非洲豬瘟的流行病學(xué)和病理學(xué)分析,畜牧獸醫(yī)論文

非洲豬瘟的流行病學(xué)和病理學(xué)分析,畜牧獸醫(yī)論文摘要：非洲豬瘟(Africanswinefever,ASF)是由非洲豬瘟病毒(Africanswinefevervirus,ASFV)感染所致的豬的一種病程短、病死率高的急性傳染病,其病理變化比豬瘟更嚴(yán)重,特征之一是淋巴細(xì)胞有明顯的核崩解現(xiàn)象[1]。非洲豬瘟不感染人,不會(huì)對(duì)人類(lèi)生命構(gòu)成直接威脅,但人類(lèi)不可因而而輕視,因ASF對(duì)食品安全會(huì)帶來(lái)很大的影響,疫情的發(fā)生會(huì)引起豬群的嚴(yán)重疾病甚至死亡,造成生產(chǎn)機(jī)能的急劇下降,間接影響人類(lèi)健康。本文將帶領(lǐng)讀者了解非洲豬瘟的發(fā)生與流行,著重闡述非洲豬瘟的病原學(xué)與實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)。本文關(guān)鍵詞語(yǔ)：非洲豬瘟;流行病學(xué);病原學(xué);實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù);1、非洲豬瘟的發(fā)生與流行非洲豬瘟緣起非洲,據(jù)資料顯示,20世紀(jì)初,東部非洲的肯尼亞初次確認(rèn)非洲豬瘟疫情,此后,陸續(xù)蔓延至歐美。近年來(lái),疫情更是向亞洲侵襲,毫不諱言,對(duì)于非洲豬瘟,人類(lèi)若控制不力,疫情還有向周邊國(guó)家乃至全球擴(kuò)張的趨勢(shì)。自2021年8月3日沈陽(yáng)市確診非洲豬瘟疫情[2]以來(lái),如今,全國(guó)已有10余個(gè)省份頒布非洲豬瘟疫情。豬肉是我們國(guó)家居民生活消費(fèi)的主要肉品,廣泛的豬肉貿(mào)易流通量,更是有利于疫情的擴(kuò)散,這對(duì)我們國(guó)家生豬養(yǎng)殖業(yè)和居民身體健康造成了宏大危害,應(yīng)引起我們國(guó)家民眾高度重視。2、非洲豬瘟病原學(xué)2.1、分類(lèi)ASFV經(jīng)國(guó)際病毒分類(lèi)委員會(huì)屢次討論,歸為雙鏈DNA病毒目(dsDNA)、非洲豬瘟病毒科(Asfarviridae)、非洲豬瘟病毒屬(Asfivirus)。當(dāng)前,ASFV是非洲豬瘟病毒科的唯一成員。2.2、病毒的形態(tài)與構(gòu)造ASFV顆粒[3]為正20面體對(duì)稱(chēng)構(gòu)造,核心是DNA,直徑為70～100nm,成熟的病毒顆粒外周有兩層以上的衣殼,衣殼外有囊膜。一條線性雙鏈DNA分子構(gòu)成了ASFV的基因組。病毒粒子主要由5個(gè)多肽組成,空衣殼含有2個(gè)多肽,分別為vp72(MW76000)和vp73(MW50000),膜由vp1(MW125000)和vp4(MW44000)組成,vp5(mw39000)可能與病毒的DNA有關(guān)。3、非洲豬瘟流行病學(xué)3.1、傳染源以病豬、患病后康復(fù)豬和隱形感染豬為主。病豬在該病發(fā)生前1～2d可經(jīng)鼻咽部排出。3.2、傳播途徑主要通過(guò)直接或間接接觸帶毒的病豬[4]而感染,通過(guò)靜脈、肌肉、腹腔和鼻內(nèi)接種含毒物品均可導(dǎo)致發(fā)病,帶毒豬的排泄物或尸體也是傳播媒介之一。蜱、蚤、虱是ASFV的蟲(chóng)源媒介,病毒存在于它們的膽管中,通過(guò)吸食血液散播疫情。3.3、易感動(dòng)物各種品種和日齡的豬以及改進(jìn)野豬都可感染。3.4、發(fā)病異常感覺(jué)和狀態(tài)潛伏期5～15d,主要伴隨高熱、發(fā)紺、淋逢迎及內(nèi)臟嚴(yán)重出血。