動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)和方法優(yōu)選ppt資料

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本(jīběn)技術(shù)和方法第一頁，共113頁。主要(zhǔyào)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抓取與固定三、年齡的大致判斷四、性別、發(fā)情、與妊娠鑒定五、編號(hào)和標(biāo)記六、分組七、去毛八、給藥途徑與方法九、采血方法十、其他體液(tǐyè)采集十一、麻醉方法十二、處死方法十三、動(dòng)物病理檢查第二頁，共113頁。一、實(shí)驗(yàn)(shíyàn)前準(zhǔn)備理論準(zhǔn)備：了解動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)制定(zhìdìng)研究計(jì)劃和方案查閱關(guān)于實(shí)驗(yàn)方法的參考文獻(xiàn)條件準(zhǔn)備：儀器、器械、藥品運(yùn)輸動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和飼養(yǎng)場所第三頁，共113頁。二、實(shí)驗(yàn)(shíyàn)動(dòng)物抓取和固定（一）小鼠第四頁，共113頁。第五頁，共113頁。小鼠固定(gùdìng)器固定(gùdìng)第六頁，共113頁。（二）大鼠第七頁，共113頁。大鼠固定(gùdìng)盒固定(gùdìng)第八頁，共113頁。（三）豚鼠(túnshǔ)第九頁，共113頁。第十頁，共113頁。（四）家兔(jiātù)第十一頁，共113頁。第十二頁，共113頁。兔子(tùzi)固定器固定第十三頁，共113頁。狗鉗狗的抓取固定(gùdìng)（五）犬第十四頁，共113頁。犬嘴固定(gùdìng)方法第十五頁，共113頁。貓的抓取犬固定(gùdìng)第十六頁，共113頁。（六）猴抓取與保定(bǎodìnɡ)第十七頁，共113頁。猴徒手(túshǒu)固定第十八頁，共113頁。三、年齡的大致(dàzhì)判斷（一）大、小鼠1、根據(jù)(gēnjù)形態(tài)鑒定日齡（大、小鼠情況基本一樣）日齡/d外觀形態(tài)特征1仔鼠裸體鮮紅3耳殼露出表皮4臍帶瘢痕脫落5能翻身8能爬行第十九頁，共113頁。日齡/d外觀形態(tài)特征10能聽到聲音9～11全身被白毛，門齒長出13～15眼皮張開，能跳躍，能抓取東西18以后能自行采食，獨(dú)立生活第二十頁，共113頁。第二十一頁，共113頁。第二十二頁，共113頁。第二十三頁，共113頁。第二十四頁，共113頁。第二十五頁，共113頁。第二十六頁，共113頁。2.根據(jù)體重鑒定(jiàndìng)日齡⑴小鼠日齡與體重的對(duì)應(yīng)日齡/d初生

51015202530體重/g

1.84.06.011.015.021.024.0第二十七頁，共113頁。⑵大鼠日齡與體重(tǐzhòng)的對(duì)應(yīng)日齡/d初生10203040體重/g6～717～2535～5055～90100～150日齡/d

50607080體重/g150～210170～240210～270240～320第二十八頁，共113頁。（二）豚鼠一般老年豚鼠牙齒和趾爪長，被毛稀疏無光澤，眼神呆滯，行動(dòng)遲緩。而年輕豚鼠牙齒短白，爪短軟，眼睛圓亮，行動(dòng)敏捷，被毛有光澤，且緊貼身體。同樣，也可根據(jù)體重來推斷(tuīduàn)大致年齡。同日齡豚鼠，雌性體重略高于雄性。與大鼠一樣，其體重受多種因素的制約。實(shí)驗(yàn)對(duì)年齡要求比較嚴(yán)格時(shí)，必須由卡片記錄提供準(zhǔn)確年齡。日齡/d初生7203060體重/g60～80100～120150～200170～220240～300日齡/d

