紫外可見分光光法培訓課件

目錄一、分子光譜概述二、紫外可見光譜三、朗伯－比爾定律四、紫外可見分光光度計五、無機與有機分析應用六、儀器操作七、儀器維護保養(yǎng)當前1頁，總共79頁。2一、概述–分子光譜原子核在其平衡位置附近的相對振動---

振動能級（Ev）Ｅ＝Ｅe+Ｅv+ＥrΔΕe>ΔΕv>ΔΕr物質(zhì)分子內(nèi)部三種運動形式電子相對于原子核的運動---

電子能級

（Ee）

分子本身繞其重心的轉動---

轉動能級

（Er）當前2頁，總共79頁。3一、概述–分子光譜Ｅ＝Ｅe+Ｅv+ＥrΔΕe>ΔΕv>ΔΕr

電子能級振動能級轉動能級當前3頁，總共79頁。4一、概述–

分子光譜ΔΕr

0.005～0.050eV遠紅外光譜(分子轉動光譜)ΔΕv

0.05～１eV紅外光譜(分子振動光譜)ΔΕe

1～20eV紫外—可見光譜(分子的電子光譜)當前4頁，總共79頁。電磁波譜g-X-射線紫外可見紅外微波無線電2004008003200(nm)波長真空紫外近紅外核磁共振波長越短，能量越高當前5頁，總共79頁。6二、紫外可見光譜

可見吸收光譜：電子躍遷光譜

吸收光波長范圍400780nm，主要用于有色物質(zhì)的定量分析。紫外吸收光譜：電子躍遷光譜吸收光波長范圍200400nm（近紫外區(qū)），可用于結構鑒定和定量分析。特點靈敏度高選擇性較好通用性強準確度較好操作簡單價格低廉當前6頁，總共79頁。7吸收曲線與最大吸收波長

max用不同波長的單色光照射，測吸光度二、紫外可見吸收光譜不同濃度的溶液，測吸光度當前7頁，總共79頁。8二、紫外可見吸收光譜同一種物質(zhì)對不同波長光的吸光度不同。吸光度最大處對應的波長稱為最大吸收波長λmax不同濃度的同一種物質(zhì)，其吸收曲線形狀相似λmax不變。而對于不同物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和λmax則不同。吸收光譜的波長分布是由產(chǎn)生譜帶的躍遷能級間的能量差所決定，反映了分子內(nèi)部能級分布狀況，是物質(zhì)定性分析的依據(jù)。吸收譜帶的強度與該物質(zhì)分子吸收的光子數(shù)成正比，是物質(zhì)定量分析的依據(jù)。當前8頁，總共79頁。9有機化合物的紫外—可見吸收光譜分子中外層價電子躍遷的結果（三種）：形成單鍵的σ電子、形成雙鍵的π電子、未成鍵的n電子分子軌道理論：一個成鍵軌道必定有一個相應的反鍵軌道。通常外層電子均處于分子軌道的基態(tài)，即成鍵軌道或非鍵軌道上。當外層電子吸收紫外或可見輻射后，就從基態(tài)向激發(fā)態(tài)(反鍵軌道)躍遷。主要有四種躍遷，所需能量ΔΕ大小順序為：

n→π＊<π→π＊<n→σ＊<σ→σ＊

當前9頁，總共79頁。10*躍遷能量很大吸收光譜在真空紫外區(qū)多為飽和烴甲烷 125nm乙烷 135nm當前10頁，總共79頁。n*躍遷

所需能量小于*躍遷（150-250nm）

若飽和烴中的氫原子被氧、氮、鹵素等原子或基團所取代，由于這些原子中含有n電子，可以發(fā)生n*躍遷摩爾吸光系數(shù)比較小，一般在100-3000L/molcm化合物 max maxH2O 167 1480CH3OH 184 150CH3Cl 173 200(CH3)2O 184 2520當前11頁，總共79頁。12*和n*躍遷*和n*躍遷能量低（>200nm）

含有不飽和鍵的有機分子易發(fā)生這類躍遷

C=C;C=C;N=N;C=O

有機化合物的紫外-可見吸收光譜分析多以這兩類躍遷為基礎*比n*躍遷幾率大100-1000倍*躍遷吸收強，~104

n*躍遷吸收弱，500當前12頁，總共79頁。13紫外光譜中常用的術語生色團：從廣義來說，所謂生色團，是指分子中可以吸收光子而產(chǎn)生電子躍遷的原子基團。但是，人們通常將能吸收紫外、可見光的原子團或結構系統(tǒng)定義為生色團。當前13頁，總共79頁。14紫外光譜中常用的術語助色團

