含量測定藥味的選擇藥味的指標(biāo)成分的選擇既要考慮到指標(biāo)成分

一、含量測定藥味的選擇：藥味的指標(biāo)成分的選擇既要考慮到指標(biāo)成分的性質(zhì)，又要考慮到可否對(duì)新藥的有效性、安全性、可控性進(jìn)行評(píng)論及中醫(yī)的君臣佐使的關(guān)系，還有考慮到當(dāng)前現(xiàn)有剖析技術(shù)等！選擇合理的藥味，合理的指標(biāo)性成分，關(guān)于擬訂含量測定標(biāo)準(zhǔn)能夠說已經(jīng)成功了一半！所以，含量測定藥味、指標(biāo)性成分選擇至關(guān)重要！選擇時(shí)側(cè)重從以下幾個(gè)方面進(jìn)行：需考慮含測指標(biāo)與新藥的安全性、有效性的關(guān)系。首選新藥的有效成分及毒性成分為含測指標(biāo)。如含有罌粟殼的止咳藥中藥，應(yīng)測定嗎啡的含量，并確立合理的含量限度范圍。需考慮含測指標(biāo)成分的理化性質(zhì)。當(dāng)新藥中所含有效成分或毒性成分，因缺乏標(biāo)準(zhǔn)品、或因其余成分的擾亂而的確難以成立含測方法時(shí)，可考慮選擇與有效成分化學(xué)構(gòu)造相像、理化性質(zhì)鄰近的指標(biāo)成分，或大類成份為含測指標(biāo)，以間接反應(yīng)新藥的有效性或安全性。需考慮新藥穩(wěn)固性研究的需要。穩(wěn)固性研究需要反應(yīng)新藥穩(wěn)固性的敏捷指標(biāo)。如含有苷類成分的新藥，如采納水解后苷元的含量為含測指標(biāo)則難以反應(yīng)在儲(chǔ)存期問苷類成分水解成苷元的狀況。新藥中有幾個(gè)有效成分都可測定含量時(shí)，需選擇穩(wěn)固性較差的成分，以反應(yīng)藥物的穩(wěn)固性。傳統(tǒng)中藥需考慮中醫(yī)理論的指導(dǎo)作用。傳統(tǒng)中藥復(fù)方制劑為，以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，采納傳統(tǒng)工藝制成、以傳統(tǒng)功能主治表述的中藥復(fù)方制劑。其含測指標(biāo)應(yīng)試慮君臣佐使的配伍理論，首選君藥的成分為含測指標(biāo)。需考慮含測指標(biāo)成分與工藝的關(guān)系。如含何首烏的復(fù)方，以其水提工藝制成的制劑中大黃素的含量很低，而用四羥基二苯乙烯苷為含測指標(biāo)較好。需考慮中藥多成分多靶點(diǎn)的特色。處方中含有多個(gè)明確有效成分的，或許處方中藥味分別按不一樣路線提取的，建議研究成立多個(gè)含測指標(biāo)；鼓舞將有效成分、大類成分、浸出物等指標(biāo)聯(lián)合起來，以更全面控制產(chǎn)質(zhì)量量。(7)中藥含量測定指標(biāo)的選擇需要考慮與基礎(chǔ)研究的關(guān)系，表現(xiàn)基礎(chǔ)研究與應(yīng)用研究的關(guān)系。應(yīng)充分利用已有的基礎(chǔ)研究成就，為新藥的研究和評(píng)論供給參照；同時(shí)，應(yīng)聯(lián)合新藥應(yīng)用研究的需要進(jìn)行必需的基礎(chǔ)研究，以提升中藥質(zhì)量控制的水平。已有的研究成就、文件資料是藥質(zhì)量量控制研究的基礎(chǔ)，應(yīng)加以充分利用，表現(xiàn)研究的繼承性。如板藍(lán)根向來缺乏適合的含測指標(biāo)，現(xiàn)發(fā)現(xiàn)其所含喹唑酮成分擁有抗病毒活性，且溶于水及乙醇，含量穩(wěn)固，有代表性，合用于作為板藍(lán)根的質(zhì)控指標(biāo)。其余。含量限度過低者(如低于萬分之一)，應(yīng)增添含量測定指標(biāo)或浸出物測定。在成立化學(xué)成分的含量測定有困難時(shí)，也可考慮成立生物測定等其余方法。中西藥合用的復(fù)方制劑，需成立中藥及每個(gè)化學(xué)藥的含測方法。二、含量測定方法介紹：測定方法：含量測定的方法主要有薄層掃描法；紫外分光光度法；高效液相色譜等。當(dāng)前主假如使用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行，下邊將做詳盡介紹高效液相色譜法的應(yīng)用。高效液相色譜法簡介：2.1色譜柱：最常用的填補(bǔ)劑為化學(xué)鍵合硅膠。反相色譜系統(tǒng)使用非極性填補(bǔ)劑，以十八烷基鍵合硅膠最為常用，即C18，其余還有C8柱，氰基柱,氨基柱等，正相色譜系統(tǒng)使用極性填補(bǔ)劑，常用的填補(bǔ)劑有硅膠等。2.2檢測器：最常用的檢測器為紫外檢測器、