90120180體重/g330～400400～470520～600第二十九頁，共113頁。（三）家兔家兔的門齒和爪隨年齡增長而增長，是年齡鑒別的重要標(biāo)志。青年兔門齒潔白，短小，排列整齊；老年兔門齒暗黃，厚而長，排列不整齊，有時(shí)破損。白色家兔趾小基本呈紅色，尖端呈白色。1歲家兔紅色與白色長度相等；1歲以下，紅多于白；1歲以上，白多于紅。還可根據(jù)趾爪的長度與彎曲度來區(qū)別。青年兔趾爪較短，直平，隱在腳毛中，隨年齡的增長，趾爪露出于腳毛之外，而且爪尖鉤曲。另外(lìnɡwài)，家兔皮薄而緊，眼神明亮，行動(dòng)活潑的為青年兔；皮厚而松，眼神頹廢，行動(dòng)遲緩的為老年兔。第三十頁，共113頁。（四）犬 犬的年齡主要以牙齒的生長情況、磨損程度、外形顏色等情況綜合判定。仔犬在出生后十幾天即開始生出乳齒，2個(gè)月以后開始由門齒→犬齒→臼齒順序逐漸更換為恒齒，8～l0個(gè)月齒換齊。但犬齒需要1歲半以后才能長堅(jiān)實(shí)。飼養(yǎng)場飼養(yǎng)的品種犬，可以(kěyǐ)根據(jù)記錄，明確了解年齡，而收購的雜種犬就無法知道確切年齡。實(shí)際中，可根據(jù)犬齒更換和磨損情況，估計(jì)犬的年齡。第三十一頁，共113頁。年齡犬齒更換和磨損情況2個(gè)月以下僅有乳齒(白、細(xì)、尖)2～4個(gè)月更換門齒4～6個(gè)月更換犬齒(白，牙尖圓鈍)6～10個(gè)月更換臼齒1歲牙長齊，潔白光亮。門齒有尖突2歲下門齒尖突部分磨乎3歲上、下門齒尖突大部分磨平4～5歲上、下門齒開始磨損呈微斜面，并發(fā)黃6～8歲門齒磨成齒根，犬齒發(fā)黃、磨損9～10歲唇部、胡須發(fā)白10歲以上門齒磨損，犬齒不齊全，牙根黃，唇邊胡須全白第三十二頁，共113頁。四、性別、發(fā)情(fāqíng)、與妊娠鑒定（一）大、小鼠的性別(xìngbié)鑒定第三十三頁，共113頁。初生兔仔如陰部孔洞扁圓而略大于肛門，且與肛門相向、距離較近的是母兔；孔洞呈圓形而略小于肛門，孔洞向前(xiànɡqián)而距肛門較遠(yuǎn)的是公兔。三月齡以上的兔子，只要看有無陰囊即可區(qū)別公母。（二）兔的性別(xìngbié)鑒定第三十四頁，共113頁。Female

