腫瘤免疫基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)實(shí)用版課件

腫瘤免疫基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)腫瘤免疫基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)1（優(yōu)選）腫瘤免疫基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)（優(yōu)選）腫瘤免疫基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)2一、免疫系統(tǒng)簡(jiǎn)述*免疫應(yīng)答*免疫系統(tǒng)的構(gòu)成*免疫系統(tǒng)平衡路徑一、免疫系統(tǒng)簡(jiǎn)述*免疫應(yīng)答3定義抗原物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后激發(fā)免疫系統(tǒng)識(shí)別發(fā)生一系列反應(yīng)以排除抗原的過(guò)程。即免疫細(xì)胞識(shí)別、攝取、處理抗原，繼而活化、增殖、分化，產(chǎn)生免疫效應(yīng)的過(guò)程。

免疫應(yīng)答定義抗原物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后激發(fā)免疫系統(tǒng)識(shí)別發(fā)4免疫應(yīng)答種類(lèi)及特點(diǎn)固有免疫獲得性免疫獲得形式不需要抗原需要抗原發(fā)揮作用早期快速（數(shù)分鐘-4天）4-5天后免疫原識(shí)別受體模式識(shí)別受體特異性抗原抗原識(shí)別受體免疫記憶無(wú)有舉例NK、NKT、巨噬細(xì)胞T細(xì)胞、B細(xì)胞免疫應(yīng)答種類(lèi)及特點(diǎn)固有免疫獲得性免疫獲得形式不需要抗原需要抗5免疫系統(tǒng)的構(gòu)成為什么有的癌癥患者不治而愈呢？醫(yī)學(xué)科學(xué)家初步研究表明，原來(lái)人體內(nèi)有一套完整的防衛(wèi)機(jī)構(gòu)——免疫系統(tǒng)，人體免疫系統(tǒng)的和諧是癌癥自然消退的主要原因免疫系統(tǒng)的構(gòu)成為什么有的癌癥患者不治而愈呢？醫(yī)學(xué)科學(xué)家初步研6免疫系統(tǒng)的構(gòu)成免疫器官免疫細(xì)胞免疫分子中樞外周膜型分子分泌型分子胸腺脾干細(xì)胞系TCR免疫球蛋白骨髓淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞BCR補(bǔ)體分子法氏囊（禽類(lèi)）黏膜相關(guān)淋巴組織單核巨噬細(xì)胞CD分子細(xì)胞因子皮膚相關(guān)淋巴組織其它APC（樹(shù)突細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等）MHC其它免疫細(xì)胞（粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、血小板、紅細(xì)胞等）黏附分子免疫系統(tǒng)的構(gòu)成免疫器官免疫細(xì)胞免疫分子中樞外周膜型分子分泌型7免疫系統(tǒng)平衡路徑免疫系統(tǒng)平衡路徑8Treg(CD4+CD25+)起免疫抑制作用的T細(xì)胞亞群Sipuleucel-T治療512名受試者參加的臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)移性前列腺癌，疾病進(jìn)展時(shí)間不延長(zhǎng)，但OS顯著提高4.激活T細(xì)胞和B細(xì)胞，是免疫反應(yīng)的關(guān)鍵腫瘤的細(xì)胞免疫治療技術(shù)種類(lèi)CD3+CD4+CD25+（℅）CD3-CD19+（℅）Ｔ細(xì)胞產(chǎn)生的免疫應(yīng)答是細(xì)胞免疫，細(xì)胞免疫的效應(yīng)形式主要有兩種：與靶細(xì)胞特異性結(jié)合，破壞靶細(xì)胞膜，直接殺傷靶細(xì)胞；身體中各類(lèi)免疫反應(yīng)，不論是細(xì)胞免疫還是體液免液，共同構(gòu)成了一個(gè)極為精細(xì)、復(fù)雜而完善的防衛(wèi)體系。即免疫細(xì)胞識(shí)別、攝取、處理抗原，繼而活化、增殖、分化，產(chǎn)生免疫效應(yīng)的過(guò)程。CDw116,CD117,CD120～CD122,CD124,CD126～CDw128,CDw130這類(lèi)提供則是細(xì)胞外部的情況，像是組織中有細(xì)菌侵入，則巨噬細(xì)胞進(jìn)行吞食后，把細(xì)菌碎片利用MHC提示給輔助T細(xì)胞，啟動(dòng)免疫反應(yīng)。機(jī)體免疫系統(tǒng)和腫瘤細(xì)胞相互作用的結(jié)果決定了腫瘤的最終演變。殺瘤活性高，而且殺瘤活性的維持不需要外源大量的IL2的輸入來(lái)維持；B-淋巴細(xì)胞（<1%）應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生。所以要CD3、CD8、CD28三標(biāo)才能分選出來(lái)。SipleucelT

腫瘤免疫細(xì)胞治療的里程碑事件由于NK細(xì)胞的殺傷活性無(wú)MHC限制，不依賴抗體，因此稱(chēng)為自然殺傷活性。*腫瘤抗原*抗原呈遞細(xì)胞*抗腫瘤免疫效應(yīng)細(xì)胞*二、腫瘤免疫簡(jiǎn)述Treg(CD4+CD25+)起免疫抑制作用的T細(xì)胞亞群*9腫瘤抗原

腫瘤抗原是細(xì)胞在癌變過(guò)程中出現(xiàn)的新抗原及過(guò)度表達(dá)的抗原物質(zhì)總稱(chēng)。腫瘤抗原能誘導(dǎo)宿主的適應(yīng)性免疫應(yīng)答，成為抗腫瘤免疫應(yīng)答的主要靶分子，也是腫瘤診斷的重要標(biāo)志分子。。

根據(jù)腫瘤抗原在腫瘤細(xì)胞特異或相關(guān)特異的蛋白質(zhì)分子及其含量的不同，分為腫瘤特異性抗原TSA和腫瘤相關(guān)抗原TAA兩大類(lèi)。TSA只能被CD8+CTL識(shí)別，誘發(fā)T細(xì)胞免疫應(yīng)答，TAA可被B細(xì)胞識(shí)別而產(chǎn)生抗體。腫瘤抗原腫瘤抗原是細(xì)胞在癌變過(guò)程中出現(xiàn)的新抗原及過(guò)度表10不同機(jī)制產(chǎn)生的常見(jiàn)人類(lèi)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制腫瘤抗原腫瘤基因突變產(chǎn)物突變的P53蛋白約50%人類(lèi)腫瘤癌基因產(chǎn)物過(guò)表達(dá)的Her-2/neu乳腺癌等致癌病毒產(chǎn)物HPV宮頸癌EBEBV淋巴瘤、鼻咽癌靜止的基因活化黑色素瘤抗原Mage1Mage3黑色素瘤過(guò)量表達(dá)的細(xì)胞蛋白gp100、MART黑色素瘤胚胎抗原癌胚抗原CEA結(jié)腸癌等多種腫瘤甲胎蛋白AFP肝癌組織特異分化抗原前列腺特異抗原PSA前列腺癌CD10、CD20B淋巴瘤不同機(jī)制產(chǎn)生的常見(jiàn)人類(lèi)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制腫瘤抗原腫瘤基因突變產(chǎn)11抗原呈遞細(xì)胞APC抗原呈遞細(xì)胞是指能攝取、加工、處理抗原，并將抗原信息呈遞給T淋巴細(xì)胞的一類(lèi)免疫細(xì)胞，在機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)程中發(fā)揮重要作用。根據(jù)APC細(xì)胞表面膜分子表達(dá)的特點(diǎn)和功能的差異，分以下兩類(lèi)一、專(zhuān)職APC*樹(shù)突細(xì)胞DC胞飲攝取*單核巨噬細(xì)胞FC受體攝取*B細(xì)胞mIg攝取二、非專(zhuān)職APC*內(nèi)皮細(xì)胞*成纖維細(xì)胞*上皮及間皮細(xì)胞*嗜酸性粒細(xì)胞抗原呈遞細(xì)胞APC抗原呈遞細(xì)胞是指能攝取、加工、處理抗12樹(shù)突狀細(xì)胞DCDC是人體內(nèi)最重要的、抗原遞呈能力最強(qiáng)的抗原專(zhuān)職遞呈細(xì)胞，直接或間接激活T細(xì)胞和B細(xì)胞，是免疫反應(yīng)的關(guān)鍵“決策細(xì)胞”。是體內(nèi)唯一能活化靜息T淋巴細(xì)胞的抗原遞呈細(xì)胞，是機(jī)體免疫應(yīng)答的啟動(dòng)者樹(shù)突狀細(xì)胞DCDC是人體內(nèi)最重要的、抗原遞呈能力是體內(nèi)132011年醫(yī)學(xué)及生理學(xué)獎(jiǎng)諾貝爾獲得者