豬只感染后,體溫短時(shí)間升至42℃并持續(xù)高熱狀態(tài),隨后體溫下降有精神沉郁、厭食、腹瀉、便血、呼吸困難的異常感覺(jué)和狀態(tài)。最急性型會(huì)有無(wú)明顯異常感覺(jué)和狀態(tài)的忽然死亡[5]。急性型的病豬皮膚外表呈現(xiàn)出血點(diǎn),可視黏膜潮紅,眼鼻有黏液,糞便外表有血液。受孕母豬在妊娠的任一階段均可流產(chǎn)。亞急性型以及慢性型體溫波動(dòng)無(wú)規(guī)律,呼吸困難,關(guān)節(jié)腫脹,且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。4、非洲豬瘟實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)發(fā)病豬和病死豬的全血、組織、分泌物和排泄物中均可能含有病毒,因內(nèi)臟器官的廣泛性出血異常感覺(jué)和狀態(tài)明顯,故在采集病料時(shí)需先通過(guò)剖檢觀察各器官組織的病理變化,結(jié)合生前檢查進(jìn)行綜合分析,采集的臟器應(yīng)盡可能全面。4.1、采集樣品4.1.1、病原學(xué)檢測(cè)樣品抗凝血液的采集:由豬耳靜脈或前腔靜脈取血。用注射器汲取枸櫞酸鈉或肝素抗凝劑,靜脈采血5mL,顛倒、轉(zhuǎn)動(dòng)混勻后,注入試管或小瓶中加塞[6]。鼻液的采集:用滅菌棉棒蘸取鼻黏膜上的分泌物,置于滅菌試管內(nèi)或加有抗生素的肉湯中。脾、淋逢迎、肝、肺等本質(zhì)器官的采集:華而不實(shí),脾臟為首選器官,淋逢迎次之。肉眼所見(jiàn)有病理變化或無(wú)明顯變化的脾臟、淋逢迎都應(yīng)在采集樣品范圍內(nèi)。以無(wú)菌操作剪去直徑1cm左右的組織樣品,參加含100g/mL青霉素和鏈霉素的PBS溶液中,4℃保存運(yùn)輸,到達(dá)實(shí)驗(yàn)室后,立即放入-80℃低溫冰箱內(nèi)冷凍保存。除此之外,病豬糞便、仔豬尸體和流產(chǎn)胎兒以及蜱可以送檢。4.1.2、血清學(xué)檢測(cè)樣品針對(duì)不同病程的豬應(yīng)分別采集并做好標(biāo)識(shí),避免樣品混亂影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如上述抗凝血液采集,無(wú)菌采血3～5mL,室溫放置12～24h,收集血清,置一消毒的青霉素小瓶或樣品管內(nèi),封口、標(biāo)識(shí)后送檢。4.2、血清學(xué)診斷技術(shù)4.2.1、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)在國(guó)際貿(mào)易中,ASFV的檢測(cè)指定方式為ELISA。好像其他病原體的ELISA試驗(yàn)方式方法,使用滅活的全病毒或表示出的抗原包被固定在固相載體上(聚苯乙烯板)。當(dāng)血清樣品中含有ASFV特異性抗體時(shí),會(huì)與吸附在板上的抗原結(jié)合。相反,若不含特異性抗體,則不能與抗原結(jié)合。假如參加針對(duì)包被抗原的特異性酶標(biāo)單抗,則會(huì)與血清中的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。若血清中含有非洲豬瘟特異性抗體,酶標(biāo)單抗就不能與包被的抗原結(jié)合,假如血清中不含特異性抗體,酶標(biāo)單抗就與抗原結(jié)合。洗滌后,除去酶標(biāo)板中未結(jié)合的物質(zhì),參加特異性底物后,假如存在酶標(biāo)單抗,就會(huì)出現(xiàn)顏色反響。4.3、病原學(xué)診斷技術(shù)4.3.1、血細(xì)胞吸附試驗(yàn)(HaemadsoptionTest,HAD)當(dāng)懷疑有ASF發(fā)生時(shí),可將以下樣品送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行血細(xì)胞吸附試驗(yàn):抗凝血(用肝素或EDTA作抗凝劑)、脾臟、扁桃體、腎臟、淋逢迎。