Male

第三十五頁，共113頁。（三）大、小鼠發(fā)情(fāqíng)鑒定第三十六頁，共113頁。小鼠性周期陰道分泌物涂片(túpiàn)變化階段持續(xù)時(shí)間（h）涂片可見卵巢變化動(dòng)情前期9-18大量有核上皮細(xì)胞少量角化上皮細(xì)胞卵泡加速生長動(dòng)情期6-12滿視野角化上皮細(xì)胞，少量有核上皮細(xì)胞卵泡成熟、排卵動(dòng)情后期30-48角化上皮細(xì)胞及白細(xì)胞黃體生成動(dòng)情間期36-42大量白細(xì)胞及少量粘液黃體退化第三十七頁，共113頁。（四）妊娠(rènshēn)鑒定1、陰道栓法（大、小鼠、豚鼠）2、外部檢查法3、摸胎法4、陰道檢查法5、直腸檢查法6、超聲波檢查法7、孕酮(yùntónɡ)含量測定法第三十八頁，共113頁。陰道(yīndào)栓第三十九頁，共113頁。五、編號(hào)(biānhào)和標(biāo)記1、染色法：淺色(qiǎnsè)動(dòng)物3.5-5％苦味酸溶液（黃色）0.5%中性紅或堿性品紅溶液（紅色）煤焦油酒精溶液（黑色）龍膽紫溶液（紫色）第四十頁，共113頁。第四十一頁，共113頁。2、打耳孔(ěrkǒng)法：小型動(dòng)物第四十二頁，共113頁。3、剪趾法：小型(xiǎoxíng)動(dòng)物第四十三頁，共113頁。4、剪尾法：大、小鼠，僅限與兩組間區(qū)分(qūfēn)5、烙印法：刺號(hào)鉗，中、大型動(dòng)物6、針刺法：中、大型動(dòng)物7、號(hào)牌法：耳標(biāo)簽、項(xiàng)圈、腿圈，中、大型動(dòng)物8、剪毛法：大動(dòng)物9、籠子標(biāo)號(hào)第四十四頁，共113頁。六、分組隨機(jī)化分組：避免人為(rénwéi)影響例：將14只小鼠隨機(jī)分成兩組。①先將小鼠編為I～14號(hào)，②在隨機(jī)數(shù)字表上任點(diǎn)一數(shù)，按任意方向連續(xù)抄14個(gè)隨機(jī)數(shù)字。編排如下：第四十五頁，共113頁。動(dòng)物編號(hào)(biānhào)1234567891011121314隨機(jī)數(shù)字1622779439495443548217379323歸組BBABAABABBAAAA③奇數(shù)代表A織，偶數(shù)代表B組④A組：356811121314B組：1247910⑤調(diào)整分組：接剛才隨機(jī)數(shù)字23繼續(xù)抄表得隨機(jī)數(shù)字78，用78除以8（因?yàn)樾枰袮組的8個(gè)數(shù)字調(diào)整掉一個(gè)），得余數(shù)6，所以把A組的第6個(gè)動(dòng)物，即12號(hào)動(dòng)物調(diào)整到B組第四十六頁，共113頁。⑥最終(zuìzhōnɡ)分組A組：3568111314B組：124791012第四十七頁，共113頁。舌下靜脈(jìngmài)、1、根據(jù)(gēnjù)形態(tài)鑒定日齡（大、小鼠情況基本一樣）5、烙印法：刺號(hào)鉗，中、大型動(dòng)物因此，為防止麻醉劑過量，注射速度一定不要過快，嚴(yán)密觀察動(dòng)物狀況，若需追加(zhuījiā)麻醉劑，一次不宜超過總量的1/5。與大鼠一樣，其體重受多種因素的制約。