樹(shù)突狀細(xì)胞(dendriticcell，DC)是由美國(guó)學(xué)者Steinman于1973年發(fā)現(xiàn)的，因其成熟時(shí)伸出許多樹(shù)突樣或偽足樣突起而得名。

DC是目前所知的機(jī)體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞，最大的特點(diǎn)是能夠刺激初始T細(xì)胞(naiveTcell)進(jìn)行增殖。因此，DC是機(jī)體免疫應(yīng)答的始動(dòng)者，在免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)中具有獨(dú)特的地位。2011年醫(yī)學(xué)及生理學(xué)獎(jiǎng)諾貝爾獲得者樹(shù)突狀細(xì)胞(de14DC的生物學(xué)功能

1.抗原提呈高水平表達(dá)MHCII類(lèi)分子；表達(dá)參與抗原攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)的特殊膜受體；有效攝取和處理抗原，然后遷移至T細(xì)胞區(qū)；活化未致敏（naive）T細(xì)胞；抗原提呈效率高，少數(shù)DC可以激活T細(xì)胞。2.參與T細(xì)胞發(fā)育、分化和激活3.參與B細(xì)胞發(fā)育、分化及激活4.免疫調(diào)節(jié)和免疫監(jiān)視功能DC的生物學(xué)功能1.抗原提呈15CD3+CD8+細(xì)胞包含了兩類(lèi)CD3+CD8+CD28和CD3+CD8+CD28+前者是抑制T細(xì)胞（suppressorTcells，Ts），后者才是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxicTcell，Tc）或者（cytotoxiclymphocyte,CTL）。根據(jù)腫瘤抗原在腫瘤細(xì)胞特異或相關(guān)特異的蛋白質(zhì)分子及其含量的不同，分為腫瘤特異性抗原TSA和腫瘤相關(guān)抗原TAA兩大類(lèi)。即免疫細(xì)胞識(shí)別、攝取、處理抗原，繼而活化、增殖、分化，產(chǎn)生免疫效應(yīng)的過(guò)程。參與T細(xì)胞發(fā)育、分化和激活應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生。CD3+CD8+細(xì)胞包含了兩類(lèi)CD3+CD8+CD28和CD3+CD8+CD28+前者是抑制T細(xì)胞（suppressorTcells，Ts），后者才是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxicTcell，Tc）或者（cytotoxiclymphocyte,CTL）。根據(jù)APC細(xì)胞表面膜分子表達(dá)的特點(diǎn)和功能的差異，分以下兩類(lèi)DC是人體內(nèi)最重要的、抗原遞呈能力*B細(xì)胞mIg攝取*單核巨噬細(xì)胞FC受體攝取細(xì)胞免疫治療前后血清中細(xì)胞因子的對(duì)比白細(xì)胞簇分化抗原—CD竟?fàn)幖夹g(shù)介紹：CIK技術(shù)、EAAL/CAPRI、ProvengeTreg(CD4+CD25+)起免疫抑制作用的T細(xì)胞亞群培養(yǎng)細(xì)胞本身的抗腫瘤作用差;CD10,CD19～CD24,CD37,CD39,CD40,CD72～CD86MHCclassI（MHCI）位于一般細(xì)胞表面上，可以提供一般細(xì)胞內(nèi)的一些狀況，比如該細(xì)胞遭受病毒感染，則相病毒外膜碎片之氨基酸鏈（peptide）透過(guò)MHC提示在細(xì)胞外側(cè)，可以供殺手T細(xì)胞等辨識(shí)，以進(jìn)行撲殺。腫瘤免疫治療的框架策略腫瘤免疫治療的框架策略活化的NK細(xì)胞可合成和分泌多種細(xì)胞因子，發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫和造血作用以及直接殺傷靶細(xì)胞的作用。抗腫瘤免疫主要效應(yīng)細(xì)胞——CTLCTL(CytotoxicTLymphocyte，Tc細(xì)胞)T細(xì)胞的效應(yīng)細(xì)胞，就是CD8+T細(xì)胞，也稱(chēng)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞。具有多種生物學(xué)功能，能特異性殺傷帶抗原的靶細(xì)胞，也能輔助或抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體。Ｔ細(xì)胞產(chǎn)生的免疫應(yīng)答是細(xì)胞免疫，細(xì)胞免疫的效應(yīng)形式主要有兩種：與靶細(xì)胞特異性結(jié)合，破壞靶細(xì)胞膜，直接殺傷靶細(xì)胞；另一種是釋放淋巴因子，最終使免疫效應(yīng)擴(kuò)大和增強(qiáng)。Tc細(xì)胞的殺傷力較強(qiáng)，可反復(fù)殺傷靶細(xì)胞，而且在殺傷靶細(xì)胞的過(guò)程中本身不受損傷。CD3+CD8+細(xì)胞包含了兩類(lèi)CD3+CD8+CD28和CD16B淋巴細(xì)胞*B細(xì)胞是參與體液免疫應(yīng)答的重要免疫細(xì)胞，也是重要的專(zhuān)職APC。成熟的B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞收到吞噬細(xì)胞提交的抗原后，開(kāi)始分化和成熟。*B細(xì)胞高表達(dá)MHC—Ⅱ類(lèi)分子，能有效呈遞抗原給CD4+T細(xì)胞，不僅激活Th細(xì)胞，同時(shí)產(chǎn)生各種細(xì)胞因子，細(xì)胞因子再激活B細(xì)胞和T細(xì)胞。激活的B細(xì)胞變成漿細(xì)胞，大量繁殖增生，產(chǎn)生大量可以中和抗原的抗體。身體中各類(lèi)免疫反應(yīng)，不論是細(xì)胞免疫還是體液免液，共同構(gòu)成了一個(gè)極為精細(xì)、復(fù)雜而完善的防衛(wèi)體系。B淋巴細(xì)胞17ＮＫ細(xì)胞自然殺傷細(xì)胞(naturalkillercell，NK)是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞，不僅與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生。Nk細(xì)胞是固有免疫細(xì)胞，不具備特異性，表面無(wú)受體由于NK細(xì)胞的殺傷活性無(wú)MHC限制，不依賴抗體，因此稱(chēng)為自然殺傷活性。⒈識(shí)別靶細(xì)胞NK細(xì)胞識(shí)別靶細(xì)胞是非特異性的，這與CTL識(shí)別靶細(xì)胞機(jī)理不同，但確切的機(jī)理尚未明了。２.活化的NK細(xì)胞可合成和分泌多種細(xì)胞因子，發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫和造血作用以及直接殺傷靶細(xì)胞的作用。ＮＫ細(xì)胞自然殺傷細(xì)胞(naturalkillercell18單核巨噬細(xì)胞Mφ單核巨噬細(xì)胞具有抗感染、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等重要作用，是機(jī)體非特異性免疫防御中的重要細(xì)胞。*抗腫瘤：巨噬細(xì)胞被某些細(xì)胞因子如IFN-γ激活后能有效地殺傷腫瘤細(xì)胞，是參與免疫監(jiān)視的重要效應(yīng)細(xì)胞。*免疫調(diào)節(jié)：在特異性免疫應(yīng)答中，巨噬細(xì)胞可分泌釋放多種細(xì)胞因子，參與免疫調(diào)節(jié)。*提呈抗原、啟動(dòng)免疫應(yīng)答：在特異性免疫應(yīng)答中，絕大多數(shù)TD抗原（胸腺依賴抗原）都需經(jīng)巨噬細(xì)胞吞噬和加工處理，并與其表面的MHC分子形成抗原肽-MHC復(fù)合物，表達(dá)在細(xì)胞膜表面，提呈給T細(xì)胞。巨噬細(xì)胞表面有很多黏附分子，可與T細(xì)胞表面的協(xié)同刺激因子受體結(jié)合，產(chǎn)生協(xié)同刺激信號(hào)，誘導(dǎo)T細(xì)胞的活化，啟動(dòng)免疫應(yīng)答。單核巨噬細(xì)胞Mφ單核巨噬細(xì)胞具有抗感染、抗腫瘤19MHC主要組織相容性復(fù)合體(MHCmajorhistocompatibilitycomplex，)MHC是由一群緊密連鎖的基因群組成，定位于動(dòng)物或人某對(duì)染色體的特定區(qū)域，呈高度多態(tài)性。MHC主要組織相容性復(fù)合體(MHCmajorhistoco20MHCMHC編碼的分子表達(dá)于不同細(xì)胞表面，參與抗原遞呈，制約細(xì)胞間相互識(shí)別及誘導(dǎo)免疫應(yīng)答。MHCMHC編碼的分子表達(dá)于不同細(xì)胞表面，參與抗原遞呈21MHC限制性

