宮頸標(biāo)本處理的病理學(xué)技能優(yōu)秀課件

宮頸標(biāo)本處理的病理學(xué)技能第一頁，共八十三頁，2022年，8月28日病理技術(shù)操作流程脫水包埋切片HE

染色封片閱片取材第二頁，共八十三頁，2022年，8月28日取材核對病人的姓名，科室，住院號等。核對標(biāo)本性質(zhì)，取出的部位，標(biāo)本數(shù)目，臨床診斷是否做標(biāo)記：如帶線、切緣、錐頂?shù)鹊谌摚舶耸摚?022年，8月28日活檢標(biāo)本的取材活檢組織及時固定固定液總量>標(biāo)本5倍以上取材時應(yīng)描述活檢組織大小、顏色、質(zhì)地固定好的組織應(yīng)放濾紙包好放入包埋盒第四頁，共八十三頁，2022年，8月28日注意：較小較碎的組織應(yīng)用紗布或濾紙包裹，滴入伊紅放入包埋盒內(nèi)直徑小于0.1cm的標(biāo)本，可描述“針尖大小”，直徑大于0.1cm的標(biāo)本應(yīng)記錄實際大小，切忌用“米粒大小”或“綠豆大小”等字樣描述。厚度大于0.5cm的標(biāo)本，切開描述切面，切開包埋。大體可辨認的息肉樣組織，則描述之：如-色息肉狀-質(zhì)地組織-塊，大小-第五頁，共八十三頁，2022年，8月28日組織學(xué)檢查的組織厚度不得超過3mm并且長短不能超過使用的包埋盒的大小。大多數(shù)實體標(biāo)本應(yīng)該切成邊長10-15mm厚2-3mm大?。旱诹?，共八十三頁，2022年，8月28日大體描述1._色_（質(zhì)地）組織1塊，大小為***cm2._色_（質(zhì)地）組織2塊，大小分別為***cm及***cm3._色_（質(zhì)地）組織3塊（或3塊以上），最大者大小為***cm,最小者大小為***cm第七頁，共八十三頁，2022年，8月28日陰道鏡活檢標(biāo)本的取材方法用品：裝標(biāo)本用的凍存管/標(biāo)本瓶，內(nèi)置固定液。0.5cm的微孔濾膜小塊。牙簽、鑷子、記號筆和登記本。第八頁，共八十三頁，2022年，8月28日方法：用戴有一次性乳膠手套的左手食指緊貼活檢鉗，右手持牙簽，將活檢鉗內(nèi)鉗取的標(biāo)本，撥到食指上攤平，用已備好的濾膜貼附上面,拇指輕壓,迅速置于已裝好固定液的標(biāo)本瓶中，固定液的總量必須大于標(biāo)本塊的5倍以上。目的：便于包埋過程中的定位,防止埋面不當(dāng)造成組織的平切。陰道鏡活檢標(biāo)本的取材方法第九頁，共八十三頁，2022年，8月28日第十頁，共八十三頁，2022年，8月28日宮頸錐切標(biāo)本取材描述錐形體的大?。ㄖ睆胶蜕疃龋┖托螤?，應(yīng)該測量基底寬度及高度，描述顏色、外觀、體積（應(yīng)測量忌用比擬）、質(zhì)地（軟，中等、硬等）上皮：顏色，光滑，糜爛，修復(fù)，撕裂，腫塊（大小，形狀，部位），囊腫（內(nèi)容物，大?。┮郧盎顧z的部位第十一頁，共八十三頁，2022年，8月28日第十二頁，共八十三頁，2022年，8月28日宮頸錐切標(biāo)本取材1.新鮮狀態(tài)下用縫線標(biāo)記12點位置2.

將一把鋒利的刀尖插入宮頸管在12點位置縱向剪開

標(biāo)本（如沒有定位，可在任一部位剪開）3.粘膜面朝上釘于軟木板上固定過夜第十三頁，共八十三頁，2022年，8月28日取材:4.

用墨汁小心涂抹手術(shù)切緣5.

