藻類的采集和鑒定

藻類的采集和鑒定第一頁，共三十一頁，2022年，8月28日SampleCollectionMonitoringSiteSelection1MonitoringTimeSelection2RequiredEquipment3Collectionmethods4第二頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityMonitoringSiteSelection11Segmentsthathaveverydifferentwaterqualityorpollutionpotentialinspecificareasshouldhavemorethanonestation.2Selectmonitoringsitesthatbestrepresentwaterqualityconditionsofawaterbody.3Sitesmaybelocatedbelowmajorpollutionsources.第三頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityMonitoringSiteSelection24Lakesandestuariesshouldhavestationsinthemajorarmsandnearthedam(reservoirs).5Forroutinemonitoringinfreshwaterstreamsandrivers,sitesmusthaveeitherastreamflowgageorbesuitableforconductingflowmeasurement.6Asageneralrule,streamsbetween25and50mileslongrequiretwostations.第四頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityMonitoringTimeSelection1-4times/monthSamplingfrequencyAccordingtodifferentprogramSummerseasonalSpringSummer第五頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityMonitoringTimeSelectionFlowBaselinemonitoringincludessamplescollectedoverarangeofflowconditions.FlowWhensamplesarecollectedduringabnormallyhighorlowflow,theabnormalconditionswillberecordedinthefieldlogbookandontheobservationlinesofthesampledataform.

第六頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityMonitoringTimeSelectionRainLastrainfallinformationisveryusefulininterpretinghistoricaldata.TidalTidalconsiderationsDailyThesametimeindifferentdays(eg.8:00-10:00am)第七頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityRequiredEquipment浮游生物采集網(wǎng)

25號（64μm）

13號（86μm）采水器

2.5L5L第八頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversity定量采樣方法：用采水器取水面以下0.5m至離湖底0.5m的混合水樣10L。定性樣品用孔徑為6μm或10μm的浮游生物網(wǎng)過濾獲得。RequiredEquipment第九頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversity邊長1M45cm9cm63cm自制浮游植物網(wǎng)第十頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversity不同水體定量樣品的采集對于一般富營養(yǎng)化調(diào)查，取水面以下0.5米處的水樣即可。對于多樣性調(diào)查，則要取生物多樣性更高的地方，所以多采取混合水樣。沒有分層的淺水湖泊，每1米一個樣取至水底上方0.5米處。有分層的水體，應取至透明度的1.5倍且包括斜溫層的深度。第十一頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversity其它定量采樣工具intergratedhose-pipesampler-5mlengthof2.5cmdiameterplasticpipingwithaweightedcollaratoneendacordattachetothehoseandboatarubbercorktofitoneendofthehose第十二頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversity其它采樣用品透明度盤濁度計pH計多參數(shù)水質(zhì)儀第十三頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversity透明度測定Procedure?Lowerdiskintothewaterontheshadedsideoftheboatwhilekeepingafirmgripontheline.?Asthediskislowered,countthenumberofdepthmarksontheline.?Keeploweringthediskuntilitisnolongervisible;recordthedepthaccordingthelinemarks.?Slowlyraisethedisk,andwhenitappearsagain,recordthedepth.?TheaverageofthesetwodepthsistheSecchidepth.第十四頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityFieldDataLogbooksStationID

SamplingDate

Location

SamplingDepth(ifotherthansurface)

SamplingTime

SampleCollector'sInitials(ifseveralpersonsintheregioncollectthisdata)

Recordofallmeasuredfieldparametersandtheirrespectivevalues.Foreachvisittoanindividualstationwherefieldand/orsamplesarecollectedrecordthefollowing:第十五頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityFieldphysicochemicalparametersincludepartorallofthefollowing:

DissolvedOxygen

ChlorineResidual

Temperature

Salinity(tidalwatersonly)

pH

SecchiDiskTransparency

SpecificConductance

DaysSinceLastPrecipitationEvent(significantenoughtoinfluencewaterquality).