１.MHCclassI（MHCI）位于一般細(xì)胞表面上，可以提供一般細(xì)胞內(nèi)的一些狀況，比如該細(xì)胞遭受病毒感染，則相病毒外膜碎片之氨基酸鏈（peptide）透過(guò)MHC提示在細(xì)胞外側(cè)，可以供殺手T細(xì)胞等辨識(shí)，以進(jìn)行撲殺。２.classⅡ（MHCⅡ）只位于抗原提呈細(xì)胞（APC)上，如巨噬細(xì)胞等。這類(lèi)提供則是細(xì)胞外部的情況，像是組織中有細(xì)菌侵入，則巨噬細(xì)胞進(jìn)行吞食后，把細(xì)菌碎片利用MHC提示給輔助T細(xì)胞，啟動(dòng)免疫反應(yīng)。３.MHCclassⅢ(MHCⅢ)主要編碼補(bǔ)體成分，腫瘤壞死因子（TNF），熱休克蛋白70（HSP70)和21羥化酶基因（CYP21A和CYP21B)。

CTL識(shí)別殺傷靶細(xì)胞是通過(guò)其表面的抗原識(shí)別受體TCR結(jié)合靶細(xì)胞。表面的抗原肽—MHC１類(lèi)分子復(fù)合物，同時(shí)通過(guò)其表面輔助受體CD８＋結(jié)合MHC１類(lèi)分子的Iｇ樣區(qū)，這個(gè)現(xiàn)象稱(chēng)為MHC限制性。MHC限制性

１.MHCclassI（MHCI）位于一22白細(xì)胞簇分化抗原—CD白細(xì)胞分化抗原是白細(xì)胞膜表面的分化抗原群（還包括血小板、血管內(nèi)皮細(xì)胞等）在正常分化成熟不同譜系（lineage）和不同階段以及活化過(guò)程中，出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)記。它們大都是穿膜的蛋白或糖蛋白，含胞膜外區(qū)、穿膜區(qū)和胞漿區(qū)。分組CD編號(hào)T細(xì)胞CD1～CD8，CD27，CD28，CD60，CD98～CDw101B細(xì)胞CD10,CD19～CD24,CD37,CD39,CD40,CD72～CD86活化細(xì)胞CD25,CDw26,CD30,CD69～CD71,CD95～CD97髓樣細(xì)胞CD9,CD11b～CD17,CD31～CD36,CD64～CD68,CD87～CD93,CD115NK/非譜系細(xì)胞CD11a,CD18,CD29,CD38,CD43,CE45～CD48,CD52～CD59,CD94血小板CD41，CD42，CD63，CD107內(nèi)皮細(xì)胞CD105，CD106，CDw109粘附分子CD11a,CD44,CD49～CD51,CD61,CD62,CD102～CD104,CDw108細(xì)胞因子受體CDw116,CD117,CD120～CD122,CD124,CD126～CDw128,CDw130白細(xì)胞簇分化抗原—CD白細(xì)胞分化抗原是白細(xì)胞膜表面的分化23適應(yīng)性抗腫瘤免疫主要效應(yīng)細(xì)胞CTL（CD8+）抗腫瘤免疫主要效應(yīng)細(xì)胞Th（CD4+）在CD8+CTL激活中起重要輔助作用，本身也產(chǎn)生細(xì)胞因子間接參與腫瘤免疫效應(yīng)。NK（CD16+CD56+）:早期抗腫瘤的重要細(xì)胞巨噬細(xì)胞γδT細(xì)胞γδT細(xì)胞是執(zhí)行固有免疫功能的T細(xì)胞，其TCR由γ和δ鏈組成。NKT細(xì)胞主要是指攜帶一恒定的T細(xì)胞受體(TCR)αβ和NK細(xì)胞活化性受體的CD4CD8/CD4+CD8T細(xì)胞Treg(CD4+CD25+)起免疫抑制作用的T細(xì)胞亞群適應(yīng)性抗腫瘤免疫主要效應(yīng)細(xì)胞CTL（CD8+）抗腫瘤免疫24腫瘤免疫治療技術(shù)的效應(yīng)細(xì)胞一、CIKCD3+CD56+細(xì)胞，被稱(chēng)為NK樣T淋巴細(xì)胞。二、EAAL、CAPRICD3+CD8+細(xì)胞、CD3+CD4+細(xì)胞、NK細(xì)胞三、ACTLCD8+CTL細(xì)胞、DC細(xì)胞四、iAPA免疫負(fù)調(diào)控因子抑制技術(shù)，SOCS1(SuppressorofCytokineSignaling1)是一種重要的免疫負(fù)調(diào)節(jié)因子(antigenpresentationattenuator,APA)，對(duì)DC細(xì)胞的抗原呈遞起負(fù)調(diào)節(jié)作用，限制抗原呈遞的時(shí)間和強(qiáng)度，從而限制自體抗腫瘤免疫反應(yīng)。注意CIK細(xì)胞是一群異質(zhì)細(xì)胞群，其中包含CTL細(xì)胞，但是CTL細(xì)胞不能單通過(guò)CD3CD8雙陽(yáng)性就能分選出來(lái)。CD3+CD8+細(xì)胞包含了兩類(lèi)CD3+CD8+CD28和CD3+CD8+CD28+前者是抑制T細(xì)胞（suppressorTcells，Ts），后者才是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxicTcell，Tc）或者（cytotoxiclymphocyte,CTL）。所以要CD3、CD8、CD28三標(biāo)才能分選出來(lái)。腫瘤免疫治療技術(shù)的效應(yīng)細(xì)胞一、CIKCD3+CD56+細(xì)胞，25第三部分腫瘤免疫細(xì)胞治療1.腫瘤逃逸機(jī)制2.腫瘤免疫治療的框架策略3.腫瘤免疫治療技術(shù)種類(lèi)4.竟?fàn)幖夹g(shù)介紹：CIK技術(shù)、EAAL/CAPRI、Provenge5.細(xì)胞治療免疫評(píng)價(jià)指標(biāo)第三部分腫瘤免疫細(xì)胞治療1.腫瘤逃逸機(jī)制26腫瘤免疫逃逸機(jī)制一、腫瘤細(xì)胞*腫瘤細(xì)胞免疫原性弱及抗原調(diào)變*腫瘤細(xì)胞表面“抗原覆蓋”或被封閉*腫瘤抗原的加工、遞呈發(fā)生障礙*MHC—Ⅰ表達(dá)低下或缺失*缺乏協(xié)同刺激因子*分泌免疫抑制因子二、宿主方面免疫功能低下、耐受、缺陷、失調(diào)機(jī)體免疫系統(tǒng)和腫瘤細(xì)胞相互作用的結(jié)果決定了腫瘤的最終演變。腫瘤免疫逃逸機(jī)制一、腫瘤細(xì)胞機(jī)體免疫系統(tǒng)和腫瘤細(xì)胞相互作用27腫瘤免疫治療的框架策略MaoJP.JournalofInternationalPharmaceuticalResearch.2013;40(2):127-36腫瘤免疫治療的框架策略MaoJP.JournalofI28腫瘤抗原表達(dá)弱,MHCⅠ分子消失;CD1～CD8，CD27，CD28，CD60，CD98～CDw101抗原呈遞細(xì)胞是指能攝取、加工、處理抗原，并將抗原信息呈遞給T淋巴細(xì)胞的一類(lèi)免疫細(xì)胞，在機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)程中發(fā)揮重要作用。*腫瘤細(xì)胞表面“抗原覆蓋”或被封閉2010;363(5):411-22*B細(xì)胞是參與體液免疫應(yīng)答的重要免疫細(xì)胞，也是重要的專(zhuān)職APC。CTL(CytotoxicTLymphocyte，Tc細(xì)胞)T細(xì)胞的效應(yīng)細(xì)胞，就是CD8+T細(xì)胞，也稱(chēng)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞。TSA只能被CD8+CTL識(shí)別，誘發(fā)T細(xì)胞免疫應(yīng)答，TAA可被B細(xì)胞識(shí)別而產(chǎn)生抗體。效應(yīng)細(xì)胞：CD4+、CD8+、NKT、NK本質(zhì)單個(gè)前列腺抗原(PAP)荷載的混合免疫細(xì)胞—Provenge,Sipleucel-T（DC,Mφ,B細(xì)胞，活化的CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞）*腫瘤細(xì)胞免疫原性弱及抗原調(diào)變Treg(CD4+CD25+)起免疫抑制作用的T細(xì)胞亞群即免疫細(xì)胞識(shí)別、攝取、處理抗原，繼而活化、增殖、分化，產(chǎn)生免疫效應(yīng)的過(guò)程。CD3+CD19-（℅）*提呈抗原、啟動(dòng)免疫應(yīng)答：在特異性免疫應(yīng)答中，絕大多數(shù)TD抗原（胸腺依賴抗原）都需經(jīng)巨噬細(xì)胞吞噬和加工處理，并與其表面的MHC分子形成抗原肽-MHC復(fù)合物，表達(dá)在細(xì)胞膜表面，提呈給T細(xì)胞。CTL識(shí)別殺傷靶細(xì)胞是通過(guò)其表面的抗原識(shí)別受體TCR結(jié)合靶細(xì)胞。2010;363(5):411-22γδT細(xì)胞γδT細(xì)胞是執(zhí)行固有免疫功能的T細(xì)胞，其TCR由γ和δ鏈組成。*單核巨噬細(xì)胞FC受體攝取CD3+CD8+細(xì)胞包含了兩類(lèi)CD3+CD8+CD28和CD3+CD8+CD28+前者是抑制T細(xì)胞（suppressorTcells，Ts），后者才是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxicTcell，Tc）或者（cytotoxiclymphocyte,CTL）。腫瘤的細(xì)胞免疫治療技術(shù)種類(lèi)

