淋巴細(xì)胞標(biāo)志檢測(cè)

淋巴細(xì)胞標(biāo)志檢測(cè)第1頁(yè)/共70頁(yè)

細(xì)胞免疫學(xué)檢測(cè)

（cellularimmunoassay）

一、淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)

(Assayofmembranmoleculesforlymphocytes）

第2頁(yè)/共70頁(yè)一、免疫細(xì)胞分離技術(shù)

(Technicofseparationforimmunocyte)二、免疫細(xì)胞表面標(biāo)志檢測(cè)技術(shù)（Assayofmembranmoleculesfor～）三、免疫細(xì)胞功能檢測(cè)技術(shù)（AssayforImmunocyteTuntion）四、細(xì)胞因子與黏附分子檢測(cè)技術(shù)（AssayforCytokineandAdhesionmolecule）第3頁(yè)/共70頁(yè)免疫系統(tǒng)(Immunesystem)免疫器官(ImmuneOrgans)免疫細(xì)胞(Immunocyte)★免疫球蛋白(Immunoglobulin)主要組織相容性復(fù)合體

(MajorHistocompatibilityComplex;MHC)細(xì)胞因子(Cytekine)白細(xì)胞分化抗原和粘附分子(LeukocyteDifferentiationAntigenandAdhesionmolecule)第4頁(yè)/共70頁(yè)免疫細(xì)胞(immunecells)指:所有參與免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答有關(guān)的細(xì)胞包括T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞及其他細(xì)胞第5頁(yè)/共70頁(yè)免疫細(xì)胞分離技術(shù)

(Separationofimmunocytes)第6頁(yè)/共70頁(yè)人外周血(peripheralblood)白細(xì)胞分離一、原理(principle)：紅細(xì)胞/白細(xì)胞比例不同（600～1000）：1，密度不同，沉降速度不同。二、方法(method)：

1、自然沉降法（直立靜置RT30～60min，緊貼紅細(xì)胞層上的白膜層）

2、聚合物加速沉降法（加某些高分子物使RBC凝集成串加速沉降，如明膠）第7頁(yè)/共70頁(yè)人外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheralbloodmononuclearcells，PBMC）的分離加入對(duì)倍稀釋的血液樣本

水平式離心20min時(shí)結(jié)果第8頁(yè)/共70頁(yè)聚蔗糖-泛影葡胺(ficoll-hypaque)(1.077±0.001g/L)

分離人外周血淋巴細(xì)胞以密度為1.077±0.001/g/L第9頁(yè)/共70頁(yè)P(yáng)ercoll混懸液(處理過的硅膠顆粒)原液密度(density)為1.135g/L+等量PBS,高速離心

(centrifugation)由下而上的逐減的連續(xù)密度梯度(densitygradient)淋巴細(xì)胞純度98%,單核細(xì)胞純度78%流程長(zhǎng),步驟繁,成本高第10頁(yè)/共70頁(yè)人外周血淋巴細(xì)胞(亞群)的分純(purificcation)人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）主含淋巴細(xì)胞,但混有單核細(xì)胞、粒細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板等。淋巴細(xì)胞的分純：（一）紅細(xì)胞的去除（0.83%氯化銨、蒸餾水）（二）血小板的去除（離心、洗滌）（三）單核、粒細(xì)胞的去除（黏附去除，羰基鐵粉吞噬）（四）淋巴細(xì)胞亞群的分離★第11頁(yè)/共70頁(yè)淋巴細(xì)胞亞群的分離

分離依據(jù)：

1、淋巴細(xì)胞不同亞群其細(xì)胞表面標(biāo)志（specificmembranemolecule/surfacemarker）

2、淋巴細(xì)胞不同亞群其細(xì)胞分化抗原（antigenofclusterdifferentiation；CD）分離方法：1、第12頁(yè)/共70頁(yè)P(yáng)recipitationofErosetteErythrocyteRosetteformingcell;ERFCThesuefaceofTlymphocytecontainsthereceptor(CD2)ofsheeperythrocyte,whichiscalledEreceptorforshort.Tlympho-cytescanformErosettewithsheeperythro-cytesbyitsEreceptor.Lymphocytes+sRBC,centrifugation-----Tlympho-cytes(底)/Blympho-cytes（界面）第13頁(yè)/共70頁(yè)2、黏著性（理化）：

