生物選修三第一章復(fù)習(xí)課件

1、基因工程的概念（又叫做DNA重組技術(shù)）操作：

DNA分子水平

優(yōu)點(diǎn)：目的性強(qiáng)，定向改造生物的性狀。專題1基因工程2、基因工程的原理：基因重組3、基因工程的基本工具限制酶

DNA載體①分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）來(lái)源：主要是從原核生物中分離功能：識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專一性。結(jié)果：黏性末端和平末端。一種限制酶識(shí)別一種序列，不同的限制酶識(shí)別不同序列。②.“分子縫合針”——DNA連接酶

E·coliDNA連接酶來(lái)源：大腸桿菌作用：黏性末端之間的磷酸二酯鍵T4DNA連接酶

來(lái)源：T4噬菌體作用：能縫合兩種末端，但連接平末端的效率較低。DNA聚合酶：只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶：是連接兩個(gè)DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。4、基因工程的基本操作程序（1）目的基因的獲取目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因?；蛭膸?kù)中獲?。ɑ蚪M文庫(kù)，cDNA文庫(kù)）目的基因轉(zhuǎn)錄的mRNA----單鏈DNA----雙鏈DNA反轉(zhuǎn)錄酶蛋白質(zhì)的氨基酸序列----mRNA序列-----結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列------目的基因推測(cè)化學(xué)合成推測(cè)PCR技術(shù)擴(kuò)增——原理：雙鏈DNA復(fù)制條件：引物模板DNA四種脫氧核苷酸熱穩(wěn)定DNA聚合酶過(guò)程：第一步：加熱90～95℃氫鍵斷裂，DNA解鏈；第二步：冷卻55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱70～75℃，DNA聚合酶從引物起合成互補(bǔ)鏈?；瘜W(xué)合成法（基因小、核酸序列已知）（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建（核心）目的：使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。組成：目的基因＋啟動(dòng)子＋終止子＋標(biāo)記基因

啟動(dòng)子：DNA片段，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA終止子：DNA片段，位于基因的尾端。標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞轉(zhuǎn)化的概念：

導(dǎo)入植物細(xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，基因槍法和花粉管通道法等。導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞：顯微注射技術(shù)。受體細(xì)胞多是受精卵。導(dǎo)入微生物細(xì)胞：Ca2+處理法5、基因工程的應(yīng)用植物基因工程：抗蟲(chóng)、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。動(dòng)物基因工程：提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物。基因治療：把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用1．科學(xué)家將人的生長(zhǎng)素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。(1)過(guò)程①表示的是采取

的方法來(lái)獲取目的基因。其過(guò)程可表示為：___________________________反轉(zhuǎn)錄法將其涂布含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長(zhǎng)的，說(shuō)明已導(dǎo)入，反之則沒(méi)有導(dǎo)入普通質(zhì)粒A和重組質(zhì)粒上都有抗氨芐青霉素基因有的能生長(zhǎng)，有的不能生長(zhǎng)(3)如果把已經(jīng)導(dǎo)入了普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的大腸桿菌，放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，發(fā)生的現(xiàn)象是

，原因是：

。（2）檢測(cè)大腸桿菌B是否導(dǎo)入了質(zhì)粒或重組質(zhì)粒，可采用的方法是_____________________________，理由是：_____________________。導(dǎo)入普通質(zhì)粒A的細(xì)菌能生長(zhǎng)，因?yàn)槠胀ㄙ|(zhì)粒A上有四環(huán)素抗性基因；導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌不能生長(zhǎng)，因?yàn)槟康幕蛘逶谒沫h(huán)素抗性基因中，破壞了其結(jié)構(gòu)和功