實驗室生物安全管理操作詳解演示文稿

實驗室生物安全管理操作詳解演示文稿當前1頁，總共132頁。（優(yōu)選）實驗室生物安全管理操作當前2頁，總共132頁。國內概況（2）國家標準2003年8月開始起草，《實驗室生物安全通用要求》GB19489-2004。2004年5月中華人民共和國質量監(jiān)督檢驗檢疫總局

和中華人民共和國標準化管理委員會正式頒布了該標準。2004年9月1日中華人民共和國建設部與國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局又聯(lián)合發(fā)布了《生物安全實驗室建設技術規(guī)范》(GB50346-2004）當前3頁，總共132頁。國內概況（3）《病原微生物實驗室生物安全管理條例》2004年11月12日，由溫家寶總理簽發(fā)中華人民共和國國務院令(第424號)公布施行《病原微生物實驗室生物安全管理條例》（簡稱《條例》）。該《條例》規(guī)定了在病原微生物實驗活動中保護實驗人員和公眾健康的宗旨，從而使我國病原微生物實驗室的管理工作步入法制化管理軌道。不言而喻，《條例》對我國防生物威脅和處理突發(fā)衛(wèi)生事件的建設具有現(xiàn)實的和深遠的意義。當前4頁，總共132頁。病原微生物實驗室的有關概念1.生物因子（劑）:具有一定生物活性的制劑2.微生物:微生物是指活的生物因子，包括能夠復制或基因物質傳遞的細胞或非細胞的微小生物實體，其中包括致病和非致病的微生物。主要指細菌（螺旋體、立克次體、衣原體）、真菌、病毒和某些寄生蟲。3.病原體:病原體是能致病的生物因子，包括能夠引發(fā)人和動物、植物傳染病的生物因子，主要指致病微生物。當前5頁，總共132頁。病原微生物實驗室的有關概念4．生物氣溶膠：氣溶膠是指懸浮于氣體介質中粒徑一般為0.001-100μm的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對穩(wěn)定的分散體系。分散相含有生物因子的氣溶膠。5.生物戰(zhàn)劑氣溶膠：

分散相含有生物戰(zhàn)劑的氣溶膠。氣溶膠噴灑是國外生物戰(zhàn)釋放生物戰(zhàn)劑的主要方式。當前6頁，總共132頁。病原微生物實驗室的有關概念6.生物危害和生物危險：生物危害是由生物因子形成的傷害。生物危險是生物因子將要或可能形成的危害，是傷害概率和嚴重性的綜合。7.危險廢物：即有潛在危險的廢物，即可燃、易燃、腐蝕、有毒、傳染、放射或其他破壞作用的廢物

當前7頁，總共132頁。病原微生物實驗室的有關概念8．污染：是指物質或事物由外來的物質或因子的混入，而造成的不希望的影響。例如空氣、水體和固體受到物理的(灰塵)、氣體的(有害氣體)、生物(氣溶膠微生物)的污染。在生物安全實驗室里的空氣、水體和固體都視為被實驗生物因子的污染。當前8頁，總共132頁。病原微生物實驗室的有關概念9．去除污染：即為了安全，去除或減少污染物（原）或其影響的過程或方法。去除生物污染不一定殺滅微生物。所以：（1）安全柜內操作（2）向室外排放的空氣要用高效空氣顆粒