2、急救措施(cuòshī)猴的后肢(hòuzhī)皮下靜脈注射特點(diǎn)(tèdiǎn)：安全范圍大，肌肉完全松弛，對(duì)肝腎毒性小，麻醉誘導(dǎo)期和蘇醒期較長。皮厚而松，眼神頹廢，行動(dòng)遲緩的為老年兔。第三十三頁，共113頁。6、針刺法：中、大型動(dòng)物第八十三頁，共113頁。3、犬、豬、猴等大動(dòng)物可在麻醉前給予(jǐyǔ)一些藥物以減少動(dòng)物緊張，減少支氣管分泌。第二十五頁，共113頁。老年兔門齒暗黃，厚而長，排列不整齊，有時(shí)破損。④A組：356811121314例：12只大鼠隨機(jī)分為3組①大鼠編號(hào)1~12②在隨機(jī)數(shù)字表上任點(diǎn)一數(shù)，按任意方向連續(xù)(liánxù)抄12個(gè)隨機(jī)數(shù)字。③每個(gè)數(shù)分別用3除，記錄余數(shù)，④根據(jù)余數(shù)分組大鼠編號(hào)：1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12隨機(jī)數(shù)字：08，27，01，50，15，29，39，39，43，79，69，10余數(shù)：2，0，1，2，0，2，0，0，1，1，0，1組別：B，C，A，B，C，B，C，C，A，A，C，A第四十八頁，共113頁。⑤A：3，9，10，12B；1，4，6C：2，5，7，8，11⑥調(diào)整分組：接剛才隨機(jī)數(shù)字10繼續(xù)抄表得隨機(jī)數(shù)字61，用61除以5（因?yàn)樾枰?xūyào)把C組的5個(gè)數(shù)字調(diào)整掉一個(gè)），得余數(shù)1，所以把C組的第1個(gè)動(dòng)物，即2號(hào)動(dòng)物調(diào)整到B組。⑦最終分組A：3，9，10，12B；1，2，4，6C：5，7，8，11第四十九頁，共113頁。七、去毛1、剪毛：彎頭剪毛剪。2、拔毛：大小鼠尾靜脈、家兔耳緣靜脈注射(jìnɡm(xù)àizhùshè)。3、剃毛：將剃毛部位先用剪刀粗剪一遍，蘸溫肥皂水潤濕，用剃刀順著被毛方向剃毛，用電動(dòng)剃毛推剪，則逆被毛向剃毛。第五十頁，共113頁。4、化學(xué)脫毛(tuōmáo)：常用脫毛(tuōmáo)劑①8%硫化鈉水溶液②硫化鈉3份，洗衣粉1份、淀粉7份，加水調(diào)成糊狀③硫化鋇50克，氧化鋅25克，淀粉25克，加水100毫升調(diào)成糊狀④硫化鈉10克，生石灰15克，加水到100毫升，適合犬和其他大動(dòng)物。第五十一頁，共113頁。八、給藥途徑(tújìng)與方法（一）自動(dòng)口服(kǒufú)：加入飼料或飲水（二）投喂藥片：掰開口，放到舌根部第五十二頁，共113頁。（三）灌胃（i.g)1、小鼠、大鼠、豚鼠灌胃時(shí)將灌胃針按在注射器上，吸入藥液。左手抓住鼠背部及頸部皮膚(pífū)將動(dòng)物固定，右手持注射器，將灌胃針插入動(dòng)物口中，沿咽后壁徐徐插入食道。動(dòng)物應(yīng)固定成垂直體位，針插入時(shí)應(yīng)無阻力。若感到阻力或動(dòng)物掙扎時(shí)，應(yīng)立即停止進(jìn)針或?qū)⑨槹纬?，以兔損傷或穿破食道以及誤入氣管。一般當(dāng)灌胃針插入小鼠3～4cm，大鼠或豚鼠4～6cm后可將藥物注入。常用的灌胃量小鼠為0.2～1ml，大鼠1～4ml，豚鼠為1～5ml。第五十三頁，共113頁。2、狗、兔、貓、猴