間隔2~3mm做順時針方向縱性切面，切取的每一面均應(yīng)包含鱗柱交界處上皮，必要時可修剪掉部分間質(zhì)。

每一個蠟塊在3個不同的平面上切片，以觀察切緣情況。宮頸錐切標(biāo)本第十四頁，共八十三頁，2022年，8月28日宮頸錐切標(biāo)本第十五頁，共八十三頁，2022年，8月28日宮頸錐切標(biāo)本第十六頁，共八十三頁，2022年，8月28日宮頸錐切標(biāo)本的取材第十七頁，共八十三頁，2022年，8月28日宮頸錐切標(biāo)本的取材第十八頁，共八十三頁，2022年，8月28日第十九頁，共八十三頁，2022年，8月28日宮頸癌根治標(biāo)本子宮切除標(biāo)本（經(jīng)腹）1.測量標(biāo)本大小并稱重2.辨認子宮的前后壁①

腹膜反折

②附件

第二十頁，共八十三頁，2022年，8月28日剖開方式①

從前壁宮頸外口處中央向上縱行剪開宮壁至子宮底，然后呈“一”字型切向雙側(cè)宮角.②用鋒利的刀從宮頸兩側(cè)一直打向雙側(cè)宮角將子宮分為前后兩部分.第二十一頁，共八十三頁，2022年，8月28日第二十二頁，共八十三頁，2022年，8月28日第二十三頁，共八十三頁，2022年，8月28日子宮切除標(biāo)本（經(jīng)腹）3.如有體積大的腫瘤，平行切開4.釘于軟木板上固定過夜宮頸癌根治標(biāo)本第二十四頁，共八十三頁，2022年，8月28日子宮切除標(biāo)本—描述子宮切除術(shù)的類型，包含的器官漿膜面的顏色，纖維性粘連，腫瘤宮頸外口直徑，鱗柱狀交界處粘膜性狀宮頸管長度，粘膜性狀，切面囊腫宮體內(nèi)膜：外觀、厚度、出血、息肉、囊腫、腫瘤子宮肌壁：厚度、出血點或斑、腫瘤（部位、數(shù)量、大小、出血、壞死、鈣化）輸卵管：根部其形狀、粗度，作橫切面卵巢：大小，質(zhì)地、顏色，切面第二十五頁，共八十三頁，2022年，8月28日子宮切除標(biāo)本—取材1.宮頸從宮頸外口以上大約2.5cm處離斷宮頸，以錐切標(biāo)本方式取材并分別標(biāo)記部位。宮頸深部浸潤性癌：至少取3塊，其中至少有1塊為腫瘤浸潤最深處，1塊包含宮頸全層應(yīng)取陰道壁切緣和左，右側(cè)宮旁組織第二十六頁，共八十三頁，2022年，8月28日2.宮頸管如有腫瘤則按腫瘤取材原則取材3.宮體如沒有明顯的腫瘤：接近宮底處至少取2塊，盡可能包括宮體全層，任何大體異常處另取如有明顯的腫瘤：腫瘤至少取3塊,其中至少有1塊為腫瘤浸潤最深處1塊包含宮體全層，非腫瘤性子宮內(nèi)膜取2塊，宮體和宮頸交界處取1塊子宮切除標(biāo)本—取材第二十七頁，共八十三頁，2022年，8月28日4.肌瘤

3個以下每個肌瘤至少取1塊，體積大者可多至3塊，3個以上仔細觀察每個肌瘤的不同切面，切面性狀相同或相似者共取3~4塊即可，任何大體上的異常的區(qū)域均分布取材。５.宮體肌壁有出血或灰紅色斑點狀區(qū)域多取6.卵巢和輸卵管7.各站淋巴結(jié)子宮切除標(biāo)本—取材第二十八頁，共八十三頁，2022年，8月28日卵巢切除標(biāo)本—描述_側(cè)卵巢切除標(biāo)本一件，大小為***cm,表面_色，光滑/凹凸不平，有/無乳頭狀突起。垂直于卵巢長軸做平行切面，見切面呈_色，可見黃、白體結(jié)構(gòu)。局部見囊腔，大小為***cm,單/多房，內(nèi)壁光滑/有突起，囊壁厚*cm,內(nèi)容物淡黃色清亮液體。第二十九頁，共八十三頁，2022年，8月28日單純或預(yù)防性切除標(biāo)本取1~2塊囊腫剔除標(biāo)本至少取3塊，盡量囊壁最厚處，薄壁囊腫最好打卷取材，良性畸胎瘤應(yīng)取到頭節(jié)復(fù)雜的囊性標(biāo)本盡量多取乳頭處及囊壁較厚處實性腫瘤部分按照實性腫瘤取材卵巢切除標(biāo)本—取材第三十頁，共八十三頁，2022年，8月28日輸卵管——處理步驟切開前固定標(biāo)本，如果附著在子宮上，則應(yīng)在原位固定測量輸卵管長度和最大直徑

