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分子生大學(xué)生命科學(xué)的分子生物學(xué)(第六版 第五篇:方第二篇 組的維DNA和RNA的結(jié)在從一代細(xì)胞到下一代細(xì)胞的過DNA 、保持和改第二篇 組的維第6章:DNA和RNA 第8章:DNA的第9章:DNA的突變和修第10章:分子水平上的同源重第11章:位點(diǎn)特異性重組和DNA第8DNA本章內(nèi)DNA合成的化學(xué)基DNA聚合酶的作用叉DNA聚合酶的叉上的DNA合 結(jié)合和結(jié)細(xì)胞中細(xì)胞中DNA每個生物有其特有的一套DNA聚合酶Ecoli至少有5種DNA聚合DNA聚合酶III負(fù)責(zé)E.coli DNA聚合酶Ecoli的DNA聚合酶專門用于去除起始DNA合成所需的RNA具有5’外切核酸酶的活能去除DNA合成起始位點(diǎn)上游的RNA或DNA也能去除RNAseH所不能除去的RNA-DNA連接延伸能力不每次結(jié)合僅能添加20-100個核苷其合成較短片段的能力使其非合成先被RNA引物占據(jù)的短區(qū)域(<10核苷酸每個生物有其特有的一套DNA聚合酶真核細(xì)胞有多種DNA真核細(xì)胞中通常有15 至關(guān)重要的有三DNA聚合酶,DNA聚合酶和DNA聚合酶/DNA聚合酶α/引物四亞基(兩個亞基DNA聚合酶α、兩個亞基引物酶)參與DNA新鏈的起始DNA聚合酶δ或DNA聚合酶ε聚合酶轉(zhuǎn)DNA聚合酶δ或DNA聚合酶εDNA聚合酶α/引物酶的過DNADNA聚合酶或DNA聚合酶取代DNA聚合酶/引物DNADNA聚合酶在沒有其他蛋白存在的情況下僅合成20100個核苷酸后就從模板上脫離DNA聚合酶在 在于DNA聚合酶與滑動夾之滑動夾多亞基蛋白、組裝成“油炸圈孔可以環(huán)繞雙螺旋并留下一層1-2個水分子的空間沿DNA雙螺旋滑動,在 叉處還與DNA聚合酶結(jié)合聚合酶-滑動夾復(fù)合物沿DNA高效與滑動夾之間的相互作DNA聚合酶從DNA上釋放單鏈DNA模 完成DNA聚合酶被釋放,但滑動夾不立即脫滑動夾招募其他必須在新合成DNA處作如:真核細(xì)胞染色質(zhì)組裝的滑動夾滑動夾蛋白、細(xì)菌、酵母及人 體系中的雖然如此,形成滑動夾的亞基數(shù)目不E.coli的滑動夾由兩個拷貝的β蛋白T4噬菌體的滑動夾是gp45真核滑動夾是PCNA蛋白的三聚所有生物中都有滑動夾,并具滑動夾與DNA聚合酶的結(jié)合DNA聚合酶與滑動夾的了DNA聚合酶從DNA上完全脫滑動夾沿DNA 叉處與DNA聚合酶緊密結(jié)而聚合酶與引物–模板接頭結(jié)合DNA聚合酶每合成20100個核苷酸就從模板上釋放通過保持與DNA密接觸滑動夾使DNA聚合酶迅速重新結(jié)合到同一引物–模板接頭上滑動夾環(huán)繞DNA并結(jié)合DNA聚合酶活性位點(diǎn)從DNA的3’-OH處脫落,與滑動夾的結(jié)合防止聚合酶從DNA上釋放滑動夾裝載器打開并裝載在DNA滑動夾裝載器一種特殊蛋白復(fù)合催化滑動夾的打開并將其裝載在DNA滑動夾裝載器也催化滑動夾從DNA上的移除滑動夾裝載器 滑
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