丁卡因半數(shù)致死量課件

機(jī)能實(shí)驗(yàn)教學(xué)

2012.5.丁卡因半數(shù)致死量測(cè)定

藥物毒性試驗(yàn)的目的在于揭示某一藥物的毒性強(qiáng)度、選擇性、發(fā)展過(guò)程以及所造成的損傷是否可逆、能否防治等。

通常將藥物毒性試驗(yàn)的方法按照給藥時(shí)間的長(zhǎng)短和觀察方法的不同，分為急性毒性試驗(yàn)、亞急性毒性試驗(yàn)、慢性毒性試驗(yàn)和特殊毒性試驗(yàn)。2實(shí)驗(yàn)背景1927年“評(píng)量藥劑致命程度的度量方式”

LD50（J.W.Trevan）首先提出

。

定義:

1.“能殺死一半試驗(yàn)總體之有害物質(zhì)、有毒物質(zhì)或游離輻射的劑量”。

2.指在質(zhì)反應(yīng)中引起50%實(shí)驗(yàn)對(duì)象死亡時(shí)的藥物劑量。評(píng)價(jià)藥物毒性大小、效價(jià)強(qiáng)度、治療指數(shù)。特殊毒性：——致突變、致畸、致癌試驗(yàn)1.反應(yīng)停事件——短肢（海豹肢）。在德國(guó)、英國(guó)和日本等造成1萬(wàn)名畸形兒的悲慘事件。2.水俉病——精神遲頓，大腦麻痹癥。發(fā)生率高達(dá)6%

由藥源性和非藥源性引起的疾病，特別是新藥進(jìn)入臨床后的使用所產(chǎn)生的，有時(shí)是無(wú)法事先預(yù)測(cè)的。為此，需要廣大的醫(yī)護(hù)工作者進(jìn)行大量的臨床觀察，總結(jié)其不良反應(yīng)及療效。急性毒理試驗(yàn)

（ＬＤ５０）

24小時(shí)內(nèi)一次或多次給藥后連續(xù)觀察動(dòng)物產(chǎn)生的毒性反應(yīng)和死亡情況。其觀察應(yīng)從定性和定量?jī)煞矫孢M(jìn)行。

定性：主要觀察用藥后動(dòng)物有哪些中毒表現(xiàn)（如是否聳毛、蜷臥、耳殼蒼白或充血、突眼、步履蹣跚、癱瘓、昏迷、抽搐、驚厥、呼吸困難、大小便失禁等），毒性反應(yīng)出現(xiàn)和消失的速度，涉及哪些組織和器官，最主要的可能毒性靶器官是哪個(gè)，損傷程度及可逆程度如何，中毒死亡過(guò)程中的特征，可能的死亡原因是什么等。

定量：觀察藥物毒性反應(yīng)與劑量的關(guān)系，求出LD50及其相關(guān)的統(tǒng)計(jì)量。

測(cè)定LD50的意義

(1)新藥申報(bào)——必須提供的資料(2)藥物毒性大小——評(píng)價(jià)藥物優(yōu)劣的重要參數(shù)

(3)評(píng)價(jià)藥物安全性——治療指數(shù)安全范圍

２.安全范圍：較好的藥物安全性指標(biāo)是：ＥＤ９５～ＬＤ５之間的距離，即安全范圍，其值越大越安全。

藥物的安全性與藥物的劑量（或濃度）有關(guān)。

實(shí)際應(yīng)用價(jià)值

藥物篩選的第一步：１．藥物的毒性高低。２．動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)性研究中，推算出治療劑量（?。蹋模担暗膸追种畮祝＃常谂R床上，一般可?。?５—１/１０ＬＤ５０開(kāi)始試用，由小到大慢慢增加到不能耐受為止，從中探索出療效滿意和毒性較小的劑量。

任何一種新藥過(guò)渡到臨床前，都必須先做ＬＤ５０測(cè)定。

LD50

指導(dǎo)原則：

1.使用最少的動(dòng)物獲得最大的信息

2.兩種以上給藥途徑（靜脈1）嚙齒類(lèi)非嚙齒類(lèi)

3.給藥后觀察14天

4.記錄所有現(xiàn)象病變尸檢鏡檢

需詳細(xì)記錄，以備復(fù)查及供臨床使用時(shí)參考

【目的】

了解藥物毒性的概念

了解藥物ＬＤ５０測(cè)定的步驟和方法

【原理】

局麻藥：對(duì)各類(lèi)組織都無(wú)損失性影響。

丁卡因?yàn)榫致樗帲ㄟ^(guò)抑制神經(jīng)細(xì)胞膜Na+內(nèi)流,阻止神經(jīng)動(dòng)作電位的產(chǎn)生和沖動(dòng)的傳導(dǎo)，而產(chǎn)生局麻作用。

隨著劑量加大，動(dòng)物會(huì)相繼出現(xiàn)一系列的癥狀直至死亡。實(shí)驗(yàn)方法（簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn)）一.預(yù)實(shí)驗(yàn)：

目的：初步摸出０和１００％死亡劑量，求公比——<1.40（r:1.11-1.33)方法：?。怪恍∈?，分三組，各小組劑量按等比數(shù)列（2:1；3:1）

（1）求出：（a)

0%；(b)

100%

（2）公式求公比（3）按公比算給藥劑量：a,ar,……

１.給藥：0.20ml/10g,腹腔注射低——高

15min觀察后，再注下一劑量。２.觀察：記錄中毒癥狀的各種表現(xiàn)(PPT6)

觀察時(shí)間：1.5h

３.記錄：出現(xiàn)中毒癥狀的時(shí)間，和死亡的時(shí)間及數(shù)量。實(shí)驗(yàn)：

【注意事項(xiàng)】

1.實(shí)驗(yàn)時(shí)，不要把各組劑量搞混，劑量要準(zhǔn)確。2.注射部位要正確，以免將藥物注入腸腔、臟器或膀胱內(nèi)。3.外環(huán)境（室溫20℃，安靜）4.動(dòng)物死亡以后，立刻解剖取出肝臟，冰箱保留備用。表：鹽酸丁卡因的小鼠毒性試驗(yàn)結(jié)果（全班）

D（mg/kg)LgDn死亡數(shù)PP2