs)suchascelecoxibmayhaveahigherriskofhavingaheartattackorastrokethanpeoplewhodonottakethesemedications.Theseeventsmayhappenwithoutwarningandmaycausedeath.

第二十九頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)阿片類鎮(zhèn)痛藥通過激動中樞神經(jīng)特定部位阿片受體而發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用，故稱為阿片類鎮(zhèn)痛藥（opioid

analgesics）。阿片類鎮(zhèn)痛藥包括阿片生物堿類及其人工合成品，鎮(zhèn)痛作用強大，抑制呼吸(hūxī)和欣快（euphoria）作用明顯，長期應(yīng)用易產(chǎn)生耐受性（tolerance）和依賴性（dependence）。第三十頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)

阿片（opium）為罌粟科植物罌粟（Papaversomniferum）未成熟蒴果漿汁的干燥物，含20余種生物堿，其中僅有嗎啡（morphine）、可待因和罌粟堿具有臨床藥用價值。嗎啡屬于菲類生物堿，1803年德國學(xué)者Sert?rner首次從阿片中分離出來。可待因是阿片中的另一重要(zhòngyào)菲類生物堿，也能產(chǎn)生阿片樣作用，但鎮(zhèn)痛作用較嗎啡弱。罌粟堿屬異喹啉類生物堿，具有松弛平滑肌作用。第三十一頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)嗎啡(Morphine)是鴉片中的主要生物堿，已有200多年歷史(lìshǐ)。嗎啡為白色針狀結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，有苦味，遇光易變質(zhì)，溶于水，略溶于乙醇。嗎啡為麻醉性鎮(zhèn)痛藥，有強大的止痛作用，對各種疼痛都有鎮(zhèn)痛效果。臨床上主要用于外科手術(shù)和外傷性劇痛、晚期癌癥劇痛等，也用于心絞痛發(fā)作時止痛和鎮(zhèn)靜作用。久用可產(chǎn)生嚴重的依賴性，一旦失去供給，將會產(chǎn)生流汗、顫抖、發(fā)熱、血壓升高、肌肉疼痛和痙攣等明顯的戒斷癥狀。長期使用嗎啡，會引發(fā)精神失常，大劑量吸食嗎啡，會導(dǎo)致呼吸停止而死亡。嗎啡可影響膽堿能系統(tǒng)活性致大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙。第三十二頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)度冷丁(哌替啶)是人工合成的阿片受體激動劑，度冷丁普遍地使用于臨床，它對人體的作用和機理與嗎啡相似，但鎮(zhèn)痛(zhèntònɡ)、麻醉作用較小，僅相當于嗎啡的1/10—1/8，注射度冷丁后，血液和腦內(nèi)的濃度迅速上升，容易引起“飄”感。它在體內(nèi)會產(chǎn)生一種名為去甲哌替啶的毒性代謝物，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有著明顯興毒性。度冷丁有一定的成癮性，連續(xù)使用1--2周便可產(chǎn)生藥物依賴性。第三十三頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)藥物(yàowù)耐受性和藥物(yàowù)依賴性耐受性tolerance是指人體對藥物反應(yīng)性降低的一種狀態(tài)，按其性質(zhì)有先天性和后天獲得性之分。前者對藥物的耐受性可長期保留，多與這類患者體內(nèi)某些(mǒuxiē)藥物代謝酶過度活躍有關(guān)。后者往往是連續(xù)多次用藥后才發(fā)生的，增加劑量后可能達到原有的效應(yīng)；停止用藥一段時間后，其耐受性可以逐漸消失，重新恢復(fù)到原有的對藥物反應(yīng)水平。容易產(chǎn)生耐受性的藥物如硝酸甘油、安定等。

