DB33-T 2548-2022朱鹮人工種群構(gòu)建及野化訓(xùn)練技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.3033CCSB4433浙 江 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB33/T2548—2022朱鹮人工種群構(gòu)建及野化訓(xùn)練技術(shù)規(guī)程20222022110720221207浙江省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布目 次III112范引文件 13語(yǔ)定義 14養(yǎng)建設(shè) 2場(chǎng)址 2場(chǎng)局設(shè)施 2布和施 24.434.534.6353種類 3衛(wèi)生 3配加工 36養(yǎng)理 46.146.246.3和殖 47工化育雛 5孵化 5育雛 6轉(zhuǎn)籠 78生疫 7消毒 7隔離 89化練 8籠設(shè) 8訓(xùn)個(gè)的擇 9管理 9訓(xùn)練 910群案理 10檔管理 10檔管理 10錄A資性朱人孵和雛錄樣表 13錄B資性朱微星記應(yīng)方法 14錄C資性朱鹮MHC型記應(yīng)用法 15前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本標(biāo)準(zhǔn)的某些內(nèi)容可能涉及專利。本標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本標(biāo)準(zhǔn)由浙江省林業(yè)局提出并組織實(shí)施。本標(biāo)準(zhǔn)由浙江省林業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：浙江開放大學(xué)、德清縣自然資源和規(guī)劃局、浙江農(nóng)林大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：藍(lán)泓、邱國(guó)強(qiáng)、楊永春、白洪青、翟祎夢(mèng)、方盛國(guó)。朱鹮人工種群構(gòu)建及野化訓(xùn)練技術(shù)規(guī)程范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了朱鹮（Nipponianippon）的飼養(yǎng)場(chǎng)建設(shè)、飼料、飼養(yǎng)管理、人工孵化和育雛、衛(wèi)生防疫、野化訓(xùn)練、種群檔案管理等技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于人工圈養(yǎng)朱鹮的飼養(yǎng)管理及野化訓(xùn)練。（GB15618土壤環(huán)境質(zhì)量農(nóng)用地土壤污染風(fēng)險(xiǎn)管控標(biāo)準(zhǔn)（試行）LY/T1564陸生野生動(dòng)物（鳥類）飼養(yǎng)場(chǎng)通用技術(shù)條件LY/T3214野生動(dòng)物人工繁育管理規(guī)范總則LY/T3215—2020野生動(dòng)物人工繁育技術(shù)規(guī)程朱鹮NY/T388畜禽場(chǎng)環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2010〕20號(hào)家禽產(chǎn)地檢疫規(guī)程LY/T3214野生動(dòng)物人工繁育管理規(guī)范總則LY/T3215—2020野生動(dòng)物人工繁育技術(shù)規(guī)程朱鹮NY/T388畜禽場(chǎng)環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2010〕20號(hào)家禽產(chǎn)地檢疫規(guī)程農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2017〕25號(hào)病死及病害動(dòng)物無(wú)害化處理技術(shù)規(guī)范3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1人工孵化artificialincubation通過(guò)模擬母鳥的孵卵行為，借助專業(yè)人工設(shè)備，代替母鳥孵卵的一項(xiàng)繁育工作。3.2人工育雛artificialrearing通過(guò)模擬母鳥的育雛行為，創(chuàng)造適宜的環(huán)境條件，代替母鳥撫育雛鳥的一項(xiàng)繁育工作。3.3野化訓(xùn)練acclimationtraining3.4訓(xùn)練籠trainingaviary在野化訓(xùn)練期間，用于集中飼養(yǎng)與訓(xùn)練待放歸個(gè)體的特殊大型網(wǎng)籠，籠內(nèi)環(huán)境充分模擬野外生境。