標(biāo)準(zhǔn)解讀
《NY/T 577-2002 山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)方法》是一項(xiàng)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),旨在規(guī)定用于檢測山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎(CAE)病毒抗體的瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)的具體操作流程。該標(biāo)準(zhǔn)適用于獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中對(duì)山羊血清樣品進(jìn)行CAE病毒感染狀態(tài)的初步篩查。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容,首先需要準(zhǔn)備的是試驗(yàn)材料與試劑,包括但不限于純化的CAE抗原、待測血清樣本、以及作為對(duì)照使用的陽性血清和陰性血清等。接著,在制備好的瓊脂平板上按照特定模式打孔,并將不同類型的樣本分別加入到相應(yīng)的孔洞中。通過適當(dāng)條件下培養(yǎng)后,觀察并記錄各孔之間是否形成沉淀線及其特征,以此來判斷樣品中是否存在針對(duì)CAE病毒的特異性抗體。
此外,標(biāo)準(zhǔn)還詳細(xì)描述了如何正確配置瓊脂凝膠、如何處理血清樣品以去除可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素、以及如何準(zhǔn)確地讀取和解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果等內(nèi)容。對(duì)于實(shí)驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的各種情況,如交叉反應(yīng)現(xiàn)象等也給予了相應(yīng)指導(dǎo)說明。
本標(biāo)準(zhǔn)為從事相關(guān)研究或工作的人員提供了科學(xué)規(guī)范的操作指南,有助于提高檢測準(zhǔn)確性及可靠性。
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- 2002-08-27 頒布
- 2002-12-01 實(shí)施
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NY/T 577-2002山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)方法-免費(fèi)下載試讀頁文檔簡介
1C5.11.220B41NY中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T577-2002山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)方法Agargelimmunodiffusiontestforcaprinearthritis/encephalitis2002-08-27發(fā)布2002-12-01實(shí)施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布
NY/T577-2002山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎(caprinearthritis/encephalitis,簡稱CAE)是由山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎病毒(CAEV)引起的山羊的一種慢性病毒性傳染病,其主要特征是成年的羊墾緩饅發(fā)展的關(guān)節(jié)炎,間或伴有間質(zhì)性肺炎和間質(zhì)性乳房炎。羔羊表現(xiàn)為上行性麻牌的神經(jīng)癥狀,被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織WorldOrganizationforAnimalHealth(英)OfficeInternationaldesEpizooties(法),TEJ列為B類疾病,我國農(nóng)業(yè)部把該病列為二類動(dòng)物疫病。本病的診斷方法為瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散(ACID)試驗(yàn),是根據(jù)(IE《診斷試驗(yàn)的疫苗標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)》2000版)和我國的實(shí)際情況制定的。技術(shù)上與OIE保持一致,該法簡便、特異,在國際貿(mào)易中為指定的診斷方法本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧魯醫(yī)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國動(dòng)物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱魯醫(yī)研究所、新疆畜牧科學(xué)院本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:相文華、王治才。
NY/T577-2002山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)方法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)的技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于山羊關(guān)節(jié)炎/腦炎的診斷和檢疫脂凝膠免波擴(kuò)做試驗(yàn)2.1材料準(zhǔn)備2.1.1試劑及器血:氯化鈉(NaCI),疊氮鈉(NaN.),1mol/l.三羥甲基氨基甲燒-鹽酸(Tris-HCI)瓊脂精,移液器(50L~100%I.)及吸嘴,外徑7mm薄壁金屬打孔器,直徑9.5cm平咀。2.1.2抗原、標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、陰性血清。2.2操作方法2.2.1瓊脂精凝膠板制備稱瓊脂糖1.0g、氟化鈉8g暨100ml.三角瓶中,加入pH8.00.05mol/.Tris-HCl100ml.隔水煮沸至全部溶化。將其自然冷卻至60C左右時(shí).倒人平血。每只平血加15mL.·待其凝因后加蓋,置濕盒內(nèi)·放4(待用。2.2.2打孔將瓊脂板放于打孔模式圖上(見圖1),用打孔器按圖樣打梅花型孔,孔徑7mm,孔距2.5mm.打完孔后,挑出孔中瓊脂塊,再用溶化的瓊脂封底。圖1AGID打孔模式圖2.2.3加樣按圖上中心孔加入抗原,2、4、6孔滴加陽性血清,1、3、5孔滴加被檢血清,加滿樣品后,置37℃溫金內(nèi)。2.3結(jié)果判定2.3.1于24h、48h及72h觀察是香有沉淀線出現(xiàn),終判時(shí)間為72h。
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