豬血液中的紅細(xì)胞能吸附在體外培養(yǎng)的感染ASFV的巨噬細(xì)胞外表,通過(guò)將病料組織感染巨噬細(xì)胞后,在細(xì)胞病變前參加紅細(xì)胞,若在巨噬細(xì)胞周?chē)鷺?gòu)成典型的玫瑰花環(huán),則證明病料組織中含有ASFV。HAD實(shí)驗(yàn)特異性較高,但會(huì)有些毒株迅速誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生病變而無(wú)法觀察到血細(xì)胞吸附現(xiàn)象。4.3.2、直接免疫熒光檢測(cè)ASFV抗原(Fluorescentantibodytest,FAT)將抗ASFV特異性抗體用熒光素標(biāo)記,在一定條件下與相應(yīng)抗原反響,檢測(cè)ASFV抗原。該方式方法已經(jīng)普遍應(yīng)用于當(dāng)前ASF疫情發(fā)生國(guó)家的證實(shí)性檢測(cè)。FAT可檢測(cè)野外可疑豬或?qū)嶒?yàn)室接種豬脾臟、扁桃體、腎臟、淋逢迎組織中的抗原。在接種敏感細(xì)胞后,FAT還能夠用于區(qū)分CPE是ASFV產(chǎn)生還是其他病毒產(chǎn)生的。但對(duì)亞急性或慢性ASF病例,FAT檢出敏感性明顯降低,可能與感染豬體內(nèi)抗原抗體復(fù)合物的構(gòu)成有關(guān)。這種抗原抗體復(fù)合物能干擾甚至阻斷ASFV抗原與結(jié)合物之間的結(jié)合。試驗(yàn)進(jìn)行時(shí),應(yīng)注意熒光標(biāo)記[7]抗體的濃度,染色溫度常采用25℃。在我們國(guó)家,非洲豬瘟屬一類(lèi)疫病[8],對(duì)疑似疫情的豬只應(yīng)高度重視,及時(shí)上報(bào)相關(guān)部門(mén),選擇具備相應(yīng)資格的樣品采集單位、運(yùn)送單位和病料樣品存儲(chǔ)單位,根據(jù)專(zhuān)家要求及時(shí)、安全送檢,運(yùn)用適宜的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù),嚴(yán)格匯報(bào)檢測(cè)結(jié)果,針對(duì)病畜以不放血方式捕殺,尸體按規(guī)定處理,做好現(xiàn)場(chǎng)的消毒工作。疫情發(fā)生后做好相應(yīng)的應(yīng)急措施,切忌盲目用藥,應(yīng)及時(shí)上報(bào)并求助官方獸醫(yī)部門(mén),盡量避免或降低不必要的經(jīng)濟(jì)損失和社會(huì)影響。以下為參考文獻(xiàn)[1]尚紅梅,吳旭錦,朱小甫.非洲豬瘟的流行現(xiàn)在狀況及防控措施[J].今日畜牧獸醫(yī),2022,35(02):23-24.[2]趙永坡,李榮達(dá),韓志英,陳公武,吳志鋼.一例非洲豬瘟的防治[J].今日畜牧獸醫(yī),2022,35(02):93.[3]劉梅芬,劉影,王翠,趙雪麗,謝彩華,閆若潛.非洲豬瘟的擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)及防控對(duì)策[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,2022,36(02):47-49.[4]李娟,戚南山,呂敏娜,吳彩艷,林栩慧,胡俊菁,肖文婉,張健騑,廖申權(quán),孫銘飛.非洲豬瘟的生物媒介及其防治策略[J].廣東畜牧獸醫(yī)科技,2022,44(01):1-4.[5]忻悅.非洲豬瘟的異常感覺(jué)和狀態(tài)及鑒別診斷[J].上海農(nóng)業(yè)科技,2022(01):68-69.[6]尚紅梅,安加俊,楊萍,王滿定.非洲豬瘟的流行