濾器過濾,（3）排出的廢水和廢物要進行高壓滅菌,對傳出的儀器和樣本容器表面進行消毒。當前9頁，總共132頁。生物安全防護相關概念（1）1．生物安全防護：是指避免生物危險因子，特別是偶然的和有意利用的生物因子，對生物體包括實驗室工作者在內的傷害和對環(huán)境的污染的意識和措施。實驗室生物安全防護分為一級防護（屏障）和二級防護（屏障）。當前10頁，總共132頁。生物安全防護相關概念（2）2．一級防護：包括兩方面內容：（1）生物安全柜和類似的設備等，分成三個級別；（2）個人防護裝備，也分成三個級別。3.二級防護:是指實驗室屏障設施，其建設有4種不同的結構。各種一級防護和二級防護的組合構成不同防護水平級別的實驗室（BSL-1?4）。當前11頁，總共132頁。生物安全防護相關概念（3）4.生物安全防護實驗室:指能夠避免或控制被操作的有害生物因子危險的實驗室。措施：通過規(guī)范的實驗室設計和精心施工、正確的實驗設備的配置、適合的個人防護裝備的使用、嚴格管理、翔實的操作規(guī)程（SOP)實現(xiàn)其功能。建造具有BSL-1和BSL-2的實驗室稱為基礎實驗室；具有BSL-3防護水平的實驗室被稱為生物安全防護實驗室；達到BSL-4水平的稱為高度生物防護實驗室。當前12頁，總共132頁。生物安全防護相關概念（4）5．生物安全柜：是直接操作危險性微生物時所用的箱形安全設備，是生物安全實驗室必備的裝備，保護使用者和環(huán)境，保護樣品。按防護水平生物安全柜分為I級、II級、III級,II級的又分為4種類型當前13頁，總共132頁。生物安全防護相關概念（5）6．安全罩：即覆蓋在生物醫(yī)學實驗室工作臺或儀器設備上的內部空氣壓力低于環(huán)境壓力的經濾器過濾的排風罩，以減少對實驗室工作者和環(huán)境的危害。7．圍場操作：是指操作有害生物因子時，用物理防護設備把病原微生物局限在一定的空間內，避免生物因子對人體的暴露和污染環(huán)境。當前14頁，總共132頁。生物安全防護相關概念（6）8．氣鎖和緩沖間：氣鎖是設置在氣壓不同的鄰近二區(qū)之間的氣壓可調節(jié)的密閉小室，作為二區(qū)的過渡通道。緩沖間是設在生物安全實驗室的清潔區(qū)與半污染區(qū)之間，或半污染區(qū)與污染區(qū)之間的類似于氣鎖的密閉小室，小室的兩門互鎖。當前15頁，總共132頁。生物安全防護相關概念（7）9．個人防護裝備：用于防止人員受到化學和生物等有害因子傷害的器材和裝備。其根本目的是屏蔽生物因子,不與人體發(fā)生直接接觸。我國在傳染病和微生物實驗室把個人防護分為三級。當前16頁，總共132頁。生物安全防護相關概念（8）（1）清潔區(qū)：是指在正常情況下不可能有實驗因子的污染的區(qū)域。（2）半污染區(qū)：是指在正常情況下只有輕微污染可能的區(qū)域。此區(qū)的功能是大量的準備工作,例如培養(yǎng)基、細胞、制劑的配制、低溫冰箱的放置等。在此工作的人員要做好個人防護,如穿上一層防護服、戴口罩和手套等。（3）污染區(qū)：是指操作實驗因子的地方，在操作過程中一定會有污染的區(qū)域,有潛在嚴重污染的可能。當前17頁，總共132頁。生物安全防護相關概念（9）（4）“緩沖間”：是指在A和B之間,B和C之間的區(qū)域（小室）。緩沖間有送、排風進行凈化換氣,以保證在人員出入時污染空氣不會直接向清潔區(qū)擴散或分割到清潔區(qū)。其功能包括空氣隔離、更衣?lián)Q鞋、去污染消毒淋浴。（5）傳遞窗：在BSL-3的A和B,B和C之間各設一個物流通道,以便傳遞實驗物資。它也是2門連鎖,并可進行消毒。當前18頁，總共132頁。生物安全防護相關概念（11）（7）“零泄漏”：我國的BSL-3和BSL-4實驗室要求活性實驗因子不能有任何泄漏。為此，對于離周圍建筑物較近的BSL-3實驗室,除了采取其他措施外，建議排入大氣的空氣要經過雙HEPA濾器串聯(lián)過濾,并經過人工生物氣溶膠法的監(jiān)測和驗證。當前19頁，總共132頁。生物安全防護相關概念（12）(8)．生物氣溶膠驗證方法：指用人工生物氣溶膠驗證生物安全實驗室、生物安全設備和個人防護裝備的安全參數(shù)是否達到要求的方法，對于生物安全柜的安全性能檢測和驗證，主要進行個體、環(huán)境和樣本保護實驗和交差污染實驗。當前20頁，總共132頁。其他概念（1）

1．消毒：是減少細菌芽胞除外的微生物的數(shù)量，使其達到無害的程度，不一定殺滅或清除全部的微生物。2．滅菌：滅菌是有效地使目的物沒有微生物的措施和過程，即殺滅所有的微生物。一般的細菌繁殖體和病毒1210C20min即可滅菌,對細菌芽胞需要30min以上;對朊病毒要1340C20min以上才能滅菌。當前21頁，總共132頁。其他概念（2）3.高效空氣過濾器：是指在額定風量和有效濾過面積下及氣流阻力在245Pa以下的對粒子徑≥0.3μm的粒子捕集效率在99.97%以上空氣過濾器。4.凈化：是指去除生物和非生物的所有類型污染的措施和過程。生物凈化其方法可能是消毒，也可能是滅菌或只是過濾。當前22頁，總共132頁。其他概念（3）5.動態(tài)密閉和靜態(tài)密閉：在BSL-4實驗室中要求靜態(tài)密閉,即實驗室在正壓情況下能保證實驗室的空氣不會外溢。在BSL-3實驗室中要求動態(tài)密閉,即實驗室允許有少量的漏氣,但當排氣大于送氣時能保持室內的負壓狀態(tài)或定向氣流。當前23頁，總共132頁。其他概念（4）6.硬件和軟件：硬件是指實驗室的設備和個人防護裝備(一級防護)和設施(二級防護)。在高致病性病原微生物實驗室中硬件要在性能上過硬,功能上齊全。軟件是指實驗室的生物管理體系，包括組織機構、管理制度、操作規(guī)程、人員素質等。當前24頁，總共132頁。其他概念（4）7．材料安全數(shù)據單：提供詳細的危險因素及預防信息的技術清單或有關資料，在制定研究計劃時應包含此內容。當前25頁，總共132頁。管理制度實驗室設置在主實驗室內應合理設置清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)非實驗有關人員和物品不得進入實驗室實驗室工作人員、外來合作者、進修和學習人員在進入實驗室及其崗位之前必須經過實驗室主任的批準當前26頁，總共132頁。