二極管陣列檢測器、熒光檢測器、示差檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、電化學(xué)檢測器和質(zhì)譜檢測器。2.3流動(dòng)相：可采納固定比率（等度洗脫）或按規(guī)定程序改變比率（梯度洗脫）的溶劑構(gòu)成作為流動(dòng)相系統(tǒng)。三、方法學(xué)觀察：現(xiàn)已*片為例，進(jìn)行方法學(xué)研究。在

*片中選擇其君藥中所含的

A成分作為指標(biāo)性成分進(jìn)行含量測定的方法學(xué)研究。3.1檢測波長的選擇：取A比較品溶液，在200～700nm譜圖在530nm波優(yōu)點(diǎn)有最大汲取，故測定波長選定為530nm

波進(jìn)步行光譜掃描，發(fā)現(xiàn)光。說明：一般選擇待測樣品化合物汲取度最大，即汲取曲線最高點(diǎn)為測定波長?；衔锏淖畲蠹橙》濡薽ax或該化合物經(jīng)顯色后的最大汲取峰，經(jīng)過分光光度計(jì)進(jìn)行掃描后確立或經(jīng)過二極管陣列檢測來確立，并與該化合物文件值對(duì)比較應(yīng)一致。在最大汲取峰處測準(zhǔn)時(shí)敏捷度高，偏差小。所以一般狀況下選擇最大汲取波長作為檢測波長。3.2樣品提取方法、溶劑觀察：取*片0.5克，精細(xì)加入不一樣溶劑目標(biāo)成分的含量。結(jié)果見下表：

25ml

進(jìn)行超聲提取

30分鐘，進(jìn)行含量測定，計(jì)算以上結(jié)果表示，70%醇提取和乙醇提取含量最高，而兩者含量又無顯然差別，故確立提取溶劑為70%乙醇。觀察方法：依據(jù)指標(biāo)性成分的性質(zhì)采納易提取的幾種溶劑進(jìn)行提取對(duì)照試驗(yàn)，選擇提取率高的一種溶劑作為提取溶劑。3.3提取時(shí)間觀察：取*片0.5克，精細(xì)加入70%乙醇進(jìn)行超聲提取5、10、15、20、分鐘，進(jìn)行含量測定，計(jì)算目標(biāo)成分的含量。結(jié)果見下表：以上結(jié)果表示，超聲辦理15分鐘，含量不再增添，為了保證提取完整，故確立超聲辦理時(shí)間為20分鐘。觀察目的：主假如選擇把目標(biāo)成分完整提拿出來，剖析方法。

所需的最短的時(shí)間，以便擬訂合理的3.4標(biāo)準(zhǔn)品純度觀察：比較品純度要求達(dá)到

98％以上。比較品純度一般都能夠達(dá)到要求。3.5標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：配制不一樣濃度的

A比較品溶液，觀察線進(jìn)樣量與峰面積的性關(guān)系、線性范圍、有關(guān)系數(shù)等。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)峰面積為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線：以上結(jié)果表示，在

