標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 38506-2020 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中生化參數(shù)的測(cè)定方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),旨在規(guī)范動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的生化參數(shù)測(cè)定方法。該標(biāo)準(zhǔn)涵蓋了多種關(guān)鍵生化指標(biāo)的測(cè)量技術(shù),包括但不限于細(xì)胞活力、蛋白質(zhì)含量、代謝產(chǎn)物濃度等,適用于生物制藥、科研等領(lǐng)域中對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)的情況。

對(duì)于細(xì)胞活力的測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)推薦使用MTT法或CCK-8法等間接評(píng)價(jià)方式來(lái)評(píng)估活細(xì)胞的數(shù)量;而直接計(jì)數(shù)法則可通過顯微鏡觀察結(jié)合臺(tái)盼藍(lán)染色實(shí)現(xiàn),后者能夠區(qū)分出死活細(xì)胞從而更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞群體的狀態(tài)。

在蛋白質(zhì)含量測(cè)定方面,《GB/T 38506-2020》介紹了BCA(Bicinchoninic Acid)法和Bradford法兩種常用的技術(shù)手段。這兩種方法都基于特定試劑與蛋白質(zhì)反應(yīng)后產(chǎn)生顏色變化這一原理,通過比色分析即可快速獲得樣品中總蛋白量的信息。

此外,針對(duì)乳酸、氨等重要代謝產(chǎn)物的檢測(cè),《GB/T 38506-2020》也提供了相應(yīng)的指導(dǎo)方案。例如,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)或者高效液相色譜(HPLC)技術(shù)可以有效測(cè)定這些物質(zhì)的具體濃度水平,為研究人員提供了強(qiáng)有力的數(shù)據(jù)支持以優(yōu)化培養(yǎng)條件。


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....

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  • 2020-03-06 頒布
  • 2020-03-06 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS07080

A40.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T38506—2020

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中生化參數(shù)的測(cè)定方法

Determinationofbiochemicalparametersinanimalcellcultureprocess

2020-03-06發(fā)布2020-03-06實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T38506—2020

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)生化檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)測(cè)試技術(shù)研究院生物研究所信達(dá)生物制藥蘇州有限公司華派生物工程

:、()、

集團(tuán)有限公司上海市計(jì)量測(cè)試技術(shù)研究院上海張江生物技術(shù)有限公司四川大學(xué)成都柏奧特克生物

、、、、

科技股份有限公司上海邁泰君奧生物技術(shù)有限公司泰州邁博太科藥業(yè)有限公司上海百邁博制藥有

、、、

限公司

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人周李華周凱松宋航邱文英李劍鳳劉剛黃林馬麗俠李振華楊坤李妍

:、、、、、、、、、、、

蔣子敬方鵬飛崔利凱郝偉偉葉德萍梁智杰張大鵬張麗燕郭懷祖徐進(jìn)郭清城戴建新

、、、、、、、、、、、。

GB/T38506—2020

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中生化參數(shù)的測(cè)定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物細(xì)胞規(guī)模培養(yǎng)過程中細(xì)胞密度細(xì)胞活率值溶解氧滲透壓葡萄糖含量

、、pH、、、、

細(xì)菌內(nèi)毒素乳酸含量的測(cè)定方法

、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞非洲綠猴腎細(xì)胞

(CHO)、(NSO、SP2/0)、

乳倉(cāng)鼠腎細(xì)胞犬腎表皮細(xì)胞豬睪丸細(xì)胞規(guī)模培養(yǎng)過程中生化參數(shù)

(Vero)、(BHK-21)、(MDCK)、(ST)

的檢測(cè)其他真核細(xì)胞規(guī)模培養(yǎng)過程中生化參數(shù)的檢測(cè)也可參考使用

,。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

血清葡萄糖測(cè)定參考方法

WS/T350

中華人民共和國(guó)藥典年版二部國(guó)家藥典委員會(huì)

(2015)()

中華人民共和國(guó)藥典年版三部國(guó)家藥典委員會(huì)

(2015)()

3術(shù)語(yǔ)和定義縮略語(yǔ)

、

31術(shù)語(yǔ)和定義

.

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

311

..

細(xì)胞密度celldensity

細(xì)胞通過培養(yǎng)后單位體積樣品中細(xì)胞的總數(shù)

,。

312

..

細(xì)胞活率cellviability

細(xì)胞培養(yǎng)過程中活細(xì)胞數(shù)目占總細(xì)胞數(shù)目的百分比

,。

32縮略語(yǔ)

.

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

腺苷三磷酸

ATP:(Adenosinetriphosphate)

還原型輔酶煙酰胺腺嘌呤二核苷酸還原態(tài)

NADH:Ⅰ(,)(Nicotinamideadeninedinucleotide)

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸

NAD(P):(Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate)

還原型輔酶煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸還原態(tài)

NAD(P)H:Ⅱ(,)(Nicotinamideadenine

dinucleotidephosphate)

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