B淋巴細(xì)胞易黏附聚酰胺纖維（尼龍纖維）表面，而T淋巴細(xì)胞則不易附著～（例）尼龍棉柱分離—直接流出的是T淋巴細(xì)胞。3、免疫學(xué)：用特異性抗體并使其固相化，捕獲具特定膜抗原的細(xì)胞～（例）1、親和板結(jié)合分離

(affinity～)2、免疫磁珠分離（immunomagneticbeads）

3、流式細(xì)胞術(shù)分離

(FCM)

第14頁(yè)/共70頁(yè)第15頁(yè)/共70頁(yè)磁性微珠(magneticbeads):磁性微珠是以金屬離子為核心，外層均勻包裹高分子聚合體的固相顆粒。磁性微珠上既可標(biāo)記針對(duì)某種細(xì)胞表面抗原的特異性抗體（直接法）;也可標(biāo)記羊抗鼠IgG抗體(間接法），使分離細(xì)胞的范圍大大擴(kuò)大第16頁(yè)/共70頁(yè)正選（positiveselection）法：磁珠結(jié)合的細(xì)胞就是所要分離獲得的細(xì)胞負(fù)選（negtiveselection）法：磁珠結(jié)合不需要的細(xì)胞，游離于上清液的細(xì)胞為所需細(xì)胞一般而言，負(fù)選法比正選法的磁珠用量大第17頁(yè)/共70頁(yè)評(píng)價(jià)(evalution)：①免疫磁珠分離法具有高純度（8099％），高得率（9095％）、高細(xì)胞活性（99~100%）的特點(diǎn)，僅次或相當(dāng)于流式細(xì)胞儀（FACS）的分選效率。②與FACS相比，本方法操作簡(jiǎn)單、省時(shí)、經(jīng)濟(jì)；可用做FACS分選前的預(yù)分離，以減少FACS所用時(shí)間。③另外連續(xù)兩次過柱分選可進(jìn)一步提高分選細(xì)胞純度，通?？蛇_(dá)95－99％。第18頁(yè)/共70頁(yè)注意事項(xiàng)（Attentions）如果分離細(xì)胞用作培養(yǎng)，全過程在超凈臺(tái)中完成。分離柱一般只能一次應(yīng)用，再用時(shí)分離效率降低。抗體包被磁珠和死細(xì)胞常有非特異性結(jié)合，因而分選前應(yīng)去除死細(xì)胞；上分離柱前，充分振蕩混懸細(xì)胞，打散細(xì)胞團(tuán)塊。用分離柱分選，應(yīng)用真空抽濾水，減少水中氣泡，使分離柱不被氣泡阻滯第19頁(yè)/共70頁(yè)熒光激活細(xì)胞分離儀原理(principle)

（fluorescenceactivatedcellsorter，F(xiàn)ACS）細(xì)胞經(jīng)熒光染色后，通過高速流動(dòng)系統(tǒng)，細(xì)胞排成單行，逐個(gè)流經(jīng)檢測(cè)區(qū)。當(dāng)細(xì)胞從流動(dòng)室噴嘴處流出時(shí)，超聲振蕩攪動(dòng)液流，使液流斷裂成一連串的均勻小滴，每小滴內(nèi)最多含一個(gè)細(xì)胞（其中只有百分之幾的液滴中含細(xì)胞）。細(xì)胞經(jīng)激光照射產(chǎn)生熒光和散射光，信號(hào)經(jīng)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)處理，分辨細(xì)胞的類型。如識(shí)別的是所需的細(xì)胞時(shí)（如T細(xì)胞），使液滴瞬即感應(yīng)陽(yáng)電荷、陰電荷或不帶電荷，使所需的細(xì)胞在電場(chǎng)偏轉(zhuǎn)下進(jìn)入不同的收集管。第20頁(yè)/共70頁(yè)

評(píng)價(jià)(evalution)