第三十四頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)耐藥性resistance又稱抗藥性是指病原微生物對藥物反應(yīng)性降低的一種狀態(tài)。這種情況主要是由于長期應(yīng)用抗菌藥物，病原微生物通過產(chǎn)生(chǎnshēng)使藥物失活的酶，改變原有代謝過程等機理，而產(chǎn)生(chǎnshēng)的一種使藥物效果降低的反應(yīng)。要想達到原有殺菌效果，往往需要加大藥物劑量；有時加大藥物劑量也不能再殺死這些耐藥病菌。第三十五頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)藥物依賴性dependence與成癮性藥物依賴性是指藥物與人體相互作用所產(chǎn)生的一種精神狀態(tài)，有時也包括身體狀態(tài)，表現(xiàn)出一種強烈使用或定期使用該藥行為反應(yīng)，目的是為了體驗這種藥物的精神效應(yīng)(xiàoyìng)，有的也是為了避免由于斷藥所引起的不舒適。第三十六頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)根據(jù)依賴情況，可分為：（1）身體依賴性，又稱生理依賴性，是由于反復(fù)用藥所造成的一種適應(yīng)狀態(tài)，中斷用藥后可產(chǎn)生一種強烈的軀體(qūtǐ)方面的損害，即戒斷綜合征，如肌肉關(guān)節(jié)疼痛、全身難受、四肢不適、全身乏力、心慌、煩躁不安、納差、流涕、哈欠連連等，不同成癮藥物引起的戒斷綜合征略有不同，這種情況也就是通常人們所說的“成癮性”。能產(chǎn)生身體依賴性的藥物主要是中樞鎮(zhèn)痛藥物，如嗎啡、度冷丁、阿片等。（2）精神依賴性，又稱心理依賴性，它使人產(chǎn)生一種要周期性或連續(xù)性地使用藥物的欲望，產(chǎn)生強烈的用藥行為，以獲得滿足或避免不適感。產(chǎn)生精神依賴性的藥物在斷藥時一般不出現(xiàn)身體戒斷癥狀，這是與身體依賴性的區(qū)別點。常導(dǎo)致產(chǎn)生精神依賴性的藥物主要有催眠類藥物，如安定、舒樂安定、利眠寧、阿普唑倫等。為了避免藥物耐受性、耐藥性、依賴性和成癮性的產(chǎn)生，關(guān)鍵要合理用藥，而且要在醫(yī)生指導(dǎo)下，根據(jù)病情需要使用。第三十七頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)二、疼痛(téngtòng)的動物模型與研究方法疼痛是多種疾病的癥狀，動物疼痛模型建立對闡明疼痛疾病的發(fā)病機理以及探討藥物作用原理都具有重要的理論意義和臨床前研究價值。動物疼痛模型除了常用的熱刺激法、電刺激法、機械刺激和化學(xué)刺激等試驗方法外，近幾年來建立動物疼痛模型，主要是通過疾病或外傷(wàishāng)誘發(fā)模型動物的疼痛來模擬人類疼痛的動物模型。第三十八頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)神經(jīng)病理性痛模型神經(jīng)損傷：神經(jīng)瘤、慢性壓迫性損傷、部分神經(jīng)損傷、背根節(jié)慢性壓迫、低溫神經(jīng)損傷中樞神經(jīng)痛模型炎癥痛模型癌癥痛模型甩尾反射模型熱輻射或熱水甩尾機械刺激甩尾熱(冷)板反應(yīng)模型內(nèi)臟痛模型化學(xué)誘導(dǎo)的軀體(qūtǐ)扭動模型膨脹結(jié)腸模型第三十九頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)扭體模型(móxíng)可采用小鼠或大鼠有多種刺激物都可誘發(fā)動物扭體(writhing)行為最常見的刺激物是醋酸(aceticacid)。將1克阿拉伯膠(arabicgum)加入9ml濃度為1%的醋酸溶液中，再注入實驗(shíyàn)動物體內(nèi)，觀察注射后90分鐘期間每15分鐘內(nèi)出現(xiàn)典型扭體癥狀的次數(shù)該模型可以模擬腹腔炎癥引起的腹痛癥狀第四十頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)白陶土(táotǔ)-鹿角菜膠炎癥模型白陶土(Kaolin)是一種細顆粒狀物質(zhì)，成分為氧化鋁，起機械刺激作用；鹿角菜膠(carrageenan)是由水生植物鹿角菜中提取的膠體物質(zhì)，具有過敏刺激作用。鹿角菜膠單獨實驗即可誘發(fā)炎癥，若與白陶土合并使用，則炎癥更為強烈可采用家兔或大鼠麻醉動物，由一側(cè)后肢足底注入4%白陶土混懸液0.1ml，并按摩5分鐘使之在組織中分散。在注射后1小時，再注入2%鹿角菜膠溶液0.05ml并按摩5分鐘。炎癥過程一般在第一次注射后2小時內(nèi)開始。動物后足紅腫，皮溫升高，PWT值降低等類似(lèisì)痛敏的癥狀一般能持續(xù)12小時以上，24小時后基本復(fù)原。因而本模型屬于亞急性炎癥痛模型范圍本模型亦可采用關(guān)節(jié)腔注射第四十一頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)福爾馬林(fúěrmǎlín)致痛模型模擬組織急性炎癥損傷所致的持續(xù)性疼痛大鼠或小鼠足底(zúdǐ)福爾馬林致痛模型：在動物一肢足底皮下注射稀釋的福爾馬林(formalin)溶液，動物的行為改變，如安靜時的屈腿、運動時的跛行以及舔足等。