助色團是指帶有非鍵電子對的基團，如-OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等，它們本身不能吸收大于200nm的光，但是當它們與生色團相連時，會使生色團的吸收峰向長波方向移動，并且增加其吸光度。當前14頁，總共79頁。15生色團—— 含有鍵不飽和官能團助色團—— 基團本身無色，但能增強生色團顏色為含有n電子，且能與電子作用，產(chǎn)生n共軛184204254270苯（*）苯酚（—OH為助色團）/nm紫外光譜中常用的術語當前15頁，總共79頁。16紫外光譜中常用的術語紅移與藍移有機化合物的吸收譜帶常常因引入取代基或改變?nèi)軇┦棺畲笪詹ㄩLλmax和吸收強度發(fā)生變化:某些有機化合物經(jīng)取代反應引入含有未共享電子對的基團（-OH、-OR、-NH2、-SH、-Cl、-Br、-SR、-NR2

）之后，吸收峰的波長將向長波方向移動，這種效應稱為紅移效應。在某些生色團如羰基的碳原子一端引入一些取代基之后，吸收峰的波長會向短波方向移動，這種效應稱為藍移效應。如-CH2、-CH2CH3、-OCOCH3。當前16頁，總共79頁。17紅移—λmax向長波方向移動藍移—

向短波方向移動增色效應—吸收強度即摩爾吸光系數(shù)，ε增大的現(xiàn)象減色效應—吸收強度即摩爾吸光系數(shù)，

ε減小的現(xiàn)象引入取代基或改變?nèi)軇┳贤夤庾V中常用的術語當前17頁，總共79頁。18無機化合物的紫外—可見吸收光譜

⑴過渡金屬離子d一d的電子躍遷（2）鑭系和錒系離子的f一f電子躍遷

⑶電荷轉移吸收光譜-絡合物的吸收在分光光度法中具有重要意義:微量組分的定量分析。

當吸收紫外可見輻射后，分子中原定域在金屬M軌道上電荷的轉移到配位體L的軌道，或按相反方向轉移，這種躍遷稱為電荷轉移躍遷，所產(chǎn)生的吸收光譜稱為荷移光譜。當前18頁，總共79頁。19有機化合物紫外-可見吸收光譜1.飽和烴及其取代衍生物

飽和烴類分子中只含有鍵，只能產(chǎn)生*躍遷。飽和烴的最大吸收峰一般小于150nm，超出紫外、可見分光光度計的測量范圍。飽和烴的取代衍生物如鹵代烴，其鹵素原子上存在n電子，可產(chǎn)生n*的躍遷。n*的能量低于*。例如，CH3Cl、CH3Br和CH3I的n*躍遷分別出現(xiàn)在173、204和258nm處。氯、溴和碘原子引入甲烷后，其相應的吸收波長發(fā)生了紅移，顯示了助色團的助色作用。直接用烷烴和鹵代烴的紫外吸收光譜分析這些化合物的實用價值不大。但是它們是測定紫外和（或）可見吸收光譜的良好溶劑。當前19頁，總共79頁。202.不飽和烴及共軛烯烴

在不飽和烴類分子中，除含有鍵外，還含有鍵，它們可以產(chǎn)生*和*兩種躍遷。*躍遷的能量小于*躍遷。例如，在乙烯分子中，*躍遷最大吸收波長為180nm

在不飽和烴類分子中，當有兩個以上的雙鍵共軛時，隨著共軛系統(tǒng)的延長，*躍遷的吸收帶將明顯向長波方向移動，吸收強度也隨之增強。在共軛體系中，*躍遷產(chǎn)生的吸收帶又稱為K帶。

有機化合物紫外-可見吸收光譜當前20頁，總共79頁。213.羰基化合物

羰基化合物含有C=O基團。C=O基團主要可產(chǎn)生*、n*、n*三個吸收帶，n*吸收帶又稱R帶，落于近紫外或紫外光區(qū)。醛、酮、羧酸及羧酸的衍生物，如酯、酰胺等。羧酸及羧酸的衍生物雖然也有n*吸收帶，但是，羧酸及羧酸的衍生物的羰基上的碳原子直接連結含有未共用電子對的助色團，如-OH、-Cl、-OR等，由于助色團上的n電子與羰基雙鍵的電子產(chǎn)生n共軛，導致*軌道的能級有所提高，使n*躍遷所需的能量變大，n*吸收帶藍移至210nm左右。有機化合物紫外-可見吸收光譜當前21頁，總共79頁。224.苯及其衍生物