0.0114

～0.0569μg范圍內(nèi)，本品峰面積值與進(jìn)樣量有優(yōu)秀的線性關(guān)系。說明：做標(biāo)準(zhǔn)曲線的目主假如（1）確立樣品進(jìn)樣量與峰面積能否呈線性關(guān)系；（2）、確立線性范圍，即合用的樣品進(jìn)樣量的確定；（3）、標(biāo)準(zhǔn)曲線能否經(jīng)過原點(diǎn)，經(jīng)過原點(diǎn)時(shí)，采納一種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品稱一點(diǎn)法，進(jìn)行含量測定；不經(jīng)過原點(diǎn)時(shí)，采納兩種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品（稱兩點(diǎn)法）進(jìn)行含量測定。3.6陰性試驗(yàn)：要求樣品溶液在與比較品液同樣地點(diǎn)有同樣保存時(shí)間的色譜峰，而陰性則無，主假如觀察方法的專屬性。常用陰陽比較法，即含以被測成分的藥材樣品與除掉該成分的藥材的樣品作比較，可觀察被測成分的地點(diǎn)能否與擾亂組分重迭，以確證測定指標(biāo)能否僅為被測成分的響應(yīng)，防備假陽性的誤判。3.7穩(wěn)固性試驗(yàn)：觀察不一樣時(shí)間點(diǎn)能否對(duì)測定方法和測定結(jié)果有影響，用同一被測樣品的供試液在不一樣間隔時(shí)間用同一測定方法所獲得的測定結(jié)果。一般觀察36小時(shí)，計(jì)算RSD%不得大于3％。比較和樣品均要做.穩(wěn)固性試驗(yàn)試驗(yàn)結(jié)果表示，樣品供試液和比較品溶液在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)固性優(yōu)秀3.8精細(xì)度試驗(yàn)：是指用同樣方法對(duì)同同樣品溶液進(jìn)行多次測定，觀察各測定值相互接近的程度。詳細(xì)以下：取同同樣品，連續(xù)測定五次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD％不得大于3％。比較和樣品均要做，詳細(xì)以下：精細(xì)度試驗(yàn)試驗(yàn)表示，儀器精細(xì)度優(yōu)秀。3.9重復(fù)性試驗(yàn)：是指在同一條件下對(duì)同一批樣品，從樣品供試品液制備始，制備多份供試品溶液。每份供試品液再分別進(jìn)行測定，測定所獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)辦理，計(jì)算其含量的均勻值和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD%）。詳細(xì)以下：同一批號(hào)樣品，分別取低、中、高三個(gè)樣品量，每個(gè)樣品量3份，按樣品測定方法操作，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD％不得大于3％。3.10加樣回收試驗(yàn)：一般回收率要求在95～105％。試驗(yàn)結(jié)果表示：回收率在95％～100％之間，加樣回收優(yōu)秀詳解：加樣回收試驗(yàn)即于已知被測成分含量的成藥中再精細(xì)加入必定量的被測成分純品，依法測定。用實(shí)測值與原樣品中含測成分之差，除以加入純品量計(jì)算回收率。此法不用制備空白比較，模擬真切性好。注意事項(xiàng)：１、純品的加人量與取樣量中被測成分之和一定在標(biāo)淮曲線線性關(guān)系范圍以內(nèi)；２、外加純品的量要適合，過小則惹起較大的相對(duì)偏差，過大則擾亂成分相對(duì)減少，真實(shí)性差。３、一般加入量與所取樣品含量之比控制在1：1左右。４、做加樣試驗(yàn)時(shí)，有人將比較品加至制備好的供試品溶液中，這是不對(duì)的，這樣不可以觀察提取、純化過程中被測成分能否損失，不可以代表含量測定方法的回收率。所以要在稱樣開始時(shí)就加入比較品！3.11含量限度的擬訂：申報(bào)臨床，一定依據(jù)原料根源不一樣的三批以上樣品測定結(jié)果，確立含量范圍三批樣品含量每克樣品