灌胃時(shí)，先將動(dòng)物固定，再將特制的擴(kuò)口器放入動(dòng)物口中，擴(kuò)口器之寬度可視動(dòng)物口腔大小而定，如狗的擴(kuò)口器可用木料(mùliào)制成長方形，長約10～15cm，粗細(xì)應(yīng)適合狗嘴，約2～3cm，中間粘一小孔，孔的直途為5～10cm。灌胃時(shí)將擴(kuò)口器放于上述動(dòng)物上下門牙之后，并用繩將它固定于嘴部，將帶有彈性的橡皮導(dǎo)管（如導(dǎo)尿管），經(jīng)擴(kuò)口器上的小圓孔插入，沿咽后壁而進(jìn)入食道，此時(shí)應(yīng)檢查導(dǎo)管是否正確插入食道，可將導(dǎo)管外口置于一盛水的燒杯中，如不發(fā)生氣泡，即認(rèn)為此導(dǎo)管是在食道中，未誤入氣管，即可將藥液灌入。灌胃管插入長度狗為20cm，兔子為12-15cm。第五十四頁，共113頁。動(dòng)物(dòngwù)最大灌胃量第五十五頁，共113頁。第五十六頁，共113頁。（四）直腸給藥（五）呼吸道給藥（六）滴鼻（七）點(diǎn)眼（八）經(jīng)皮膚給藥：常用于檢測藥物(yàowù)、毒物、化妝品等的透皮吸收、局部作用、至敏作用等。家兔和豚鼠選擇脊柱兩側(cè)皮膚，大小鼠常采取浸尾方式。（九）皮內(nèi)注射(i.d)：一般用于接種或過敏實(shí)驗(yàn)。將藥液注射在真皮和表皮之間。皮內(nèi)注射時(shí)需將注射的局部脫去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮膚并使之繃緊，在兩指之間，用注射器連4(1/2)號(hào)細(xì)針頭，緊貼皮膚表層刺入皮內(nèi)，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射藥液，此時(shí)可見皮膚表面鼓起一白色小皮丘。第五十七頁，共113頁。（十）皮下注射(s.c)：注射時(shí)以左手拇指和食指提起皮膚，將連有5（1/2）號(hào)針頭的注射器刺入皮下。皮下注射部位(bùwèi)一般狗、貓多在大腿外側(cè)，豚鼠在后大腿的內(nèi)側(cè)或小腹部；大白鼠可在側(cè)下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。（十一）肌肉注射(i.m)：股部肌肉第五十八頁，共113頁。（十二）腹腔注射(i.p)：用大、小白鼠做實(shí)驗(yàn)時(shí)，以左手抓住動(dòng)物，使腹部向上(xiàngshàng)，右手將注射針頭于左（或右）下腹部刺入皮下，使針頭向前推