這些行為的程度(如舔足時間)與福爾馬林濃度成正比面部福爾馬林致痛模型：把不同濃度的福爾馬林溶液(0.2~10%)皮下注射到大鼠的右上唇，記錄注射后每3分鐘時間內(nèi)動物用同側(cè)前肢或后肢摩擦注射部位的秒數(shù)作為痛分數(shù)第四十二頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)各種癥狀普遍分為兩個時相：急性相或第一相：前5分鐘。之后有5-10分鐘的間歇持續(xù)相或第二相：15~60分鐘兩相均可用于實驗，但以第二相為常用。兩個時相的發(fā)生(fāshēng)機制并不相同第四十三頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)炎癥(yánzhèng)痛模型inflammatorypainmodel多發(fā)性佐劑關(guān)節(jié)炎模型含高濃度結(jié)核桿菌的福氏佐劑，向大鼠尾根部或足底作皮內(nèi)注射，一側(cè)或雙側(cè)后肢通常首先出現(xiàn)多個關(guān)節(jié)的炎癥(yánzhèng)

單發(fā)性佐劑關(guān)節(jié)周圍炎模型完全福氏佐劑注射到動物后肢足底，造成單個關(guān)節(jié)周圍局部組織的炎癥反應(yīng)單發(fā)性佐劑關(guān)節(jié)腔炎模型將高濃度的福氏佐劑直接注射到大鼠后肢踝關(guān)節(jié)腔中，引起一個具有急性、慢性兩相的高度局限的關(guān)節(jié)炎癥福氏佐劑關(guān)節(jié)炎模型福氏佐劑足底炎癥模型第四十四頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)ChronicInflammatoryPainModel-MonoarthritisAnklejoint:intra-articularinjectionofCFAWeek1:acuteperiodWeek2-3:subacuteperiodWeek4-9:chronicperiod第四十五頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)常用的痛刺激(cìjī)方法熱刺激冷刺激機械(jīxiè)刺激化學(xué)刺激電刺激缺血第四十六頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)實驗動物(dòngwù)的疼痛評價方法較理想的行為學(xué)評價方法應(yīng)該具備能區(qū)分動物對傷害性和非傷害性刺激的不同反應(yīng)痛刺激引起的行為反應(yīng)隨刺激強度從痛閾到耐痛閾間出現(xiàn)相應(yīng)(xiāngyīng)改變測得的行為改變可以反映動物的痛感受動物的行為反應(yīng)對鎮(zhèn)痛藥物的處理敏感能將非感覺性變化，如注意力、活動能力等與感覺性變化區(qū)分開反復(fù)刺激不引起或只引起極小的組織損傷第四十七頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)小鼠甩尾實驗(shíyàn)或熱板法熱刺激的痛覺檢測(jiǎncè)方法第四十八頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)第四十九頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)化學(xué)(huàxué)刺激的痛覺檢測方法第五十頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)福爾馬林試驗（formalintest）和小鼠扭體試驗（writhingtest）在本實驗中主要是利用(lìyòng)福爾馬林（化學(xué)刺激、延長的保護性活動）試驗來評價阿司匹林的鎮(zhèn)痛藥效，并觀察0.6%的醋酸溶液所引起的小鼠扭體反應(yīng)。第五十一頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)稱量小鼠的體重，用于注射福爾馬林的后右腳掌進行標記，以便于行為學(xué)反應(yīng)觀察；將小鼠放入大玻璃燒杯（1500或2000ml）中，讓它適應(yīng)環(huán)境10－15min；下面放置傾斜30度的鏡子，以便于觀察小鼠的足部反應(yīng)；配好藥物：生理鹽水（0.9%的NaCl溶液(róngyè)）和不同濃度的阿司匹林溶液(róngyè)（1mg/ml；10mg/ml；100mg/ml）；在注射福爾馬林溶液前30min提前腹腔注射空白對照（溶劑對照）待測的藥物；然后迅速將小鼠放回玻璃大燒杯中；第五十二頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