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環(huán)境工程微生物學(xué)主要內(nèi)容微生物的遺傳(重點(diǎn))微生物的變異基因重組遺傳工程技術(shù)在環(huán)保中的應(yīng)用(重點(diǎn))微生物的遺傳和變異(重點(diǎn))微生物的遺傳遺傳和變異是一切生物最本質(zhì)的屬性。遺傳(保守性/相對(duì)性)變異(絕對(duì)性)——育種/廢水(氣、固廢)降解菌的篩選遺傳和變異——進(jìn)化遺傳學(xué):研究生物遺傳和變異現(xiàn)象的學(xué)科。微生物的遺傳一、遺傳和變異的物質(zhì)基礎(chǔ)--DNA三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)(一)經(jīng)典轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(transformation):(二)噬菌體感染實(shí)驗(yàn)(三)植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)經(jīng)典轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)SR噬菌體感染實(shí)驗(yàn)噬菌體1952.赫爾希和切斯
1952年赫爾希和切斯噬菌體侵染大腸桿菌實(shí)驗(yàn)噬菌體感染實(shí)驗(yàn)1、DNA的結(jié)構(gòu)DNA由兩條多個(gè)核苷酸組成的鏈配對(duì)而成,兩條鏈彼此互補(bǔ),以右手螺旋的方式圍繞一根主軸而互相盤(pán)繞形成。DNA的結(jié)構(gòu)與復(fù)制核苷酸的結(jié)構(gòu)DNA的結(jié)構(gòu)DNA分子結(jié)構(gòu)DNA的結(jié)構(gòu)DNA的結(jié)構(gòu)A~T,G~C互相間通過(guò)
氫鍵連接。DNA的存在形式染色體(DNA和蛋白)1.基因是一個(gè)具有遺傳因子效應(yīng)的DNA片段,它是遺傳物質(zhì)的最小功能單位。是生物染色體上的一段DNA,它儲(chǔ)存了遺傳信息,又具有自我復(fù)制的能力?;蚓哂刑囟ǖ膲A基順序,即核苷酸順序,它不僅可以決定生物的某一個(gè)性狀,而且還具有調(diào)控其他基因表達(dá)活性的功能?;蚣仁且粋€(gè)結(jié)構(gòu)單位,也是一個(gè)功能單位?;颉z傳因子基因控制遺傳性狀,但不等于遺傳性狀。任何一個(gè)遺傳性狀的表達(dá)都是在基因控制下的個(gè)體發(fā)育的結(jié)果。從基因型到表現(xiàn)型需要通過(guò)酶催化的代謝活動(dòng)來(lái)實(shí)現(xiàn)?;蛑苯涌刂泼傅暮铣?,控制新陳代謝,從而決定遺傳性狀的表現(xiàn)?;颉z傳因子?1、DNA的復(fù)制DNA具有獨(dú)特的半保留式的自我復(fù)制能力,確保了DNA復(fù)制精確,并保證一切生物遺傳性的相對(duì)穩(wěn)定。DNA的復(fù)制DNA的復(fù)制2、DNA的復(fù)制的酶(1)解旋酶(2)DNA聚合酶(3)DNA連接酶能使細(xì)胞中游離的四種脫氧核糖核苷三磷酸(dATP,dCTP,dTTP.dGTP)合成DNA(有適量DNA和Mg2+);性質(zhì):模板指導(dǎo)性的酶
5’---3’
產(chǎn)物DNA和天然的DNA性質(zhì)相同DNA的變性:解鏈溫度Tm:DNA的復(fù)性:DNA的變性和復(fù)性DNA的變性mRNA叫信使RNA,tRNA叫轉(zhuǎn)移RNA,rRNA(核糖體RNA)反義RNA起調(diào)節(jié)作用,決定mRNA翻譯合成速度。由mRNA、tRNA、反義RNA和rRNA協(xié)作合成蛋白質(zhì)。RNA及其作用
DNA分子的四種堿基A(腺嘌呤)T(胸腺嘧啶)G(鳥(niǎo)嘌呤)C(胞嘧啶)
RNA分子的四種堿基A(腺嘌呤)
U(尿嘧啶)G(鳥(niǎo)嘌呤)C(胞嘧啶)蛋白質(zhì)合成蛋白質(zhì)合成mRNAmRNA+tRNAmRNA+tRNA+rRNA蛋白質(zhì)合成64蛋白質(zhì)合成mRNA合成mRNA合成1.識(shí)別功能(起始;終止)2.解旋功能特點(diǎn):1.RNA很短2.單鏈蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)合成過(guò)程:
轉(zhuǎn)錄mRNA:由DNA轉(zhuǎn)錄成mRNA,同時(shí)也轉(zhuǎn)錄成其他幾種RNA;
翻譯:由tRNA完成;
蛋白質(zhì)合成:依托核糖體,合成多肽,
