病原微生物第19章支原體課件

1．食入未經(jīng)消毒的羊奶，最有可能引起的病是A．結(jié)核B．波浪熱C．破傷風(fēng)D．肉毒中毒E．傷寒2．菌體呈卵圓形，兩端濃染的細(xì)菌是A．炭疽桿菌B．白喉棒狀桿菌C．結(jié)核分枝桿菌D．鼠疫桿菌E．傷寒沙門菌3．鼠疫桿菌在肉湯培養(yǎng)液中生長(zhǎng)不能形成A．混濁生長(zhǎng)B．絮狀沉淀C．形成菌膜D．鐘乳石狀下沉E．顆粒狀沉淀4.5歲患兒，發(fā)燒、咽痛、咳嗽5天急診入院。免疫接種史不祥。查體：咽后壁、鄂弓和懸雍垂等處發(fā)現(xiàn)灰白色膜狀物，用滅菌棉拭子不易擦掉。初步診斷為A．白喉B．急性喉炎C．病毒性咽炎D．扁桃腺炎E．支氣管炎微生物的種類性狀非細(xì)胞型原核細(xì)胞型真核細(xì)胞型細(xì)胞型測(cè)量單位nm（最?。┖怂酓NAorRNADNA&RNADNA&RNA細(xì)胞結(jié)構(gòu)僅有原始核質(zhì)，無(wú)核膜或核仁；細(xì)胞器很不完善，只有核蛋白體種類病毒類病毒朊粒細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體（二菌四體）真菌μm沒(méi)有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無(wú)產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖μm細(xì)胞核分化程度高，有核膜和核仁；細(xì)胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器完整第一節(jié)概述定義缺乏細(xì)胞壁形態(tài)上呈高度多形性能通過(guò)除菌濾器在無(wú)生命培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)繁殖最小的原核細(xì)胞型微生物能形成有分支的長(zhǎng)絲，故稱支原體柔膜體綱支原體目肺炎支原體，人型支原體，生殖支原體，穿透支原體，發(fā)酵支原體，梨支原體脲脲原體支原體分類支原體科無(wú)膽甾原體科螺原體科支原體屬脲原體屬一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)

0.3～0.5

μm無(wú)細(xì)胞壁高度多形性：球、桿、絲狀和分枝狀等一般Giemsa染色較好，染為淡紫色（二）結(jié)構(gòu)

內(nèi)外兩層為蛋白質(zhì)及糖類，中層為脂類（磷脂為主），凡作用于膽固醇的物質(zhì)，如皂素、毛地黃甙、二性霉素B等均能破壞細(xì)胞膜致其死亡。

特殊的頂端結(jié)構(gòu)：粘附宿主上皮細(xì)胞表面，與支原體的致病有關(guān)。固體培養(yǎng)基：

2～7天長(zhǎng)出直徑約10～600

μm的典型的“荷包蛋樣”菌落：低倍鏡下見(jiàn)菌落呈圓形，心致密隆起，深入瓊脂，外周由顆粒包繞。液體培養(yǎng)基：清亮，用顏色變化單位（CCU）表示。需用放大鏡/低倍顯微鏡觀察

鑒別點(diǎn)

支原體細(xì)菌L型細(xì)胞壁缺失原因在遺傳上與細(xì)菌無(wú)關(guān)與原菌相關(guān)，可以回復(fù)細(xì)胞膜含高濃度固醇細(xì)胞膜不含固醇培養(yǎng)特性需要膽固醇大多需要高滲培養(yǎng)菌落大小生長(zhǎng)慢，菌落小菌落稍大(0.6~1.0)液體培養(yǎng)液體培養(yǎng)混濁度極低有一定混濁度，可附壁支原體與細(xì)菌L型的異同點(diǎn)不同點(diǎn)缺乏細(xì)胞壁，形態(tài)多樣，能通過(guò)濾菌器。固體培養(yǎng)—菌落呈荷包蛋樣或顆粒狀。臨床表現(xiàn)相似—間質(zhì)性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等相同點(diǎn)（四）抗原結(jié)構(gòu)

