傳染與免疫放映

傳染與免疫放映第一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日第一節(jié)傳染第二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日一、傳染與傳染病幾個概念1疾病:

生物體在一定條件下，由體內(nèi)或體外致病因素引起的一系列復(fù)雜且有特征性的病理狀態(tài)，即稱疾病。2傳染:

又稱感染或侵染，是指外源或內(nèi)源性病原體突破其宿主的免疫“防線”后，在宿主的特定部位定植、生長繁殖或（和）產(chǎn)生酶及毒素，從而引起一系列病理生理的過程。3傳染病:

是一類由活病原體的大量繁殖所引起，可從某一宿主個體直接或間接傳播到同種或異種宿主另一些個體的疾病。

第三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（一）病原體病原體的數(shù)量、致病特性和侵人方式是決定傳染結(jié)局中的最主要因素。二、決定傳染結(jié)局的三大因素第四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

又稱致病力，表示病原體致病能力的強弱。構(gòu)成毒力的因素兩方面:

1．毒力（1）侵襲力包括3種能力:

①吸附和侵入能力：②繁殖與擴散能力：③抵抗宿主防御功能的能力第五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(2)毒素細(xì)菌毒素可分兩個大類:①外毒素

→指在病原細(xì)菌生長過程中不斷向外界環(huán)境分泌的一類毒性蛋白質(zhì)，類毒素:用0.3%～0.4%甲醛溶液對外毒素進(jìn)行脫毒處理，可獲得失去毒性但仍保留其原有免疫原性（抗原性）的生物制品，稱作類毒素?？苟舅?將類毒素注射機體后,可使機體產(chǎn)生對相應(yīng)外毒素具有免疫性的抗體,稱為抗毒素.②內(nèi)毒素→是G－細(xì)菌細(xì)胞壁外層的組分之一，其化學(xué)成分是脂多糖（LPS）。因它在活細(xì)胞中不分泌到體外，僅在細(xì)菌死亡后自溶或人工裂解時才釋放，故稱內(nèi)毒素。

第六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日③內(nèi)毒素與外毒素的比較第七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日鱟（

hou

）試劑法（LALtest）:

鱟具有開放性血管系統(tǒng)，每只可采血100～300mL，其血清呈藍(lán)色，內(nèi)含血藍(lán)蛋白和外源凝集素。鱟血中僅含一種變形細(xì)胞，其裂解產(chǎn)物可與G－細(xì)菌的內(nèi)毒素(LPS)和脂磷壁酸（膜磷壁酸）等發(fā)生特異性和高靈敏度的凝膠化反應(yīng)用來檢測內(nèi)毒素的方法。其作用機制是：

應(yīng)用:臨床診斷，藥品、生物制品和血制品檢驗，食品衛(wèi)生監(jiān)測，以及科學(xué)研究等諸多領(lǐng)域。第八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日3．侵入門徑(1)消化道(2)呼吸道(3)皮膚創(chuàng)口(4)泌尿生殖道(5)其他途徑2.入侵病原體的數(shù)量

第九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日免疫:免疫是機體識別和排除抗原性異物的一種保護(hù)性功能。免疫功能包括：①免疫防御②免疫穩(wěn)定③免疫監(jiān)視（二）宿主的免疫力第十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（三）環(huán)境因素第十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

病原菌侵入其宿主后，按病原菌、宿主與環(huán)境三方面力量的對比或影響的大小決定著傳染的結(jié)局。結(jié)局有下列3種。（一）隱性傳染

（二）帶菌狀態(tài)

三、傳染的3種可能結(jié)局第十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

按發(fā)病部位可分為局部感染和全身感染兩種，按性質(zhì)和嚴(yán)重程度的不同，可把它們分成4類：

(1)毒血癥

(2)菌血癥如傷寒癥的早期。（三）顯性傳染第十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(3）敗血癥病原體侵入血流并大量繁殖。(4)膿毒血癥敗血癥的同時，又在臟器中引起化膿性病灶者。第十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日定義:

凡在生物長期進(jìn)化過程中形成，屬于先天即有、相對穩(wěn)定、無特殊針對性的對付病原體的天然抵抗能力，稱為非特異性免疫也稱先天免疫、或自然免疫.第二節(jié)非特異性免疫第十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（一）皮膚與粘膜作用有3種：①機械性阻擋和排除作用；②化學(xué)物質(zhì)的抗菌作用；③正常菌群的拮抗作用（二）屏障結(jié)構(gòu)

1．血腦屏障

2．血胎屏障

一、表皮和屏障結(jié)構(gòu)第十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日白細(xì)胞的種類二、吞噬細(xì)胞及其吞噬作用第十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日與非特異性免疫有關(guān)的幾類吞噬細(xì)胞（一）多形核白細(xì)胞（PMN)

多形核白細(xì)胞又稱粒細(xì)胞。作用：可穿越血管壁，發(fā)揮吞噬功能。嗜中性粒細(xì)胞粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞（即嗜伊紅粒細(xì)胞）第十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

作用:并有吞噬和胞飲功能。

（二）巨噬細(xì)胞主要功能有(1)吞噬和殺菌作用

(2)抗原遞呈作用

(3)免疫調(diào)節(jié)作用

(4）抗癌作用第十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日1定義:

炎癥是機體對病原體的侵入或其他損傷的一種保護(hù)性反應(yīng)，在相應(yīng)部位出現(xiàn)紅、腫、熱、痛和功能障礙，是炎癥的五大特征。

2意義

①集中大量吞噬細(xì)胞在炎癥部位；②抗菌因子和抗體發(fā)生局部濃縮；③死亡的宿主細(xì)胞堆集可釋放一部分抗菌物質(zhì)；④氧濃度的下降和乳酸濃度的提高抑制多種病原體的生長；⑤體溫的升高可降低某些病原體的繁殖速度。三、炎癥反應(yīng)第二十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

在正常體液和組織中含有多種抗菌物質(zhì)，如補體、溶菌酶、α和β干擾素、吞噬細(xì)胞殺菌素、白細(xì)胞素等

四、正常體液或組織中的抗菌物質(zhì)第二十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日1、概述定義：補體是指存在于正常人體或高等動物血清中的一組非特異性血清蛋白。在免疫反應(yīng)中，由于它具有能擴大和增強抗體的“補助”功能，故稱補體。性質(zhì)：室溫幾天或56℃下10分鐘失活來源：巨噬細(xì)胞、腸道上皮細(xì)胞及肝脾所產(chǎn)生2、功能激活后的補體參與破壞或清除已被抗體結(jié)合的抗原或細(xì)胞，（1）發(fā)揮其溶胞作用（2）病毒滅活（3）促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬（4）釋放組胺。（一）補體第二十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日2、補體激活途徑

①經(jīng)典途徑②凝集素途徑③替換途徑第二十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日1.概念干擾素是高等動物細(xì)胞在病毒或dsRNA等誘生劑的刺激下，所產(chǎn)生的一種具有高活性、廣譜抗病毒等功能的特異性糖蛋白。功能：