FlowSeverity第十六頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityFieldDataLogbooks第十七頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityOtherObservationsWaterAppearanceColor,unusualamountofsuspendedmatter,debrisorfoam,etc.WeatherRecentmeteorologicaleventsthatmayhaveimpactedwaterquality;heavyrains,coldfront,verydry,verywet,etc.BiologicalActivityExcessivemacrophyte,phytoplanktonorperiphytongrowth,Theobservationofwatercolorandexcessivealgalgrowthisveryimportantinexplaininghighchlorophyllavalues.Otherobservationssuchasfish,birdsandspawningfisharenoted.第十八頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityOtherObservationsUnusualOdorsHydrogensulfideodor,mustyodor,sewageodor,etc.WatershedorInstreamActivitiesInstreamordrainagebasinactivitiesoreventsthatareimpactingwaterquality;bridgeconstruction,shorelinemowing,livestockwateringupstream,etc.第十九頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityOtherObservationsRecordofPertinentObservationsRelatedtoWaterQualityandStreamUses.Ifthewaterqualityconditionsareexceptionallypoor,notethatstandardsarenotmetintheobservations,forexample,dissolvedoxygenisbelowminimumcriteria.Uses-swimming,wading,boating,fishing,irrigationpumps,navigation,etc.Eventually,forsettingwaterqualitystandards,thelevelofusewillbebasedoncommentsrelatedtotheleveloffishingandswimmingactivitiesobservedatastation.第二十頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversitySampleFixation固定液的配方如下：定性樣品固定液甲醛：丙三醇：水=10：10：80（體積比），可再加1ml冰醋酸，可以防止易收縮的藻類變形。定量樣品固定液（魯哥試液）20g碘化鉀溶解于含有20ml冰醋酸的200ml的水中，再加10g碘溶解其中，用棕色瓶保存。改良的可加4ml丙三醇，可用于對浮游動物的保存。第二十一頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversity從10L混合水樣中取1L作為定量樣品，用Lugol’s碘液固定并沉淀濃縮至50mL，作定量計數(shù)用。將部分樣品經(jīng)酸處理，用于在油鏡下對硅藻進行鑒定。第二十二頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversitySedimentationandConcentration沉淀和濃縮在筒形分液漏斗中進行。把分液漏斗固定在架子中，放在穩(wěn)定的桌子上。將水樣倒入分液漏斗，使浮游植物自然沉淀。理論上，浮游植物最小顆粒沉降速率為0.3cm/h,若分液漏斗中水柱高度為20cm，則需沉淀60h。實際上，藻類大小在1μm～50μm之間，經(jīng)碘液固定后，下沉較快，所以靜置時間一般可為48h。第二十三頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversity分級沉淀法沒有分液漏斗時，也可采取分級沉淀法。沉淀后，用細小的玻璃管（直徑小于2mm）借虹吸方法慢慢吸去上清液，注意不能攪動或吸出浮在表面和沉淀的藻類，虹吸管在水樣的一端可用孔徑為20μm的篩絹封蓋。第二十四頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversity分級沉淀法將剩余的藻液（約20mL）放入容積為50mL的試劑瓶中。試劑瓶事先在30mL處做好標記。用吸出的上層清液沖洗分液漏斗2－3次，一起放入試劑瓶中，定容到30mL。需要長期保存的樣品，應加入少許甲醛溶液，并用石蠟或parmarfilm膜封口。樣品瓶上應寫明采樣日期，地點，采樣體積和濃縮體積等第二十五頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityIdentifyandCount對采到的優(yōu)勢種要求鑒定到種，一般到屬。疑難種類要保存標本以備進一步鑒定。浮游植物計數(shù)框：由玻璃條組成的方框，面積為20mm×20mm，容量為0.1mL，框內(nèi)劃分為橫直各10行格，共100個小方格。將計數(shù)樣品充分搖勻后，迅速吸取0.1mL樣品至計數(shù)框中，蓋上蓋玻片。計數(shù)框內(nèi)應無氣泡，也不應有樣品溢出。氣溫高時，為了防止在長時間計數(shù)過程中水分蒸發(fā)而出現(xiàn)氣泡，可在蓋玻片四周封以液體石蠟。計數(shù)時，顯微鏡的目鏡可用10×，物鏡用40×，但根據(jù)情況可加以變動。第二十六頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityCountMethods行格法：對計數(shù)框上的第二行、五行和八行，三行共30格小方格進行計數(shù)，現(xiàn)已較少采用。視野法：利用顯微鏡的目鏡視野來選取計數(shù)的面積。先用臺微尺量得在一定放大倍數(shù)下的視野直徑，然后按圓面積公式求得視野面積。應利用計數(shù)框上的方格或顯微鏡機械移動臺上的標尺刻度，使選取的視野在計數(shù)框上均勻分布。計數(shù)的視野數(shù)目應根據(jù)樣品中浮游植物數(shù)量的多少確定。一般計數(shù)100~500個視野，使所得的浮游植物計數(shù)值至少在300以上?？梢韵扔嫈?shù)100個視野，如計數(shù)后數(shù)值太少，再增加100個，依此類推，計數(shù)的視野應均勻分布在計算框的全部面積內(nèi)。為減少工作量，一般不對整個計數(shù)框內(nèi)水樣中的浮游植物都計數(shù)，而只選取其中一部分樣品計數(shù)。選取過程是一個次級抽樣過程，故要考慮抽樣的大小和代表性，常用行格法和視野法。第二十七頁，共三十一頁，2022年，8月28日Instituteofhydrobiology,JinanUniversityCalculation把計數(shù)結(jié)果換算為原來所采的水樣中浮游植物數(shù)量時，用下列計算公式：式中：N——浮游植物數(shù)量，cell/mLA——計數(shù)框面積，mm2

Ac——計數(shù)面積或視野面積，mm2Vs——1L原水樣沉淀濃縮后的體積，mL

Va——計數(shù)框的容量，mL