：①用FACS分離細(xì)胞準(zhǔn)確快速、純度高、回收率高，能保持細(xì)胞活力，并可在無(wú)菌條件下進(jìn)行。

②儀器昂貴，極少用于常規(guī)，而多數(shù)僅作為研究的手段第21頁(yè)/共70頁(yè)吞噬細(xì)胞(phagocytosis)分離Phagocytes----mononuclear～

macrophageneutrophil、eosinophil、basophil分離（Separation）：

Mononuclear～參照Percoll分層液法

Macrophage斑蝥敷貼（誘發(fā)無(wú)菌性皮炎）

Other～很少分純第22頁(yè)/共70頁(yè)樹突狀細(xì)胞（Dendriticcell）Dendriticcells（DCs）arethemostpotentantigenpresentingcell（APC）known，whichhavenumerousspecializedfeaturesthatmakethemextremelyefficientatcapturingandpresentingantigenandactivatingTcellsandmediatingimmuneresponse.

樹突細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)的專職抗原提呈細(xì)胞，可把抗原特異性地提呈給T淋巴細(xì)胞而產(chǎn)生抗原特異性免疫應(yīng)答。第23頁(yè)/共70頁(yè)樹突狀細(xì)胞（Dendriticcell）制備DCscanbegenerated，invitro，frommanydifferentsamplesofhumanbeings.DCsonlyconstitue0.5～1.0%oftheperipheralbloodmononuclearcells.DCscanbegeneratedfrommonocyto/MΦ+IL-4andGM-CSFIdentifingDCsbyCDmarker第24頁(yè)/共70頁(yè)

免疫細(xì)胞功能檢測(cè)

(Assaysforimmunocytes)

一、功能簡(jiǎn)介

二、測(cè)定方法第25頁(yè)/共70頁(yè)Tlymphocytes

外周血中T細(xì)胞占淋巴細(xì)胞總數(shù)的65%~70%來(lái)源于骨髓干細(xì)胞（胚胎期為卵黃囊和胎肝，Bone-marrowstemcells），在胸腺中發(fā)育和分化。分化成熟（bederived）后離開胸腺進(jìn)入外周免疫器官的胸腺依賴區(qū)定居。淋巴細(xì)胞再循環(huán)(recycle)（血液—組織—淋巴—血液）第26頁(yè)/共70頁(yè)T細(xì)胞亞群（Subset）根據(jù)TCR不同分為γδT細(xì)胞和αβT細(xì)胞根據(jù)表面標(biāo)志和分化抗原的不同，αβT可分為CD4＋和CD8＋T細(xì)胞CD4＋T細(xì)胞根據(jù)其分泌的細(xì)胞因子和介導(dǎo)的功能在分為Th1和Th2CD8＋T細(xì)胞依據(jù)其功能不同分為細(xì)胞毒性(cytotoxicity)T細(xì)胞和抑制性(suppresion)T細(xì)胞NK1.1＋

T細(xì)胞專一識(shí)別脂類(lipid)抗原、非MHC限制第27頁(yè)/共70頁(yè)Type-I/2Thelper（Th1,Th2）Th1細(xì)胞主要分泌IL-2、IFN-γ和TNF-β，介導(dǎo)細(xì)胞免疫Th2細(xì)胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10，介導(dǎo)體液免疫Th1和Th2是一對(duì)重要的調(diào)節(jié)(regulation)細(xì)胞，同時(shí)又互為抑制(inhibition)細(xì)胞，二類細(xì)胞的相互平衡(balance)與否直接影響(influence)機(jī)體的免疫功能第28頁(yè)/共70頁(yè)T-cytotoxiccells,Tc/CTL（1）CD8+T細(xì)胞免疫應(yīng)答的主要效應(yīng)(effect)細(xì)胞特異性殺傷靶細(xì)胞(targetcells)在腫瘤免疫和抗病毒感染的免疫中發(fā)揮重要作用功能發(fā)揮受MHCI類限制第29頁(yè)/共70頁(yè)Tc/CTL（2）除細(xì)胞毒效應(yīng)外，CTL還可分泌一系列細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)(regulation)免疫功能；也分泌趨化性(tendto)細(xì)胞因子如IL-8、IP-10（IFNinducibleprotein10）、ＭIP-1（巨噬細(xì)胞炎癥蛋白）等，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)(inflammatoryreaction)。依據(jù)CTL分泌細(xì)胞因子的不同可分為Tc1和Tc2。第30頁(yè)/共70頁(yè)T-suppresioncells,Ts通過過繼轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)(passivetransfertest)加以確認(rèn)(confirm)?？赡?maybe)作為單獨(dú)的功能細(xì)胞群體存在多年來(lái)未能找到Ts特有（specific～）的表面標(biāo)志（surfacemarker）。第31頁(yè)/共70頁(yè)第32頁(yè)/共70頁(yè)

