紫外分光光度計

紫外分光光度計第一頁，共十五頁，2022年，8月28日一、基本結(jié)構(gòu)1、輻射光源2、單色器（分光系統(tǒng)）3、樣品室（吸收池）4、檢測器5、測量信號顯示系統(tǒng)第二頁，共十五頁，2022年，8月28日1、光源

儀器對光源的基本要求是，在廣泛的光譜區(qū)內(nèi)能穩(wěn)定發(fā)射連續(xù)光譜、有足夠輻射強度而且輻射能量隨波長無明顯變化。

可見區(qū)：鎢絲燈、鹵素?zé)?/p>

波長：320~2500nm

紫外區(qū)：氫燈、氘燈

波長：180~375nm一、基本結(jié)構(gòu)第三頁，共十五頁，2022年，8月28日2、單色器

單色器是能從光源波長連續(xù)的復(fù)合光中分出單色光的光學(xué)裝置，其主要功能為產(chǎn)生光譜純度高的波長且波長在紫外—可見區(qū)域內(nèi)任意可調(diào)。

單色器一般由入射狹縫、準(zhǔn)光器（透鏡或凹面反射鏡使入射光成平行光）、色散元件、聚焦元件和出射狹縫等幾部分組成。

其中色散元件是核心部分，其分光作用，主要是棱鏡和光柵。一、基本結(jié)構(gòu)第四頁，共十五頁，2022年，8月28日3、吸收池

用于盛放分析試樣，一般有石英和玻璃材料兩種。4、檢測器

將光信號轉(zhuǎn)變成電信號的部件；基本要求是靈敏度高、響應(yīng)時間快、對輻射能量的響應(yīng)線性關(guān)系好；

目前應(yīng)用最廣泛的是硅光電池、光電管和光電倍增管。一、基本結(jié)構(gòu)第五頁，共十五頁，2022年，8月28日5、測量信號指示系統(tǒng)

將檢測器輸出的信號進一步放大，然后用記錄儀紀(jì)律下來。

常見的信號顯示裝置有直讀檢流計、電位調(diào)節(jié)指零裝置、自動記錄和數(shù)字顯示裝置。一、基本結(jié)構(gòu)第六頁，共十五頁，2022年，8月28日二、分類及特點1、單光束分光光度計特點：

光路系統(tǒng)簡單

光源能量損失小

機械振動小

噪聲小

信噪比高原理：由氘燈D2或鎢絲燈W發(fā)出連續(xù)光譜，經(jīng)反射鏡M1和M2反射進入單色器，經(jīng)過棱鏡P虎撲光柵分光將單色光通過狹縫S射入樣品池Sa，分別通過參比溶液和樣品溶液，進行光強度（吸收）的測量。第七頁，共十五頁，2022年，8月28日2、雙光束分光光度計二、分類及特點原理：由光源發(fā)出的光通過單色器分光，將一束單色光從狹縫送出，經(jīng)旋轉(zhuǎn)鏡Sc1分成強度相等的兩束光，一束通過參比池，另一束通過樣品池。

特點：能自動記錄吸收光譜曲線第八頁，共十五頁，2022年，8月28日3、雙波長分光光度計二、分類及特點原理：同一光源發(fā)出的光被分為兩束，分別經(jīng)過兩個單色器后獲得兩束不同波長的單色光，利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池。第九頁，共十五頁，2022年，8月28日3、雙波長分光光度計

優(yōu)點：

可消除參比池與樣品池的不同而引起的誤差；

可消除不同混濁度引起的背景吸收；

適當(dāng)選擇波長，可簡化混合組分同時測定過程。二、分類及特點第十頁，共十五頁，2022年，8月28日三、操作過程1、光源的調(diào)節(jié)2、分光光度計的校正①波長的校正②吸光度的校正③吸收池的校正3、測量條件的選擇①測量波長的選擇②狹縫的調(diào)節(jié)③測量誤差與適宜吸光度范圍選擇第十一頁，共十五頁，2022年，8月28日四、顯色反應(yīng)在可見光區(qū)進行分光光度測定時，長選擇合適的顯色劑將被測組分轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩衔铮缓筮M行測定。

影響顯色反應(yīng)的因素：

酸度

顯色劑的濃度

顯色時間和反應(yīng)溫度

試樣中共存離子的干擾第十二頁，共十五頁，2022年，8月28日選擇顯色劑的原則：①顯色反應(yīng)的靈敏度高；②顯色劑的選擇性好；③顯色時顏色變化鮮明；④生成的有色化合物穩(wěn)定性好、組成恒定。四、顯色反應(yīng)第十三頁，共十五頁，2022年，8月28日五、應(yīng)用1、定性分析①化合物純度的鑒定②未知物的定性鑒定③分子結(jié)構(gòu)的推斷2、定量分析①校正曲線法②標(biāo)準(zhǔn)對比法③