實驗室準入制度

★基礎生物安全二級實驗室或更高級實驗室門上應有國際生物危險警告標志。★只有經過授權的人員才允許進入實驗室的工作區(qū)?！飳嶒炇业拈T應保持關閉?！?6歲以下兒童不應被授權或允許進入實驗室工作區(qū)?！镏挥薪涍^專門的授權,方可進入動物房?！锱c實驗室工作無關的動物禁止進入實驗室。★實驗室內外應有明顯的"禁止吸煙"、"禁止吃喝東西"的標志。

當前27頁，總共132頁。實驗室準入制度★實驗室應保持整潔、干凈、與工作無關的物品禁止放入實驗室?！锶魏螡撛诘奈ｋU物濺出或工作日結束后,工作臺表面應凈化?！锼形廴镜奈锲?、標本和培養(yǎng)基在丟棄或清洗再利用之前應先進行凈化?！锇b及運輸時必須遵守適當?shù)膰一驀H規(guī)則。能打開的窗子必須安裝防蚊蟲的紗窗。當前28頁，總共132頁。實驗室工作人員資格和培訓實驗室的工作人員必須是受過專業(yè)教育的技術人員。在獨立工作前須在中高級實驗技術人員指導下進行上崗培訓，達到合格標準，方可開始工作實驗室的工作人員必須被告知實驗室工作的潛在危險并接收實驗室安全教育，自愿從事實驗室工作實驗室的工作人員必須遵守實驗室的所有制度、規(guī)定和操作規(guī)程三級和四級生物安全防護實驗室的工作人員留本底血清進行相關檢測，以后定期復檢。當前29頁，總共132頁。實驗室特殊管理對可能的危險因素，制定保證安全的工作程序事前進行有效的培訓和模擬訓練對于意外事故要能夠提供包括緊急救助或專業(yè)性保健治療的措施，足以應付緊急情況實驗室事故處理及上報當前30頁，總共132頁。實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如用于教學的普通微生物實驗室等。包含微生物舉例

大腸桿菌格魯伯耐格里原蟲感染性犬肝炎病毒枯草桿菌一級生物安全防護實驗室當前31頁，總共132頁。實驗室應設洗手池（靠近出口處）實驗室圍護結構內表面應易于清潔。地面應防滑、無縫隙，不得鋪設地毯實驗室中的家具應牢固。應有專門放置生物廢棄物容器的臺（架）實驗臺表面應不透水，耐腐蝕、耐熱實驗室如有可開啟的窗戶，應設置紗窗一級生物安全防護實驗室實驗室設計及建造當前32頁，總共132頁。

工作過程中禁止非工作人員進入實驗室。接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗室前要洗手禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及存儲食物使用機械移液器吸取液體，禁止口吸制定尖銳器具的安全操作規(guī)程一級生物安全防護實驗室標準微生物操作規(guī)程當前33頁，總共132頁。按照實驗室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產生每天至少消毒一次工作臺面，活性物質濺出后要隨時消毒所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室前須進行滅活（如高壓）。需運出實驗室滅活的物品必須放在專用密閉容器內。制定有效的防鼠防蟲措施無特殊微生物操作規(guī)程一級生物安全防護實驗室標準微生物操作規(guī)程當前34頁，總共132頁。一級生物安全防護實驗室

安全設施和個體防護一般無須使用生物安全柜等專用安全設備工作人員在實驗室應穿工作服，帶防護眼鏡工作人員手上有皮膚破損或皮疹時應戴手套負責人：在微生物及相關學科進行過專門培訓的專家

工作人員：曾經就實驗室操作規(guī)程進行過培訓當前35頁，總共132頁。實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。包含微生物舉例麻疹病毒沙門氏菌弓形體乙型肝炎病毒衣原體志賀氏菌二級生物安全防護實驗室當前36頁，總共132頁。BSL-2門上標志當前37頁，總共132頁。滿足一級實驗室(標準微生物操作規(guī)程)各款要求，在此基礎上特別注意制定出入制度實驗室人口貼上生物危險標志制定實驗室特定的生物安全操作規(guī)則每年一次最新培訓制度二級生物安全防護實驗室特殊微生物操作規(guī)程生物危險Ⅱ級當前38頁，總共132頁。