B淋巴細(xì)胞的分化成熟（bederived）

骨髓干細(xì)胞—前B細(xì)胞—未成熟B細(xì)胞—成熟B細(xì)胞—激活B細(xì)胞—漿細(xì)胞（plasmacells）經(jīng)過Ig基因重排、活化、轉(zhuǎn)錄最終表達(dá)BCR。（B-cell-receptorcomplex,BCR）第33頁(yè)/共70頁(yè)前（pro/pre）B細(xì)胞細(xì)胞漿出現(xiàn)μ鏈，并誘導(dǎo)輕鏈的重排

（rearrange）；不表達(dá)BCR不具有任何已知的生物學(xué)功能

BCR(B-cell-receptor):B-cellsurfaceimmunoglobulinanditsassociatedsignallingmolecules,CD79aandCD79b.第34頁(yè)/共70頁(yè)未成熟（immature）B細(xì)胞μ—替代輕鏈（SL）—preBCR—細(xì)胞質(zhì)IgM—膜IgM膜IgM是B細(xì)胞分化成熟中首先出現(xiàn)的BCR，也是未成熟B細(xì)胞的表面標(biāo)志此時(shí)B細(xì)胞具有識(shí)別（recognition）抗原的能力，但還不能介導(dǎo)免疫應(yīng)答處于抗原敏感期，受到相應(yīng)刺激后會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡（apoptosis），是B細(xì)胞自身免疫耐受（immunologicaltolerance）的重要機(jī)制第35頁(yè)/共70頁(yè)成熟（mature）B細(xì)胞細(xì)胞漿和細(xì)胞膜都表達(dá)IgM和IgD能識(shí)別抗原(recognitionofantigen)，介導(dǎo)特異性免疫應(yīng)答B(yǎng)細(xì)胞此時(shí)完成在骨髓中的分化和成熟第36頁(yè)/共70頁(yè)活化（active）B細(xì)胞和漿細(xì)胞無(wú)抗原刺激時(shí)，B細(xì)胞在外周免疫器官中僅存活7～10天當(dāng)受到抗原刺激時(shí)，B細(xì)胞可被活化并增殖和分化，進(jìn)入激活狀態(tài)最終向漿細(xì)胞分化漿細(xì)胞大量合成和分泌Ig，BCR數(shù)量減少第37頁(yè)/共70頁(yè)B細(xì)胞亞群（Subset）為異質(zhì)性群體，顯示不同的功能和標(biāo)志，依據(jù)CD5將B細(xì)胞分為B1和B2。（一）B1細(xì)胞：

CD5+，主要識(shí)別非蛋白質(zhì)抗原，如細(xì)菌脂多糖。無(wú)須Th細(xì)胞輔助，可直接介導(dǎo)對(duì)非胸腺依賴抗原的免疫應(yīng)答，產(chǎn)生特異性抗體為低親和力，不產(chǎn)生免疫記憶細(xì)胞第38頁(yè)/共70頁(yè)（二）B2細(xì)胞：