苯有三個吸收帶，它們都是由*躍遷引起的。E1帶出現(xiàn)在180nm（MAX=60，000）；E2帶出現(xiàn)在204nm（MAX=8000）；B帶出現(xiàn)在255nm（MAX=200）。在氣態(tài)或非極性溶劑中，苯及其許多同系物的B譜帶有許多的精細結構，這是由于振動躍遷在基態(tài)電子上的躍遷上的疊加而引起的。在極性溶劑中，這些精細結構消失,當苯環(huán)上有取代基時，苯的三個特征譜帶都會發(fā)生顯著的變化，其中影響較大的是E2帶和B譜帶。有機化合物紫外-可見吸收光譜當前22頁，總共79頁。235.稠環(huán)芳烴及雜環(huán)化合物稠環(huán)芳烴，如奈、蒽、芘等，均顯示苯的三個吸收帶，但這三個吸收帶均發(fā)生紅移，且強度增加。隨著苯環(huán)數(shù)目的增多，吸收波長紅移越多，吸收強度也相應增加。當芳環(huán)上的-CH基團被氮原子取代后，則相應的氮雜環(huán)化合物（如吡啶、喹啉）的吸收光譜，與相應的碳化合物極為相似，即吡啶與苯相似，喹啉與奈相似。此外由于引入含有n電子的N原子的，這類雜環(huán)化合物還可能產(chǎn)生n*吸收帶。有機化合物紫外-可見吸收光譜當前23頁，總共79頁。24溶劑對紫外吸收光譜的影響1.溶劑的極性

溶劑的極性越強，由π→π＊躍遷產(chǎn)生的譜帶向長波方向移動越顯著。這是因為發(fā)生π→π＊躍遷的分子激發(fā)態(tài)的極性總大于基態(tài)，在極性溶劑的作用下，激發(fā)態(tài)能量降低的程度大于基態(tài)，從而使基態(tài)到激發(fā)態(tài)躍遷所需的能量變小，使吸收帶發(fā)生紅移。

所用溶劑極性越強，則由n→π＊躍遷產(chǎn)生的譜帶向短波方向移動越明顯，即藍移越大。發(fā)生n→π＊躍遷的分子都含有未成鍵的孤對電子，與極性溶劑形成氫鍵，使得分子的非鍵軌道能量有較大程度的降低，使n→π＊躍遷所需的能量相應增大，致使吸收譜帶發(fā)生藍移。當前24頁，總共79頁。252.pH值對紫外光譜的影響pH值的改變可能引起共軛體系的延長或縮短，從而引起吸收峰位置的改變，對一些不飽和酸、烯醇、酚及苯胺類化合物的紫外光譜影響很大，如果化合物溶液變?yōu)閴A性時，吸收峰發(fā)生紅移，表明該化合物為酸性物質(zhì)。如果變?yōu)閴A性，發(fā)生藍移，可能為芳胺。例如：苯酚（當pH大于7時，發(fā)生紅移）苯胺與鹽酸苯胺溶劑對紫外吸收光譜的影響當前25頁，總共79頁。

利用被測物質(zhì)的分子對紫外-可見光具有選擇性吸收的特性而建立的分析方法。一、紫外－可見吸光光度法的特點（1）具有較高的靈敏度。（2）有一定的準確度，該方法相對誤差為2%-5%，可滿足對微量組分測定的要求。（3）操作簡便、快速、選擇性好、儀器設備簡單。（4）應用廣泛

互補光當前26頁，總共79頁。單色光：只具有一種波長的光?；旌瞎猓河蓛煞N以上波長組成的光，如白光。物質(zhì)對光的選擇性吸收白光青藍青綠黃橙紅紫藍1、光的互補性與物質(zhì)的顏色當前27頁，總共79頁。

物質(zhì)的顏色是由于物質(zhì)對不同波長的光具有選擇性的吸收作用而產(chǎn)生的，物質(zhì)的顏色由透過光的波長決定。例：硫酸銅溶液吸收白光中的黃色光而呈藍色；高錳酸鉀溶液因吸白光中的綠色光而呈紫色。如果兩種適當顏色的光按一定的強度比例混合可以得白光，這兩種光就叫互為補色光。物質(zhì)呈現(xiàn)的顏色和吸收的光顏色之間是互補關系。當前28頁，總共79頁。不同顏色的可見光波長及其互補光白光青藍青綠黃橙紅紫藍當前29頁，總共79頁。2、吸收光譜或吸收曲線