一、非特異性

LAK細(xì)胞、CIK細(xì)胞、EAAL細(xì)胞、CAPRI二、特異性*腫瘤/病毒抗原特異性T細(xì)胞：腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL,以RosenbergS為代表）腫瘤特異性T細(xì)胞克隆CAR-TACTLZCTLEBV、CMV-CTL*混合的抗原提呈細(xì)胞：

—Provenge,Sipleucel-T（

DC,Mφ,B細(xì)胞，活化的CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞）備注：CTL：腫瘤抗原特異性CTL細(xì)胞CIK：細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞LAK：淋巴因子激活的殺傷性細(xì)胞TIL：腫瘤浸潤(rùn)T淋巴細(xì)胞

腫瘤抗原表達(dá)弱,MHCⅠ分子消失;腫瘤的細(xì)胞免疫治療技術(shù)種29CIKCIK是英文cytokineinducedkiller的縮寫(xiě)，中文為細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞。它是將人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）在體外用多種細(xì)胞因子（抗CD3McAb、IL2、IFNγ、IL1α等）共同培養(yǎng)一段時(shí)間后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞。過(guò)繼性免疫細(xì)胞治療的里程碑。CIKCIK是英文cytokineinducedkill30CIK之優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)增殖活性高在培養(yǎng)的第15天數(shù)量就可以達(dá)到70多倍；殺瘤活性高，而且殺瘤活性的維持不需要外源大量的IL2的輸入來(lái)維持；殺瘤譜廣腎癌、惡性黑色素瘤、白血病、乳腺癌、直腸癌、胃癌、肺癌、食管癌、宮頸癌、卵巢癌、多發(fā)性骨髓瘤、惡性淋巴瘤（非T細(xì)胞淋巴瘤）等惡性腫瘤細(xì)胞都有顯著的殺傷活性；僅有非MHC（組織相容性復(fù)合體）限制性殺瘤作用，對(duì)占80%表達(dá)為MHC限制型的腫瘤細(xì)胞無(wú)殺傷作用，其殺傷作用受到局限。CIK之優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)增殖活性高在培養(yǎng)的第15天數(shù)量就可以達(dá)到73132CIKNKTCAPRINKTNKDCThCTL

殺傷20%腫瘤細(xì)胞殺傷20%+80%腫瘤細(xì)胞僅有非MHC限制型殺傷32CIKNKTCAPRINKTNK殺20%殺20%+3233CAPRI培養(yǎng)流程鏈?zhǔn)郊せ?3血清PBMC淋巴細(xì)胞分層液紅細(xì)胞+專(zhuān)利試劑1初步活化的淋巴細(xì)胞T-淋巴細(xì)胞B-淋巴細(xì)胞DC細(xì)胞（<5%）

CAPRI細(xì)胞T-淋巴細(xì)胞（>90%）效應(yīng)細(xì)胞：CD4+、CD8+、NKT、NKDC細(xì)胞（3-5%）

B-淋巴細(xì)胞（<1%）T-淋巴細(xì)胞B-淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞（-10%）DC細(xì)胞（<1%）

1/2PBMC:1/2未活化的PBMC2

CD3單抗培養(yǎng)1天+專(zhuān)利試劑2培養(yǎng)4天回輸6次單采機(jī)1234

單核細(xì)胞成熟為DC33CAPRI培養(yǎng)流程鏈?zhǔn)郊せ?3血清PBMC淋巴細(xì)胞分層液33SipleucelT

腫瘤免疫細(xì)胞治療的里程碑事件

2010年4月29日，美國(guó)FDA批準(zhǔn)第一個(gè)腫瘤細(xì)胞免疫治療產(chǎn)品上市，即SipleucelT本質(zhì)單個(gè)前列腺抗原(PAP)荷載的混合免疫細(xì)胞適應(yīng)癥晚期前列腺癌

SipleucelT

腫瘤免疫細(xì)胞治療的里程碑事件

201034SipuleucelT（Provenge）

顯著延長(zhǎng)晚期去勢(shì)治療失敗的前列腺癌患者的OSKantoffPWetal.NEnglJMed.2010;363(5):411-22Sipuleucel-T治療512名受試者參加的臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)移性前列腺癌，疾病進(jìn)展時(shí)間不延長(zhǎng)，但OS顯著提高4.1個(gè)月。SipuleucelT（Provenge）

顯著延長(zhǎng)晚期去勢(shì)35細(xì)胞免疫治療前后血清中細(xì)胞因子的對(duì)比

IFN-r（pg/ml）TNF-a（pg/ml）IL-10（pg/ml）IL-6（pg/ml）IL-4（pg/ml）IL-2（pg/ml）治療前7.08±2.554.20±3.273.80±0.787.53±4.107.72±3.246.25±0.60治療后88.62±196.5066.12±155.5826.36±55.0426.58±32.0149.75±99.7042.87±87.71P值0.480.890.120.040.160.05腫瘤免疫評(píng)價(jià)指標(biāo)細(xì)胞免疫治療前后血清中細(xì)胞因子的對(duì)比

IFN-rTNF-a36細(xì)胞治療前后淋巴細(xì)胞亞群的對(duì)比

CD3+CD4+CD8-（℅）CD3+CD4-CD8+（℅）CD3+CD19-（℅）CD3-CD19+（℅）CD3-CD56+（℅）CD3+CD56+（℅）CD3+HLA-DR-（℅）CD3+HLA-DR+（℅）CD3+CD28+CD8+（℅）CD3+CD4+CD25+（℅）治療前25.3±12.141.9±15.769.7±9.914.6±9.49.6±4.84.6±3.459.8±12.78.4±6.711.5±3.70.7±0.4治療后27.4±13.842.9.0±16.373.4±7.512.3±6.39.6±4.57.1±6.161.3±12.210.1±8.411.7±5.30.9±0.8P值0.7440.9020.4130.590.90.3320.8120.6630.9520.413腫瘤免疫觀察指標(biāo)細(xì)胞治療前后淋巴細(xì)胞亞群的對(duì)比