如果輸卵管大小相對正常，則每隔5mm連續(xù)切開并檢查，注意不要完全切斷如果輸卵管明顯增大，則將輸卵管完全縱向剖開，如需要再做平行切面第三十一頁，共八十三頁，2022年，8月28日輸卵管——描述輸卵管長度和最大直徑漿膜：纖維素，出血，纖維性粘連至卵巢或其他器官壁：厚度異常？破裂？如有,則描述位置傘端的外觀：開放？閉合？內(nèi)翻？管腔：明顯？擴張？內(nèi)容物；如果異常增多測量直徑粘膜：萎縮？增厚？第三十二頁，共八十三頁，2022年，8月28日分別在峽、壺腹及傘部各取1塊輸卵管——取材第三十三頁，共八十三頁，2022年，8月28日第三十四頁，共八十三頁，2022年，8月28日第三十五頁，共八十三頁，2022年，8月28日第三十六頁，共八十三頁，2022年，8月28日第三十七頁，共八十三頁，2022年，8月28日標(biāo)本為全切/陰式切除的全子宮，部分陰道壁及左/右/雙側(cè)附件。陰道壁長*cm，周徑為*cm。子宮大小為***cm,漿膜面_色，光滑/不光滑/粗糙/凸凹不平見多個隆起。子宮頸外口呈_色，粘膜光滑/粗糙/糜爛/中重度糜爛/見一內(nèi)生性/外生性腫物（腫物大小為***cm,切面呈_色，侵及肌層/外膜層，向上累及/未累及子宮內(nèi)膜）。第三十八頁，共八十三頁，2022年，8月28日宮頸管長*cm，粘膜呈_色，可見一/多個息肉/小囊腫，大小為***cm,囊內(nèi)容_,子宮內(nèi)膜呈_色，光滑/粗糙/見一/多個息肉狀突起/見一隆起型腫物（腫物大小為***cm，切面呈灰白/灰紅色，侵及肌層/外膜層，向下累及/未累及宮頸）。第三十九頁，共八十三頁，2022年，8月28日子宮內(nèi)膜厚*cm,子宮體肌壁厚*cm,于內(nèi)膜下/肌壁間/漿膜下可見一個/多個_色結(jié)節(jié)狀腫物，大者大小為***cm,小者大小為***cm,切面_色，編織狀明顯/不明顯，質(zhì)地_，與周圍肌壁組織分界清楚/不清楚，其余肌壁組織切面可見/未見散在暗紅色區(qū)域。左側(cè)輸卵管長*cm,直徑為*cm,卵巢大小為*cm,右側(cè)輸卵管長*cm,直徑為*cm,卵巢大小為*cm。第四十頁，共八十三頁，2022年，8月28日第四十一頁，共八十三頁，2022年，8月28日總技術(shù)流程（1）固定：（2）脫水：（3）透明：（4）浸蠟：（5）包埋：（6）切片：（7）烤片：（8）HE染色常規(guī)制片技術(shù)第四十二頁，共八十三頁，2022年，8月28日

二次固定固定

脫水

透明浸蠟置換作用

媒介作用

石蠟滲透第四十三頁，共八十三頁，2022年，8月28日固定常用10%中性甲醛固定液配方：

市售甲醛（40%）100mlD.W.900ml磷酸二氫鈉4g磷酸氫二鈉6.5g固定時間4h以上，大標(biāo)本應(yīng)在24h以上第四十四頁，共八十三頁，2022年，8月28日固定是組織制片的基礎(chǔ)及關(guān)鍵步驟固定是否徹底，影響著整個制片的過程是整個標(biāo)本處理過程的一個主要環(huán)節(jié)固定第四十五頁，共八十三頁，2022年，8月28日固定目的：