經(jīng)修飾、折疊、加工,最終生成具有特定功能的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)的合成第二節(jié)微生物的變異一、變異的實(shí)質(zhì)在微生物遺傳過(guò)程中,由于某種因素的影響,DNA上的堿基對(duì)發(fā)生差錯(cuò),出現(xiàn)堿基的缺失、置換或插入,改變了基因內(nèi)原有的堿基順序,導(dǎo)致后代性狀的改變。當(dāng)這種改變可以遺傳時(shí),就是發(fā)生了突變。所以說(shuō)基因突變是微生物發(fā)生變異的實(shí)質(zhì)?!扒度肴玖稀保哼灌こ?,原黃素、溴化乙錠二、突變的類(lèi)型突變的類(lèi)型自發(fā)突變
誘發(fā)突變第二節(jié)微生物的變異物理誘變,如紫外線(xiàn)?;瘜W(xué)誘變,利用化學(xué)物質(zhì)促進(jìn)突變。紫外線(xiàn)的作用機(jī)理:形成T的二聚體,從而導(dǎo)致DNA復(fù)制出現(xiàn)錯(cuò)誤。光復(fù)活性:核苷酸切除修復(fù)酶遺傳病、癌癥突變的應(yīng)用可進(jìn)行定向培育和馴化。在環(huán)境工程中,常采用定向培育的方法來(lái)培育菌種(馴化)。第二節(jié)微生物的變異誘變育種三、基因重組基因重組是改變微生物遺傳性狀的另一途徑。把來(lái)自不同性狀的個(gè)體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到一起,使基因重新組合,產(chǎn)生新品種,稱(chēng)為基因重組或遺傳重組。重組是分子水平上的一個(gè)概念,可以理解為遺傳物質(zhì)分子水平的雜交。第三節(jié)基因重組基因工程基因工程過(guò)程示意圖①?gòu)募?xì)胞中分離出DNA①②③④⑤⑥②限制酶截取DNA片斷③分離大腸桿菌中的質(zhì)粒④DNA重組⑤用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌⑥培養(yǎng)大腸桿菌克隆大量基因剪切酶連接酶修飾酶遺傳工程技術(shù)在環(huán)保中的應(yīng)用(1)石油降解功能菌的構(gòu)建(2)烴類(lèi)和抗汞質(zhì)粒菌的構(gòu)建(3)脫色工程菌的構(gòu)建(4)特殊環(huán)境下的Q5T工程菌的構(gòu)建(5)人工合成有機(jī)物工程菌的構(gòu)建(6)重金屬污染的基因工程修復(fù)
基因工程在環(huán)保方面的應(yīng)用(1)石油降解功能菌的構(gòu)建環(huán)境污染凈化
20世紀(jì)70年代美國(guó)生物學(xué)家Chakrabarty等對(duì)假單胞桿菌屬的不同菌種分解烴類(lèi)化臺(tái)物的遺傳學(xué)進(jìn)行了大量研究,發(fā)現(xiàn)假單胞桿菌屬的許多菌種的細(xì)胞內(nèi)含有某種降解質(zhì)粒,它們控制著石油中烴類(lèi)降解菌酶的合成?;蚬こ淘诃h(huán)保方面的應(yīng)用(2)烴類(lèi)和抗汞質(zhì)粒菌的構(gòu)建Chakrabartv等人同時(shí)將著油的假單胞菌體內(nèi)能夠陣解辛烷、乙烷、癸烷功能的0CT質(zhì)粒和抗汞質(zhì)粒MER向時(shí)轉(zhuǎn)移到對(duì)20mg/L汞敏感的惡臭假單胞菌體內(nèi),結(jié)果使對(duì)汞敏感的惡臭假單胞菌轉(zhuǎn)變成了能抗50—70mg/L汞,且能同時(shí)分解烷烴的抗汞質(zhì)粒菌?;蚬こ淘诃h(huán)保方面的應(yīng)用(3)脫色工程菌的構(gòu)建基因工程在環(huán)保方面的應(yīng)用
目前,已經(jīng)將含有降解偶氮染料質(zhì)粒的編號(hào)K24和K46兩株假單胞菌通過(guò)質(zhì)粒轉(zhuǎn)移技術(shù)培育出兼有分解兩種偶氮染料功能的脫色工程菌。(4)特殊環(huán)境下的Q5T工程菌的構(gòu)建基因工程在環(huán)保方面的應(yīng)用
Q5T工程菌是由將嗜溫菌pseudomounasputdapawl中能降解甲苯和二甲苯的質(zhì)粒TOL轉(zhuǎn)移到嗜冷菌Q5
菌株體內(nèi)構(gòu)建而成的。
該Q5T工程菌在0攝氏度時(shí)仍能正常利用濃度為1000mg/L的甲苯作為碳源,這對(duì)寒冷地區(qū)進(jìn)行廢水生物處理既有十分重要的意義。(5)人工合成有機(jī)物工程菌的構(gòu)建A.多氯聯(lián)苯PCBs基因工程在環(huán)保方面的應(yīng)用基因工程在環(huán)保方面的應(yīng)用B.除草劑:阿特拉津B.除草劑:阿特拉津B.除草劑:
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