禁止用手處理破碎的玻璃器具。二級生物安全防護實驗室特殊微生物操作規(guī)程使用塑料器材代替玻璃器材。用過的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽，禁止用手直接從注射器取下。用過的針頭必須直接放入防穿透的容料中。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運送到特定區(qū)域消毒，最好進行高壓消毒針具利器使用注意事項：培養(yǎng)基、組織、體液及其它具有潛在危險性的廢棄物須放在防漏的容器中儲存、運輸及消毒、滅菌當前39頁，總共132頁。工作人員應接受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗，卡介苗等)必要時收集從事危險性工作人員的本底血清實驗設備在運出修理或維護前必須進行消毒人員暴露于感染性物質時，及時向實驗室負責人匯報，并記錄事故經過和處理方案禁止將無關動物帶入實驗室二級生物安全防護實驗室特殊微生物操作規(guī)程當前40頁，總共132頁。在一級生物安全基礎上，處理以下致病微生物時應在生物安全柜(Ⅱ級)中進行，包括:高濃度大容量有噴濺可能性上述材料的離心操作如使用密封的離心機轉子或安全離心杯，且只在生物安全柜中開閉，可在實驗室中進行。當微生物的操作不可能在生物安全柜內進行時，須使用面部保護裝置應有相應的SOP(標準操作程序二級生物安全防護實驗室安全設施和個體防護當前41頁，總共132頁。二級生物安全防護實驗室安全設施和個體防護在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服，不得穿著外出。用過的工作服應先在實驗室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。當手可能接觸感染材料、污染的設備時應戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實驗室，工作完全結束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。當前42頁，總共132頁。二級生物安全防護實驗室負責人應為更具責任感、能力的專家限制免疫耐受者進入實驗室限制正在接受免疫抑制劑者進入實驗室工作人員認識到工作中可能存在的危險操作/技術熟練當前43頁，總共132頁。廢棄物處理廢棄物是指任何要丟棄的物品。在實驗室里，廢棄物的凈化和最終的處理密切相關。對于日常用品、污染后被真正地拿出實驗室銷毀的情況很少、大多數(shù)的玻璃器皿、用具和實驗服都將重新投入使用。最重要的原則就是所有的感染性物品都應該在實驗室內凈化、高壓滅菌或焚燒。當前44頁，總共132頁。廢棄物處理從實驗室拿出污染物品或材料以前應保證:★這些物品和材料是否已經過可靠的程序有效凈化和滅菌?！锶绻麤]有，它必須有可靠的包裝，以利于現(xiàn)場焚燒，或運送到另一個有焚燒功能的設施?！锛航泝艋幚淼奈锲穼δ切┲苯訁⑴c處理程序的人員或可能接觸這些丟棄物的人員不會涉及任何額外的潛在危險，包括生物和其它危害。當前45頁，總共132頁。廢棄物處理程序（分類）1首先將感染性物品及盛裝這些感染性物品的容器依據下列原則進行：★能被再利用的或能象普通廢棄物一樣處理的非感染性物品:"生活"廢棄物。★污染的(感染性的)"利器"—皮下注射針頭、解剖刀、刀和碎玻璃,這些物品應該始終收集到防刺透的、有蓋子的容器里,并且象感染性物品一樣對待?！镆ㄟ^高壓滅菌凈化后,清洗再利用的污染物?！镆邏簻缇筇幚淼奈廴疚??！镆苯铀腿シ贌奈廴疚?。當前46頁，總共132頁。處理程序利器

使用后的皮下注射針頭不應再蓋帽或從一次性注射器上夾掉或移走。完整的注射器應裝在利器盒里,利器盒應是防刺透的,并且不能裝滿,當裝至容積的四分之三時、就應放入“感染性材料”容器里拿去焚燒。一次性注射器、單獨使用或與針頭一起使用，應該放入容器里焚燒，需要的情況下焚燒前要先高壓，利器盒不許丟到垃圾里。焚燒是處理污染物(包括宰殺后的實驗動物)的終末步驟，污染物的焚燒必須取得公共衛(wèi)生機構和大氣污染機構的批準，也要得到實驗室生物安全員的批準。當前47頁，總共132頁。處理程序要高壓和再利用的感染性物品

感染性物品在高壓和再利用之前不得預清洗,任何必要的洗涮和修復工作都要在高壓滅菌或消毒之后進行，所有感染性材料都應該在防滲露的容器里高壓滅菌。如果使用化學消毒劑，則消毒液每天新鮮配制，廢棄物應保持和消毒劑直接接觸（不能被氣泡隔住）并根據所使用的消毒劑選擇浸泡時間，然后把消毒劑倒到一個容器里以備高壓或焚燒。盛裝廢棄物的罐子在使用前應高壓并洗凈。當前48頁，總共132頁。對于所有的凈化過程蒸汽高壓都是首選的方法。要凈化和處理的材料應放在容器里,如放在耐高壓的塑料袋里，袋上以顏色標識其內容物要高壓滅菌和/或焚燒。也可以設計其它凈化方法、但它們必須可消除或消滅微生物，如消毒劑和化學藥品，一般實驗室推薦使用次氯酸納和酚類化合物作為消毒劑。

凈化當前49頁，總共132頁。凈化用于特殊目的各種表面活性劑或脂溶劑，包括酒精、腆酒、腆載體和極高或極低PH一樣，也可能是有效的，但要先確定要殺滅的微生物對此無抗性，以保證每種消毒劑在特定的用途中有效。不建議使用干熱、微波、紫外線、電離輻射等不確定方法。當前50頁，總共132頁。菌毒種的管理和使用菌毒種包括致病的和人類寄生的病毒、細菌真菌、端鉤螺旋體、立克次體等微生物。當前51頁，總共132頁。菌毒種的管理和使用來源從病人、感染者或動物分離培養(yǎng)的致病微生物、研制診斷試劑、疫苗或其他生物制品的微生物，從研制機構購買的標準品。