吸收曲線：測定某種物質(zhì)對不同波長單色光的吸收程度，以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標作圖。KMnO4的吸收曲線最大吸收波長，max定量分析的基礎：某一波長下測得的吸光度與物質(zhì)濃度關系的有關當前30頁，總共79頁。300400500600350525545Cr2O72-MnO4-1.00.80.60.40.2AbsorbanceCr2O72-、MnO4-的吸收光譜350光譜定性分析基礎：吸收曲線的形狀和最大吸收波長當前31頁，總共79頁。32三、光的吸收定律光的吸收程度和吸收層厚度的關系A∝b光的吸收程度和吸收物濃度之間的關系

A∝c

朗伯—比耳定律

A=ε

bc吸光光度法的理論基礎和定量測定的依據(jù)朗伯(Lambert)比耳(Beer)當前32頁，總共79頁。33A：吸光度---溶液對光的吸收程度b：液層厚度(光程長度,cm)c：溶液的摩爾濃度，mol·L－１ε：摩爾吸光系數(shù)，L·mol－１·cm－１；三、光的吸收定律A＝lg（I0/It)=εbc濃度為1mol/L、液層厚度為1cm時該溶液在某一波長下的吸光度A＝lg（I0/It)=abcc：溶液的濃度，g·L－１

a：吸光系數(shù)，L·g－１·cm－１

濃度為1g/L、液層厚度為1cm時該溶液在某一波長下的吸光度a——εa=ε/M

（M為摩爾質(zhì)量）

當前33頁，總共79頁。34摩爾吸光系數(shù)三、光的吸收定律不隨濃度c和光程長度b的改變而改變，在溫度和波長等條件一定時，ε僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關同一吸收物質(zhì)在不同波長下的ε值是不同的。在最大吸收波長λmax處的摩爾吸光系數(shù)，常以εmax表示。代表可能達到的最大靈敏度。εmax越大表明光度法測定該物質(zhì)靈敏度越高ε>105：超高靈敏；ε=(6～10）×104

：高靈敏ε<2×104：不靈敏。當前34頁，總共79頁。35三、光的吸收定律透過率T—

入射光透過溶液的程度T=It/I0吸光度A與透過率T的關系:A

＝－lgT

當前35頁，總共79頁。36偏離朗伯—比耳定律的原因

當溶液濃度較高時，標準曲線常發(fā)生彎曲，稱為偏離朗伯—比耳定律。原因物理性因素化學性因素當前36頁，總共79頁。37物理性因素難以獲得真正的純單色光——

儀器的原因選擇比較好的單色器將入射波長選定在待測物質(zhì)的最大吸收波長且吸收曲線較平坦處解決辦法前提條件之一：入射光為單色光當前37頁，總共79頁。38化學性因素假定：所有的吸光質(zhì)點之間不發(fā)生相互作用當溶液濃度c>10－2mol/L時，吸光質(zhì)點間可能發(fā)生締合等相互作用，直接影響了對光的吸收。溶液中存在著離解、聚合、互變異構、配合物的形成等化學平衡時。使吸光質(zhì)點的濃度發(fā)生變化，影響吸光度當前38頁，總共79頁。39例：鉻酸鹽或重鉻酸鹽溶液中存在下列平衡：

CrＯ42-＋2H＋=Cr2Ｏ72-＋H2Ｏ溶液中CrＯ42-、Cr2Ｏ72-的顏色不同，吸光性質(zhì)也不相同,故溶液pH對測定有重要影響.當前39頁，總共79頁。40四、紫外可見分光光度計當前40頁，總共79頁。41四、紫外可見分光光度計當前41頁，總共79頁。42HitachiU3010

紫外可見分光光度計普析通用TU-1221型紫外可見分光光度計四、紫外可見分光光度計當前42頁，總共79頁。43波長330~800nm722型光柵分光光度計四、紫外可見分光光度計當前43頁，總共79頁。光度計的基本結構光源單色器狹縫樣品室檢測器當前44頁，總共79頁。45顯示屏波長調(diào)節(jié)旋鈕比色池架四、紫外可見分光光度計當前45頁，總共79頁。46在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜具有足夠的輻射強度較好的穩(wěn)定性較長的使用壽命可見光區(qū)：鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在320～2500nm。紫外區(qū)：氫、氘燈，發(fā)射185～400nm的連續(xù)光譜。光源當前46頁，總共79頁。47