（1）抑制病毒增殖（2）具有免疫調(diào)節(jié)作用（增強NK和T細(xì)胞的活力）（3）對癌細(xì)胞的殺傷作用。（二）干擾素第二十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日2.干擾素種類及誘生劑干擾素IFN-α（白細(xì)胞干擾素，Ⅰ型干擾素）IFN-β

（成纖維細(xì)胞干擾素）IFN-γIFN-ω

（免疫干擾素或Ⅱ型干擾素）誘生劑：微生物、微生物產(chǎn)物(LPs,真菌多糖等）、多分化合物、植物血凝素、伴刀豆球蛋白、葡萄球菌腸毒素A和卡那霉素等。第二十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日干擾素的誘導(dǎo)過程和作用機制INF－第二十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日第三節(jié)特異性免疫

第二十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日概念A(yù)特異性免疫:

也稱獲得性免疫，主要功能是識別非自身和自身的抗原物質(zhì)，并對它產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從而保證機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定狀態(tài)。概述第二十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日①后天獲得②特異性；③包括體液免疫系統(tǒng)和細(xì)胞免疫系統(tǒng)（即細(xì)胞介導(dǎo)免疫系統(tǒng)）；④特異性免疫力存在明顯的差別。B特點為：

第二十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日C獲得方式:

特異性免疫可通過自動或被動兩種第三十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日免疫應(yīng)答是指一類發(fā)生在活生物體內(nèi)的特異性免疫的系列反應(yīng)過程。這是一個從抗原的刺激開始，經(jīng)過抗原特異性淋巴細(xì)胞對抗原的識別（感應(yīng)），使它們發(fā)生活化、增殖、分化等一系列變化，最終表現(xiàn)出相應(yīng)的體液免疫或（和）細(xì)胞免疫效應(yīng)。特點能識別異己、具特異性、記憶性D免疫應(yīng)答第三十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日免疫應(yīng)答過程可分3階段和兩大類型根據(jù)參與的免疫活性細(xì)胞的種類和功能的不同，免疫應(yīng)答又可分為細(xì)胞免疫和體液免疫兩類。第三十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

細(xì)胞免疫：

指機體在抗原刺激下，一類小淋巴細(xì)胞（依賴胸腺的T細(xì)胞）發(fā)生增殖、分化，進(jìn)而直接攻擊靶細(xì)胞或間接地釋放一些淋巴因子的免疫作用；體液免疫：

則指機體受抗原刺激后，來源于骨髓的一類小淋巴細(xì)胞（B細(xì)胞）進(jìn)行增殖并分化為漿細(xì)胞，由它合成抗體并釋放到體液中以發(fā)揮其免疫作用。第三十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日TD抗原和TI抗原TD抗原：即胸腺依賴性抗原，它所激發(fā)的體液免疫應(yīng)答，必須有TH細(xì)胞參予才能完成，TI抗原：非胸腺依賴性抗原，可單獨刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，不須TH細(xì)胞參予，第三十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（一）中樞免疫器官又稱一級淋巴器官，是免疫細(xì)胞發(fā)生、分化和成熟的部位。

一、免疫器官

1．骨髓青春期后造血多發(fā)生在脊椎骨、胸骨、髂骨（qia）和肋骨中。第三十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日骨髓中的多能干細(xì)胞可分化出：

①髓樣干細(xì)胞發(fā)育成紅細(xì)胞系、粒細(xì)胞系、單核細(xì)胞系和巨噬細(xì)胞系等；②淋巴干細(xì)胞發(fā)育成淋巴細(xì)胞、T、B細(xì)胞，免疫功能：（1）、各種前體細(xì)胞的發(fā)源地（2）、形成抗體的重要部位

（3）、再次免疫應(yīng)答的發(fā)生的主要場所（主要類別是IgG)第三十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日2．胸腺位置：胸腔上部，胸骨后方，緊貼大血管之前。分左右兩葉是T細(xì)胞分化和成熟的場所。第三十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日胸腺的主要免疫功能１、Ｔ細(xì)胞成熟的場所２、產(chǎn)生胸腺激素胸腺上皮細(xì)胞可產(chǎn)生多種小分子的肽類胸腺激素。對誘導(dǎo)Ｔ細(xì)胞成熟起重要作用第三十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日3.法氏囊鳥類所特有，形如囊狀，性成熟后消失。相當(dāng)于人和哺乳動物骨髓的功能切除不能產(chǎn)生抗體。位置：位于泄殖腔后上方；功能：Ａ、促使鳥類B細(xì)胞分化成熟的場所Ｂ、可作為外周淋巴器官，即能捕捉抗原和合成某些抗體。第三十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

主要是（1）脾臟位于腹腔左上方，分為皮質(zhì)（白髓）和髓質(zhì)（紅髓），是T、B細(xì)胞定居之地(二)外周免疫器官第四十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日脾臟的主要免疫功能：Ａ、血液過濾功能吞噬細(xì)胞Ｂ、滯留淋巴細(xì)胞的作用Ｃ、產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要場所，是產(chǎn)生抗體的重要器官。Ｄ、產(chǎn)生吞噬細(xì)胞增強激素第四十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（2）淋巴結(jié)。

其他淋巴組織A皮膚淋巴組織B粘膜淋巴組織第四十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日免疫功能：１、過濾和清除異物作用

２、產(chǎn)生免疫應(yīng)答的場所

第四十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日免疫細(xì)胞泛指一切具有免疫功能的細(xì)胞，包括各類淋巴細(xì)胞(T,B,D,NK,NS,K和N細(xì)胞等）、粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和各種類型的巨噬細(xì)胞等。免疫活性細(xì)胞則僅指能特異地識別抗原，即能接受抗原的刺激，并隨后進(jìn)行分化、增殖和產(chǎn)生抗體或淋巴因子，以發(fā)揮特異性免疫應(yīng)答的一群細(xì)胞.主要指T細(xì)胞和B細(xì)胞,單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞也包括免疫活性細(xì)胞內(nèi)。

二、免疫細(xì)胞及其在細(xì)胞免疫中的作用

第四十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日免疫活性細(xì)胞來源及功能第四十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日第四十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日1。概念

T細(xì)胞即T淋巴細(xì)胞，一種參與特異性免疫應(yīng)答的小淋巴細(xì)胞，主要執(zhí)行細(xì)胞免疫功能，包括細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用和遲發(fā)型超敏反應(yīng)，也參與抗體的形成和炎癥反應(yīng)等。2。表面標(biāo)志包括表面受體和表面抗原兩類。表面受體:是指淋巴細(xì)胞表面上能與相應(yīng)配體（特異性抗原、綿羊紅細(xì)胞、補體等）發(fā)生特異性結(jié)合的的分子結(jié)構(gòu)。

如受體(E受體)和有絲分裂原受體等。

（一）T細(xì)胞第四十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日表面抗原：是指淋巴細(xì)胞或其亞群細(xì)胞表面上能被特異性抗體（如單克隆抗體）所識別的表面分子。由于表面抗原是在淋巴細(xì)胞分化過程中產(chǎn)生的，故又稱分化抗原。國際上商定以分化群（clusterofdiffierentiation,CD）命名淋巴細(xì)胞細(xì)胞表面抗原或分子，如CD2、CD4、CD8，已命名上百種。（1）T細(xì)胞的表面標(biāo)志