LY/T1564NY/T388GB156185100m30m2m場(chǎng)區(qū)應(yīng)用圍擋封閉，具體按LY/T32145～108m6m7m3m2.5m25cm～30cm5cm3m3°～530cm（）。40cm～50cm30cm～40cm）。8cm～10cm1.8m～3.0m3m～4m；1.5m～2.0m1m10cm～20cm8cm孵化室10m2～15m22.6m～2.8m（育雛室4.4.14.4.220m2～30m20.5m～1.0m飼料室按LY/T3215—2020的相關(guān)要求執(zhí)行。5飼料5飼料按LY/T3215—2020的相關(guān)要求執(zhí)行，用水質(zhì)量應(yīng)符合NY/T388的相關(guān)規(guī)定。1%～2%2～330g1表1朱鹮主要飼料添加劑用量維生素礦物質(zhì)氨基酸維生素A維生素D2維生素E維生素B維生素C磷酸氫鈣鐵碘銅錳鋅賴氨酸鹽2500IU200IU5mg5mg25mg280mg5mg50μg0.5mg0.5mg0.25mg12.5mg280g1表2朱鹮雛鳥不同日齡飼料配方日齡）鮮活泥鰍（%）黃粉蟲（%）奶粉（%）熟蛋黃（%）蘋果（%）胡蘿卜（%）水（%）1～540551055306～15501043442516～25601522331526～308015——113＞3080～100a20～0—————a此期泥鰍應(yīng)剪成雛鳥可自主采食的長(zhǎng)度，并逐漸過(guò)渡到雛鳥可完全自主采食。0℃～2570℃～257飼養(yǎng)300g～350g350g）50g。1LY/T3214管理LY/T2806LY/T3214（）30按LY/T3215—2020的相關(guān)要求執(zhí)行。配對(duì)1:1。210～113～6PMxMSIMSI3注：適宜配對(duì)指數(shù)（matingsuitabilityindex，MSI）MSI（123）（45112160cm～70cm25cm～30cm2～315mm43037～400.2%18～1260%～70%1～277122～317.1.2.237.555%～60%上卵翻卵1～290°照卵4～93～4晾卵73～525℃～302～434℃～35破殼25～28℃～3765%～70%30出雛10～1577.1.2.11飼喂——1～55～630%～48%；625458%10%32%～50%；——262～316%～30%（）（19：00～6：00）根據(jù)雛鳥生長(zhǎng)發(fā)育和表現(xiàn)逐漸下調(diào)育雛溫度，具體條件如下：——1日～7日齡：飼養(yǎng)于育雛箱，每箱5只～10只雛鳥，溫度33℃～35℃，濕度50%；——8日～15日齡：溫度31℃～34℃，濕度50%；——16～4025℃～3050%～60%204～530～4540～60按LY/T3215—2020（～113～4284（）84LY/T235911303000m23020m～30m30°。5cm～8cm3m0.5m15cm～3020cm1～2（9.2.11300g～1600g1500g～1800g45%。1:1，2～590%，1～210%6.16.25～10朱鹮的野化訓(xùn)練宜在每年秋季開始，并持續(xù)進(jìn)行至少1年。112～42～553～101～2風(fēng)9.250%以30%40（LY/T3215—2020C表C.4C.5）10.2.3）PMxLY/T3215—2020C表C.1）附錄AA.1A.2）。（LY/T3215—2020CC.6C.7C.8）。對(duì)當(dāng)年的新生個(gè)體，宜在每年8月～10月（換羽期）采集樣品；對(duì)于死亡個(gè)體，宜根據(jù)需要及時(shí)采集各組織樣品。PEPE1～250～60-80樣品采集并處理完成后，宜盡快用于提取DNA，使用血液/組織基因組DNA提取試劑盒，具體方法參照試劑盒使用說(shuō)明。經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)合格后將裝有基因組DNA的離心管保存于-20℃冰箱備用，或-80℃超低溫冰箱長(zhǎng)期保存。見(jiàn)附錄B。樣品采集并處理完成后，宜盡快用于提取DNA，使用血液/組織基因組DNA提取試劑盒，具體方法參照試劑盒使用說(shuō)明。經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)合格后將裝有基因組DNA的離心管保存于-20℃冰箱備用，或-80℃超低溫冰箱長(zhǎng)期保存。見(jiàn)附錄B。MHC見(jiàn)附錄C。