0.5～1.0cm，再以45度角穿過腹肌，固定針頭，緩緩注入藥液，為避免傷及內(nèi)臟，可使動(dòng)物處于頭低位，使內(nèi)臟移向上(xiàngshàng)腹。若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為家兔，進(jìn)針部位為下腹部的腹白線離開1cm處。第五十九頁，共113頁。第六十頁，共113頁。（十三）靜脈注射(jìnɡm(xù)àizhùshè)(i.v)：1、小鼠：尾靜脈(jìngmài)2、大鼠：尾靜脈(jìngmài)、陰莖靜脈(jìngmài)、舌下靜脈(jìngmài)、淺背側(cè)跖靜脈(jìngmài)第六十一頁，共113頁。大小鼠有上、左、右3根尾靜脈(jìngmài)，成品字型小鼠尾靜脈注射(jìnɡm(xù)àizhùshè)第六十二頁，共113頁。第六十三頁，共113頁。大鼠陰莖(yīnjīng)靜脈注射大鼠舌下靜脈注射(jìnɡm(xù)àizhùshè)大鼠淺背側(cè)跖靜脈注射(jìnɡm(xù)àizhùshè)第六十四頁，共113頁。3、豚鼠：淺背側(cè)跖靜脈、耳靜脈注射4、家兔(jiātù)：耳靜脈注射5、豬：耳緣靜脈6、猴：前肢橈靜脈、后肢隱靜脈注射第六十五頁，共113頁。豬耳緣靜脈注射(jìnɡm(xù)àizhùshè)第六十六頁，共113頁。7、貓、狗：前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)小隱(xiǎoyǐn)靜脈注射第六十七頁，共113頁。狗前肢(qiánzhī)內(nèi)側(cè)頭靜脈第六十八頁，共113頁。狗后肢外側(cè)小隱(xiǎoyǐn)靜脈第六十九頁，共113頁。猴的后肢(hòuzhī)皮下靜脈注射第七十頁，共113頁。（十四）腦腔注射：1、小鼠小指夾鼠尾，拇指和是指置小鼠頭兩側(cè)固定，中指和無名指壓住鼠身，在注射處消毒后，右手持注射器，以食指固定針芯，垂直(chuízhí)刺入針頭深度約5～7mm。2、兔將兔用固定器固定好，剃去頭頂?shù)谋幻?，左手將頭皮繃緊，消毒后，右手持錐子，自頭頂正中稍偏一側(cè)部位，錐穿頭骨，即換以左手固定錐子，右手持注射器，使針頭沿錐尖刺入，慢慢拔出錐子，即刻將針頭刺入約10～20mm，即可推液。第七十一頁，共113頁。（十五）關(guān)節(jié)腔注射(zhùshè)：（十六）椎管內(nèi)注射(zhùshè)：注射(zhùshè)入蛛網(wǎng)膜下腔（十七）淋巴囊內(nèi)注射(zhùshè)：蛙和蟾蜍第七十二頁，共113頁。（十八）小腦(xiǎonǎo)延髓池注射：第七十三頁，共113頁。幾種動(dòng)物(dòngwù)不同給藥途徑的常用注射量（毫升）注射途徑小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.2～1.01～32～55～105～15肌肉0.1～0.20.2～0.50.2～0.50.5～12～5靜脈0.2～0.51～21～53～105～15皮下0.1～0.50.5～10.5～21～33～10第七十四頁，共113頁。九、采血方法(fāngfǎ)（一）大、小鼠：1、眶靜脈叢（竇）：少量多次采大小鼠血。小鼠0.2～0.3ml，大鼠0.4～0.6ml2、摘眼球：用于一次大量采小鼠血，可得到(dédào)4～5％體重的血量3、尾靜脈：用于少量多次采大小鼠血第七十五頁，共113頁。第七十六頁，共113頁。尾靜脈(jìngmài)采血第七十七頁，共113頁。4、剪頭：用于一次性大量采小鼠血，可得到0.5～1.0ml的血量5、大血管：包括頸動(dòng)脈（靜脈），股動(dòng)脈（靜脈），腋下動(dòng)脈（靜脈），腹主動(dòng)脈，此方法不常用于小鼠采血，而多用于大鼠一次性大量采血。可得5ml左右(zuǒyòu)血量。6、心臟采血：小鼠少用，可用于大鼠一次性（開胸）或多次采血（不開胸）。第七十八頁，共113頁。心臟(xīnzàng)采血第七十九頁，共113頁。（二）家兔：1、耳緣靜脈(jìngmài)：中等血量的采集，可反復(fù)采血，每次5～10ml。2、耳中央動(dòng)脈：可反復(fù)采血，每次10～15ml。第八十頁，共113頁。3、心臟采血：可用于一次性（開胸）或多次采血（不開胸）。一次性開胸采血可得到80～100ml血量4、頸動(dòng)靜脈采血：用于一次性采血，需要(xūyào)手術(shù)，可得血量80～10ml。第八十一頁，共113頁。（三）豚鼠：1、心臟采血：可用于一次性（開胸）或多次采血（不開胸）。一次性開胸采血可得到(dédào)5～10ml血量。2、背跖靜脈采血：用于少量反復(fù)采血。3、耳緣剪口采血第八十二頁，共113頁。（四）犬貓：和靜脈注射部位相同，前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢(hòuzhī)外側(cè)小隱靜脈。也可頸靜脈（動(dòng)脈）或心臟采血。第八十三頁，共113頁。（五）豬：前腔靜脈(jìngmài)或耳大靜脈(jìngmài)采血（六）羊：頸靜脈(jìngmài)采血（七）猴：前肢頭靜脈(jìngmài)、后肢皮下靜脈(jìngmài)或耳緣靜脈(jìngmài)等。（八）禽類：翼下靜脈(jìngmài)第八十四頁，共113頁。仔豬(zǎizhū)前腔靜脈采血第八十五頁，共113頁。采血注意事項(xiàng)（一）采血場所有充足的光線；室溫夏季最好保持在25～28℃，冬季，15～20℃為宜；（二）采血用具有(jùyǒu)采用部位一般需要進(jìn)行消毒；（三）采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；（四）若需抗凝全血，在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑。（五）注意不同動(dòng)物的采血量采血。第八十六頁，共113頁。部位