AT細(xì)胞抗原受體(TCR），實際上就是T細(xì)胞的抗原受體，或稱T細(xì)胞受體(TCR），這是它執(zhí)行復(fù)雜和精確的識別抗原性異物的物質(zhì)基礎(chǔ)之一。（2）CD2稱E受體能與綿羊紅細(xì)胞（E）結(jié)合，形成細(xì)胞花環(huán)。此實驗用來鑒定T細(xì)胞及檢測外周血中的T細(xì)胞的比例及數(shù)目的常用方法。第四十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（2）CD3

常與TCR緊密結(jié)合形成TCR-CD3復(fù)合體。功能是將TCR與外來結(jié)合的抗原信息傳遞到細(xì)胞內(nèi)，啟動細(xì)胞內(nèi)的活化過程。（3）CD4和CD8

分別為MHCII類分子和I類分子的受體，分別出現(xiàn)在不同功能亞群的T細(xì)胞表面。在同一T細(xì)胞表面只表達(dá)其中一種。因此T細(xì)胞可分成兩大亞群：CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞前者具有Th功能，后者具有Ts或Tk/Tc功能。正常比例應(yīng)為2:1（4）有絲分裂原受體能刺激靜止的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化成淋巴母細(xì)胞，第四十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日根據(jù)T細(xì)胞的發(fā)育階段、表面標(biāo)志和T細(xì)胞免疫功能的不同，可把它分為若干亞群。3、T細(xì)胞亞群第五十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日1．調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（TR）

(1)輔助性T細(xì)胞(TH)

在體液免疫中發(fā)揮作用，主要功能是輔助B細(xì)胞，促使其活化和產(chǎn)生抗體。

(2)抑制性T細(xì)胞（TS）可抑制TH,TC和B細(xì)胞的功能，由它控制淋巴細(xì)胞的增殖。

2．效應(yīng)性T細(xì)胞（TE）

(1)遲發(fā)型超敏T細(xì)胞（TDTH）又稱遲發(fā)型T細(xì)胞（TD），在細(xì)胞介導(dǎo)的免疫中發(fā)揮作用。

(2）細(xì)胞毒T細(xì)胞（TC）又稱殺傷性T細(xì)胞，在細(xì)胞介導(dǎo)免疫中發(fā)揮作用。Tc能特異地溶解帶Tc抗原的靶細(xì)胞，例如腫瘤細(xì)胞、移植細(xì)胞或受病原體感染的宿主組織細(xì)胞等。幾個主要亞群第五十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日B細(xì)胞即B淋巴細(xì)胞，一種在細(xì)胞膜表面帶有自己合成的免疫球蛋白（也稱膜抗體）的淋巴細(xì)胞。也稱骨髓依賴淋巴細(xì)胞

（二）B細(xì)胞（Bcell)

第五十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日1．B細(xì)胞和表面受體

B細(xì)胞與T細(xì)胞的外形雖相同，包括有絲分裂原受體、抗原受體、補體受體和Fc（抗體的可結(jié)晶片段）受體等都有所不同。

第五十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（1）B細(xì)胞的抗原受體SmIgB細(xì)胞的抗原受體是細(xì)胞表面的免疫球蛋白SmIg(SIg),主要是單體的IgM和IgD作用:A是抗原的受體,能與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合.B:是表面抗原,具有免疫球蛋白的抗原決定簇,能與抗免疫球蛋白的抗體分子結(jié)合C:是鑒別B細(xì)胞的主要特征,常用熒光素或鐵蛋白標(biāo)記的抗免疫球蛋白抗體來鑒別.第五十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（2）Fc受體（FcR）能與免疫球蛋白的片段結(jié)合,大多數(shù)B細(xì)胞有IgG的受體稱FcγR,能特異性地與IgG的Fc片段結(jié)合.作用:A:與抗原抗體復(fù)合物結(jié)合,有利于B細(xì)胞對抗原的捕獲及B細(xì)胞的激活和抗體的產(chǎn)生

B:能以與靶細(xì)胞(如腫瘤細(xì)胞)上的抗體結(jié)合,借以殺死靶細(xì)胞第五十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(3)補體受體（CR）能與補體成分C3b和C3d發(fā)生特異性結(jié)合的受體分別稱為CRⅠ和CRⅡ.作用:

有利于B細(xì)胞捕捉與補體結(jié)合的抗原抗體復(fù)合物,CR被結(jié)合后,可使B細(xì)胞活化.(4)絲裂原受體與有絲分裂原結(jié)合的受體.葡萄球菌A蛋白（SPA）是B細(xì)胞專有的分裂原.作用:與分裂原結(jié)合后促進(jìn)B細(xì)胞分裂.(5)CD79

常與B細(xì)胞抗原受體（BCR）形成復(fù)合物,B細(xì)胞所特有。功能與CD3類似,為信號傳遞分子。第五十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日3.B細(xì)胞的亞群按B細(xì)胞產(chǎn)生抗體時是否需T細(xì)胞的輔助分成兩亞群，（1）B-1（T細(xì)胞不依賴性亞群）它只有初級免疫應(yīng)答反應(yīng)（產(chǎn)IgM），而無次級免疫應(yīng)答反應(yīng)。（2）B-2（T細(xì)胞依賴性亞群）必須在T細(xì)胞的輔助下才產(chǎn)生IgG和IgM等抗體，有次級免疫應(yīng)答反應(yīng)。第五十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日1．NK細(xì)胞概述:NK細(xì)胞可在無抗體、無補體或無抗原致敏的情況下就能殺傷靶細(xì)胞的淋巴細(xì)胞，故稱自然殺傷細(xì)胞。即自然殺傷細(xì)胞，因其細(xì)胞質(zhì)中有嗜天青顆粒，且細(xì)胞較大，故也稱大顆粒淋巴細(xì)胞（LGL）。主要存在于外周血和脾臟中。表面受體:

干擾素受體和IL-2受體等生物學(xué)功能:

非特異性地殺傷腫瘤細(xì)胞,抵抗多種微生物感染,排斥骨髓細(xì)胞的移植.

