檢測(cè)生物組織中的糖類脂肪蛋白質(zhì)

一、實(shí)驗(yàn)原理：斐林試劑

水浴加熱（50—65℃）還原糖磚紅色沉淀脂肪蘇丹Ⅳ染液橘黃色脂肪蘇丹Ⅲ染液紅色蛋白質(zhì)雙縮脲試劑紫色反應(yīng)碘液淀粉藍(lán)色糖類選材——選無(wú)色、白色或淺色，避免材料自身的顏色對(duì)實(shí)驗(yàn)變化顏色的掩蓋1、還原糖的檢測(cè)選材制備組織樣液（制漿、一層紗布過濾）取2ml待測(cè)組織樣液加入1ml斐林試劑磚紅色沉淀50—65℃水浴顏色變化：棕色磚紅色沉淀(Cu2O)藍(lán)色(Cu(OH)2)2、脂肪的檢測(cè)和觀察：圓形小顆粒呈橘黃色，說明有脂肪存在。方法一：組織樣液+蘇丹Ⅲ染液→橘黃色取材：方法二：制作臨時(shí)裝片，染色，顯微鏡觀察制片①取最薄②染色③去浮色（50﹪酒精）觀察顯微鏡鏡結(jié)論：顏色淺或無(wú)，脂肪含量豐富注意事項(xiàng)：①切片要薄，如厚薄不均就會(huì)導(dǎo)致觀察時(shí)

。②酒精的作用是：

。③用第二種方法需使用

觀察

洗去浮色有的地方清晰有的地方模糊顯微鏡3、蛋白質(zhì)的檢測(cè)和觀察：

選材

選含

豐富的豆?jié){或雞蛋清溶液蛋白質(zhì)制備組織樣液呈色反應(yīng)組織樣液2mL雙縮脲試劑A液1mL雙縮脲試劑B液4滴搖勻后變成紫色結(jié)論：說明組織樣液中存在蛋白質(zhì)。1.某些植物，如菠菜，其葉片中含有大量的可溶性還原糖，但不宜做鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn)材料，原因是（）A.葉片不宜磨碎B.研磨時(shí)糖類易被破壞C.葉片中葉綠素顏色較深，掩蓋了實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察D.葉片中光合作用的產(chǎn)物以淀粉的形式存在C對(duì)應(yīng)訓(xùn)練2.在下列三支試管中分別加入一些物質(zhì)，甲試管:豆?jié){;乙試管:氨基酸溶液;丙試管:牛奶和蛋白酶;上述三支試管中加入雙縮脲試劑振蕩后,有紫色反應(yīng)的是()A.甲B.甲、乙C.甲、乙、丙D.甲、丙

D3.生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機(jī)物的鑒定實(shí)驗(yàn)中，以下操作錯(cuò)誤的是（）A．可溶性還原糖的鑒定，可用酒精燈直接加熱產(chǎn)生磚紅色沉淀B．只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡C．用雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)不需要加熱D．使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)配現(xiàn)用A4.下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作步驟的敘述中，正確的是

Ａ．用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲液和乙液，可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定

Ｂ.脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染成橘黃色的脂肪滴

C.鑒定可溶性還原糖時(shí)，要加入斐林試劑甲液搖勻后，再加入乙液

Ｄ．用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑A液與B液要混合均勻后，再加入含樣品的試管中，且必須現(xiàn)配現(xiàn)用（）Ｂ斐林試劑與雙縮脲試劑的比較A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4生成紫色絡(luò)合物磚紅色沉淀先加A液，再加B液，不需加熱甲乙液等量混合，現(xiàn)配現(xiàn)用，需加熱蛋白質(zhì)還原糖試劑組成結(jié)果試劑用法檢測(cè)對(duì)象雙縮脲試劑斐林試劑六、應(yīng)用1.檢測(cè)尿糖——2.真假奶粉檢測(cè)——3.真假脫脂奶粉檢測(cè)——4.診斷是否患腎炎——5.檢測(cè)唾液中是否含酶——斐林試劑雙縮脲試劑蘇丹Ⅲ/Ⅳ染液雙縮脲試劑雙縮脲試劑試卷《第一節(jié)細(xì)胞中的元素和化合物》P例2、7、8、10、15⑴斐林試劑磚紅色葡萄糖⑵蘇丹Ⅲ染液蘇丹Ⅲ能溶解在酒精中⑶過量的雙縮脲試劑B會(huì)與試劑A發(fā)應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色⑷①分別配制、儲(chǔ)存②0.1g/mlNaOH0.01g/mlCuSO4

③燒杯底部實(shí)驗(yàn)者④太大15．根據(jù)“檢測(cè)生物組織中糖類、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定”實(shí)驗(yàn)，回答下列問題：

（1）鑒定成熟蘋果肉中存在還原性糖所用的試劑是__________________，該試劑與細(xì)胞內(nèi)還原性糖發(fā)生作用，形成_______________沉淀，因此，可用該試劑檢驗(yàn)糖尿病病人尿液中是否存在____________。

（2）鑒定花生子葉細(xì)胞中脂肪的實(shí)驗(yàn)中，能將脂肪染成橘黃色的染液是____________，用其染色時(shí)，要用酒精來(lái)沖洗浮色，這是因?yàn)開_______________________________。

（3）鑒定黃豆組織中存在蛋白質(zhì)時(shí)，向組織液中加入雙縮脲試劑A搖勻，再向樣液中加入雙縮脲試劑B搖勻。其中雙縮脲試劑B的量只有4滴，而不能過量，為什么？

__________________________________________________________________。（4）本實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

①斐林試劑極不穩(wěn)定，其甲液和乙液需_______________，使用時(shí)再臨時(shí)混合均勻用于實(shí)驗(yàn)。②雙縮脲試劑的使用，應(yīng)先加試劑______________，造成堿性環(huán)境，再加試劑______。③在還原糖的鑒定中，對(duì)試管中溶液加熱時(shí)，試管底部不要觸及_____________，試管口不要朝向_____________________，以免溶液沸騰時(shí)沖出試管造成燙傷。④蛋白質(zhì)的鑒定樣品液濃度不能___________________，以免實(shí)驗(yàn)后粘住試管壁，洗不凈。⑴斐林試劑磚紅色葡萄糖⑵蘇丹Ⅲ染液蘇丹