DB1308-T 314-2022羊肚菌液體菌種生產技術規(guī)程

65.020.20B05承 德 市 地 方 標 準DB1308/T314—2022羊肚菌液體菌種生產技術規(guī)程2022-10-31發(fā)布 2022-11-01實施承德市市場監(jiān)督管理局 發(fā)布DB1308/T314DB1308/T314—2022前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由承德市農業(yè)農村局歸口。本文件起草單位：平泉市希才應用菌科技發(fā)展有限公司。I羊肚菌液體菌種生產技術規(guī)程范圍本文件規(guī)定了羊肚菌液體菌種生產的生產環(huán)境、前期準備、操作流程以及各步驟的操作方法指示。本文件適用于羊肚菌液體菌種生產的過程管理。規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。本文件沒有規(guī)范性引用文件。術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。生產環(huán)境生產車間環(huán)境整潔，通風良好，溫度20℃～23℃，符合安全生產需求。前期準備制種設備由無菌空氣過濾系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、冷卻系統(tǒng)、停電保護裝置、耐高壓罐體等組成。其他設備工具00l三角瓶100ml燒杯﹑玻璃棒、磁力攪拌子、棉塞、小勺﹑刀、菜板、牛皮紙、繩、pH試紙等。原料新鮮土豆﹑葡萄糖粉﹑化學純磷酸二氫鉀﹑化學純硫酸鎂﹑化學純蛋白胨﹑瓊脂粉、100目豆粕粉、食品級消泡劑等。操作流程母種擴繁培養(yǎng)液制作→發(fā)酵罐準備→原種制作→檢驗→備用。操作方法１母種擴繁培養(yǎng)液制作用燒杯量取1000ml水，放電爐上燒開，依次將豆粕5g、葡萄糖20g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂1.5g500ml50l，加入.5gcm壓力（21℃）0in，取出冷卻到0℃以下時，接入一塊約2m2的斜面母種或6～0塊2m2的斜面母種。于3℃～5℃下靜置培養(yǎng)48h，再置放到復式搖床上振蕩培養(yǎng)，振蕩頻率為80～100次/min，振幅6cm～10cm。如果用旋轉200～220轉/min7d明，液中懸浮著大量小菌絲球，并伴有相關菇類特有的香味為宜。發(fā)酵罐準備清理滅菌和使用119℃，時間30min?？障Y束后，將滅菌開關關閉，逆行關閉過濾器滅菌線路開關和蒸汽線路開關，打開排氣線路開關，降壓后開罐使用。原種制作預熱10min打開進氣開關攪拌1min，預熱至80℃時開始配料。配料.5g﹑豆粕粉.5kg﹑酵母膏.5g﹑00g、硫酸鎂50g﹑消泡劑00l~00ml90℃后便可加料。用壓力將混合均勻的營養(yǎng)料加入罐內，最后加入消泡劑。滅菌min。滅菌結束后將蒸汽開關和過濾器滅菌線路開關關閉。冷卻打開排氣線路開關自動降壓至罐內壓力為0.03Mpa左右時，打開進氣閥門，并打開自來水和冷卻進排管路的開關，開始降溫，直至降溫到培養(yǎng)溫度24℃。接種２將搖瓶種于接種前放置磁力攪拌器上攪拌12Mpa進入培養(yǎng)階段。培養(yǎng)培養(yǎng)溫度為0.035h﹑溫度﹑氣味﹑氣流量等相關數(shù)據并填寫培養(yǎng)記錄表。檢驗取樣發(fā)酵液培養(yǎng)滿3h和5h時各取樣檢驗一次。取樣時在火焰的保護下用無菌瓶接取少量發(fā)酵液，然后用75％酒精沖洗出料口消毒。所取樣液在超凈工作臺內接種平板和栽培包后涂片鏡檢。感官檢查看旋5min不沉淀，表明菌種生長力強；反之，如果菌絲極易沉淀，說明菌絲已老化或死亡。嗅理化試驗菌絲干重量取液體菌種10ml，用水分測試儀烘干至含水量18%，然后稱量菌絲干重。菌絲干重第一次檢驗≥1.5g、第二次檢驗≥2g為合格。液體粘稠度將液體菌種置于量筒中，使用比重計進行粘稠度測量。第一次檢驗比重﹥1.0、二次檢驗比重≥1.2為合格。pHpHpH值4.5～4.8pH值4～4.2為合格。３菌絲活力將