實驗一用生長譜法測定微生物的營養(yǎng)需求_第1頁
實驗一用生長譜法測定微生物的營養(yǎng)需求_第2頁
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文檔簡介

關(guān)于實驗一用生長譜法測定微生物的營養(yǎng)需求第一頁,共七頁,編輯于2023年,星期一一、目的要求

學(xué)習(xí)用生長譜法測定微生物營養(yǎng)需要(碳源)的基本原理和方法。第二頁,共七頁,編輯于2023年,星期一二、基本原理

為了使微生物生長、繁殖,必須供給所需要的碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子等,如果缺少其中一種,微生物便不能生長。培養(yǎng)基的六大營養(yǎng)因素:碳源氮源能源無機(jī)鹽生長因子水第三頁,共七頁,編輯于2023年,星期一根據(jù)這一特性,可將微生物接種在一種只缺少某種營養(yǎng)物的完全合適的瓊脂培養(yǎng)基中,倒成平板,再將所缺的營養(yǎng)物(例如各種碳源)點植于平板上,經(jīng)適溫培養(yǎng),該營養(yǎng)物便逐漸擴(kuò)散于植點周圍。該微生物若需要此種營養(yǎng)物,便在這種營養(yǎng)物擴(kuò)散處生長繁殖,微生物繁殖之處便出現(xiàn)圓形落圈,即生長圖形,故稱此法為生長譜法。這種方法可以定性的測定微生物對各種營養(yǎng)物質(zhì)的需要。在微生物育種和營養(yǎng)缺陷型的鑒定中也常用此法。

第四頁,共七頁,編輯于2023年,星期一三、實驗材料1.培養(yǎng)基:基礎(chǔ)鹽合成培養(yǎng)基(無碳培養(yǎng)基),固體

NaCl1gKH2PO40.5gK2HPO40.5gNH4SO42gMgSO4?7H2O

0.2g

瓊脂20gpH7.0

/1L2.糖類(10%,v/v,115oC,30min高壓滅菌)木糖,葡萄糖,甘露醇,麥芽糖,蔗糖,乳糖

3.實驗材料:無菌平板,無菌濾紙片,打孔器等4.實驗菌種:大腸桿菌(E.coli)

第五頁,共七頁,編輯于2023年,星期一四、實驗內(nèi)容1、將無碳培養(yǎng)基溶化后冷卻至到50℃左右。2、用無菌吸管吸取0.5mlE.coli

懸液于直徑為12㎝的無菌培養(yǎng)皿中,將上述冷卻的培養(yǎng)基傾倒于培養(yǎng)皿中,輕輕在桌面混勻。3、待培養(yǎng)基凝固后,在平板背面用記號筆劃分為六個區(qū),在平板背面邊緣處標(biāo)記要點植的各種糖類。4、在桌面酒精燈火焰處用鑷子分別加入蘸有不同糖類的濾紙片。5、待平板吸收干燥后,倒置于37℃溫室培養(yǎng)18~24小時,觀察各種

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