?補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)可檢測(cè)糖脂類抗原

?ELISA試驗(yàn)可檢測(cè)蛋白質(zhì)類抗原

?血清抗體可用生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)（growth

inhibitiontest,GIT）和代謝抑制試驗(yàn)（metabolicinhibitiontest,MIT）以鑒定

抗原構(gòu)造其主要Ag性來(lái)自細(xì)胞膜。胞膜外層蛋白質(zhì)是主要型特異性Ag。其抗原性常用生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)（GIT）和代謝抑制試驗(yàn)（MIT）鑒定。

GIT：將吸有型特異性抗血清的濾紙片貼在接種過(guò)支原體的平板上，孵育后，如有抑制生長(zhǎng)現(xiàn)象出現(xiàn)，則說(shuō)明該支原體與血清同型。MIT：是將支原體接種在含有抗血清的葡萄糖（酚紅）培養(yǎng)基中，若抗體與支原體型一致，則抑制該支原體不能分解葡萄糖產(chǎn)酸，酚紅不變色。用GIT和MIT可將支原體分成若干血清型。

若相應(yīng)，則支原體生長(zhǎng)、代謝受抑制，酚紅不變色代謝抑制試驗(yàn)（MIT）生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)（GIT）（五）抵抗力

?對(duì)化學(xué)消毒劑敏感，對(duì)結(jié)晶紫、醋酸鉈、亞碲酸鉀有抵抗力；

?對(duì)影響細(xì)胞壁合成的抗生素如青霉素類天然耐受，但對(duì)干擾蛋白質(zhì)合成的抗生素如強(qiáng)力霉素、交沙霉素等敏感。二、致病性與免疫性（一）致病機(jī)制

?莢膜或微莢膜：抗吞噬作用

?毒性代謝產(chǎn)物：神經(jīng)毒素、磷脂酶C、核酸酶、過(guò)氧化氫和超氧離離子均能引起宿主黏膜上皮細(xì)胞或紅細(xì)胞的病理?yè)p傷

?超抗原：免疫調(diào)節(jié)

?其它：如穿透支原體粘附侵入CD4＋

T細(xì)胞引起損傷

?粘附素：粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮細(xì)胞二、致病性與免疫性致病性支原體致病性肺炎支原體原發(fā)性非典型肺炎、支氣管炎表面感染人型支原體泌尿生殖道感染表面感染生殖支原體泌尿生殖道感染表面感染穿透支原體多見(jiàn)于艾滋病入血溶脲脲原體泌尿生殖道感染表面感染（三）免疫性

?體液免疫：抗膜蛋白的抗體包括

IgM、IgG和SIgA

?細(xì)胞免疫：主要是特異性CD4＋Th1

細(xì)胞分泌細(xì)胞因子二、致病性與免疫性0.2～0.3μm，高度多形性，如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀和絲狀；初次分離應(yīng)在含血清和新鮮酵母浸出液的培養(yǎng)基中，一般10天左右長(zhǎng)出菌落；多次傳代后生長(zhǎng)加快，菌落呈“油煎蛋”狀；能發(fā)酵葡萄糖，不能利用精氨酸與尿素；對(duì)美藍(lán)、醋酸鉈、青霉素不敏感。第二節(jié)肺炎支原體一、生物學(xué)性狀（二）所致疾病

原發(fā)性非典型性肺炎（primaryatypicalpneumonia），臨床以咳嗽、發(fā)熱、頭痛、咽痛和肌肉痛為主，有時(shí)并發(fā)支氣管肺炎、皮疹、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。二、致病性與免疫性（三）免疫性血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細(xì)胞；呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對(duì)防止再感染有較強(qiáng)保護(hù)作用；出現(xiàn)IgE介導(dǎo)的I型超敏反應(yīng)，促使哮喘病急性發(fā)作

三、微生物學(xué)檢查法（二）血清學(xué)檢查

冷凝集試驗(yàn)：即用病人血清與人O型血紅細(xì)胞或自身紅細(xì)胞混合，4℃過(guò)夜時(shí)可發(fā)生凝集，而在37℃時(shí)這種凝集又分散解離開(kāi)，但僅50％左右的患者才出現(xiàn)陽(yáng)性。此反應(yīng)為非特異性?？焖僭\斷

