標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 40249-2021 斑節(jié)對蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程 PCR檢測法》是一項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn),旨在通過聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction, PCR)技術(shù)來診斷斑節(jié)對蝦中的桿狀病毒感染情況。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了從樣品采集到最終結(jié)果分析的全過程要求。
首先,在樣品采集方面,標(biāo)準(zhǔn)明確了適合進(jìn)行PCR檢測的樣本類型以及如何正確地收集這些樣本以確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)的有效性。這包括但不限于活體或冷凍保存的斑節(jié)對蝦組織樣本的選擇與處理方法。
接著是核酸提取步驟,此部分介紹了使用何種試劑盒或者手工操作流程來進(jìn)行高質(zhì)量DNA的提取,并強(qiáng)調(diào)了避免污染的重要性,因?yàn)榧词故俏⒘康耐庠碊NA也可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果。
然后進(jìn)入PCR擴(kuò)增階段,這里描述了推薦使用的引物序列、反應(yīng)條件設(shè)置等關(guān)鍵參數(shù),同時(shí)也指出了選擇合適對照組(如陰性對照和陽性對照)對于驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)可靠性的必要性。
最后是對PCR產(chǎn)物的檢測與結(jié)果判定環(huán)節(jié)。根據(jù)擴(kuò)增曲線及熔解曲線特征,結(jié)合凝膠電泳圖像或其他形式的數(shù)據(jù)展示方式,可以準(zhǔn)確判斷樣品中是否存在斑節(jié)對蝦桿狀病毒DNA片段。此外,還提供了重復(fù)性和再現(xiàn)性指標(biāo),用以評估不同實(shí)驗(yàn)室之間采用相同方法時(shí)的一致性水平。
整個(gè)文件不僅為從事水產(chǎn)動物疾病研究的專業(yè)人士提供了一套科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牟僮髦改?,也促進(jìn)了行業(yè)內(nèi)關(guān)于斑節(jié)對蝦健康監(jiān)測技術(shù)交流與發(fā)展。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2021-05-21 頒布
- 2021-12-01 實(shí)施
文檔簡介
ICS6502030
CCSB.41.
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T40249—2021
斑節(jié)對蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程
PCR檢測法
CodeofdiagnosisforinfectionwithPenaeusmonodon-typebaculovirus—
PCRmethod
2021-05-21發(fā)布2021-12-01實(shí)施
國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布
國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會
GB/T40249—2021
前言
本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定
GB/T1.1—2020《1:》
起草
。
請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任
。。
本文件由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出
。
本文件由全國水產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口
(SAC/TC156)。
本文件起草單位中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所全國水產(chǎn)技術(shù)推廣總站
:、。
本文件主要起草人楊冰萬曉媛黃倢李清史成銀張鋒宋曉玲余衛(wèi)忠張慶利李晨劉莉
:、、、、、、、、、、、
許華
。
Ⅰ
GB/T40249—2021
斑節(jié)對蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程
PCR檢測法
1范圍
本文件規(guī)定了斑節(jié)對蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程中普遍適用的核酸檢測技術(shù)的要求針對斑節(jié)對蝦桿
,
狀病毒Penaeusmonodon給出了檢測法所需試劑或材料儀器設(shè)備
(-typebaculovirus,MBV),PCR、、
樣品試驗(yàn)步驟和結(jié)果判定
、。
本文件適用于對蝦各生活期樣品中帶毒情況的定性檢測以進(jìn)行斑節(jié)對蝦桿狀病毒病的流
MBV,
行病學(xué)調(diào)查診斷檢疫和監(jiān)測
、、。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文
。,
件僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于
,;,()
本文件
。
白斑綜合征診斷規(guī)程第部分組織病理學(xué)診斷法
GB/T28630.4—2012(WSD)4:
3術(shù)語和定義
本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義
。
4縮略語
下列縮略語適用于本文件
。
堿基對
bp:(basepair)
脫氧核糖核酸
DNA:(deoxyribonucleicacid)
脫氧核糖核苷三磷酸
dNTPs:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)
溴化乙啶
EB:(ethidiumbromide)
乙二胺四乙酸
EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)
鹽酸
HCl:(hydrogenchloride)
斑節(jié)對蝦桿狀病毒Penaeusmonodon
MBV:(-typebaculovirus)
氫氧化鈉
NaOH:(sodiumhydroxide)
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
PCR:(polymerasechainreaction)
十二烷基硫酸
SDS:(sodiumdodecylsulfate)
Taq水生棲熱菌
:(thermusaquaticus)
鹽酸和緩沖液
TE:TrisE
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