當前52頁，總共132頁。菌毒種的管理和使用取和發(fā)放菌毒種：嚴格執(zhí)行國家有關規(guī)定，手續(xù)完備，并認真作好記錄，按菌毒種分類要求，一類菌毒種報衛(wèi)生部審批，二類菌毒種報省級衛(wèi)生行政部門審批。一、二類菌毒種不得郵寄，三類菌毒種在郵寄時應執(zhí)行有關規(guī)定。當前53頁，總共132頁。菌毒種的管理和使用保存按菌毒種特性種類要求，分別放置于最適條件下保存，專人保管，雙人雙鎖。分類保存，按制度嚴格管理收入菌毒種，隨時做好標記，編號，登記，造冊。按期檢測活性，定期傳代保存，發(fā)現(xiàn)污染或活性減低，及時挽救，菌毒種死亡或變異,報批后銷毀并登記。當前54頁，總共132頁。菌毒種的管理和使用保存：按菌毒種特性種類要求，分別放置于最適條件下保存，專人保管，雙人雙鎖。分類保存，按制度嚴格管理收入菌毒種，隨時做好標記，編號，登記，造冊。按期檢測活性，定期傳代保存，發(fā)現(xiàn)污染或活性減低，及時挽救，菌毒種死亡或變異，報批后銷毀并登記。當前55頁，總共132頁。易燃易爆危險品、劇毒藥品、放射性標準源的使用管理

易燃易爆危險品、劇毒藥品、水、電或放射事故可能會間接引起傳染性微生物的擴散。因此任何微生物實驗室在這些方面都應有很高的安全要求。

當前56頁，總共132頁。劇毒藥品、放射性標準源必須做到專門場所、雙人、專柜加密加鎖管理。危險品（易燃易爆）應儲存在專柜內，專柜須防火、防盜、隔熱、避光、通風專人保管。易燃易爆危險品、劇毒藥品、放射性標準源的使用管理

當前57頁，總共132頁。放射性標準源必須存放于有鉛屏蔽的鐵柜中有專人管理。劇毒藥品、放射性標準源及危險品建立建全進出帳目，定期檢查，做到帳物相符，任何人不得外借或作其它用途。易燃易爆危險品、劇毒藥品、放射性標準源的使用管理

當前58頁，總共132頁。劇毒藥品、放射性標準源使用是嚴格履行審批請領手續(xù)，危險品嚴格履行請領手續(xù)，做好使用登記，保管者嚴格按規(guī)范和制度辦事，加強管理建立制度。易燃易爆危險品、劇毒藥品、放射性標準源的使用管理

當前59頁，總共132頁。對違犯制度者、瀆職者、失職者、違規(guī)者的任何人都應追查其責任，嚴肅處理，情節(jié)嚴重者由公安司法部門依法處理。易燃易爆危險品、劇毒藥品、放射性標準源的使用管理

當前60頁，總共132頁。實驗室高致病性微生物泄漏事故處理從事高致病性微生物實驗室必須嚴格執(zhí)行上述條例，嚴防高致病性微生物從實驗室泄漏，萬一發(fā)生高致病性微生物泄漏事故，《實驗室高致病性微生物泄漏應急處置預案》處置。當前61頁，總共132頁。實驗室高致病性微生物泄漏應急處置預案意外割傷和擦傷受傷人員應脫去保護服，洗凈雙手和受傷部位，使用適當?shù)南緞M入急救室，同時通知負責人受傷的原因及所污染的微生物，根據需要和醫(yī)生的建議進行處理，并保存完整的醫(yī)療檔案。當前62頁，總共132頁。實驗室高致病性微生物泄漏應急處置預案潛在的危險材料的意外吸入立即脫去防護服并送至急救室，告訴醫(yī)生吸入的材料，根據需要和醫(yī)生的建議進行處理并保存完整的醫(yī)療檔案，同時通知實驗室負責人。當前63頁，總共132頁。

實驗室高致病性微生物泄漏應急處置預案

有潛在危險的氣溶膠的釋放在實驗過程中如果有潛在危險的氣溶膠的釋放時，所有人員應立即撤離現(xiàn)場，任何暴露的人員都應進行醫(yī)療咨詢。并且馬上通知實驗室負責人。至少1小時內任何人不得進入事發(fā)房間，以使氣溶膠散去及重粒子沉降，如果實驗室無中央排風系統(tǒng)，要延遲24小時進入房間，并貼出標識以禁止進入。規(guī)定時間過后，應穿上防護服并戴呼吸保護裝置，在安全生產督查員的監(jiān)督下進行房間凈化。當前64頁，總共132頁。實驗室高致病性微生物泄漏應急處置預案打碎或濺出傳染性物質污染了感染性物質的破碎物品，感染性物質濺出，應該先用一塊布或紙巾蓋上，再把消毒劑倒到上面，至少靜置30分鐘，然后才把布或紙巾及打碎的物品清理走并高壓消毒。玻璃碎片應用鑷子夾取，污染區(qū)應用消毒劑拖干凈。如果使用了簸箕清理打碎的器皿，應將簸箕高壓或在有效的消毒劑里浸泡24小時。如果實驗室記錄被污染，則需重新填寫記錄并將污染的原件消毒處理。當前65頁，總共132頁。實驗室高致病性微生物泄漏應急處置預案含有潛在危險物離心管破裂在離心機正在運行時發(fā)生了破裂時，應關閉動力并保持離心機蓋子關閉30分鐘，在機器停止后發(fā)生破裂，離心機蓋子應立即關閉并保持30分鐘，同時通知實驗室負責人并在有效的防護條件下清理現(xiàn)場，所有打破的離心管、玻璃碎片、桶、套管及轉軸都要高壓或放到對該微生物有效的無腐蝕性的消毒劑中浸泡24小時。清理中所有的物品都應視為污染物消毒處理。當前66頁，總共132頁。實驗室工作人員出現(xiàn)所從事微生物感染癥狀或體征時應按下列處置規(guī)程當前67頁，總共132頁。