)第五十三頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)在腹腔注射后30min，將小鼠取出，將小鼠裝入小紙筒或用手輕柔的抓住后，在其標記(biāojì)的后右腳掌的腳底中間皮膚下用微量進樣器注射20μl的福爾馬林溶液，迅速放回燒杯中；開始計時，并在注射后40min記錄小鼠的行為學(xué)反應(yīng)；一般福爾馬林會引起兩個時相的反應(yīng)：0－10min出現(xiàn)的第I相（早期相），此反應(yīng)主要是直接刺激C纖維所致；10－60min出現(xiàn)的第II相，一般認為有炎癥機制參與。近年來用于用于記錄方法有兩種：第五十四頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)第一種：記錄每分鐘內(nèi)出現(xiàn)各級反應(yīng)的秒數(shù)，并根據(jù)反應(yīng)的分級標準（分級標準：舔、咬或抖足為3分；提足2分；輕觸面但不負重，行走時跛行1分；正常負重，走動(zǒudòng)自如0分）來計算相應(yīng)的每分鐘的反應(yīng)分數(shù)，即各級反應(yīng)的秒數(shù)乘以相應(yīng)反應(yīng)的分數(shù)，以乘積之和為疼痛定量的指標（最大值為60秒×3分＝180）第二種：記錄不同時相舔、抖被注射足時間為疼痛指標。重復(fù)以上實驗操作，直至獲得所需的實驗動物只數(shù)。第五十五頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)第五十六頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)熱板測痛儀第五十七頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)光熱(ɡuānɡrè)測痛儀第五十八頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)三、內(nèi)源性痛覺調(diào)節(jié)(tiáojié)系統(tǒng)人們設(shè)想腦內(nèi)的阿片受體不可能專為外源性阿片堿類藥物而存在(cúnzài)，在體內(nèi)很可能存在(cúnzài)相應(yīng)的內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)與之結(jié)合參與疼痛的調(diào)節(jié)。第五十九頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)（一）內(nèi)源性阿片肽哺乳動物體內(nèi)天然產(chǎn)生的具有嗎啡或鴉片(yāpiàn)樣活性的物質(zhì)，在結(jié)構(gòu)上屬于肽類可以分為五大類。

強啡肽孤啡肽內(nèi)嗎啡肽β-內(nèi)啡肽腦啡肽內(nèi)阿片肽第六十頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)（二）阿片受體是典型的G蛋白耦聯(lián)受體,通過藥理學(xué)試驗可分為(fēnwéi)四大類．Opioidreceptorμreceptorδreceptorκreceptororphanreceptor第六十一頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)(三)內(nèi)阿片(āpiàn)肽和阿片(āpiàn)受體的發(fā)現(xiàn)1973年采用放射性配基結(jié)合實驗和藥理學(xué)手段發(fā)現(xiàn)阿片受體。1975年運用生物化學(xué)方法分離(fēnlí)和純化阿片受體的內(nèi)源性配基——內(nèi)源性阿片肽(腦啡肽，內(nèi)啡肽和強啡肽)，這兩個發(fā)現(xiàn)使人們對阿片類藥物作用的分子基礎(chǔ)有了深入的認識。第六十二頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)1992年采用分子生物學(xué)技術(shù)從NGlOS—15細胞上克隆出δ受體后，已相繼從不同種屬的動物上克隆出阿片(āpiàn)受體三個亞型μ、κ和δ受體。1994年從人和大鼠cDNA文庫中篩選到另一類阿片受體，其藥理性質(zhì)明顯不同于己發(fā)現(xiàn)的阿片受體，稱之為阿片受體家族中的“孤兒受體”(orphanreceptor)。第六十三頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)1995年從猴及大鼠中分離到孤兒受體的內(nèi)源性配基，稱為孤啡肽(nociceptin)1996年-1998年阿片受體（μ、κ和δ）基因敲出小鼠制備成功，這將對三類(sānlèi)阿片受體在嗎啡類鎮(zhèn)痛及成癮機理的進一步了解有十分重要的作用。