1.保持組織形態(tài)學(xué)特征清晰和穩(wěn)定2.阻止組織、細胞自溶與腐敗3.凝固或沉淀組織細胞內(nèi)物質(zhì)4.保存組織細胞抗原性5.使組織保持一定的硬度和彈性固定第四十六頁，共八十三頁，2022年，8月28日一種好的固定液特性：1.滲透力相對較強，能迅速滲入組織內(nèi)部2.組織收縮、膨脹或變硬相對很小3.能夠硬化、固化組織，增加組織硬度4.使得組織對染料產(chǎn)生較強的親和力，并產(chǎn)生較佳的折光率第四十七頁，共八十三頁，2022年，8月28日影響固定因素：固定液類型及酸堿度固定液濃度固定時間與組織體積固定的溫度第四十八頁，共八十三頁，2022年，8月28日固定液濃度固定液濃度過低達不到固定效果，濃度過高穿透力降低，易引起組織中央固定不良。福爾馬林的濃度大于10%的會增加組織變硬和收縮的程度。

第四十九頁，共八十三頁，2022年，8月28日甲醛

酒精冰醋酸丙酮第五十頁，共八十三頁，2022年，8月28日第五十一頁，共八十三頁，2022年，8月28日第五十二頁，共八十三頁，2022年，8月28日固定時間與組織體積

一般4-24小時組織取材厚度原則在4mm以內(nèi)對于免疫組化而言：固定不足，組織抗原彌散，結(jié)構(gòu)不佳，固定過度，抗原破壞。組織固定后如不能及時進入脫水，可置70%酒精中進行適度保存。

第五十三頁，共八十三頁，2022年，8月28日固定溫度溫度降低，減慢了固定液滲透速度；溫度升高，分子彌散增加，分子活動加快，滲透速度加快。大多數(shù)組織適宜的固定溫度為25°C，全自動脫水機溫度一般控制在35°C左右。一般不建議加熱固定第五十四頁，共八十三頁，2022年，8月28日

脫水原則：

1.將組織內(nèi)水分脫干凈但又不使組織過度脫水2.酒精脫水應(yīng)由低濃度至高濃度進行脫水劑特性及要求：

1.能與水、透明劑在任何比例下混合2.對組織的穿透性能良好3.脫水速度快4.對組織有一定硬化作用脫水第五十五頁，共八十三頁，2022年，8月28日酒精：

最常用脫水劑，具有親水性，能溶于水和其他有機溶劑，脫水力強，能硬化組織。能很好與透明劑混溶易使組織收縮、變脆，導(dǎo)致透明劑難進入組織從低濃度開始逐級增加濃度脫水第五十六頁，共八十三頁，2022年，8月28日低濃度酒精在組織中穿透力很強，比高濃度更易滲透到組織內(nèi)部組織在低濃度酒精中脫水充分，高濃度只是脫去從低濃度到高濃度之間的水分高濃度酒精滲透力不強，延長時間意義不大，反而會使得組織收縮、變脆脫水第五十七頁，共八十三頁，2022年，8月28日75%酒精(1h)→85%酒精(1h)→95%酒精Ⅰ(1h30')→95%酒精Ⅱ(1h)→100%酒精(1h30')→100%酒精(1h)脫水第五十八頁，共八十三頁，2022年，8月28日