CD3+CD4+CD8-（37細(xì)胞治療前后Th1、Th2變化情況對(duì)比

Th1Th2治療前3.1±4.00.5±0.4治療后10.8±9.11.4±1.5P值0.0470.116腫瘤免疫觀察指標(biāo)細(xì)胞治療前后Th1、Th2變化情況對(duì)比

Th1Th2治療前38*腫瘤/病毒抗原特異性T細(xì)胞：Sipuleucel-T治療512名受試者參加的臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)移性前列腺癌，疾病進(jìn)展時(shí)間不延長(zhǎng)，但OS顯著提高4.染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，在某些情況下參與超敏反增殖活性高在培養(yǎng)的第15天數(shù)量就可以達(dá)到70多倍；2011年醫(yī)學(xué)及生理學(xué)獎(jiǎng)諾貝爾獲得者γδT細(xì)胞γδT細(xì)胞是執(zhí)行固有免疫功能的T細(xì)胞，其TCR由γ和δ鏈組成。腫瘤抗原能誘導(dǎo)宿主的適應(yīng)性免疫應(yīng)答，成為抗腫瘤免疫應(yīng)答的主要靶分子，也是腫瘤診斷的重要標(biāo)志分子。*混合的抗原提呈細(xì)胞：TSA只能被CD8+CTL識(shí)別，誘發(fā)T細(xì)胞免疫應(yīng)答，TAA可被B細(xì)胞識(shí)別而產(chǎn)生抗體。另一種是釋放淋巴因子，最終使免疫效應(yīng)擴(kuò)大和增強(qiáng)。是體內(nèi)唯一能活化靜息T淋巴細(xì)胞的抗原遞呈細(xì)胞，是機(jī)體免疫應(yīng)答的啟動(dòng)者B淋巴細(xì)胞參與T細(xì)胞發(fā)育、分化和激活*MHC—Ⅰ表達(dá)低下或缺失CD3+CD4+CD25+（℅）LAK：淋巴因子激活的殺傷性細(xì)胞CDw116,CD117,CD120～CD122,CD124,CD126～CDw128,CDw130腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL,以RosenbergS為代表）過(guò)繼性免疫療法存在的問(wèn)題腫瘤抗原表達(dá)弱,MHCⅠ分子消失;培養(yǎng)細(xì)胞本身的抗腫瘤作用差;腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸對(duì)MHCⅠ腫瘤細(xì)胞的限制型殺傷記憶細(xì)胞的比例*腫瘤/病毒抗原特異性T細(xì)胞：過(guò)繼性免疫療法存在的問(wèn)題腫瘤抗39腫瘤免疫基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)腫瘤免疫基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)40（優(yōu)選）腫瘤免疫基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)（優(yōu)選）腫瘤免疫基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)41一、免疫系統(tǒng)簡(jiǎn)述*免疫應(yīng)答*免疫系統(tǒng)的構(gòu)成*免疫系統(tǒng)平衡路徑一、免疫系統(tǒng)簡(jiǎn)述*免疫應(yīng)答42定義抗原物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后激發(fā)免疫系統(tǒng)識(shí)別發(fā)生一系列反應(yīng)以排除抗原的過(guò)程。即免疫細(xì)胞識(shí)別、攝取、處理抗原，繼而活化、增殖、分化，產(chǎn)生免疫效應(yīng)的過(guò)程。

免疫應(yīng)答定義抗原物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后激發(fā)免疫系統(tǒng)識(shí)別發(fā)43免疫應(yīng)答種類(lèi)及特點(diǎn)固有免疫獲得性免疫獲得形式不需要抗原需要抗原發(fā)揮作用早期快速（數(shù)分鐘-4天）4-5天后免疫原識(shí)別受體模式識(shí)別受體特異性抗原抗原識(shí)別受體免疫記憶無(wú)有舉例NK、NKT、巨噬細(xì)胞T細(xì)胞、B細(xì)胞免疫應(yīng)答種類(lèi)及特點(diǎn)固有免疫獲得性免疫獲得形式不需要抗原需要抗44免疫系統(tǒng)的構(gòu)成為什么有的癌癥患者不治而愈呢？醫(yī)學(xué)科學(xué)家初步研究表明，原來(lái)人體內(nèi)有一套完整的防衛(wèi)機(jī)構(gòu)——免疫系統(tǒng)，人體免疫系統(tǒng)的和諧是癌癥自然消退的主要原因免疫系統(tǒng)的構(gòu)成為什么有的癌癥患者不治而愈呢？醫(yī)學(xué)科學(xué)家初步研45免疫系統(tǒng)的構(gòu)成免疫器官免疫細(xì)胞免疫分子中樞外周膜型分子分泌型分子胸腺脾干細(xì)胞系TCR免疫球蛋白骨髓淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞BCR補(bǔ)體分子法氏囊（禽類(lèi)）黏膜相關(guān)淋巴組織單核巨噬細(xì)胞CD分子細(xì)胞因子皮膚相關(guān)淋巴組織其它APC（樹(shù)突細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等）MHC其它免疫細(xì)胞（粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、血小板、紅細(xì)胞等）黏附分子免疫系統(tǒng)的構(gòu)成免疫器官免疫細(xì)胞免疫分子中樞外周膜型分子分泌型46免疫系統(tǒng)平衡路徑免疫系統(tǒng)平衡路徑47Treg(CD4+CD25+)起免疫抑制作用的T細(xì)胞亞群Sipuleucel-T治療512名受試者參加的臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)移性前列腺癌，疾病進(jìn)展時(shí)間不延長(zhǎng)，但OS顯著提高4.激活T細(xì)胞和B細(xì)胞，是免疫反應(yīng)的關(guān)鍵腫瘤的細(xì)胞免疫治療技術(shù)種類(lèi)CD3+CD4+CD25+（℅）CD3-CD19+（℅）Ｔ細(xì)胞產(chǎn)生的免疫應(yīng)答是細(xì)胞免疫，細(xì)胞免疫的效應(yīng)形式主要有兩種：與靶細(xì)胞特異性結(jié)合，破壞靶細(xì)胞膜，直接殺傷靶細(xì)胞；身體中各類(lèi)免疫反應(yīng)，不論是細(xì)胞免疫還是體液免液，共同構(gòu)成了一個(gè)極為精細(xì)、復(fù)雜而完善的防衛(wèi)體系。即免疫細(xì)胞識(shí)別、攝取、處理抗原，繼而活化、增殖、分化，產(chǎn)生免疫效應(yīng)的過(guò)程。CDw116,CD117,CD120～CD122,CD124,CD126～CDw128,CDw130這類(lèi)提供則是細(xì)胞外部的情況，像是組織中有細(xì)菌侵入，則巨噬細(xì)胞進(jìn)行吞食后，把細(xì)菌碎片利用MHC提示給輔助T細(xì)胞，啟動(dòng)免疫反應(yīng)。機(jī)體免疫系統(tǒng)和腫瘤細(xì)胞相互作用的結(jié)果決定了腫瘤的最終演變。殺瘤活性高，而且殺瘤活性的維持不需要外源大量的IL2的輸入來(lái)維持；B-淋巴細(xì)胞（<1%）應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生。所以要CD3、CD8、CD28三標(biāo)才能分選出來(lái)。SipleucelT

腫瘤免疫細(xì)胞治療的里程碑事件由于NK細(xì)胞的殺傷活性無(wú)MHC限制，不依賴抗體，因此稱(chēng)為自然殺傷活性。*腫瘤抗原*抗原呈遞細(xì)胞*抗腫瘤免疫效應(yīng)細(xì)胞*二、腫瘤免疫簡(jiǎn)述Treg(CD4+CD25+)起免疫抑制作用的T細(xì)胞亞群*48腫瘤抗原

