HIV篩查實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理與控制

質(zhì)量保證第一頁，共35頁。一、人員培訓(xùn)人員要求3名以上技術(shù)人員至少1人具有中級職稱、2年以上血清學(xué)檢驗(yàn)工作經(jīng)驗(yàn)上崗要求上崗前必須接受技術(shù)培訓(xùn)并獲得合格證書每年接受復(fù)訓(xùn)一次培訓(xùn)內(nèi)容HIV檢測相關(guān)基礎(chǔ)知識、檢測技術(shù)及管理要求、實(shí)驗(yàn)操作、質(zhì)量管理與控制、生物安全。第二頁，共35頁。使用新方法前對人員進(jìn)行培訓(xùn)獲得資格開展相應(yīng)工作檢驗(yàn)人員檢測人復(fù)核人簽發(fā)人不能一人同時承擔(dān)多個角色！第三頁，共35頁。二、環(huán)境條件HIV篩查實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室或檢測區(qū)域應(yīng)分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，應(yīng)符合二級生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）要求。配備開展HIV抗體檢測所需的設(shè)備：生物安全柜、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、恒溫孵育箱、離心機(jī)、加樣器、冰箱等。第四頁，共35頁。HIV檢測點(diǎn)須有HIV抗體檢測區(qū)域或?qū)Ｓ脤?shí)驗(yàn)臺，能開展簡便、快速的檢測。須配備快速試驗(yàn)所必須的物品，包括冰箱、消毒與污染物處理設(shè)備、一次性耗材、安全防護(hù)用品等。第五頁，共35頁。三、樣品的采集和保存盡量避免溶血細(xì)菌污染抗凝不完全假陽性內(nèi)源性HRP紅細(xì)胞破裂釋放活性物纖維蛋白原干擾注：血清置4℃冰箱5天內(nèi)完成檢測第六頁，共35頁。四、檢測方法和試劑選擇試劑國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準(zhǔn)、批檢合格、在有效期內(nèi)，經(jīng)臨床質(zhì)量評估敏感性和特異性高。更換試劑批號時應(yīng)進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn)。檢測方法使用可靠的檢測方法，常用：ELISA和快速檢測。第七頁，共35頁。五、設(shè)備維護(hù)與校準(zhǔn)酶標(biāo)儀/洗板機(jī)加樣器溫度計(jì)高壓鍋國家法定部門定期校準(zhǔn)（每年至少1次）精密儀器生產(chǎn)廠家校準(zhǔn)（每年至少1次）均須做好日常維護(hù)及使用記錄蛋白印跡儀流式細(xì)胞儀病載儀第八頁，共35頁。六、文件和文件管理1.標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）至少建立以下SOP樣品的接收、登記、處理和保存檢測方法和步驟試劑使用和保存儀器的使用、維護(hù)和校準(zhǔn)質(zhì)量控制要求及程序結(jié)果解釋與報(bào)告保密程序?qū)嶒?yàn)室數(shù)據(jù)、相關(guān)文件記錄與保存不確定樣品追蹤和處理實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)、清理及消毒第九頁，共35頁。SOP應(yīng)包括的內(nèi)容標(biāo)題和編號編寫和修訂日期編寫和修訂人員姓名方法、目的和應(yīng)用范圍檢測設(shè)備試劑及有效期安全防護(hù)相關(guān)步驟結(jié)果的解釋和報(bào)告附錄每年修訂一次第十頁，共35頁。2.實(shí)驗(yàn)原始記錄原始記錄表試劑廠家測定方法試劑批號試劑效期操作人員姓名復(fù)核人員姓名檢測日期第十一頁，共35頁。3.結(jié)果報(bào)告試劑盒質(zhì)控品外部質(zhì)控品滿足要求不滿足要求分析結(jié)果重新檢測復(fù)核人簽字簽發(fā)人簽字第十二頁，共35頁。4.HIV標(biāo)本的保存記錄標(biāo)本保存記錄標(biāo)本類型貯存量貯存溫度貯存起始時間標(biāo)本保管人標(biāo)本復(fù)核人第十三頁，共35頁。5.樣品登記和保存收樣建立唯一編碼登記相關(guān)信息保存姓名、性別、年齡、檢測日期第十四頁，共35頁。6.文件存檔

實(shí)驗(yàn)原始記錄、打印數(shù)據(jù)、WB試驗(yàn)的反應(yīng)條帶或照片、樣品登記表、樣品保存記錄表等應(yīng)妥善存檔保存10年以上。第十五頁，共35頁。質(zhì)量控制第十六頁，共35頁。一、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的定義

為達(dá)到質(zhì)量要求所采取的作業(yè)技術(shù)和活動。定義第十七頁，共35頁。二、酶免或發(fā)光法抗體檢測的室內(nèi)質(zhì)量控制