實驗室工作人員出現(xiàn)所從事微生物感染癥狀或體征時應按下列處置規(guī)程★立即封鎖該實驗室（動物房），并明顯標識嚴禁無關人員進入?！锪⒓赐ㄖ獙嶒炇邑撠熑?，并逐級上報?！镅杆賹⒈桓腥救藛T送指定醫(yī)院隔離治療，同一實驗室工作人員進行健康體檢并進行醫(yī)學觀察，必要時進行預防性治療。當前68頁，總共132頁。實驗室工作人員出現(xiàn)所從事微生物感

染癥狀或體征時應按下列處置規(guī)程

★進行流行病學調查，明確污染來源并列出其他密切接觸者或暴露人員（感染者家屬、同樓層人員）名單及處理方案。

★在微生物和流行病專家的指導和有嚴格防護設施的條件下對實驗室進行消毒處理，在未得到驗收許可之前不能啟用該實驗室?！飼⑸锖土餍胁＜艺页鲂孤┰?，提出整改意見，對實驗室存在的安全隱患進行改造，并追究相關人員的責任。當前69頁，總共132頁。生物安全管理組織體系國家地區(qū)單位上級主管部門實驗室所在單位實驗室當前70頁，總共132頁。

國家級

國務院衛(wèi)生主管部門主管與人體健康有關的實驗室及其實驗活動的生物安全監(jiān)督工作。國務院獸醫(yī)主管部門主管與動物有關的實驗室及其實驗活動的生物安全監(jiān)督工作。國務院其他有關部門在各自職責范圍內負責實驗室及其實驗活動的生物安全管理工作。

當前71頁，總共132頁。各地：

縣級以上地方人民政府及其有關部門在各自職責范圍內負責實驗室及其實驗活動的生物安全管理工作當前72頁，總共132頁?？h級以上地方人民政府衛(wèi)生主管部門、獸醫(yī)主管部門依照各自分工，履行下列職責：

(一)對病原微生物菌(毒)種、樣本的采集、運輸、儲存進行監(jiān)督檢查；(二)對從事高致病性病原微生物相關實驗活動的實驗室是否符合本條例規(guī)定的條件進行監(jiān)督檢查；(三)對實驗室或者實驗室的設立單位培訓、考核其工作人員以及上崗人員的情況進行監(jiān)督檢查；(四)對實驗室是否按照有關國家標準、技術規(guī)范和操作規(guī)程從事病原微生物相關實驗活動進行監(jiān)督檢查。

當前73頁，總共132頁。實驗室的設立單位及其主管部門實驗室的設立單位應當依照條例的規(guī)定制定科學、嚴格的管理制度，并定期對有關生物安全規(guī)定的落實情況進行檢查，定期對實驗室設施、設備、材料等進行檢查、維護和更新，以確保其符合國家標準。實驗室的設立單位及其主管部門應當加強對實驗室日?；顒拥墓芾?。當前74頁，總共132頁。實驗室感染控制機構及人員實驗室的設立單位應當指定專門的機構或者人員承擔實驗室感染控制工作，定期檢查實驗室的生物安全防護、病原微生物菌(毒)種和樣本保存與使用、安全操作、實驗室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等規(guī)章制度的實施情況。

當前75頁，總共132頁。實驗室感染控制機構及人員負責實驗室感染控制工作的機構或者人員應當具有與該實驗室中的病原微生物有關的傳染病防治知識，并定期調查、了解實驗室工作人員的健康狀況

當前76頁，總共132頁。從事高致病性病原微生物相關實驗活動的實驗室的設立單位，應當建立健全安全保衛(wèi)制度。從事高致病性病原微生物相關實驗活動的實驗室應當向當?shù)毓矙C關備案，并接受公安機關有關實驗室安全保衛(wèi)工作的監(jiān)督指導。當前77頁，總共132頁。實驗室負責人

----實驗室生物安全的第一責任人

實驗室負責人應當指定專人監(jiān)督檢查實驗室技術規(guī)范和操作規(guī)程的落實情況。

當前78頁，總共132頁。實驗室安全手冊安全手冊應在工作區(qū)隨時可用。手冊應針對實驗室的需要，主要包括但不限于以下幾方面：生物危險；消防；電氣安全；化學品安全；輻射；危險廢物處理和處置。從工作區(qū)撤離和事件處理規(guī)程有詳細說明。實驗室主任人應至少每年對安全手冊評審和更新。