ELISA：檢測(cè)P1和P30蛋白mAbs

PCR：從痰標(biāo)本中檢測(cè)16SrRNA或

P1蛋白基因防治原則大環(huán)內(nèi)酯類藥物喹諾酮類藥物四、防治原則第三節(jié)解脲脲原體形態(tài)：0.5～0.3

μm，單個(gè)或成雙排列固體培養(yǎng)：48

h后長(zhǎng)出直徑15～30

μm

“油煎蛋”狀菌落。最適pH為5.5～6.5。生化反應(yīng)：分解尿素，不分解糖類和精氨酸抵抗力：對(duì)1:2000醋酸鉈不敏感抗原：MB抗原是其主要膜抗原，將解脲脲原體分為A、B兩大群，14個(gè)血清型一、生物學(xué)性狀二、致病性與免疫性

（二）所致疾病非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睪炎等泌尿生殖道疾病，還與自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎和男性不孕有關(guān)。病原體檢測(cè)

接種液體培養(yǎng)基，分解尿素產(chǎn)堿，酚紅指示劑由橘黃色變?yōu)榧t色；再取0.2

ml培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于固體培養(yǎng)基，在5%CO2和90%N2的環(huán)境中經(jīng)37℃培養(yǎng)24～48h，用低倍鏡觀察菌落，進(jìn)一步鑒定需用特異抗血清做GIT與MIT。三、微生物學(xué)檢查法核酸檢測(cè)

PCR檢測(cè)：

檢測(cè)尿素酶基因、多帶抗原（MB-Ag）基因和16S

rRNA基因。此法快速、特異，適宜于大批量標(biāo)本檢測(cè)。三、微生物學(xué)檢查法加強(qiáng)宣傳教育，注意性衛(wèi)生，切斷傳播途徑。四環(huán)素類、喹諾酮類藥物治療，但有耐藥株產(chǎn)生。四、防治原則第四節(jié)人型支原體-分解精氨酸，不分解尿素和葡萄糖。最適pH7.2～7.4。固體培養(yǎng)基上形成200～300

μm的較大菌落，呈典型的“油煎蛋”狀。-寄居于泌尿生殖道，通過(guò)性接觸傳播，可引起附睪炎、盆腔炎、產(chǎn)褥熱等。-微生物學(xué)檢測(cè)和防治原則同解脲脲原體。人型支原體對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素不敏感，對(duì)1:2000醋酸鉈與紅霉素（100

mg/L）不敏感。第五節(jié)生殖支原體-生殖支原體基本形態(tài)為燒瓶狀，能發(fā)酵葡萄糖使培養(yǎng)基變酸，不分解尿素和精氨酸。-培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，須在無(wú)醋酸鉈SP-4培養(yǎng)基生長(zhǎng)但緩慢，菌落呈典型的“油煎蛋”狀。-頂端結(jié)構(gòu)有粘附素MgPa，140

kDa，與肺炎支原，能粘附在人泌尿生殖道上皮，主要引起尿道炎。-較難培養(yǎng)，生長(zhǎng)慢，不適宜于常規(guī)實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)室最好的診斷方法是核酸檢測(cè)。第六節(jié)穿透支原體

1991年Lo首次從1例艾滋病患者尿中分離出一種新支原體，其形態(tài)為桿狀或長(zhǎng)燒瓶狀，一端為頂端結(jié)構(gòu)，具有粘附與穿入的作用。穿透支原體發(fā)酵葡萄糖，分解精氨酸，不分解尿素，在SP-4培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較慢，形成典型的“油煎蛋”狀菌落。頂端結(jié)構(gòu)能粘附于人紅細(xì)胞、單核細(xì)胞、CD4＋T淋巴細(xì)胞及人尿道上皮細(xì)胞，導(dǎo)致宿主細(xì)胞受損或死亡。目前認(rèn)為穿透支原體可能是AIDS發(fā)病的一個(gè)輔助因素。思考題1、細(xì)菌L型與支原體在生物學(xué)性狀方面有何相似之處？其主要區(qū)別是什么？2、簡(jiǎn)述支原體形態(tài)結(jié)構(gòu)的主要特征。3、簡(jiǎn)述致病性支原體的種類及其致病性。4、名詞解釋：支原體(mycoplasma)、冷凝集試驗(yàn)1.有關(guān)細(xì)菌L型與支原體的共同點(diǎn)，錯(cuò)誤的是A．具有多形態(tài)性B．均能通過(guò)濾菌器C．在固體培養(yǎng)基上均能形成“荷包蛋”樣菌落D．培養(yǎng)時(shí)均需10％～20％的動(dòng)物血清