腫瘤抗原是細(xì)胞在癌變過(guò)程中出現(xiàn)的新抗原及過(guò)度表達(dá)的抗原物質(zhì)總稱(chēng)。腫瘤抗原能誘導(dǎo)宿主的適應(yīng)性免疫應(yīng)答，成為抗腫瘤免疫應(yīng)答的主要靶分子，也是腫瘤診斷的重要標(biāo)志分子。。

根據(jù)腫瘤抗原在腫瘤細(xì)胞特異或相關(guān)特異的蛋白質(zhì)分子及其含量的不同，分為腫瘤特異性抗原TSA和腫瘤相關(guān)抗原TAA兩大類(lèi)。TSA只能被CD8+CTL識(shí)別，誘發(fā)T細(xì)胞免疫應(yīng)答，TAA可被B細(xì)胞識(shí)別而產(chǎn)生抗體。腫瘤抗原腫瘤抗原是細(xì)胞在癌變過(guò)程中出現(xiàn)的新抗原及過(guò)度表49不同機(jī)制產(chǎn)生的常見(jiàn)人類(lèi)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制腫瘤抗原腫瘤基因突變產(chǎn)物突變的P53蛋白約50%人類(lèi)腫瘤癌基因產(chǎn)物過(guò)表達(dá)的Her-2/neu乳腺癌等致癌病毒產(chǎn)物HPV宮頸癌EBEBV淋巴瘤、鼻咽癌靜止的基因活化黑色素瘤抗原Mage1Mage3黑色素瘤過(guò)量表達(dá)的細(xì)胞蛋白gp100、MART黑色素瘤胚胎抗原癌胚抗原CEA結(jié)腸癌等多種腫瘤甲胎蛋白AFP肝癌組織特異分化抗原前列腺特異抗原PSA前列腺癌CD10、CD20B淋巴瘤不同機(jī)制產(chǎn)生的常見(jiàn)人類(lèi)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制腫瘤抗原腫瘤基因突變產(chǎn)50抗原呈遞細(xì)胞APC抗原呈遞細(xì)胞是指能攝取、加工、處理抗原，并將抗原信息呈遞給T淋巴細(xì)胞的一類(lèi)免疫細(xì)胞，在機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)程中發(fā)揮重要作用。根據(jù)APC細(xì)胞表面膜分子表達(dá)的特點(diǎn)和功能的差異，分以下兩類(lèi)一、專(zhuān)職APC*樹(shù)突細(xì)胞DC胞飲攝取*單核巨噬細(xì)胞FC受體攝取*B細(xì)胞mIg攝取二、非專(zhuān)職APC*內(nèi)皮細(xì)胞*成纖維細(xì)胞*上皮及間皮細(xì)胞*嗜酸性粒細(xì)胞抗原呈遞細(xì)胞APC抗原呈遞細(xì)胞是指能攝取、加工、處理抗51樹(shù)突狀細(xì)胞DCDC是人體內(nèi)最重要的、抗原遞呈能力最強(qiáng)的抗原專(zhuān)職遞呈細(xì)胞，直接或間接激活T細(xì)胞和B細(xì)胞，是免疫反應(yīng)的關(guān)鍵“決策細(xì)胞”。是體內(nèi)唯一能活化靜息T淋巴細(xì)胞的抗原遞呈細(xì)胞，是機(jī)體免疫應(yīng)答的啟動(dòng)者樹(shù)突狀細(xì)胞DCDC是人體內(nèi)最重要的、抗原遞呈能力是體內(nèi)522011年醫(yī)學(xué)及生理學(xué)獎(jiǎng)諾貝爾獲得者

樹(shù)突狀細(xì)胞(dendriticcell，DC)是由美國(guó)學(xué)者Steinman于1973年發(fā)現(xiàn)的，因其成熟時(shí)伸出許多樹(shù)突樣或偽足樣突起而得名。

DC是目前所知的機(jī)體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞，最大的特點(diǎn)是能夠刺激初始T細(xì)胞(naiveTcell)進(jìn)行增殖。因此，DC是機(jī)體免疫應(yīng)答的始動(dòng)者，在免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)中具有獨(dú)特的地位。2011年醫(yī)學(xué)及生理學(xué)獎(jiǎng)諾貝爾獲得者樹(shù)突狀細(xì)胞(de53DC的生物學(xué)功能

1.抗原提呈高水平表達(dá)MHCII類(lèi)分子；表達(dá)參與抗原攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)的特殊膜受體；有效攝取和處理抗原，然后遷移至T細(xì)胞區(qū)；活化未致敏（naive）T細(xì)胞；抗原提呈效率高，少數(shù)DC可以激活T細(xì)胞。2.參與T細(xì)胞發(fā)育、分化和激活3.參與B細(xì)胞發(fā)育、分化及激活4.免疫調(diào)節(jié)和免疫監(jiān)視功能DC的生物學(xué)功能1.抗原提呈54CD3+CD8+細(xì)胞包含了兩類(lèi)CD3+CD8+CD28和CD3+CD8+CD28+前者是抑制T細(xì)胞（suppressorTcells，Ts），后者才是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxicTcell，Tc）或者（cytotoxiclymphocyte,CTL）。根據(jù)腫瘤抗原在腫瘤細(xì)胞特異或相關(guān)特異的蛋白質(zhì)分子及其含量的不同，分為腫瘤特異性抗原TSA和腫瘤相關(guān)抗原TAA兩大類(lèi)。即免疫細(xì)胞識(shí)別、攝取、處理抗原，繼而活化、增殖、分化，產(chǎn)生免疫效應(yīng)的過(guò)程。參與T細(xì)胞發(fā)育、分化和激活應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生。CD3+CD8+細(xì)胞包含了兩類(lèi)CD3+CD8+CD28和CD3+CD8+CD28+前者是抑制T細(xì)胞（suppressorTcells，Ts），后者才是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxicTcell，Tc）或者（cytotoxiclymphocyte,CTL）。根據(jù)APC細(xì)胞表面膜分子表達(dá)的特點(diǎn)和功能的差異，分以下兩類(lèi)DC是人體內(nèi)最重要的、抗原遞呈能力*B細(xì)胞mIg攝取*單核巨噬細(xì)胞FC受體攝取細(xì)胞免疫治療前后血清中細(xì)胞因子的對(duì)比白細(xì)胞簇分化抗原—CD竟?fàn)幖夹g(shù)介紹：CIK技術(shù)、EAAL/CAPRI、ProvengeTreg(CD4+CD25+)起免疫抑制作用的T細(xì)胞亞群培養(yǎng)細(xì)胞本身的抗腫瘤作用差;CD10,CD19～CD24,CD37,CD39,CD40,CD72～CD86MHCclassI（MHCI）位于一般細(xì)胞表面上，可以提供一般細(xì)胞內(nèi)的一些狀況，比如該細(xì)胞遭受病毒感染，則相病毒外膜碎片之氨基酸鏈（peptide）透過(guò)MHC提示在細(xì)胞外側(cè)，可以供殺手T細(xì)胞等辨識(shí)，以進(jìn)行撲殺。腫瘤免疫治療的框架策略腫瘤免疫治療的框架策略活化的NK細(xì)胞可合成和分泌多種細(xì)胞因子，發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫和造血作用以及直接殺傷靶細(xì)胞的作用?？鼓[瘤免疫主要效應(yīng)細(xì)胞——CTLCTL(CytotoxicTLymphocyte，Tc細(xì)胞)T細(xì)胞的效應(yīng)細(xì)胞，就是CD8+T細(xì)胞，也稱(chēng)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞。具有多種生物學(xué)功能，能特異性殺傷帶抗原的靶細(xì)胞，也能輔助或抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體。Ｔ細(xì)胞產(chǎn)生的免疫應(yīng)答是細(xì)胞免疫，細(xì)胞免疫的效應(yīng)形式主要有兩種：與靶細(xì)胞特異性結(jié)合，破壞靶細(xì)胞膜，直接殺傷靶細(xì)胞；另一種是釋放淋巴因子，最終使免疫效應(yīng)擴(kuò)大和增強(qiáng)。Tc細(xì)胞的殺傷力較強(qiáng)，可反復(fù)殺傷靶細(xì)胞，而且在殺傷靶細(xì)胞的過(guò)程中本身不受損傷。CD3+CD8+細(xì)胞包含了兩類(lèi)CD3+CD8+CD28和CD55B淋巴細(xì)胞*B細(xì)胞是參與體液免疫應(yīng)答的重要免疫細(xì)胞，也是重要的專(zhuān)職APC。成熟的B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞收到吞噬細(xì)胞提交的抗原后，開(kāi)始分化和成熟。*B細(xì)胞高表達(dá)MHC—Ⅱ類(lèi)分子，能有效呈遞抗原給CD4+T細(xì)胞，不僅激活Th細(xì)胞，同時(shí)產(chǎn)生各種細(xì)胞因子，細(xì)胞因子再激活B細(xì)胞和T細(xì)胞。激活的B細(xì)胞變成漿細(xì)胞，大量繁殖增生，產(chǎn)生大量可以中和抗原的抗體。身體中各類(lèi)免疫反應(yīng)，不論是細(xì)胞免疫還是體液免液，共同構(gòu)成了一個(gè)極為精細(xì)、復(fù)雜而完善的防衛(wèi)體系。B淋巴細(xì)胞56ＮＫ細(xì)胞自然殺傷細(xì)胞(naturalkillercell，NK)是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞，不僅與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生。Nk細(xì)胞是固有免疫細(xì)胞，不具備特異性，表面無(wú)受體由于NK細(xì)胞的殺傷活性無(wú)MHC限制，不依賴抗體，因此稱(chēng)為自然殺傷活性。⒈識(shí)別靶細(xì)胞NK細(xì)胞識(shí)別靶細(xì)胞是非特異性的，這與CTL識(shí)別靶細(xì)胞機(jī)理不同，但確切的機(jī)理尚未明了。２.活化的NK細(xì)胞可合成和分泌多種細(xì)胞因子，發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫和造血作用以及直接殺傷靶細(xì)胞的作用。ＮＫ細(xì)胞自然殺傷細(xì)胞(naturalkillercell57單核巨噬細(xì)胞Mφ單核巨噬細(xì)胞具有抗感染、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等重要作用，是機(jī)體非特異性免疫防御中的重要細(xì)胞。*抗腫瘤：巨噬細(xì)胞被某些細(xì)胞因子如IFN-γ激活后能有效地殺傷腫瘤細(xì)胞，是參與免疫監(jiān)視的重要效應(yīng)細(xì)胞。*免疫調(diào)節(jié)：在特異性免疫應(yīng)答中，巨噬細(xì)胞可分泌釋放多種細(xì)胞因子，參與免疫調(diào)節(jié)。*提呈抗原、啟動(dòng)免疫應(yīng)答：在特異性免疫應(yīng)答中，絕大多數(shù)TD抗原（胸腺依賴抗原）都需經(jīng)巨噬細(xì)胞吞噬和加工處理，并與其表面的MHC分子形成抗原肽-MHC復(fù)合物，表達(dá)在細(xì)胞膜表面，提呈給T細(xì)胞。巨噬細(xì)胞表面有很多黏附分子，可與T細(xì)胞表面的協(xié)同刺激因子受體結(jié)合，產(chǎn)生協(xié)同刺激信號(hào)，誘導(dǎo)T細(xì)胞的活化，啟動(dòng)免疫應(yīng)答。單核巨噬細(xì)胞Mφ單核巨噬細(xì)胞具有抗感染、抗腫瘤58MHC主要組織相容性復(fù)合體(MHCmajorhistocompatibilitycomplex，)MHC是由一群緊密連鎖的基因群組成，定位于動(dòng)物或人某對(duì)染色體的特定區(qū)域，呈高度多態(tài)性。MHC主要組織相容性復(fù)合體(MHCmajorhistoco59MHCMHC編碼的分子表達(dá)于不同細(xì)胞表面，參與抗原遞呈，制約細(xì)胞間相互識(shí)別及誘導(dǎo)免疫應(yīng)答。MHCMHC編碼的分子表達(dá)于不同細(xì)胞表面，參與抗原遞呈60MHC限制性

