齊魯醫(yī)學(xué)口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離

培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離

取材部位準(zhǔn)確嚴(yán)格無(wú)菌操作，避免微生物和化學(xué)污染盡快培養(yǎng)，24h以?xún)?nèi)減小損傷，使用銳器，避免撕扯制備標(biāo)本，以便鑒定口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁(yè)!體外細(xì)胞的純化人工純化：酶消化法、機(jī)械刮除法、反復(fù)貼壁法、克隆法、培養(yǎng)基限定法、流式細(xì)胞儀分離法等自然純化口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁(yè)!細(xì)胞凍存要點(diǎn)：冷凍過(guò)程要緩慢凍存細(xì)胞必須處在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞復(fù)蘇要點(diǎn)：快速解凍解凍后的細(xì)胞應(yīng)離心去除冷凍保護(hù)劑后再接種到培養(yǎng)基中口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁(yè)!細(xì)胞培養(yǎng)的污染、檢測(cè)與控制微生物污染：細(xì)菌，真菌，支原體等污染污染的途徑：空氣、器材、操作、試劑、組織標(biāo)本微生物污染的檢測(cè)微生物污染的控制：抗生素除菌法；加溫處理口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁(yè)!第二節(jié)口腔醫(yī)學(xué)中相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及其特點(diǎn)口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁(yè)!牙髓細(xì)胞（Dentalpulpcells

）培養(yǎng)方法：組織塊法；酶消化法細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)免疫組織化學(xué)染色體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖特點(diǎn)功能特點(diǎn)口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁(yè)!牙髓細(xì)胞體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖（Cellproliferationinvitro）

生長(zhǎng)增殖較快

傳代期較短，15-20代(2-4M)

可復(fù)層生長(zhǎng)口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁(yè)!牙髓細(xì)胞培養(yǎng)方法：組織塊培養(yǎng)法；酶消化法細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)：成纖維細(xì)胞型（與牙周膜細(xì)胞類(lèi)似）免疫組織化學(xué)染色：波形絲蛋白（+）；角蛋白（-）體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖特點(diǎn)功能特點(diǎn)口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁(yè)!

免疫組織化學(xué)染色波形絲蛋白染色陽(yáng)性角蛋白染色陰性口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁(yè)!功能特點(diǎn)分泌功能：膠原、非膠原蛋白、堿性磷酸酶。礦化功能收縮功能再生功能根面吸附等口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁(yè)!細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)腺泡上皮細(xì)胞：體外培養(yǎng)的腺泡細(xì)胞多呈“鋪路石”樣排列導(dǎo)管上皮細(xì)胞：導(dǎo)管上皮細(xì)胞呈多邊形肌上皮細(xì)胞：

肌上皮細(xì)胞呈梭形或星形唾液腺細(xì)胞口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁(yè)!A小型豬腮腺上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)（×10）B小型豬腮腺上皮細(xì)胞alpha淀粉酶免疫組化染色（×10）腺泡細(xì)胞上皮細(xì)胞口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁(yè)!三、口腔黏膜細(xì)胞口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁(yè)!兔口腔黏膜上皮細(xì)胞ABA無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)條件下（×10）B滋養(yǎng)細(xì)胞層培養(yǎng)條件下（×4）口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁(yè)!破骨細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)：多核巨細(xì)胞，體積大組織化學(xué)染色：破骨細(xì)胞單克隆抗體呈陽(yáng)性反應(yīng)；降鈣素反應(yīng)呈藍(lán)紫色；抗酒石酸磷酸酶反應(yīng)呈棕褐色功能：骨吸收功能影響因素：促進(jìn)：破骨細(xì)胞激活因子、甲狀旁腺素抑制：γ-干擾素、降鈣素口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁(yè)!五、口腔腫瘤細(xì)胞口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁(yè)!細(xì)胞培養(yǎng)常用方法：組織塊培養(yǎng)法酶消化法口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁(yè)!一、牙齒相關(guān)細(xì)胞口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁(yè)!牙髓細(xì)胞波形絲蛋白染色(+)未分化間充質(zhì)細(xì)胞成纖維細(xì)胞口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁(yè)!牙髓細(xì)胞功能特點(diǎn)

堿性磷酸酶（alkalinephosphatase,ALP)活性

礦化現(xiàn)象(VonKossa)

對(duì)細(xì)胞因子的反應(yīng)

對(duì)蓋髓劑的反應(yīng)口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁(yè)!牙周膜細(xì)胞（periodontalligamentcells）

培養(yǎng)方法：組織塊法；酶消化法細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)免疫組織化學(xué)染色體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖特點(diǎn)功能特點(diǎn)牙周膜細(xì)胞增殖分化的影響因素原代人牙周膜成纖維細(xì)胞傳代人牙周膜成纖維細(xì)胞口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁(yè)!牙周膜細(xì)胞

成纖維樣細(xì)胞，培養(yǎng)成功率高

細(xì)胞增殖快

體外存活時(shí)間長(zhǎng)(4-12M)口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁(yè)!二、唾液腺細(xì)胞口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁(yè)!導(dǎo)管上皮細(xì)胞HSG細(xì)胞系HSG細(xì)胞系口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁(yè)!免疫組織化學(xué)染色腺泡上皮細(xì)胞：角蛋白、淀粉酶、對(duì)氨基水楊酸、導(dǎo)管上皮膜、前角蛋白、單克隆角蛋白、分泌成分陽(yáng)性反應(yīng)導(dǎo)管上皮細(xì)胞：角蛋白、上皮膜蛋白、磷酸酐酶抗體染色陽(yáng)性反應(yīng)肌上皮細(xì)胞：肌動(dòng)蛋白、S-100蛋白、肌凝蛋白抗體染色陽(yáng)性反應(yīng)口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁(yè)!口腔黏膜細(xì)胞培養(yǎng)方法：組織塊法和酶消化法形態(tài)特點(diǎn)：卵圓形、多邊形，呈“鋪路石”樣單層排列免疫組織化學(xué)染色：波形絲蛋白陰性，角蛋白陽(yáng)性功能：分泌大量的膠原蛋白與非膠原蛋白口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁(yè)!四、頜骨相關(guān)的硬組織細(xì)胞口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁(yè)!成骨細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)：不同培養(yǎng)方法所獲得的成骨細(xì)胞形態(tài)各有差異免疫組織化學(xué)染色特點(diǎn)：BGP、Ⅰ型膠原、堿性磷酸酶活性功能：成骨作用

調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞骨吸收作用口腔培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離共29頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁(yè)!口腔鱗癌細(xì)胞細(xì)胞系來(lái)源：鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本原代及傳代培養(yǎng)生物學(xué)特性：

多角形上皮樣細(xì)胞