二甲苯Ⅰ‘（1h）→二甲苯Ⅱ（1h）

脫水

蠟Ⅰ（1h30‘）58-60℃→蠟Ⅱ（1h30’）58-60℃→蠟Ⅲ（1h）58-60℃

蠟溫過高可降低浸蠟時間，浸蠟用的石蠟要定期更新，保持純度透明第五十九頁，共八十三頁，2022年，8月28日透明劑在脫水劑和石蠟之間起著橋梁作用它能與兩種溶液相溶在此過程中，因組織塊中的水分被透明劑取代，其折射指數(shù)接近于組織蛋白的折光指數(shù)，組織塊變得透亮。透明第六十頁，共八十三頁，2022年，8月28日二甲苯：最常用的透明劑無色透明、有毒性，不溶于水、易揮發(fā)透明力強容易使得組織收縮、變形、變脆長期接觸會呼吸道黏膜有刺激作用透明第六十一頁，共八十三頁，2022年，8月28日置換組織中的透明劑，石蠟滲入組織組織浸蠟、包埋，實質(zhì)上一個目的兩個步驟石蠟是最常用的浸潤劑和包埋劑一般用于浸蠟的石蠟熔點為56-58°C浸蠟溫度應(yīng)高于石蠟熔點2-4°C浸蠟第六十二頁，共八十三頁，2022年，8月28日采用石蠟包埋法鑷子夾取組織薄片，立埋（切記不能平埋）于包埋模中（埋鱗狀上皮的那面）。把包埋修好的蠟塊按號順序排列。放入4℃冰箱中保存待切片包埋第六十三頁，共八十三頁，2022年，8月28日第六十四頁，共八十三頁，2022年，8月28日第六十五頁，共八十三頁，2022年，8月28日注意調(diào)節(jié)組織平面，使之保持垂直，并與刀刃平行。切片機的切片厚度標(biāo)尺，一般3～4nm活檢組織需連續(xù)切片，每張切片上4-8張組織片。切片第六十六頁，共八十三頁，2022年，8月28日第六十七頁，共八十三頁，2022年，8月28日第六十八頁，共八十三頁，2022年，8月28日第六十九頁，共八十三頁，2022年，8月28日石蠟切片烤后從溫箱中拿出應(yīng)迅速浸入二甲苯洗去切片中的石蠟。時間寧長勿短，否則脫蠟不盡無法著色。HE染色第七十頁，共八十三頁，2022年，8月28日第七十一頁，共八十三頁，2022年，8月28日各級酒精洗去切片中的二甲苯，使切片逐級酒精入水。HE染色第七十二頁，共八十三頁，2022年，8月28日蘇木精染色時間：依染液的新舊與著色能力強弱有關(guān)，染色時間應(yīng)隨時觀察切片著色程度伊紅染色時間：染色程度應(yīng)以蘇木精對核的著色程度為參照標(biāo)準(zhǔn)，以求達到對比鮮明。HE染色第七十三頁，共八十三頁，2022年，8月28日第七十四頁，共八十三頁，2022年，8月28日脫水、透明HE染色第七十五頁，共八十三頁，2022年，8月28日中性樹膠濃度適宜。過濃氣泡不易擴散，不易排出。過稀易溢出玻片，膠內(nèi)二甲苯揮發(fā)后產(chǎn)生氣泡不便觀察。封固第七十六頁，共八十三頁，2022年，8月28日建議每個實施單位，有2名病理醫(yī)師閱片，如果診斷一致，確定診斷，如果不一致，應(yīng)增加第三位醫(yī)師閱片，對確實有爭議的病例，可請上級專家閱片診斷。病理閱片第七十七頁，共八十三頁，2022年，8月28日鱗狀細胞癌的組織學(xué)報告內(nèi)容包括以下幾個方面：1、組織學(xué)類型及分級2、腫瘤部位3、浸潤深度或厚度4、腫瘤大小5、血管淋巴管浸潤6、淋巴結(jié)狀況7、切緣狀況診斷報告第七十八頁，共八十三頁，2022年，8月28日宮頸癌微浸潤癌病理報告模板

宮頸，LEEP，宮頸錐切，宮頸切除術(shù)，＿＿子宮切除術(shù)浸潤性＿＿＿＿癌浸潤深度：＿＿＿＿mm浸潤橫徑：＿＿＿＿mm淋巴管/血管間隙受累：＿＿＿＿切緣宮頸內(nèi)口：＿＿＿＿＿宮頸外口：＿＿＿＿＿深部：＿＿＿＿＿其他第七十九頁，共八十三頁，2022年，8月28日宮頸微浸潤癌診斷模板范例

宮