１.MHCclassI（MHCI）位于一般細(xì)胞表面上，可以提供一般細(xì)胞內(nèi)的一些狀況，比如該細(xì)胞遭受病毒感染，則相病毒外膜碎片之氨基酸鏈（peptide）透過(guò)MHC提示在細(xì)胞外側(cè)，可以供殺手T細(xì)胞等辨識(shí)，以進(jìn)行撲殺。２.classⅡ（MHCⅡ）只位于抗原提呈細(xì)胞（APC)上，如巨噬細(xì)胞等。這類(lèi)提供則是細(xì)胞外部的情況，像是組織中有細(xì)菌侵入，則巨噬細(xì)胞進(jìn)行吞食后，把細(xì)菌碎片利用MHC提示給輔助T細(xì)胞，啟動(dòng)免疫反應(yīng)。３.MHCclassⅢ(MHCⅢ)主要編碼補(bǔ)體成分，腫瘤壞死因子（TNF），熱休克蛋白70（HSP70)和21羥化酶基因（CYP21A和CYP21B)。

CTL識(shí)別殺傷靶細(xì)胞是通過(guò)其表面的抗原識(shí)別受體TCR結(jié)合靶細(xì)胞。表面的抗原肽—MHC１類(lèi)分子復(fù)合物，同時(shí)通過(guò)其表面輔助受體CD８＋結(jié)合MHC１類(lèi)分子的Iｇ樣區(qū)，這個(gè)現(xiàn)象稱(chēng)為MHC限制性。MHC限制性