動(dòng)物種類ａ．尾靜脈大鼠、小鼠ｂ．耳靜脈兔、狗、貓、豬、山羊、綿羊ｃ．眼底靜脈叢兔、大鼠、小鼠

d．舌下靜脈兔

e．腹壁靜脈青蛙、蟾蜍

f．冠、腳蹼皮下靜脈雞、鴨、鵝１、取少量(shǎoliàng)血第八十七頁，共113頁。２、取中量血部位

動(dòng)物種類ａ．后肢外側(cè)皮下小隱靜脈狗、猴、貓ｂ．前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈狗、猴、貓ｃ．耳中央動(dòng)脈兔ｄ．頸靜脈狗、貓、兔ｅ．心臟豚鼠、大鼠、小鼠ｆ．?dāng)囝^大鼠、小鼠ｇ．翼下靜脈雞、鴨、鴿、鵝ｈ．頸動(dòng)脈雞、鴨、鴿、鵝第八十八頁，共113頁。３、取大量(dàliàng)血部位

動(dòng)物種類ａ．股動(dòng)脈、頸動(dòng)脈狗、猴、貓、兔ｂ．心臟狗、猴、貓、兔ｃ．頸靜脈馬、牛、山羊、綿羊ｄ．摘眼球大鼠、小鼠第八十九頁，共113頁。4、最大安全(ānquán)采血量與最小致死采血量動(dòng)物種類最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510兔1040狼狗100500獵狗50200猴1560第九十頁，共113頁。常用抗凝劑：1、肝素：抑制凝血酶活力(huólì)，阻止血小板凝集。純品肝素1mg＝125U，10U~20U抗1ml血凝集，但通常應(yīng)用2~3倍劑量。用法：可配成1%肝素溶液，用時(shí)取0.1ml于試管內(nèi)，100℃烘干，每管可抗凝5~10ml血?；蛴?%肝素溶液濕潤采血注射器。肝素可改變蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，當(dāng)用鹽析法分離蛋白作分類測定時(shí)，不可用肝素抗凝。第九十一頁，共113頁。2、枸櫞酸鈉：使凝血必需的鈣離子失活。常用(chánɡyònɡ)3~5%水溶液，堿性較強(qiáng)。3、草酸鹽合劑：草酸銨1.2g，草酸鉀0.8g，福爾馬林1.0ml，加蒸餾水至100ml。使凝血必需的鈣離子失活。每毫升血加草酸鹽合劑0.1ml。4、氟化鈉：每毫升血加6mg。第九十二頁，共113頁。十、其他體液(tǐyè)采集1、胸水、腹水采集：穿刺2、消化液采集：唾液，胃液，胰液，膽汁3、精液采集：中、大動(dòng)物用假陰道，小動(dòng)物穿刺附睪來采集精液。4、腦脊液采集：手術(shù)(shǒushù)或小腦延髓池抽取5、骨髓采集：大動(dòng)物活體穿刺，小動(dòng)物處死后取股骨或胸骨骨髓。第九十三頁，共113頁。6、尿液采集(cǎijí)：代謝籠收集導(dǎo)尿管采集(cǎijí)膀胱穿刺壓迫排尿第九十四頁，共113頁。十一(Shí－Yī)、麻醉方法（一）麻醉方法：1、全麻吸入麻醉，靜脈注射、腹腔注射。2、局麻浸潤麻醉。根據(jù)手術(shù)，按皮下、筋膜、肌肉(jīròu)、腹膜、骨膜等順序逐步深入注射到術(shù)野周圍。第九十五頁，共113頁。第九十六頁，共113頁。（二）麻醉前準(zhǔn)備：1、禁食8~12h，防止嘔吐，可飲水。2、根據(jù)實(shí)驗(yàn)部位和種類，給動(dòng)物脫毛。3、犬、豬、猴等大動(dòng)物可在麻醉前給予(jǐyǔ)一些藥物以減少動(dòng)物緊張，減少支氣管分泌。第九十七頁，共113頁。（1）阿托品：減少支氣管和唾液腺分泌，防止氣管阻塞。副作用(zuòyòng)：加快心率。用量：肌肉或皮下注射0.04mg/kg（2）安定：產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用(zuòyòng)，加強(qiáng)麻醉效果，使骨骼肌松弛。用量：2.5~5mg/kg（3）嗎啡：產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用(zuòyòng)。副作用(zuòyòng)：抑制呼吸中樞。用量：皮下注射1~2mg/kg，肌肉注射10~20mg/kg。第九十八頁，共113頁。（三）麻醉藥物：1、全麻藥物（1）乙醚：強(qiáng)揮發(fā)性、易燃。乙醚是最常用的吸入麻醉劑，各種動(dòng)物適用。機(jī)制：抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)。特點(diǎn)(tèdiǎn)：安全范圍大，肌肉完全松弛，對(duì)肝腎毒性小，麻醉誘導(dǎo)期和蘇醒期較長。副作用：局部刺激大，引起上呼吸道黏膜分泌增加，導(dǎo)致呼吸道阻塞，可用阿托品對(duì)抗解救。第九十九頁，共113頁。第一百頁，共113頁。（2）巴比妥類：種類很多，有巴比妥鈉，戊巴比妥鈉，硫噴妥那，苯巴比妥鈉等。適用于各種動(dòng)物。如實(shí)驗(yàn)中大小鼠常用3％戊巴比妥鈉溶液腹腔注射進(jìn)行麻醉。

