生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)C 教學(xué)大綱

~~生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)C一、課程說明課程編號(hào)：280206X11課程名稱：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)C/BiochemistryExperimentC學(xué)時(shí)/學(xué)分：48/1.5課程類別：學(xué)科基礎(chǔ)課先修課程：無機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)、有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)適用專業(yè)：醫(yī)學(xué)各專業(yè)教材、教學(xué)參考書：1.生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程，曾衛(wèi)民等，北京科學(xué)出版社，2013年9月2.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程，武金霞等，北京科學(xué)出版社，2012年8月3.醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程，揭克敏等，北京科學(xué)出版社，2014年5月4.生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，王曉華等，化學(xué)工業(yè)出版社，2008年第1版二、課程設(shè)置的目的意義本課程屬實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)課程，和生物化學(xué)理論課配合開設(shè)，是學(xué)生生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技能與生物化學(xué)素質(zhì)培養(yǎng)不可缺少的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。以培養(yǎng)學(xué)生素質(zhì)與能力為主線，加強(qiáng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)方法與原理的訓(xùn)練和培養(yǎng)，讓學(xué)生具有一個(gè)完整的實(shí)驗(yàn)科學(xué)研究思維空間，逐步培養(yǎng)開拓與創(chuàng)新能力。通過實(shí)驗(yàn)課不僅使學(xué)生鞏固和加強(qiáng)課堂所學(xué)的基礎(chǔ)理論知識(shí)，更重要的是培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作能力、分析問題和解決問題的能力，養(yǎng)成嚴(yán)肅認(rèn)真、實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)，培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新精神和創(chuàng)新能力；使學(xué)生學(xué)習(xí)到常見的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)知識(shí)，熟悉常見的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的原理、方法，掌握基本的實(shí)驗(yàn)技能；向?qū)W生介紹實(shí)驗(yàn)新的技術(shù)、新的思想，同時(shí)鼓勵(lì)學(xué)生積極思考，大膽設(shè)計(jì)新的實(shí)驗(yàn)方案，為學(xué)生進(jìn)入更高層次的生物化學(xué)及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)和實(shí)踐打下基礎(chǔ)。1．理論聯(lián)系實(shí)際，使生物化學(xué)教學(xué)中的重要理論和概念得到鞏固和深化，并擴(kuò)展課堂中所獲得的知識(shí)。2．培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立思考和獨(dú)立工作的能力，學(xué)會(huì)聯(lián)系理論知識(shí)，獨(dú)立設(shè)計(jì)和進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，仔細(xì)觀察和分析實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，學(xué)會(huì)正確處理數(shù)據(jù)及解釋現(xiàn)象，從中得出科學(xué)的結(jié)論，并且撰寫科學(xué)報(bào)告和論文。3．向?qū)W生介紹實(shí)驗(yàn)新的技術(shù)、新的思想，同時(shí)誘導(dǎo)學(xué)生發(fā)散性思維，讓學(xué)生積極思考，大膽設(shè)計(jì)新的實(shí)驗(yàn)方案，培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力，培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)的工作態(tài)度和作風(fēng)。為學(xué)習(xí)其他課程和今后從事生物化學(xué)領(lǐng)域的科研生產(chǎn)打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。三、課程的基本要求1．生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備要求學(xué)生課前做好預(yù)習(xí)，明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，了解和熟悉各?shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與步驟，并寫出預(yù)習(xí)報(bào)告。設(shè)計(jì)性、研究性實(shí)驗(yàn)課前準(zhǔn)備。教師在課前1～2周將實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目通知學(xué)生，向?qū)W生介紹設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的特點(diǎn)、要求，讓學(xué)生明確設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，為學(xué)生提供具有參考價(jià)值的書名和期刊雜志名。學(xué)生通過查閱有關(guān)的文獻(xiàn)資料，寫出簡要的文獻(xiàn)綜述。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求擬定實(shí)驗(yàn)方案，于課前三天上交指導(dǎo)教師。教師對學(xué)生的實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行整理歸類，進(jìn)行修改和點(diǎn)評，并做好所需儀器試劑的準(zhǔn)備工作。2．課堂講解證性和綜合性實(shí)驗(yàn)以提問的方式檢查學(xué)生的預(yù)習(xí)情況，啟發(fā)學(xué)生的思維，做到以學(xué)生為主體自己動(dòng)腦和動(dòng)手做實(shí)驗(yàn)，讓學(xué)生了解和掌握一些生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)方法。