第六十四頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)1997年的又一重要新發(fā)現(xiàn)：即從牛前腦皮層中分離(fēnlí)純化得到兩個高選擇性μ受體的內(nèi)源性配體，叫endomorphine-1（內(nèi)源性嗎啡-1）及endomorphine-2（內(nèi)源性嗎啡-2）。第六十五頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)(四)內(nèi)源性阿片肽家族各成員(chéngyuán)概述腦啡肽(enkephalin)：包括蛋氨酸腦啡肽和亮啡肽，對δ受體的選擇性較強，被認為是δ受體的內(nèi)源性配體。前腦啡肽原基因編碼263或267個氨基酸殘基的前腦啡肽原，經(jīng)酶切加工出蛋氨酸腦啡肽和亮啡肽。腦啡肽主要由腦內(nèi)和下行痛覺調(diào)制神經(jīng)元以及腎上腺髓質(zhì)表達，在中樞腦啡肽是重要的鎮(zhèn)痛介質(zhì)，許多抑制性遞質(zhì)通過腦啡肽介導(dǎo)的阿片(āpiàn)受體作用發(fā)揮鎮(zhèn)痛效應(yīng)。腦啡肽在疼痛信號弱時釋放不增加，而在強烈刺激時才有大量的釋放。第六十六頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)亮腦啡肽序列(xùliè)和三維結(jié)構(gòu)Tyr-G1y-G1y-Phe-Leu-OH第六十七頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)甲腦啡肽序列(xùliè)和三維結(jié)構(gòu)Tyr-G1y-G1y-Phe-Met-OH第六十八頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)強啡肽(dynorphin)：強啡肽由前強啡肽原基因編碼，經(jīng)酶切加工出強啡肽A和強啡肽B，腦內(nèi)和脊髓神經(jīng)元都可分泌。強啡肽是κ受體的特異性配體。在脊髓水平，強啡肽的作用存在比較復(fù)雜。生理水平的強啡肽起鎮(zhèn)痛作用，同時它能維持其他阿片肽在脊髓的鎮(zhèn)痛效應(yīng)，而在脊髓損傷和坐骨神經(jīng)損傷時腦脊液中的強啡肽水平明顯升高，研究表明，強啡肽能通過NMDA受體誘導(dǎo)脊髓損傷。許多慢性疼痛動物或病人(bìngrén)腦脊液內(nèi)強啡肽水平并未減少，相反，隨著疼痛時間延長，強啡肽的水平越高。第六十九頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)強啡肽A序列(xùliè)和三維結(jié)構(gòu)圖Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Arg-Ile-Arg-Pro-Lys-Leu-Lys-Trp-Asp-Asn-Gln-OH第七十頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)強啡肽B序列(xùliè)和三維結(jié)構(gòu)圖Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Arg-Gln-Phe-Lys-Val-Val-Thr

第七十一頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)β-內(nèi)啡肽(beta-endorphin)：β-內(nèi)啡肽由POMC基因編碼的β趨脂素經(jīng)蛋白水解酶PC2水解產(chǎn)生，對u和δ受體均有較強的親和力。在脊髓蛛網(wǎng)膜下腔內(nèi)注射β-內(nèi)啡肽，除了可以直接作用于μ受體外，還可以通過結(jié)合脊髓后角受體促進腦啡肽分泌而產(chǎn)生強鎮(zhèn)痛效應(yīng)。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)只有(zhǐyǒu)腺垂體和下丘腦的神經(jīng)分泌細胞分泌通路細胞器中含有PC2水解酶能夠產(chǎn)生成熟的β-內(nèi)啡肽，而感覺神經(jīng)元和中間神經(jīng)元不能分泌β-內(nèi)啡肽。