將光源發(fā)射的復合光分解成單色光并可從中選出一任波長單色光的光學系統(tǒng)。單色器棱鏡、光柵當前47頁，總共79頁。狹縫狹縫是指由一對隔板在光通路上形成的縫隙，用來調(diào)節(jié)入射單色光的純度和強度，也直接影響分辯力。出射狹縫的寬度通常有兩種表示方法：一為狹縫的實際寬度，以毫米（mm）表示，另一種為光譜頻帶寬度，即指由出射狹縫射出光束的光譜寬度，以毫微米nm表示。例如，出射狹縫的寬度是6nm，并不是說出射狹縫的寬度是6nm，而是指由此狹縫射出的光具有6nm的光譜帶寬。

當前48頁，總共79頁。49樣品室在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一般用玻璃池。當前49頁，總共79頁。50

利用光電效應將透過吸收池的光信號變成可測的電信號檢測器光電池、光電管或光電倍增管。結果顯示記錄系統(tǒng)檢流計、數(shù)字顯示、微機進行儀器自動控制和結果處理當前50頁，總共79頁。單光束儀器HW紅藍S1S2單色器樣品室當前51頁，總共79頁。單光束儀器的缺點：操作麻煩： 空白——IO樣品——I任一波長

不能進行吸收光譜的自動掃描光源不穩(wěn)定性影響測量精密度當前52頁，總共79頁。雙光束儀器IOI當前53頁，總共79頁。雙光束儀器的特點和不足：測量方便，不需要更換吸收池補償了儀器不穩(wěn)定性的影響實現(xiàn)了快速自動吸收光譜掃描不能消除試液的背景成分吸收干擾當前54頁，總共79頁。雙波長儀器切光器12采用雙單色器當前55頁，總共79頁。/nmA0200300400待測成分干擾成分12當前56頁，總共79頁。消除光譜重疊干擾A1=Aa

1+Ai1

A2=Aa

2+Ai2

Ai1=Ai2

A=A1-

A2

=

Aa2-Aa

1=（a1-a2）bCa消除了共存組分的干擾當前57頁，總共79頁。雙波長儀器能否消除背景干擾？A1=lgI0/I1=1bC+AbA2=lgI0/I2=2bC+Ab式中Ab為背景吸收或干擾物質(zhì)的吸收若波長選擇合適，1和2處Ab相同當前58頁，總共79頁。則A=lgI1/I2=（1-2）bC因此測量兩波長吸光度之差，就消除了背景吸收的干擾。當前59頁，總共79頁。顯色反應及顯色條件的選擇顯色反應將待測組分轉變成有色化合物的反應顯色劑與待測組分形成有色化合物的試劑五、無機分析應用顯色反應類型絡合反應氧化還原反應取代反應縮合反應選擇要素靈敏度高(大)

選擇性好(無特效顯色劑)有色生成物穩(wěn)定組成恒定(不同絡合比顏色不同)顯色劑在測定波長處無明顯吸收有色化合物與顯色劑顏色對比度大，要求△>60nm。當前60頁，總共79頁。61顯色條件的選擇1.顯色劑用量2.反應體系的酸度

影響金屬離子和顯色劑的存在形式、絡合物組成、穩(wěn)定性及反應進行程度當前61頁，總共79頁。顯色條件的選擇3.顯色時間4.顯色溫度5.溶劑6.干擾的消除選擇適當?shù)娘@色反應條件加入掩蔽劑分離干擾離子(萃取法、離子交換法、吸附法等）當前62頁，總共79頁。吸光度測量條件的選擇1.選擇適當?shù)娜肷涔獠ㄩL

一般應該選擇λmax為入射光波長。但如果λmax處有共存組分干擾時，則應考慮選擇靈敏度稍低但能避免干擾的入射光波長。2.控制適宜的吸光度（讀數(shù)范圍）Tmin＝36.8%,Amin＝0.434（吸光度測量誤差最小）最佳讀數(shù)范圍T%=70％～10％A=0.15～0.85具體待定當前63頁，總共79頁。64