設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)和討論課，根據(jù)學(xué)生的課前準(zhǔn)備情況，認(rèn)真進(jìn)行點(diǎn)評與提示，講解實(shí)驗(yàn)的重點(diǎn)和難點(diǎn)，保證學(xué)生能順利地完成實(shí)驗(yàn)，達(dá)到培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新意識(shí)的教學(xué)目的。對實(shí)驗(yàn)中所用到的常規(guī)儀器，要求學(xué)生在實(shí)驗(yàn)操作前仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)室已準(zhǔn)備好的使用說明書后，教師講解實(shí)驗(yàn)中可能會(huì)出現(xiàn)的問題以及如何排除儀器故障等，達(dá)到培養(yǎng)學(xué)生仔細(xì)閱讀說明書、排除故障和困難的好習(xí)慣。對于實(shí)驗(yàn)中所用到的精密儀器和大型設(shè)備，教師則要仔細(xì)表演和示范操作，規(guī)范學(xué)生的操作，使學(xué)生養(yǎng)成嚴(yán)格的科學(xué)工作作風(fēng)。3．總結(jié)點(diǎn)評總結(jié)點(diǎn)評是實(shí)驗(yàn)的最后階段，也是實(shí)踐認(rèn)識(shí)過程的高級(jí)階段。學(xué)生做完實(shí)驗(yàn)后，教師都應(yīng)對實(shí)驗(yàn)情況進(jìn)行點(diǎn)評，并給每個(gè)學(xué)生評出實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)分、實(shí)驗(yàn)狀況分。學(xué)生的實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)，教師檢查確認(rèn)后，簽上教師的姓名。四、教學(xué)內(nèi)容、重點(diǎn)難點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)基本要求序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱總學(xué)時(shí)學(xué)時(shí)分配教學(xué)重點(diǎn)教學(xué)難點(diǎn)基本要求講課(含研討)實(shí)踐1基本操作44刻度吸量管722型分光光度計(jì)使用1.掌握一般玻璃儀器的洗滌法和刻度吸量管的使用2.掌握一般試管內(nèi)液體混勻方法3.熟悉微量加樣器，722型分光光度計(jì)和低速臺(tái)式離心機(jī)的使用4.熟悉生化實(shí)驗(yàn)室的規(guī)則2血紅蛋白及其衍生物吸收光譜的測定44物質(zhì)吸收光譜繪制的原理和方法血紅蛋白的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1.掌握某種物質(zhì)吸收光譜繪制的原理和方法2.掌握氧合血紅蛋白和碳氧血紅蛋白的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及吸收光譜3.熟悉722型分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)和工作原理并熟練掌握其使用方法3酵母RNA的提取和鑒定44濃鹽加熱法提取酵母RNA的原理等電點(diǎn)沉淀的原理1.掌握濃鹽加熱法提取酵母RNA的原理2．掌握等電點(diǎn)沉淀的原理3．熟悉RNA徹底水解的三個(gè)成分：磷酸、核糖、堿基(嘌呤)各自的特征性檢驗(yàn)方法4.熟悉操作步驟與技術(shù)。5.了解本方法提取的變性RNA的用途4Folin-酚試劑法測血清蛋白含量44蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制和應(yīng)用蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制1.掌握Folin-酚法測定蛋白質(zhì)含量的原理和方法。2.掌握分光光度法制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，準(zhǔn)確測定未知樣品的蛋白質(zhì)含量。3.掌握用標(biāo)準(zhǔn)管法及標(biāo)準(zhǔn)曲線法的計(jì)算過程，及繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)用意義。4.學(xué)習(xí)分光光度計(jì)的原理及使用方法。5蔗糖酶與淀粉酶的專一性44蔗糖酶與淀粉酶專一性的測定原理定性檢查還原性糖的方法1.熟悉蔗糖酶與淀粉酶催化的化學(xué)反應(yīng)及酶專一性的意義。2.掌握測定蔗糖酶與淀粉酶專一性的原理及方法。3.掌握一種定性檢查還原性糖的方法。6酶動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)-底物濃度及抑制劑對酶活性的影響44底物濃度及抑制劑對酶活性的影響用L-B方程求米氏常數(shù)的原理和方法1.掌握用L-B方程求米氏常數(shù)(Km)的原理和方法。2.掌握底物濃度及抑制劑對酶活性的影響。3.進(jìn)一步熟悉分光光度法。4.通過實(shí)驗(yàn)加深對酶動(dòng)力學(xué)理論的理解。7醋酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白質(zhì)44醋酸纖維薄膜電泳的基本原理和操作血清蛋白質(zhì)醋纖維素薄膜電泳圖譜的含義1.掌握醋酸纖維薄膜電泳的基本原理和操作過程。2.掌握電泳分離血清蛋白質(zhì)及其定性定量的方法。3.熟悉血清蛋白質(zhì)醋纖維素薄膜電泳圖譜的含義及臨床意義。4.了解血清蛋白質(zhì)的種類和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。8凝膠過濾分離高鐵血紅蛋白和高鐵氰化鉀44凝膠過濾分離及透析分離純化的原理凝膠過濾分離的原理1.掌握凝膠過濾的分離原理2．掌握透析分離純化的原理3．熟悉血紅素中心鐵的結(jié)合方式和轉(zhuǎn)變反應(yīng)4.熟悉凝膠過濾操作步驟與技術(shù)。5.了解鉬蘭反應(yīng)的顯色原理9乳酸脫氫酶同工酶活性測定44LDH同工酶活性測定的原理和方法同工酶活性測定的臨床意義1.掌握同工酶的概念及乳酸脫氫酶同工酶活性測定的臨床意義。2.掌握LDH同工酶活性測定的原理和方法。3.進(jìn)一步熟悉電泳技術(shù)的原理和方法。10聚丙烯酰胺凝膠電泳44聚丙烯酰胺凝膠電泳不連續(xù)體系及其導(dǎo)致的三個(gè)效應(yīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳的濃縮效應(yīng)1.掌握聚丙烯酰胺凝膠生成的原理和本次聚丙烯酰胺凝膠電泳采用不連續(xù)系統(tǒng)（即緩沖液成分、pH及凝膠孔徑不連續(xù)）導(dǎo)致濃縮效應(yīng)、分子篩效應(yīng)和電荷效應(yīng)的基本原理。2.熟悉操作步驟與技術(shù)。3.了解電泳分離血清蛋白質(zhì)的意義。11血清尿酸測定44酶法測定血清尿酸含量的基本原理分光光度法制作標(biāo)準(zhǔn)曲線1.掌握酶法測定血清尿酸含量的基本原理。2.掌握分光光度法制作標(biāo)準(zhǔn)曲線及計(jì)算過程。3.熟悉血清尿酸測定的臨床意義。12生物化學(xué)實(shí)