（三）第三淋巴細(xì)胞

第五十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日2．K細(xì)胞即殺傷細(xì)胞，是一類與NK細(xì)胞相似的大顆粒淋巴細(xì)胞。通過IgG的Fc片段與K細(xì)胞表面的Fc受體的結(jié)合，可觸發(fā)K細(xì)胞的殺傷活性，故它能專一地但非特異地殺傷被IgG所覆蓋的靶細(xì)胞。主要存在于腹腔滲出液、血液和脾臟中。

ADCC:

在特異性的抗體介導(dǎo)下參與的殺傷作用，被稱作抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。第五十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（四）第四淋巴細(xì)胞一種同時具備T細(xì)胞和NK細(xì)胞特征的淋巴細(xì)胞，稱為NKT細(xì)胞是繼T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞和K細(xì)胞之后的第四類淋巴細(xì)胞。

NKT細(xì)胞可以抑制人體內(nèi)TDTH細(xì)胞導(dǎo)致產(chǎn)生的自身免疫病。

第六十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（五）淋巴細(xì)胞再循環(huán)定義:淋巴細(xì)胞在在淋巴液、血液和淋巴器官之間的反復(fù)循環(huán)意義:在于使帶有各種不同抗原受體的淋巴細(xì)胞不斷在體內(nèi)各處巡游，增加與抗原遞呈細(xì)胞接觸的機會，使機體更有效地發(fā)揮清除異物性抗原的免疫作用。第六十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日免疫分子的種類三、免疫分子及其在體液免疫中的作用膜表面抗原分子主要組織相容性復(fù)合物抗原白細(xì)胞分化抗原粘附因子膜表面免疫分子

抗體補體細(xì)胞因子免疫分子體液免疫分子第六十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日①膜表面抗原受體：

T細(xì)胞和B細(xì)胞表面都存在膜表面抗原受體。功能：識別相應(yīng)的抗原并相互結(jié)合，以啟動特異性免疫應(yīng)答。②主要組織相容性復(fù)合物抗原組織相容性：是指在不同高等動物個體間進(jìn)行組織或器官移植時，供體與受體雙方彼此可接受的程度。組織相容性抗原：它是由主要組織相容性復(fù)合物(MHC）編碼的一類特殊的細(xì)胞表面蛋白，代表個體組織特異性的抗原。主要的免疫分子第六十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日根據(jù)人體MHC抗原的分布、結(jié)構(gòu)和功能分為MHC-I參與肽介導(dǎo)的對靶細(xì)胞裂解殺傷作用MHC-II具有與輔助性T細(xì)胞結(jié)合以及抗原信號傳遞的限制性MHC-III3類。

第六十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日③白細(xì)胞分化抗原（CD）：是各類白細(xì)胞表達(dá)其不同發(fā)育分化階段所特有的膜表面分子，種類極多，迄今已知道的就有近200種（分別標(biāo)以CD1，CD2,…）。功能：是參與活化、介導(dǎo)細(xì)胞遷移等多種功能。

④粘附分子（AM）：是廣泛分布于免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞表面，介導(dǎo)細(xì)胞間、細(xì)胞與基質(zhì)間相互接觸和結(jié)合的分子。功能：具有參與活化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞遷移或炎癥反應(yīng)等。第六十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日⑤抗體⑥補體⑦細(xì)胞因子機體的免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞能合成和分泌小分子的多肽類因子，它們能調(diào)節(jié)多種細(xì)胞生理功能，稱為細(xì)胞因子。細(xì)胞因子包括淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的淋巴因子和單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的單核因子等。目前已知白細(xì)胞介素（IL）、干擾素（IFN）、集落刺激因子（CSF）、腫瘤壞死因子（TNF）、轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β）等均是免疫細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，它們在免疫系統(tǒng)中起著非常重要的調(diào)控作用，在異常情況下也會導(dǎo)致病理反應(yīng)。

⑧抗原淋巴因子和單核因子第六十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日1．基本概念A(yù)抗原:是一類能誘導(dǎo)機體發(fā)生免疫應(yīng)答并能與相應(yīng)抗體或T淋巴細(xì)胞受體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)的大分子物質(zhì)?？乖址Q免疫原?？乖瑫r具備兩個特性：①免疫原性，又稱抗原性，指能刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答能力的特性；②免疫反應(yīng)性，或稱反應(yīng)原性，指能與免疫應(yīng)答的產(chǎn)物發(fā)生特異反應(yīng)的特性。

（一）抗原（Ag)第六十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日B完全抗原:

凡同時具有免疫原性和免疫反應(yīng)性的抗原，就是完全抗原，包括大多數(shù)常見的抗原，例如多數(shù)蛋白質(zhì)、細(xì)菌細(xì)胞、細(xì)菌外毒素、病毒體和動物血清等；c半抗原:

凡缺乏免疫原性而有免疫反應(yīng)性的物質(zhì)，稱為或不完全抗原.

第六十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(1)相對分子質(zhì)量大大分子是抗原的首要條件，要求:相對分子質(zhì)量>1.0X104，具免疫原性

<4.0x103者，不具免疫原性。這一范圍內(nèi)，一般免疫原性還與相對分子質(zhì)量成正比。(2)結(jié)構(gòu)復(fù)雜一般來說分子結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)象愈復(fù)雜則免疫原性越強。蛋白質(zhì)＞復(fù)雜多糖＞核酸2.免疫原性的物質(zhì)基礎(chǔ)第六十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(3)異物性指某抗原的理化性質(zhì)與其所刺激的機體的自身物質(zhì)理化性質(zhì)間的差異程度。要求:抗原都必須是異種或至少是異體的物質(zhì)。種屬關(guān)系越遠(yuǎn)，其組織結(jié)構(gòu)間的差異越大，則免疫原性越強。異物性的幾種情況:a、非動物抗原（如葉綠素、微生物）b、異種動物抗原（如鴨源蛋白對兔）c、同種異種抗原（同種動物異體間）d、自身抗原第七十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（1）定義:

指位于抗原表面可決定抗原特異性的特定化學(xué)基團(tuán)，又稱抗原表位?？乖瓫Q定簇決定抗原的特異性，即決定著抗原與抗體發(fā)生特異結(jié)合的能力。（2）抗原的抗原價：抗原分子的抗原決定簇的數(shù)目。不同抗原決定簇，產(chǎn)生不同種相應(yīng)的特異性。

3．抗原決定簇抗原決定簇第七十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(2)簡單半抗原或稱阻抑半抗原它既無免疫原性也無免疫反應(yīng)性，但能與抗體發(fā)生不可見的結(jié)合，其結(jié)果可阻止抗體再與相應(yīng)的完全抗原或復(fù)合半抗原相結(jié)合的可見反應(yīng)，例如S．Pneumoniae莢膜多糖的水解產(chǎn)物、抗菌素、酒石酸、苯甲酸等。4.兩類半抗原

(1)復(fù)合半抗原無免疫原性但具免疫反應(yīng)性，能在試管中與相應(yīng)抗體發(fā)生特異性結(jié)合并產(chǎn)生可見反應(yīng)。例如細(xì)菌的莢膜多糖、二硝基氯苯（DNCB）等。半抗原與抗體結(jié)合第七十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(1)表面抗原指包圍在細(xì)菌細(xì)胞壁外層的抗原，主要是莢膜（K抗原）或微莢膜抗原

(2)菌體抗原（O抗原）指存在于細(xì)胞壁、細(xì)胞膜與細(xì)胞質(zhì)上的抗原。(3)鞭毛抗原（H抗原）指存在于鞭毛上的抗原，即鞭毛蛋白抗原，又稱H抗原(4）菌毛抗原由細(xì)菌細(xì)胞表面的菌毛蛋白所形成的抗原。5．細(xì)菌的抗原第七十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