1、室內(nèi)質(zhì)量控制的質(zhì)控品試劑盒內(nèi)部對照判斷試驗(yàn)有效性，但不能作為室內(nèi)質(zhì)控品。室內(nèi)質(zhì)控品監(jiān)控檢測的重復(fù)性?？芍辉O(shè)弱陽性質(zhì)控，以試劑盒臨界值的2~3倍為宜。第十八頁，共35頁。3、室內(nèi)質(zhì)控血清的制備收集陽性血清（無溶血、黃疸、脂肪）56℃、30min滅活3000r/min離心15min正常人血清或10%小牛血清PBS溶液稀釋測量值分裝，-20℃凍存第十九頁，共35頁。4、質(zhì)量控制方法Levey-Jennings質(zhì)控圖

使用累積和技術(shù)或趨勢分析技術(shù)的圖形提供系統(tǒng)偏移和漂移的狀況。第二十頁，共35頁。質(zhì)控圖參數(shù)在不同的批次檢測取得的至少20個數(shù)據(jù)至少做5個批次的檢測，每個批次中不少于4個質(zhì)控品檢測結(jié)果平均值標(biāo)準(zhǔn)差變異系數(shù)控制限樣本量足夠樣本量較少第二十一頁，共35頁。質(zhì)控的規(guī)定和使用

目前很多質(zhì)控規(guī)則已被采用，最常用的是12S和13S規(guī)則。第二十二頁，共35頁。告警（12S）：當(dāng)外部對照的S/CO值超過±2S范圍時，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應(yīng)予注意，是否可以繼續(xù)檢測需要進(jìn)一步觀察。若將12S做失控標(biāo)準(zhǔn)，有較高的假失控概率，所以一般不采用。警告:12S規(guī)則違背第二十三頁，共35頁。失控（13S）：當(dāng)外部對照的S/CO值超過±3S范圍時，系統(tǒng)處于失控狀態(tài)，本次結(jié)果不能被接受。失控:13S規(guī)則違背第二十四頁，共35頁。位移：連續(xù)幾次（3-5次）外部質(zhì)控都落在均值的一側(cè)。提示試驗(yàn)條件發(fā)生了較大改變。發(fā)生位移第二十五頁，共35頁。出現(xiàn)以下情況也應(yīng)該應(yīng)該暫停實(shí)驗(yàn)，找出原因。連續(xù)兩次同一方向超出2S第二十六頁，共35頁。連續(xù)四次同一方向超出1S第二十七頁，共35頁。失控原因的處理和分析處理出現(xiàn)數(shù)據(jù)違背控制規(guī)則填寫失控報(bào)告單上交實(shí)驗(yàn)室主管是否發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告決定第二十八頁，共35頁。失控原因的分析立即重新測定同一質(zhì)控品用新的質(zhì)控品重測失控項(xiàng)目檢查儀器狀態(tài)檢查試劑聯(lián)系儀器廠家排除人為或偶然誤差排除質(zhì)控品變質(zhì)或污染失控失控失控失控第二十九頁，共35頁?！凹纯谭ā辟|(zhì)控

樣本量較少，無法繪制“L-J”質(zhì)控圖時，前20個數(shù)據(jù)可采用“即刻法”。該方法只需3個測定值即可開始進(jìn)行質(zhì)控。第三十頁，共35頁。先將測定值從小到大排列，X1最小，Xn最大；計(jì)算X和S；計(jì)算SI上限值和SI下限值。SI上限=（X最大-X）/S，SI下限=（X-X最?。?S；對照SI值表，檢查是否失控?！谌豁?，共35頁。SI值表nn3sn2snn3sn2s31.161.15122.552.2941.491.46132.612.3351.751.67142.662.3761.941.82152.712.4172.101.94162.752.4482.222.03172.792.4792.322.11182.822.50102.412.18192.852.53112.482.23202.882.56第三十二頁，共35頁。當(dāng)SI上限和SI下限<n2s時表示處于控制范圍內(nèi)，可以繼續(xù)測定。當(dāng)SI上限和SI下限有一值處于n2s~n3s值之間時說明該值在2s~3s范圍，處于“告警”狀態(tài)。當(dāng)SI上限和SI下限有一值>n3s時說明該值已在3s范圍之外，屬“失控”。注：“即刻法”只能在前20次內(nèi)使用，超出即可采用L-J質(zhì)控圖法。第三十三頁，共35頁。三、快速法抗體檢測質(zhì)控1、試劑內(nèi)對照

在質(zhì)控窗口內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)控帶，該質(zhì)控帶是試劑自帶的內(nèi)部過程質(zhì)控，說明實(shí)驗(yàn)室操作全部完成并且實(shí)驗(yàn)所用材料處于工作狀態(tài)。清潔的檢測區(qū)背景是內(nèi)部陰性過程質(zhì)控。如實(shí)驗(yàn)完成后未出現(xiàn)紅色質(zhì)控帶，說明試劑盒內(nèi)質(zhì)控?zé)o效，該試驗(yàn)結(jié)果無效，樣品須重檢。

第三十四頁，共35頁。2、室內(nèi)質(zhì)控