CpGODN的免疫刺激作用課件

CpG-ODN的免疫刺激作用

CPG概念為非甲基化的胞嘧啶鳥嘌呤二核苷酸重復(fù)序列，即CpG基序。一種免疫佐劑作用靶點(diǎn)TLR9細(xì)胞免疫，體液免疫Th1免疫應(yīng)答慢性乙型肝炎患者細(xì)胞免疫低下HBV免疫耐受，持續(xù)感染腫瘤微小殘留病的清除Th1占淋巴細(xì)胞百分比CPG提高PBMC中Th1、Tc1細(xì)胞百分率***：與對照組比較，P<0.05

CPG刺激BPMC分泌細(xì)胞因子**：與對照組比較，P<0.05

CPG誘導(dǎo)PBMC殺傷靶細(xì)胞CFSE染色靶細(xì)胞濃度為5μmol/L的CFSE（2羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯）工作液取對數(shù)生長期的靶細(xì)胞濃度108/L細(xì)胞懸液與等體積CFSE工作液混合37℃孵育10min。離心洗滌兩次后懸浮細(xì)胞備用CFSE染色靶細(xì)胞CIK細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞CIK細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞研究背景通過主動免疫、過繼特異性免疫、過繼非特異性免疫等方式，清除慢性乙肝患者體內(nèi)殘存的HBV，達(dá)到治療效果。TOLL受體TOLL受體在血細(xì)胞中的表達(dá)活化B細(xì)胞負(fù)載核心抗原磁珠分選B淋巴細(xì)胞CPG活化B淋巴細(xì)胞核心抗原肽:FLPSDFFPSV-FITC流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡檢測抗原負(fù)載狀況活化B細(xì)胞負(fù)載抗原肽活化B細(xì)胞負(fù)載核心抗原熒光顯微鏡觀察B細(xì)胞負(fù)載HBcAg18-27肽

APC與T細(xì)胞作用機(jī)制CpG提高淋巴細(xì)胞CD69表達(dá)

T淋巴細(xì)胞B淋巴細(xì)胞

CD69表達(dá)率（%）***：與對照組比較，P<0.05

B細(xì)胞CD80、CD86表達(dá)對照組加CPG-ODN組加CPG-ODN組CpG提高B細(xì)胞表面MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ的表達(dá)MHC-ⅠMHC-ⅡMHC表達(dá)量（MFI）*****：與對照組比較，P<0.05

活化B細(xì)胞誘導(dǎo)CTL負(fù)載了抗原的活化B細(xì)胞與淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)(含IL-2的RPMI1640培養(yǎng)液).收集細(xì)胞,以五聚體技術(shù)檢測HBV特異性CTL.實驗組特異性CTL為0.50±0.19%，對照組為0.20±0.10%。

特異性CTL誘導(dǎo)Pro5TMMHCPentamers檢測對照組和實驗組HBcAg18-27抗原特異性CTL（Q2-1區(qū)）。前者為對照組（未加APC），后者為實驗組（加APC）。結(jié)論CpG能夠活化B細(xì)胞，對T細(xì)胞無明顯的作用CpG能夠提高B細(xì)胞表面抗原遞呈相關(guān)分子的表達(dá)CPG誘導(dǎo)PBMC產(chǎn)生高水平的IFN-γCPG誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞向Th1、