細(xì)菌的外毒素成分為糖蛋白，一般都是抗原性很強的蛋白質(zhì)。如：破傷風(fēng)毒素、肉毒素。類毒素則是外毒素經(jīng)甲醛脫毒后對動物無毒、但仍保留強免疫原性的蛋白質(zhì)。類毒素可免疫宿主動物以制取相應(yīng)的抗體（俗稱抗毒素），用以治療細(xì)菌中毒癥，例如白喉抗毒素和破傷風(fēng)抗毒素等。

(5）外毒素和類毒素第七十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日共同抗原:在一個同時存在有多種抗原的復(fù)雜抗原系統(tǒng)，例如細(xì)菌細(xì)胞中，只有該系統(tǒng)自身特有的抗原，稱特異性抗原；而為多種復(fù)雜抗原系統(tǒng)所共有的抗原，則稱共同抗原（又稱類屬抗原或交叉反應(yīng)抗原）。交叉反應(yīng):這類由于甲、乙兩菌存在共同抗原而引起甲菌抗原（或抗體）與乙菌的抗體（或抗原）間發(fā)生較弱的免疫反應(yīng)的現(xiàn)象，稱為交叉反應(yīng)。6.共同抗原與交叉反應(yīng)第七十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日1．概述抗體（Ab)是高等動物體在抗原物質(zhì)的刺激下，由漿細(xì)胞產(chǎn)生的一類能與相應(yīng)抗原在體內(nèi)外發(fā)生特異結(jié)合的免疫球蛋白?？贵w的特點：①僅由魚類以上脊椎動物的漿細(xì)胞所產(chǎn)生；②必須有相應(yīng)抗原物質(zhì)刺激免疫細(xì)胞后才能產(chǎn)生；③能與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性、非共價和可逆的結(jié)合；④其化學(xué)本質(zhì)是一類具有體液免疫功能的球蛋白；⑤因抗體是蛋白質(zhì)，故既具抗體功能也可作抗原去刺激異種生物產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，這就是抗抗體.(二）抗體

第七十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日凡具有抗體活性以及與抗體有關(guān)的各種球蛋白．，統(tǒng)稱為免疫球蛋白（Ig），因此，免疫球蛋白幾乎是抗體的同義詞。按化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗原性的差異純化后的Ig已分為5類IgIgG,IgAIgMIgDIgE第七十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日H鏈:近對稱軸的一對較長的肽鏈，稱為重鏈或H鏈L鏈:外側(cè)一對較短的肽鏈，稱為輕鏈或L鏈V區(qū):占重鏈1/4或輕鏈1/2長度的一段區(qū)域，稱可變區(qū)"或V區(qū)C區(qū):占重鏈3/4或輕鏈1／2長度的一段區(qū)域，則稱恒定區(qū)或C區(qū)2．Ig的化學(xué)結(jié)構(gòu)

第七十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日第七十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日Ig的類別根據(jù)重鏈的血清學(xué)類型、相對分子質(zhì)量大?。▉喕鶖?shù)）和糖含量的不同，可把抗體分成數(shù)類，人的抗體就可分成IgG,IgA,IgM、IgD和IgE5類。這是因為，它們重鏈的血清學(xué)類型可分別分為γ、α、μ、δ和ε5種類型。Ig的亞類按其重鏈構(gòu)造上的變化又可分為多個亞類，人類的IgG就可分為IgGl,IgG2,IgG3和IgG4這4個亞類，它們間除了重鏈間的免疫原性有所不同（分別為Y，、72,73和74）外，其重鏈間的二硫鍵數(shù)目和位置也各不相同（見后）。IgA和IgM的重鏈也至少存在兩個亞類。（1）Ig的類別和亞類第八十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日型別Ig的型別是按其輕鏈的血清學(xué)類型來區(qū)分的,5類Ig只有λ和κ兩種型別。亞型：再按輕鏈可變區(qū)氨基酸序列差異的不同，還可把上述兩型別進(jìn)一步劃分為數(shù)個亞型。(2)Ig的型別和亞型

第八十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

不同的Ig及其亞類所含的氨基酸殘基數(shù)是有差別的。輕鏈的氨基酸殘基數(shù)在220個左右重鏈則是輕鏈的加倍，約440個左右(3)Ig肽鏈的氨基酸數(shù)第八十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(4)IgG的酶解和化學(xué)分解片段

第八十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日通過Pap水解IgGI可產(chǎn)生兩個相同的抗原結(jié)合片段（Fab）和一個可結(jié)晶片段（Fc）。①木瓜蛋白酶的酶解片段：

第八十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日Pep可將IgG1水解成大小不同的兩個片段。大片段是由兩個二硫鍵連接的Fab雙體，故稱F(ab‘)：，它具有Fab的功能，但卻是兩個抗原結(jié)合價，且肽鍵稍長。小片段是與Fc相似但分子長度略短的重鏈片段②胃蛋白酶（Pep）的酶解片段第八十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

當(dāng)IgG1在pH2.5的酸性條件下用疏基乙醇處理后，可使兩條重鏈間的二硫鍵還原，于是IgGI就分解成兩個對稱的半分子。若進(jìn)一步再加尿素或氯酸肌等處理，則此半分子又可進(jìn)一步分解為一重鏈和一輕鏈，同時也就喪失了與抗原結(jié)合的能力。③琉基試劑的分解產(chǎn)物：

第八十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日不同的IgG亞類是不同的。鏈內(nèi)二硫鍵:12～16個（每條輕鏈上有2～3個,重鏈上有4～5個）鏈間二硫鍵:2～11個（IgGI＝2,IgG2＝4,IgG3＝11,IgG4＝4）。(5)Ig的二硫鍵數(shù)第八十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日有單體、雙體和五體等。①單體：由一個“Y”形分子組成的Ig,稱為單體，例如IgG,IgD和IgE等。②雙體：由兩個"Y"形分子組成的Ig,稱為雙體。(6)Ig的體第八十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日由5個“丫’形分子分合成的星狀I(lǐng)g,稱為五體或五分體③五體：

第八十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日抗原結(jié)合價:

指每個Ig分子上能與抗原決定簇相結(jié)合部位的數(shù)目。(7）Ig的抗原結(jié)合價

組成：由一條輕鏈的V區(qū)和一條重鏈的V區(qū)合在一起可組成一個抗原結(jié)合價。這可比作一付鉗子只有當(dāng)兩個夾口同時存在時才能牢牢夾住一個物件那樣。第九十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日在電子顯微鏡下,游離的Ig分子不能產(chǎn)生清晰的圖像,只有當(dāng)它與2價的半抗原交聯(lián)成不大的復(fù)合物時才能產(chǎn)生清晰的圖像.（9）5類Ig的構(gòu)象第九十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日3.5類免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)和功能第九十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