１.MHCclassI（MHCI）位于一61白細(xì)胞簇分化抗原—CD白細(xì)胞分化抗原是白細(xì)胞膜表面的分化抗原群（還包括血小板、血管內(nèi)皮細(xì)胞等）在正常分化成熟不同譜系（lineage）和不同階段以及活化過(guò)程中，出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)記。它們大都是穿膜的蛋白或糖蛋白，含胞膜外區(qū)、穿膜區(qū)和胞漿區(qū)。分組CD編號(hào)T細(xì)胞CD1～CD8，CD27，CD28，CD60，CD98～CDw101B細(xì)胞CD10,CD19～CD24,CD37,CD39,CD40,CD72～CD86活化細(xì)胞CD25,CDw26,CD30,CD69～CD71,CD95～CD97髓樣細(xì)胞CD9,CD11b～CD17,CD31～CD36,CD64～CD68,CD87～CD93,CD115NK/非譜系細(xì)胞CD11a,CD18,CD29,CD38,CD43,CE45～CD48,CD52～CD59,CD94血小板CD41，CD42，CD63，CD107內(nèi)皮細(xì)胞CD105，CD106，CDw109粘附分子CD11a,CD44,CD49～CD51,CD61,CD62,CD102～CD104,CDw108細(xì)胞因子受體CDw116,CD117,CD120～CD122,CD124,CD126～CDw128,CDw130白細(xì)胞簇分化抗原—CD白細(xì)胞分化抗原是白細(xì)胞膜表面的分化62適應(yīng)性抗腫瘤免疫主要效應(yīng)細(xì)胞CTL（CD8+）抗腫瘤免疫主要效應(yīng)細(xì)胞Th（CD4+）在CD8+CTL激活中起重要輔助作用，本身也產(chǎn)生細(xì)胞因子間接參與腫瘤免疫效應(yīng)。NK（CD16+CD56+）:早期抗腫瘤的重要細(xì)胞巨噬細(xì)胞γδT細(xì)胞γδT細(xì)胞是執(zhí)行固有免疫功能的T細(xì)胞，其TCR由γ和δ鏈組成。NKT細(xì)胞主要是指攜帶一恒定的T細(xì)胞受體(TCR)αβ和NK細(xì)胞活化性受體的CD4CD8/CD4+CD8T細(xì)胞Treg(CD4+CD25+)起免疫抑制作用的T細(xì)胞亞群適應(yīng)性抗腫瘤免疫主要效應(yīng)細(xì)胞CTL（CD8+）抗腫瘤免疫63腫瘤免疫治療技術(shù)的效應(yīng)細(xì)胞一、CIKCD3+CD56+細(xì)胞，被稱(chēng)為NK樣T淋巴細(xì)胞。二、EAAL、CAPRICD3+CD8+細(xì)胞、CD3+CD4+細(xì)胞、NK細(xì)胞三、ACTLCD8+CTL細(xì)胞、DC細(xì)胞四、iAPA免疫負(fù)調(diào)控因子抑制技術(shù)，SOCS1(SuppressorofCytokineSignaling1)是一種重要的免疫負(fù)調(diào)節(jié)因子(antigenpresentationattenuator,APA)，對(duì)DC細(xì)胞的抗原呈遞起負(fù)調(diào)節(jié)作用，限制抗原呈遞的時(shí)間和強(qiáng)度，從而限制自體抗腫瘤免疫反應(yīng)。注意CIK細(xì)胞是一群異質(zhì)細(xì)胞群，其中包含CTL細(xì)胞，但是CTL細(xì)胞不能單通過(guò)CD3CD8雙陽(yáng)性就能分選出來(lái)。CD3+CD8+細(xì)胞包含了兩類(lèi)CD3+CD8+CD28和CD3+CD8+CD28+前者是抑制T細(xì)胞（suppressorTcells，Ts），后者才是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxicTcell，Tc）或者（cytotoxiclymphocyte,CTL）。所以要CD3、CD8、CD28三標(biāo)才能分選出來(lái)。腫瘤免疫治療技術(shù)的效應(yīng)細(xì)胞一、CIKCD3+CD56+細(xì)胞，64第三部分腫瘤免疫細(xì)胞治療1.腫瘤逃逸機(jī)制2.腫瘤免疫治療的框架策略3.腫瘤免疫治療技術(shù)種類(lèi)4.竟?fàn)幖夹g(shù)介紹：CIK技術(shù)、EAAL/CAPRI、Provenge5.細(xì)胞治療免疫評(píng)價(jià)指標(biāo)第三部分腫瘤免疫細(xì)胞治療1.腫瘤逃逸機(jī)制65腫瘤免疫逃逸機(jī)制一、腫瘤細(xì)胞*腫瘤細(xì)胞免疫原性弱及抗原調(diào)變*腫瘤細(xì)胞表面“抗原覆蓋”或被封閉*腫瘤抗原的加工、遞呈發(fā)生障礙*MHC—Ⅰ表達(dá)低下或缺失*缺乏協(xié)同刺激因子*分泌免疫抑制因子二、宿主方面免疫功能低下、耐受、缺陷、失調(diào)機(jī)體免疫系統(tǒng)和腫瘤細(xì)胞相互作用的結(jié)果決定了腫瘤的最終演變。腫瘤免疫逃逸機(jī)制一、腫瘤細(xì)胞機(jī)體免疫系統(tǒng)和腫瘤細(xì)胞相互作用66腫瘤免疫治療的框架策略MaoJP.JournalofInternationalPharmaceuticalResearch.2013;40(2):127-36腫瘤免疫治療的框架策略MaoJP.JournalofI67腫瘤抗原表達(dá)弱,MHCⅠ分子消失;CD1～CD8，CD27，CD28，CD60，CD98～CDw101抗原呈遞細(xì)胞是指能攝取、加工、處理抗原，并將抗原信息呈遞給T淋巴細(xì)胞的一類(lèi)免疫細(xì)胞，在機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)程中發(fā)揮重要作用。*腫瘤細(xì)胞表面“抗原覆蓋”或被封閉2010;363(5):411-22*B細(xì)胞是參與體液免疫應(yīng)答的重要免疫細(xì)胞，也是重要的專(zhuān)職APC。CTL(CytotoxicTLymphocyte，Tc細(xì)胞)T細(xì)胞的效應(yīng)細(xì)胞，就是CD8+T細(xì)胞，也稱(chēng)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞。TSA只能被CD8+CTL識(shí)別，誘發(fā)T細(xì)胞免疫應(yīng)答，TAA可被B細(xì)胞識(shí)別而產(chǎn)生抗體。效應(yīng)細(xì)胞：CD4+、CD8+、NKT、NK本質(zhì)單個(gè)前列腺抗原(PAP)荷載的混合免疫細(xì)胞—Provenge,Sipleucel-T（DC,Mφ,B細(xì)胞，活化的CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞）*腫瘤細(xì)胞免疫原性弱及抗原調(diào)變Treg(CD4+CD25+)起免疫抑制作用的T細(xì)胞亞群即免疫細(xì)胞識(shí)別、攝取、處理抗原，繼而活化、增殖、分化，產(chǎn)生免疫效應(yīng)的過(guò)程。CD3+CD19-（℅）*提呈抗原、啟動(dòng)免疫應(yīng)答：在特異性免疫應(yīng)答中，絕大多數(shù)TD抗原（胸腺依賴抗原）都需經(jīng)巨噬細(xì)胞吞噬和加工處理，并與其表面的MHC分子形成抗原肽-MHC復(fù)合物，表達(dá)在細(xì)胞膜表面，提呈給T細(xì)胞。CTL識(shí)別殺傷靶細(xì)胞是通過(guò)其表面的抗原識(shí)別受體TCR結(jié)合靶細(xì)胞。2010;363(5):411-22γδT細(xì)胞γδT細(xì)胞是執(zhí)行固有免疫功能的T細(xì)胞，其TCR由γ和δ鏈組成。*單核巨噬細(xì)胞FC受體攝取CD3+CD8+細(xì)胞包含了兩類(lèi)CD3+CD8+CD28和CD3+CD8+CD28+前者是抑制T細(xì)胞（suppressorTcells，Ts），后者才是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxicTcell，Tc）或者（cytotoxiclymphocyte,CTL）。腫瘤的細(xì)胞免疫治療技術(shù)種類(lèi)

一、非特異性

LAK細(xì)胞、CIK細(xì)胞、EAAL細(xì)胞、CAPRI二、特異性*腫瘤/病毒抗原特異性T細(xì)胞：腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL,以RosenbergS為代表）腫瘤特異性T細(xì)胞克隆CAR-TACTLZCTLEBV、CMV-CTL*混合的抗原提呈細(xì)胞：

—Provenge,Sipleucel-T（

DC,Mφ,B細(xì)胞，活化的CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞）備注：CTL：腫瘤抗原特異性CTL細(xì)胞CIK：細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞LAK：淋巴因子激活的殺傷性細(xì)胞TIL：腫瘤浸潤(rùn)T淋巴細(xì)胞

腫瘤抗原表達(dá)弱,MHCⅠ分子消失;腫瘤的細(xì)胞免疫治療技術(shù)種68CIKCIK是英文cytokineinducedkiller的縮寫(xiě)，中文為細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞。它是將人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）在體外用多種細(xì)胞因子（抗CD3McAb、IL2、IFNγ、IL1α等）共同培養(yǎng)一段時(shí)間后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞。過(guò)繼性免疫細(xì)胞治療的里程碑。CIKCIK是英文cytokineinducedkill69CIK之優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)增殖活性高在培養(yǎng)的第15天數(shù)量就可以達(dá)到70多倍；殺瘤活性高，而且殺瘤活性的維持不需要外源大量的IL2的輸入來(lái)維持；殺瘤譜廣腎癌、惡性黑色素瘤、白血病、乳腺癌、直腸癌、胃癌、肺癌、食管癌、宮頸癌、卵巢癌、多發(fā)性骨髓瘤、惡性淋巴瘤（非T細(xì)胞淋巴瘤）等惡性腫瘤細(xì)胞都有顯著的殺傷活性；僅有非MHC（組織相容性復(fù)合體）限制性殺瘤作用，對(duì)占80%表達(dá)為MHC限制型的腫瘤細(xì)胞無(wú)殺傷作用，其殺傷作用受到局限。CIK之優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)增殖活性高在培養(yǎng)的第15天數(shù)量就可以達(dá)到77071CIKNKTCAPRINKTNKDCThCTL

殺傷20%腫瘤細(xì)胞殺傷20%+80%腫瘤細(xì)胞僅有非MHC限制型殺傷32CIKNKTCAPRINKTNK殺20%殺20%+7172CAPRI培養(yǎng)流程鏈?zhǔn)郊せ?2血清PBMC淋巴細(xì)胞分層液紅細(xì)胞+專(zhuān)利試劑1初步活化的淋巴細(xì)胞T-淋巴細(xì)胞B-淋巴細(xì)胞DC細(xì)胞（<5%）

CAPR