第七十二頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)β-內(nèi)啡肽序列(xùliè)和三維結(jié)構(gòu)圖Tyr-G1y-G1y-Phe-Met-Thr-Ser-G1u-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-Phe-Lys-Asn-A1a-Ile-I1e-Lys-Asn-Val-His-Lys-Lys-G1y-Gln-OH第七十三頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)孤啡肽(nociceptin，OFQ)：孤啡肽的氨基酸序列結(jié)構(gòu)與強啡肽比較相似，都是17肽，但它對δ、μ、κ受體的親和力很弱，對孤兒(ORL1)受體親和力強。孤啡肽可引起痛敏，腦室內(nèi)微量注射可導(dǎo)致(dǎozhì)大鼠痛閾降低基因，并且可以抑制嗎啡的抗傷害鎮(zhèn)痛效應(yīng)。

第七十四頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)孤啡肽序列(xùliè)和三維結(jié)構(gòu)圖Phe-G1y-G1y-Phe-Thr-G1y-Ala-Arg-Lys-Ser-A1a-Arg-Lys-Leu-A1a-Asn-G1n-OH第七十五頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)內(nèi)嗎啡肽(endomorphin)：一種四肽氨基酸，對μ受體具有高選擇性、強效的親和力，它的氨基酸序列是Tyr-Pro-Trp-Phe-NH２，主要分布于腦內(nèi)。根據(jù)EM-1特異抗體又找到結(jié)構(gòu)類似的EM-2，主要分布于腦內(nèi)和脊髓內(nèi)，與前者的區(qū)別在于(zàiyú)第三位上的氨基酸改為Phe，它對μ受體的親和力比EM-1更高。第七十六頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)腦和脊髓蛛網(wǎng)膜下腔內(nèi)注射(zhùshè)內(nèi)嗎啡肽或類似物，可產(chǎn)生明顯的鎮(zhèn)痛效應(yīng)，對于炎性疼痛的治療作用更為明顯，對于神經(jīng)痛EM也能有效鎮(zhèn)痛，同時對嗎啡耐受的大鼠神經(jīng)痛仍具有效果。內(nèi)嗎啡肽是一個比較合適的治療頑固性疼痛的分子。但是內(nèi)嗎啡肽成癮還是不能解決的一個問題。

第七十七頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)EM-1:Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2EM-2:Tyr-Pro-Phe-Phe-NH2第七十八頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)內(nèi)源性阿片肽的前體前阿黑皮素(POMC)是β內(nèi)啡肽的前體。前腦啡肽(或稱前腦啡肽A)是甲硫腦啡肽和亮腦啡肽的前體。前強啡肽(或稱前腦啡肽Ｂ)是各類強啡肽的前體。

阿片肽是其前體經(jīng)過—系列(xìliè)酶解后產(chǎn)生的。第七十九頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)(五)阿片(āpiàn)受體研究μ受體由398個氨基酸組成，具有G蛋白相關(guān)受體結(jié)構(gòu)特征endomorphine-1（內(nèi)源性嗎啡-1）及endomorphine-2（內(nèi)源性嗎啡-2）是其高選擇性的內(nèi)源性配體。研究表明，μ受體主要介導(dǎo)嗎啡鎮(zhèn)痛、位置(wèizhi)偏愛和身體依賴性作用.第八十頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)δ受體有372個氨基酸組成，該受體有七個疏水性(shuǐxìng)的跨膜區(qū)域。第八十一頁，共九十二頁。痛覺研究與阿片系統(tǒng)2005年8月25日在國際著名學(xué)術(shù)期刊《細胞》發(fā)表了中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院神經(jīng)科學(xué)研究所張旭博士指導(dǎo)的感覺系統(tǒng)研究組及其合作者完成的研究論文，他們發(fā)現(xiàn)在傳導(dǎo)痛覺的初級感覺神經(jīng)元中新合成的P物質(zhì)的前體分子與Delta阿片受體發(fā)生直接相互作用，并將該阿片受體帶入可調(diào)控的分泌途徑中，使Delta阿片受體在它的激動劑刺激下，或者在痛覺刺激下，能夠出現(xiàn)在這些感覺神經(jīng)元的表面，與相應(yīng)受體激動劑結(jié)合，產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用。他們還觀察到?jīng)]有P物質(zhì)基因的小鼠，D