胸腺依賴型抗體的產(chǎn)生的過程：①巨噬細(xì)胞（MΦ）的抗原遞呈作用

MΦ雖無特異識別抗原的功能，卻能有效地攝取、處理、遞呈抗原和激活T細(xì)胞；4.產(chǎn)抗體細(xì)胞的激活和抗體的形成第九十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日②T細(xì)胞對B細(xì)胞的激活在抗體形成過程中能特異地識別抗原，輔助B細(xì)胞，促使B細(xì)胞活化和進(jìn)一步分化成漿細(xì)胞以產(chǎn)生抗體；③漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體

B細(xì)胞是產(chǎn)生抗體的效應(yīng)細(xì)胞，也有特異識別抗原的功能。第九十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日機體產(chǎn)生抗體的規(guī)律:即存在初次免疫應(yīng)答和再次免疫應(yīng)答兩個階段。特點:5．機體產(chǎn)抗體的兩次應(yīng)答規(guī)律第九十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(1)抗體形成的克隆選擇學(xué)說①對抗體產(chǎn)生多樣性的解釋高等動物體內(nèi)天生存在著大量具有不同抗原受體的免疫細(xì)胞克隆,每個克隆產(chǎn)生特異抗體的能力不同。②抗原的作用類似“扳機”的的起動作用.某一特定抗原一旦進(jìn)人機體，選出相應(yīng)的細(xì)胞克?、郛?dāng)生物處于胚胎期時，其免疫系統(tǒng)的發(fā)育還不完善，某一淋巴細(xì)胞克隆若接觸相應(yīng)抗原，則它就被消除或受抑制，形成免疫耐受。④禁忌克?。ㄌ烊幻庖吣褪埽┛蓮?fù)活或發(fā)生突變，從而又可成為能與自身抗原成分起免疫應(yīng)答的克隆。6.抗體形成的機制第九十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日第九十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日克隆選擇學(xué)說圖示第九十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日體細(xì)胞突變學(xué)說

①編碼L鏈V區(qū)的基因是由VL序列和J序列組成，編碼L鏈C區(qū)的基因稱C序列。

②編碼H鏈V區(qū)的基因除VH和J序列外，在它們之間還存在一個D區(qū),H鏈的C區(qū)則由CH

序列所編碼。

③在胚胎期的細(xì)胞中，編碼L鏈V區(qū)的V和J基因間分得很遠(yuǎn)，而在成體的B細(xì)胞中,V和J可連在一起，但它們與CL序列間仍被內(nèi)含子隔開。只有當(dāng)整個DNA被轉(zhuǎn)錄成mRNA后，內(nèi)含子才被切除。H鏈基因的組裝方式與L鏈相似。

④V序列有數(shù)百種不同類型J,D和C基因也有多種，因此,L鏈V-J基因間的組合或H鏈V-D-J基因間的組合是極其多樣的。

⑤V除與J發(fā)生連接外，偶爾亦可與另一種V發(fā)生誤接，從而又增加了抗體蛋白的多樣性。(2）抗體多樣性的分子生物學(xué)機制

第九十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(1)單克隆抗體（McAb)的定義指由一純系B淋巴細(xì)胞克隆經(jīng)分化、增殖后的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的單一成分、單一特異性的免疫球蛋白分子。(2)淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)淋巴細(xì)胞雜交瘤簡稱雜交瘤，是由B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞兩者融合而成的一種既能在體內(nèi)外大量增殖，又能產(chǎn)生大量McAb的雜種細(xì)胞。7.單克隆抗體與淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)第一百頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

①選擇親本細(xì)胞株：第一種親本細(xì)胞—骨髓瘤細(xì)胞必須事前選用HGPRT酶（次黃嘌呤一鳥嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶）缺陷型細(xì)胞或TK酶（胸苷激酶）缺陷型細(xì)胞;

第二種親本細(xì)胞—B淋巴細(xì)胞是用SRBC先免疫小白鼠，待其在脾臟內(nèi)形成激活的B淋巴細(xì)胞后，再取出脾臟，制成B細(xì)胞懸液。

②混合雙親細(xì)胞：將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞以2:1至10:1的比例混合。

③促進(jìn)細(xì)胞融合：

融合劑為仙臺病毒（HVJ)或多用PEG。

④淘汰未融合的親本（HAT選擇性培養(yǎng)基）

⑤雜交瘤的擴大培養(yǎng)：優(yōu)良淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞株可通過注射到動物體內(nèi)增殖，也可在組織培養(yǎng)瓶或新型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶進(jìn)行擴大培養(yǎng)。

⑥單克隆抗體的改造

淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備方法

第一百零一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

淋巴細(xì)胞雜交瘤制備方法和McAb的方法第一百零二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日第一百零三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日①McAb在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用

AMcAb為深入研究Ig的一級結(jié)構(gòu)和高級結(jié)構(gòu)提供了理想的實驗材料

B制成熒光抗體探針，借以對生物大分子進(jìn)行精確定位②在實踐中的應(yīng)用用于精確地診斷疾病或提供抗病毒病等的高效治療劑；用McAb制成的固相親和層析系統(tǒng)可用以提純相應(yīng)的抗原；用McAb制備“藥物導(dǎo)彈”則可用作治療腫瘤等的靶向藥物

(3)單克隆抗體的應(yīng)用第一百零四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日第四節(jié)免疫學(xué)方法及其應(yīng)用

第一百零五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(1)特異性抗原決定簇和抗體分子V區(qū)間的各種分子引力是它們間特異性的物質(zhì)基礎(chǔ)。這種高度特異性是各種血清學(xué)反應(yīng)及其應(yīng)用的理論依據(jù)。

(2)可逆性抗原抗體間的結(jié)合僅是一種物理結(jié)合，故在一定條件下是可逆的。

一、抗原、抗體反應(yīng)的一般規(guī)律第一百零六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

(3）定比性

第一百零七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(4)階段性抗原與抗體的反應(yīng)一般有兩個明顯的階段，第一階段的特點是時間短（一般僅數(shù)秒），不可見；第二階段的時間長（從數(shù)分鐘至數(shù)小時或數(shù)天），可見。第二階段的出現(xiàn)受多種因子影響，

(5)條件依賴性最佳條件一般為pH=6～8,溫度為37～45℃,適當(dāng)振蕩，以及用生理鹽水作電解質(zhì)等。第一百零八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日二、抗原、抗體間的主要反應(yīng)第一百零九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（一）凝集反應(yīng)

1定義顆粒性抗原（完整的細(xì)菌細(xì)胞或血細(xì)胞等）與相應(yīng)的抗體在合適的條件下反應(yīng)并出現(xiàn)肉眼可見的凝集團(tuán)現(xiàn)象，稱凝集反應(yīng)或直接凝集反應(yīng)。

2.方法①直接法，包括玻片法和試管法等②間接法，典型的間接凝集試驗又稱被動凝集反應(yīng)（一）凝集反應(yīng)

第一百一十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日第一百一十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

定義:可溶性抗原與其相應(yīng)的抗體在合適條件下反應(yīng)，并出現(xiàn)肉眼可見的沉淀物現(xiàn)象，稱為沉淀反應(yīng)。1．測沉淀反應(yīng)的經(jīng)典方法（1）環(huán)狀沉淀反應(yīng)又稱環(huán)狀試驗態(tài)參數(shù)，是一種試管法。如炭疽病檢驗的Ascoli氏試驗