當前79頁，總共132頁。標準操作程序（SOP）應根據實驗對象、生物危害程度評估、研究內容、設施特點、設備具體制定相應的標準操作程序。實驗室的標準操作程序應包括對涉及的任何危險以及如何在風險最小的情況下開展工作之詳細的作業(yè)指導書。負責工作區(qū)活動的管理責任人每年應對這些程序至少評審和更新一次,應制定書面計劃。當前80頁，總共132頁。獲得、維持和分發(fā)實驗室所有使用材料之安全數(shù)據單（MSDS）的程序；實驗室設備安全去污染和維護的程序；緊急程序，包括漏出處理程序；事件記錄、報告及調查；廢物處理和處置。當前81頁，總共132頁。小結認真學習條例和國標、行標。生物安全管理是一個復雜工程。各個部門有機配合，負責。各路專家真誠合作，討論、研究。單位領導長抓不懈。工作人員嚴謹、嚴密、嚴格。當前82頁，總共132頁。

生物安全實驗室人員管理人員培訓健康監(jiān)測與就醫(yī)程序

當前83頁，總共132頁。人員培訓實驗室或者實驗室的設立單位應當每年定期對工作人員進行培訓，保證其掌握實驗室技術規(guī)范、操作規(guī)程、生物安全防護知識和實際操作技能，并進行考核。工作人員經考核合格的，方可上崗。當前84頁，總共132頁。人員培訓從事高致病性病原微生物相關實驗活動的實驗室，應當每半年將培訓、考核其工作人員的情況和實驗室運行情況向省、自治區(qū)、直轄市人民政府衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門報告。

當前85頁，總共132頁。培訓對象實驗室所有相關人員：管理人員實驗人員運輸工清潔工修理工不但要對新員工進行培訓和指導，對老員工也要開展周期性的再培訓

當前86頁，總共132頁。培訓目的使所有相關人員熟悉工作環(huán)境，熟悉所從事的病原微生物的危害、預防和相關實驗活動的操作程序，掌握所使用儀器設備的性能和操作程序，了解生物安全知識，掌握意外事故發(fā)生時的相關處理程序等。當前87頁，總共132頁。培訓內容包括為實現(xiàn)實驗操作目標所必須掌握的知識或技術。還應注重培訓解決工作中可能出現(xiàn)意外事件的能力，并糾正在使用某一技術過程中容易出現(xiàn)的錯誤。同時還要有消防和預備狀態(tài)、化學和放射安全、生物危險和傳染預防、急救等課程

當前88頁，總共132頁。培訓方法專題講座、廣播介紹、計算機輔助教學、交互式影像、示范練習、模擬演練等各種方式。新員工上崗后還應由有經驗的技術負責人或職工帶一段時間，以充分熟悉工作工程。同時還應考慮不同培訓對象的差異。對某些人應采用更直觀的或“手把手”的方式更好；建議制定安全培訓規(guī)劃的人員要熟悉了解成人教育的基本原則。

當前89頁，總共132頁。培訓評估檢查培訓對象對所進行培訓的反應；考核培訓對象對所培訓內容的記憶和/或操作執(zhí)行情況；評估培訓對象在工作中的行為變化；按培訓機構的目的或目標來考查是否已有明顯的效果。當前90頁，總共132頁。培訓檔案實驗室負責人應負責建立培訓檔案，記錄被培訓者的培訓經歷。其中包括：培訓內容、培訓時間、培訓教師、考核或評估結果等當前91頁，總共132頁。健康監(jiān)測從事高致病性病原微生物相關實驗活動的實驗室，還應當對實驗室工作人員進行健康監(jiān)測，每年組織對其進行體檢，并建立健康檔案；必要時，應當對實驗室工作人員進行預防接種。當前92頁，總共132頁。健康監(jiān)測（1）每個實驗室必須指定專人負責健康監(jiān)測工作。負責健康監(jiān)測工作的人員應當具有與該實驗室中所操作的病原微生物有關的傳染病防治知識，堅持出勤登記制度，并及時調查、了解實驗室工作人員的健康狀況。

當前93頁，總共132頁。健康監(jiān)測（2）常規(guī)監(jiān)測：開展實驗室工作前對實驗室人員進行健康體檢并建立健康檔案，對實驗室人員進行定期臨床檢查，實行系統(tǒng)監(jiān)測。在開展實驗工作前還要采集本底血清標本并長期保存。當前94頁，總共132頁。健康監(jiān)測（3）實驗室工作人員必須在身體狀況良好的情況下，才能進入BSL-2（ABSL-2）及以上級別的實驗室工作。出現(xiàn)下列情況，不應進入上述區(qū)域：患發(fā)熱性疾??；感冒、上呼吸道感染、或其他導致抵抗力下降的情況；妊娠；已經在實驗室控制區(qū)域內連續(xù)工作4h以上，或其他原因造成的疲勞狀態(tài)。當前95頁，總共132頁。健康監(jiān)測（4）進入BSL-3(ABSL-3)及以上級別實驗室工作的相關人員，應每日早、晚測量體溫并觀察相應癥狀；結束實驗室工作后，應繼續(xù)進行相應時段（相關疾病的平均潛伏期）的健康監(jiān)測。一旦出現(xiàn)異常情況應立即報告實驗室負責人，以便及時采取相應控制措施。當前96頁，總共132頁。生物安全柜基礎知識當前97頁，總共132頁。目錄前言安全柜簡介安全柜的自動控制安全柜的性能要求及檢測安全柜的選擇原則安全柜的檢測當前98頁，總共132頁。一、前言生物安全柜負壓過濾排風柜：在生物因子操作過程中用來保護操作人員、環(huán)境和（或）實驗物品，防止其暴露于實驗中（可能）產生的危險性或潛在危險性生物氣溶膠或濺出物。是微生物實驗室的重要設備，是“病原體操作的一級安全隔離屏障”，關系生命安全和環(huán)境安全，要求非常嚴格。當前99頁，總共132頁。二、安全柜簡介安全柜分級：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三級當前100頁，總共132頁。A-前窗操作口B-觀察窗