特點(diǎn)：安全范圍廣，毒性小，麻醉潛伏期短，麻醉維持時(shí)間長?？筛骨换蜢o脈(jìngmài)給藥。機(jī)理：阻斷神經(jīng)沖動(dòng)傳遞到大腦。副作用：過量使用可導(dǎo)致呼吸肌麻痹而死亡，同時(shí)抑制末梢循環(huán)，導(dǎo)致血壓降低，并影響基礎(chǔ)代謝，導(dǎo)致體溫降低。第一百零一頁，共113頁。（3）氯胺酮：常用其鹽酸鹽。特點(diǎn)：麻醉潛伏期短，麻醉維持期僅10~20min，麻醉淺，安全性高，可重復(fù)給藥。機(jī)制：阻斷大腦聯(lián)絡(luò)途徑。副作用(zuòyòng)：興奮心血管系統(tǒng)，使血壓升高，心率加快，偶爾引起嘔吐。（4）水合氯醛：作用(zuòyòng)特點(diǎn)和巴比妥類相似。但安全范圍小，麻醉劑量和中毒劑量接近，對(duì)皮膚和黏膜有較強(qiáng)刺激。第一百零二頁，共113頁。第一百零三頁，共113頁。第一百零四頁，共113頁。2、局麻藥物（1）普魯卡因：是無刺激性的局麻藥物。特點(diǎn)：麻醉速度快，注射后1~3分鐘就可產(chǎn)生麻醉。可以維持30~45分鐘。對(duì)皮膚和黏膜穿透力很弱，需要(xūyào)注射給藥才能產(chǎn)生局麻效果。它可以使血管舒張，易被吸收入血液而失去效果。在其溶液中加入腎上腺素（每100ml加入0.1%腎上腺素0.2~0.5ml）可以使麻醉時(shí)間延長1~2小時(shí)。第一百零五頁，共113頁。（2）利多卡因：效力和穿透力比普魯卡因(pǔlǔkǎyīn)強(qiáng)。（3）的卡因：化學(xué)結(jié)構(gòu)和普魯卡因(pǔlǔkǎyīn)類似，效力和穿透力比普魯卡因(pǔlǔkǎyīn)強(qiáng)。第一百零六頁，共113頁。（四）實(shí)驗(yàn)(shíyàn)動(dòng)物的急救動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程中，可因麻醉藥過