主要包括：——樣品數(shù)據(jù)：采樣時(shí)間、采樣地點(diǎn)、樣品類型、個(gè)體信息等；——微衛(wèi)星標(biāo)記分型數(shù)據(jù)：個(gè)體環(huán)志號(hào)、選用的微衛(wèi)星標(biāo)記名稱、分型圖、微衛(wèi)星分型結(jié)果等；——MHC單倍型數(shù)據(jù)：個(gè)體環(huán)志號(hào)、序列結(jié)果、測(cè)序峰圖、等位基因及單倍型結(jié)果等；——研究報(bào)告：對(duì)分型數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析及詳細(xì)的研究報(bào)告等。MHC附錄A（資料性）朱鹮人工孵化和育雛記錄樣表A.1朱鹮人工孵化記錄表見(jiàn)表A.1。表A.1朱鹮人工孵化記錄表機(jī)號(hào)日期天氣時(shí)間室溫℃室濕%機(jī)溫℃機(jī)濕%翻卵照卵晾卵破殼備注A.2朱鹮人工育雛記錄表見(jiàn)表A.2。表A.2朱鹮人工育雛記錄表A.2朱鹮人工育雛記錄表見(jiàn)表A.2。表A.2朱鹮人工育雛記錄表雛鳥編號(hào)父本母本出生體重日期日齡d體征狀態(tài)體重g飼喂時(shí)間單次飼喂量g日總飼喂量g機(jī)溫℃機(jī)濕%備注附錄B（資料性）朱鹮微衛(wèi)星標(biāo)記的應(yīng)用方法B.1標(biāo)記的引物合成B.1（）PCR5TAMRAFAMHEX表B.1朱鹮微衛(wèi)星標(biāo)記的引物信息編號(hào)標(biāo)記名稱重復(fù)單元引物序列（5’～3’）退火溫度Ta（℃）熒光標(biāo)記產(chǎn)物長(zhǎng)度（bp）1NN01(CA)11F:TCAGATAACATTTGTGGGATTGR:AGGGCTAGGTTTGGCATT58HEX193～2052NN25(AAAC)8F:TCCAGCTACTCACTTCTTTCGGR:ATAGATACCCAGGGCATTCAGG57TAMRA166～1783NN18(GT)20F:TAAAACGAGCCAGACAGTCGCAR:GCCCTGAAGCAGTGGTAGGAAG58FAM158～1744NN12(GT)19F:TTTCTTCCTCCTGTCAGCTCTTGR:GTGCTCTGCACCCTTCACCTTC57HEX238～2425NN21(GA)12F:CCAGCCTCCTATCCTAATCTAATCGR:GAGCCAATCTGTTCCAGTCTCCTT57TAMRA175～1856NN04(CA)2TA(CA)11C(CA)2F:GTTTCTTCTGTGCCATCCR:ATGCCTTGCATTATTGCTT57FAM213～2157NN17(GT)11F:CTGGATGTAGGCTTGCTTGGTGR:AAGGGGCTGGTTAGTGATAGGG59TAMRA286～2908NN16(GT)12F:CCAGCCAGTGGGAGTGAAATGCR:TGGGATCGTGCTTGGGATCGTG58FAM236～2409NN26(AAAC)9F:GCACCCAAGACAAAGAGGCAATGR:CCTGTTCCAGGGTTTGACCACC57HEX159～16710NN03(CA)13F:GATCAACGAACAACCCAAR:CATACGGAAGAAACCTCA57TAMRA297～303B.2微衛(wèi)星分型B.2微衛(wèi)星分型PCRPCR相同顏色標(biāo)記但產(chǎn)物長(zhǎng)度范圍明顯不重疊的PCR產(chǎn)物可以混合后進(jìn)行掃描分型。根據(jù)熒光峰圖判讀各個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記的等位基因（產(chǎn)物長(zhǎng)度）。C.2C.2MHC單倍型判讀PCR3（）UAADABMHC表C.2朱鹮常見(jiàn)MHC單倍型的等位基因組成附錄C（資料性）朱鹮MHC單倍型標(biāo)記的應(yīng)用方法C.1標(biāo)記的引物合成MHCIUAA（exon2exon3）II類多exon2C.13表C.1朱鹮MHC單倍型標(biāo)記的引物信息標(biāo)記名稱引物序列（5’～3’）產(chǎn)物長(zhǎng)度（bp）退火溫度Ta（℃）UAA-exon2F：TGCCCCCCACCTCTGACCR：GCCCCCACTCACCCCTGCTCT31361UAA-exon3F：TGGTCGCGTTCCAGGGGCTCACR：GGCCGGCACACGCACCCACAG34567DAB-exon2F：CCGGGGTGCTGAGAGCAGCR：GAAATGTTCTGCCACGCACTCAC35963注：UAA-exon2UAA-exon3MHCI5個(gè)I（UAAUBAUCA1UCA2、UDA）的標(biāo)記序列，其中UBA、UCA1、UCA2、UDA均為單態(tài)（只有一個(gè)等位基因）。單倍型等位基因（標(biāo)記序列的Genbank號(hào)）DAB-exon2UAA-exon2UAA-exon3HT01DAB*01（MK829179）UAA*01（MK829161）UAA*01（MK829167）HT02DAB*02（MK829180）HT04DAB