(2)絮狀沉淀反應(yīng)又稱絮狀反應(yīng)。把抗原與相應(yīng)抗體在試管內(nèi)或凹玻片上混勻，經(jīng)一段時間后，凡出現(xiàn)肉眼可見的絮狀沉淀顆粒者，即為陽性反應(yīng)。例如診斷梅毒的康氏試驗和測定抗毒素的絮狀沉淀單位等都用本法。（二）沉淀反應(yīng)第一百一十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(1)單向瓊糖擴散法(又稱單向免疫擴散法）。將抗原溶液滴加在混有抗體的瓊脂介質(zhì)小孔中，抗原經(jīng)擴散后，可在小孔周圍適當(dāng)位置形成一沉淀環(huán)，根據(jù)環(huán)的面積可進(jìn)行抗原的定量測定。

(2)雙向瓊脂擴散法又稱Ouchterlony法或雙向免疫擴散法。將抗原、抗體分別滴加在瓊脂介質(zhì)的不同小孔中，作相對方向擴散，在兩孔間合適的部位會形成沉淀線。

主要方法第一百一十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

第一百一十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日原理讓抗原與抗體在半固體凝膠介質(zhì)中作相對方向的自由擴散或在電場中進(jìn)行電泳，由于反應(yīng)物的分子大小、形狀和電荷的不同，導(dǎo)致兩者的擴散或泳動速度的差異，于是會在合適的比例處形成特異的沉淀帶。優(yōu)點靈敏度高、分辨力強等。

2.測沉淀反應(yīng)的現(xiàn)代方法

第一百一十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

是一種將雙向瓊脂擴散法與電泳技術(shù)相結(jié)合的方法。原理是：抗原與抗體分別置于凝膠板電場負(fù)、正極附近的小孔中，通電后，抗原向正極移動，而抗體則向負(fù)極移動，結(jié)果在兩孔間合適的抗原、抗體濃度處會形成一條沉淀線。此法具有速度快、靈敏度較高等優(yōu)點，應(yīng)用:乙型肝炎表面抗原(HBsAg）和甲種胎兒蛋白（AFP或aFP)等的檢測。(3）對流免疫電泳法（CIE）

第一百一十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日是一種單向瓊脂擴散法與電泳技術(shù)相結(jié)合的方法。方法:在已混有抗體的凝膠板上挖一小孔，向孔內(nèi)滴加抗原并進(jìn)行電泳，結(jié)果會沿著電泳方向形成火箭形沉淀線。沉淀線的高度與抗原量成正比，可用于AFP等定量測定。

(4）火箭電泳法第一百一十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日是一種將火箭電泳與血清免疫電泳相結(jié)合的方法。先將血清用電泳分離出各成分，然后切下凝膠板轉(zhuǎn)移至另一已加有抗血清的凝膠上，進(jìn)人垂直方向的第二次電泳，形成呈連續(xù)火箭樣的沉淀線(5）雙向免疫電泳法。第一百一十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

補體結(jié)合試驗是一種有補體參與，并以綿羊紅細(xì)胞和溶血素（紅細(xì)胞的特異抗體）是否發(fā)生溶血反應(yīng)作指示的一種高靈敏度的抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)。其中共有2個系統(tǒng)和5種成分參與反應(yīng)：

（三）補體結(jié)合試驗（CFT)

第一百一十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日基本原理：①補體可與任何抗原和抗體的復(fù)合物相結(jié)合；②指示系統(tǒng)如遇還未被抗原和抗體復(fù)合物所結(jié)合的游離補體，就會出現(xiàn)肉眼易見的溶血反應(yīng)。原理和基本操作第一百二十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日中和試驗:

由特異性抗體抑制相應(yīng)抗原的生物學(xué)活性的反應(yīng).稱為中和試驗.抗原生物學(xué)活性:

外毒素的毒性酶的催化活性病毒的感染性.（四）中和試驗第一百二十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日（一）免疫熒光技術(shù)免疫熒光技術(shù)又稱熒光抗體法(FAT)，一種將結(jié)合有熒光素的熒光抗體與抗原進(jìn)行反應(yīng)，借以提高免疫反應(yīng)靈敏度和適合顯微鏡觀察的免疫標(biāo)記技術(shù)。常用的熒光素有異硫抓酸熒光素(FTTC)、羅丹明等.

三、免疫標(biāo)記技術(shù)第一百二十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

免疫酶技術(shù)又稱酶免疫測定法。一種利用酶作標(biāo)記的抗體或抗抗體以進(jìn)行抗原、抗體反應(yīng)的高靈敏度的免疫標(biāo)記技術(shù)。原理:用酶作標(biāo)記抗體，以及用酶的特殊底物處理標(biāo)本來顯示酶標(biāo)記的抗體。由于酶的催化作用，使原來無色的底物通過水解、氧化或還原反應(yīng)而顯示出顏色。常用酶:HRP底物:DAB（二）免疫酶技術(shù)第一百二十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日標(biāo)記酶應(yīng)具備：①純度高、特異性強、穩(wěn)定性和溶解度好；②測定方法簡單、敏感、快速；③與底物作用后會呈現(xiàn)顏色；④與抗體交聯(lián)后仍保持酶活性。

第一百二十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日簡稱酶標(biāo)法。被廣泛用于檢測各種抗原或抗體。（1）雙抗體夾心法（sandwichELISA）這是一種測定待測標(biāo)本中是否含抗原的方法，步驟為：①將含已知抗體的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔內(nèi)，洗滌一次；②加待測抗原，如兩者是特異的，則發(fā)生結(jié)合，然后把多余抗體洗除；③加人與待測抗原呈特異的酶聯(lián)抗體（或稱第二抗體），使形成“夾心”；④加入該酶的底物后，若見到有色酶解產(chǎn)物（黑圓點）產(chǎn)生，則說明在孔壁上存在相應(yīng)的抗原。

1．酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA)

第一百二十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日一種檢測血清中是否含特定抗體的方法，步驟為：①將已知抗原吸附在微量滴定板的小孔內(nèi)，用緩沖液洗滌3次；②加待檢抗血清，如其中含特異抗體，則與抗原發(fā)生特異結(jié)合，隨即用緩沖液洗滌3次，洗去多余抗體；③加人酶聯(lián)抗抗體（抗人下球蛋白抗體），使它與已吸附的抗原和抗體的復(fù)合物相結(jié)合，再洗3次，以除去未吸附的酶聯(lián)抗抗體；④加入該酶的底物，使底物分解并產(chǎn)生顏色，待終止反應(yīng)后，依底物顏色深淺，即可知樣品中的抗體含量。(2)間接免疫吸附測定法(indirectELISA)