C-排氣過濾器D-負壓排氣系統(tǒng)

圖1Ⅰ級安全柜結構和氣流模式示意圖

Ⅰ級安全柜操作者可通過前窗操作口在安全柜內進行操作。前窗操作口向內吸入的負壓氣流保護人員的安全污染氣流經高效過濾器過濾后排出，保護環(huán)境不受污染。不能對產品實施保護。當前101頁，總共132頁。Ⅱ級安全柜操作者可以通過前窗操作口在安全柜內進行操作。操作口流入氣流：保護人員經高效過濾器過濾的下降氣流：保護產品被污染氣流經高效過濾器過濾后排出：保護環(huán)境當前102頁，總共132頁。Ⅱ級安全柜的分類Ⅱ級安全柜根據結構特點和氣流模式的不同分為A1、A2、B1、B2四種類型當前103頁，總共132頁。Ⅱ級A1型安全柜前窗操作口流入氣流的最低速率為0.40m/s；下降氣流為安全柜的部分流入氣流和部分下降氣流的混合氣體，經過高效過濾器過濾后送至工作區(qū)；

當前104頁，總共132頁。當前105頁，總共132頁。A前窗操作口B觀察窗C排氣過濾器

D下降氣流過濾器E壓力排氣系統(tǒng)F風機

圖2Ⅱ級A1型安全柜結構和氣流模式示意圖（側視圖）當前106頁，總共132頁。Ⅱ級A2型安全柜操作口流入氣流的最低速率為0.50m/s。下降氣流為部分流入氣流和部分下降氣流的混合，經過高效過濾器過濾后送至工作區(qū)。污染氣流經過高效過濾器過濾后可以排到實驗室或經安全柜的外排接口通過排風管道排到大氣中。當前107頁，總共132頁。Ⅱ級A2型安全柜安全柜內所有污染部位均處于負壓狀態(tài)或者被負壓通道和負壓通風系統(tǒng)環(huán)繞。安全柜用于進行以微量揮發(fā)性有毒化學品和痕量放射性核素為輔助劑的微生物實驗時，必須連接功能合適的排氣罩。當前108頁，總共132頁。A-前窗操作口B-觀察窗C-排氣過濾器

D-下降氣流過濾器E-壓力排氣系統(tǒng)F-風機

圖3Ⅱ級A2型安全柜結構和氣流模式示意圖當前109頁，總共132頁。Ⅱ級B1型安全柜操作口流入氣流的最低平均速率為0.50m/s下降氣流大部分由未污染的流入氣流循環(huán)提供，經過高效過濾器過濾后送至工作區(qū)。大部分被污染的下降氣流經過高效過濾器過濾后通過專用的排氣管道排入大氣中；當前110頁，總共132頁。Ⅱ級B1型安全柜安全柜內所有被污染部位均處于負壓狀態(tài)或者被負壓通道和負壓通風系統(tǒng)包圍。如果揮發(fā)性有毒化學品或放射性核素隨空氣循環(huán)不影響實驗操作或實驗在安全柜的直接排氣區(qū)域進行，B1型安全柜可以用于以微量揮發(fā)性有毒化學品和痕量放射性核素為輔助劑的微生物實驗。當前111頁，總共132頁。B-觀察窗C-排氣過濾器D-下降氣流過濾器

E-負壓排氣系統(tǒng)F-風機G-下降氣流過濾器

圖4Ⅱ級B1型安全柜結構和氣流模式示意圖當前112頁，總共132頁。Ⅱ級B2型安全柜所有污染部位均處于負壓狀態(tài)或者被直接排氣（不在工作區(qū)循環(huán)）的負壓通道和負壓通風系統(tǒng)包圍。B2型安全柜可以用于以揮發(fā)性有毒化學品和放射性核素為輔助劑的微生物實驗。當前113頁，總共132頁。A-前窗操作口B-觀察窗C-排氣過濾器

D-下降氣流過濾器E-負壓排氣系統(tǒng)F-風機G散流器

圖5Ⅱ級B2型安全柜結構和氣流模式示意圖當前114頁，總共132頁。A-操作口B-觀察窗C-排氣過濾器

D-進氣過濾器E-傳遞窗

圖5Ⅲ級安全柜結構和氣流模式示意圖當前115頁，總共132頁。安全柜氣流特性（WHO)*去掉單支手套，手套連接口的風速前窗氣流（m/s）氣流組分（%）排氣連接循環(huán)氣流排出氣流Ⅰ級>0.40100硬管式連接A1型>0.47030排入室內或套管（罩）式連接A2型>0.57030排入室內或套管（罩）式連接B1型>0.53070硬管式連接B2型>0.