3.選擇合適的參比溶液若僅待測組分與顯色劑反應產(chǎn)物有吸收，其它試劑均無吸收，用純?nèi)軇ㄋ?作參比溶液；若顯色劑或其它試劑略有吸收，試液本身無吸收，用“試劑空白”(不加試樣溶液)作參比溶液；若待測試液有吸收，而顯色劑等無吸收，則可用“試樣空白”(不加顯色劑)作參比溶液。當前64頁，總共79頁。65定性分析結構分析標準譜圖對照經(jīng)驗規(guī)則計算官能團鑒定順反異構體的確定互變異構體的確定五、有機分析應用當前65頁，總共79頁。66化合物的定性分析

利用紫外光譜可以推導有機化合物的分子骨架中是否含有共軛結構體系,如C=C－C=C、C=C－C=O、苯環(huán)等。利用紫外光譜鑒定有機化合物遠不如利用紅外光譜有效，因為很多化合物在紫外沒有吸收或者只有微弱的吸收，并且紫外光譜一般比較簡單，特征性不強。利用紫外光譜可以用來檢驗一些具有大的共軛體系或發(fā)色官能團的化合物，可以作為其他鑒定方法的補充。鑒定化合物主要是根據(jù)光譜圖上的一些特征吸收，特別是最大吸收波長λmax即摩爾吸光系數(shù)ε值，來進行鑒定。當前66頁，總共79頁。67鑒定的方法有兩種：（1）與標準物、標準譜圖對照：將樣品和標準物以同一溶劑配制相同濃度溶液，并在同一條件下測定，比較光譜是否一致。（2）吸收波長和摩爾吸光吸收：如果樣品和標準物的吸收波長相同，摩爾吸光吸收也相同，可以認為樣品和標準物是同一物質(zhì)?；衔锏亩ㄐ苑治霎斍?7頁，總共79頁。68⑴若在200～750nm波長范圍內(nèi)無吸收峰，則可能是直鏈烷烴、環(huán)烷烴、飽和脂肪族化合物或僅含一個雙鍵的烯烴等。不含共軛體系，無醛、酮、溴、碘。官能團鑒定⑵若在270～350nm波長范圍內(nèi)有低強度吸收峰(ε＝10～100L·mol-1·cm-1),（n→π躍遷），則可能含有一個簡單非共軛且含有n電子的生色團，如羰基。⑶若在2５0～300nm波長范圍內(nèi)有中等強度的吸收峰則可能含苯環(huán)。化合物的結構分析當前68頁，總共79頁。69⑷若在210～250nm波長范圍內(nèi)有強吸收峰，則可能含有2個共軛雙鍵；若在260～300nm波長范圍內(nèi)有強吸收峰，則說明該有機物含有3個或3個以上共軛雙鍵。⑸若該有機物的吸收峰延伸至可見光區(qū)，則該有機物可能是長鏈共軛或稠環(huán)化合物?；衔锏慕Y構分析當前69頁，總共79頁。70五、有機分析應用異構體的確定反式異構體的λmax和εmax大于順式異構體化合物純度的檢驗氫鍵強度的測定成分分析當前70頁，總共79頁。71異構體的確定

對于構造異構體，可以通過經(jīng)驗規(guī)則計算出λmax值與實測值比較，即可證實化合物是哪種異構體。對于順反異構體，一般來說，某一化合物的反式異構體的λmax和εmax大于順式異構體。另外還有互變異構體，常見的互變異構體有酮－烯醇式互變異構，如乙酰乙酸乙酯的酮－烯醇式互變異構。當前71頁，總共79頁。72成分分析

紫外光譜在有機化合物的成分分析方面的應用比其在化合物定性鑒定方面具有更大的優(yōu)越性，方法的靈敏度高，準確性和重現(xiàn)性都很好，應用非常廣泛。只要對近紫外有吸收或可能有吸收的化合物，均可用紫外分光光度法進行測定，定量基礎朗伯-比爾定律。當前72頁，總共79頁。

六、儀器操作一、定性分析不同物質(zhì)結構不同或者說其分子能級的能量(各種能級能量總和)或能量間隔各異，因此不同物質(zhì)將選擇性地吸收不同波長或能量的外來輻射，這是UV-Vis定性分析的基礎。

定性分析具體做法是讓不同波長的光通過待測物，經(jīng)待測物吸收后，測量其對不同波長光的吸收程度(吸光度A)，以吸光度A為縱坐標，輻射波長為橫坐標作圖，得到該物質(zhì)的吸收光譜或吸收曲線，據(jù)吸收曲線的特性(峰強度、位置及數(shù)目等)研究分子結構。當前73頁，總共79頁