第一百二十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日以上的ELISA都是在液相中進(jìn)行酶底物的顯色反應(yīng)的，其產(chǎn)物均為可溶性有色化合物，故也可用分光光度法測其含量。本法在原理上與以上兩法相同，方法上的不同處是：①用硝酸纖維薄膜取代上述微量滴定板；②最終顯色反應(yīng)是用不溶于水的有色沉淀物，例如，堿性磷酸酶的底物不能用對硝基酚磷酸鹽(pNPP），而要用氮藍(lán)四哇(NBT）等。最終可從薄膜上沉淀物顏色的有無或多少確定結(jié)果。此法的優(yōu)點是靈敏度高（比普通ELISA高10～100倍），與放射免疫測定法相當(dāng)。

(3)斑點酶免疫吸附法（dot-ELISA）

第一百二十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

（1）免疫組織化學(xué)又稱酶標(biāo)免疫組織化學(xué)，其原理與上述dot－ELISA相同，不同處僅用組織切片或細(xì)胞樣品代替固相抗原。

(2）免疫印跡幾種相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)先經(jīng)SDS凝膠電泳分離出不同的條帶，再轉(zhuǎn)印至硝酸纖維膜上，然后用酶標(biāo)記的抗體對條帶進(jìn)行顯色和鑒定。優(yōu)點:SDS的高分辨率和免疫反應(yīng)的高特異性等應(yīng)用:

檢測不同基因所表達(dá)的各種微量蛋白質(zhì)抗原。2．酶標(biāo)記免疫定位第一百二十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

放射免疫測定法是一類利用放射性同位素標(biāo)記的抗原或抗體來檢測相應(yīng)抗體或抗原的高靈敏度免疫分析方法。優(yōu)點:

高靈敏度和高特異性等。常用同位素:125I,131I

3H35S等。放射性強度檢測:

液體閃爍儀（用于溶液）

X線膠片自顯影（用于固相）計出。應(yīng)用:

激素、核酸、病毒抗原或腫瘤抗原等微量物質(zhì)的測定。(三)放射免疫測定法(RIA)第一百二十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

免疫電鏡技術(shù)是一種采用電子致密物質(zhì)標(biāo)記的抗體與其相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合后，借電鏡檢出這一標(biāo)記復(fù)合物的技術(shù)。標(biāo)記抗體的電子致密物質(zhì):

辣根過氧化物酶和鐵蛋白等檢出對象:細(xì)菌、病毒或動植物細(xì)胞的超薄切片等。用膠體金或金、銀的微粒來對抗體進(jìn)行標(biāo)記，以進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)志定位、免疫細(xì)胞亞群計數(shù)或白血病分型等。

（四）免疫電鏡技術(shù)（IEM)第一百三十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

發(fā)光免疫測定法是一種把化學(xué)．發(fā)光或生物發(fā)光反應(yīng)與免疫測定結(jié)合后的高靈敏度分析方法。發(fā)光反應(yīng)一般均為氧化反應(yīng)。優(yōu)點是：①可定量檢測抗原或抗體；②靈敏度高（約比酶免疫技術(shù)高1000倍）；③試劑穩(wěn)定，無毒；④檢測操作簡便、快速(0.5一數(shù)h).(五)發(fā)光免疫測定法(LIA)第一百三十一頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日第五節(jié)生物制品及其應(yīng)用第一百三十二頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日生物制品:在人工免疫中，可作為預(yù)防、治療和診斷用的來自生一物體的各種制劑，都稱生物制品。生物制品可以是特異性的抗原（疫苗，菌苗，類毒素）、抗體（治療用血清，診斷用血清，免疫球蛋白，單克隆抗體等），細(xì)胞免疫制劑，也可以是各種非特異性的免疫調(diào)節(jié)劑。第一百三十三頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日(一)常規(guī)疫苗

1．疫苗用于預(yù)防傳染病的抗原制劑稱為疫苗。廣義的疫苗包括菌苗和疫苗兩類生物制品；狹義的疫苗僅指用病毒、立克次氏體或螺旋體等微生物制成的生物制品，而菌苗則僅指用細(xì)菌制成的生物制品。疫苗又可分活疫苗和死疫苗兩類。一、人工自動免疫類生物制品第一百三十四頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

指用人工的方法使病原體減毒或從自然界篩選某病原體的無毒株或微毒株所制成的活微生物制劑，有時稱減毒活疫苗。優(yōu)點：接種劑量低，作用持久（一般3～5年）、可靠，缺點：是不易保存，有時還會發(fā)生增毒變異。如：卡介苗(BCG）、鼠疫菌苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗和甲型肝炎疫苗等。(1)活疫苗第一百三十五頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

用理、化因子殺死病原體，但仍保留原有免疫原性的疫苗，稱死疫苗?？袢『土餍行愿忻暗乃酪呙绲?。優(yōu)點：是使用安全，保存容易；缺點：是使用劑量較大，須多次接種，持續(xù)時間短（數(shù)月至1年），有時還會引起機體發(fā)熱、全身或局部腫痛等副作用。(2)死疫苗第一百三十六頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

類毒素系細(xì)菌的外毒素經(jīng)甲醛脫毒后仍保留原有免疫原性的預(yù)防用生物制品。精制的吸附類毒素，它是將類毒素吸附在明礬或磷酸鋁等佐劑上,以延緩它在體內(nèi)的吸收、延長作用時間和增強免疫效果。常用的類毒素:

破傷風(fēng)類毒紊和白喉類毒紊等，它們常與百日咳死菌苗一起，制成“百一白一破”三聯(lián)制劑使用。2．類毒素第一百三十七頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日

又稱自體疫苗，指用從病人自身病灶中分離出來的病原體所制成的死疫苗。例:

由葡萄球菌引起的反復(fù)發(fā)作的慢性化膿性感染，或是由大腸桿菌引起的尿路感染等疾病，當(dāng)用抗生素治療無效時，就可設(shè)法從其自身病灶中分離病原菌，待制成死疫苗并作多次皮下注射后，有可能治愈該病。3.自身疫苗第一百三十八頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日1．亞單位疫苗一種保留病原體中有效免疫原成分，而去除其無效或有害成分的化學(xué)純品疫苗。例如:

只含流感病毒血凝素、神經(jīng)氨酸酶成分的流感亞單位疫苗；只含腺病毒衣殼的腺病毒亞單位疫苗；用乙型肝炎病毒表面抗原制成的“乙肝”亞單位疫苗；（二）新型疫苗第一百三十九頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日2.化學(xué)疫苗用化學(xué)方法提取病原體中有效免疫成分制成的化學(xué)純品疫苗，其成分一般比亞單位疫苗更為簡單。例如:

肺炎鏈球菌的英膜多糖或腦膜炎奈氏球菌的莢膜多糖都可制成多糖化學(xué)疫苗。3．多肽疫苗又稱化學(xué)合成疫苗，指用人工合成的高免疫原性多肽片段制成的疫苗，稱多肽疫苗。例如:

乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的各種合成肽段，白喉毒素的14肽，以及流感病毒血凝素的18肽等。第一百四十頁，共一百五十三頁，2022年，8月28日4.基因工程疫苗又稱DNA重組疫苗。