CD5-，主要識(shí)別蛋白質(zhì)抗原在Th細(xì)胞輔助下，被完全激活并介導(dǎo)對(duì)胸腺依賴抗原的免疫應(yīng)答，產(chǎn)生特異性抗體第39頁(yè)/共70頁(yè)OtherimmunecellsNK（naturalkiller）細(xì)胞單核吞噬（mononuclearphagocyte）細(xì)胞粒細(xì)胞（granulocytes）肥大（mast）細(xì)胞第40頁(yè)/共70頁(yè)NK細(xì)胞大顆粒淋巴細(xì)胞、裸細(xì)胞（naked～）來(lái)源于骨髓造血干細(xì)胞參與細(xì)胞免疫在腫瘤免疫、抗病毒感染中起重要作用細(xì)胞表面標(biāo)志較少：CD2，CD16，CD56，CD69第41頁(yè)/共70頁(yè)

mononuclearphagocyte

血液中——單核細(xì)胞（mononuclear～）組織中——巨噬細(xì)胞（macrophage，MΦ）來(lái)源于骨髓干細(xì)胞，發(fā)育成單核細(xì)胞后，進(jìn)入血流分布于各種組織器官，并有不同命名非特異免疫功能（non-specific～）特異性（specific）免疫功能（免疫調(diào)節(jié)、抗原遞呈，antigen-presenting）第42頁(yè)/共70頁(yè)DifferentdenominationOfmononuclearphagocyteBlood—mononuclearcellsGeneraltissue—macrophage，MΦConnectivetissue—tissuecellsLiver—Kupffer‘scellLung—alveolarcellsSkin—Langerhan‘scellNervoussystem—micro-gliacells

Abdomen—abdomen(腹腔)MΦ第43頁(yè)/共70頁(yè)Markersofmononuclearphagocyte

成熟的單核吞噬細(xì)胞表達(dá)MHCI類和II類分子，協(xié)同刺激(co-stimulatory)分子（CD40、B7）CD1，CD2，CD14，CD64，CD32，CD16，CD23，CD35（C3b受體）和CR3（C3bi受體）第44頁(yè)/共70頁(yè)樹突細(xì)胞（Dendriticcell，DC）由骨髓中髓樣前體細(xì)胞分化而來(lái)，DC成熟經(jīng)歷2個(gè)階段：1）經(jīng)血流遷徙到外周組織和器官，此時(shí)MHC和B7分子的表達(dá)水平很低，無(wú)功能，但可以吞噬和吞飲抗原2）這些細(xì)胞經(jīng)輸入淋巴管進(jìn)入局部淋巴結(jié)，分化為成熟DC，但不再具有吞噬活性。第45頁(yè)/共70頁(yè)DC的組織分布和命名淋巴樣器官：T細(xì)胞區(qū)（并指狀DC）和B細(xì)胞區(qū)（濾泡DC）非淋巴樣器官：皮膚和黏膜（朗罕細(xì)胞）、器官（間質(zhì)DC）循環(huán)體液：血液（血液DC）、淋巴液（隱蔽細(xì)胞）第46頁(yè)/共70頁(yè)DC的生物學(xué)功能向T細(xì)胞遞呈抗原（CD1，CD40，MHC）參與天然免疫和T細(xì)胞亞群的分化誘導(dǎo)免疫耐受：淋巴樣DC調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答（抑制T細(xì)胞增殖）向B細(xì)胞遞呈抗原（濾泡DC）第47頁(yè)/共70頁(yè)GranulocyteandMastcellsGranulocyte來(lái)源于BM（bonemarrow），參與特異和非特異免疫應(yīng)答，在炎癥中發(fā)揮作用，主要分布于血液肥大細(xì)胞主要分布于黏膜和結(jié)締組織中（血液中即嗜堿性粒細(xì)胞），表達(dá)FcεR，在IgE作用下發(fā)生脫顆粒反應(yīng)，參與I型變態(tài)反應(yīng)。主要標(biāo)志：MHC，B7，CD40，CD40L第48頁(yè)/共70頁(yè)AssayforthesurfacemarkersofTlymphocyteT細(xì)胞表面標(biāo)志（Th，Ts，Ti）抗體致敏細(xì)胞花環(huán)(E-rosette)法（CD58受體）免疫細(xì)胞化學(xué)法(immunochemistry～)免疫熒光法(immunofluorescent～)T細(xì)胞亞群檢測(cè)（flowcytometrysorter,FCMS）第49頁(yè)/共70頁(yè)AssayforthesurfacemarkersofBlymphocyteSmIgM(surfacemembrane～)檢測(cè)Fc受體(receptor)和補(bǔ)體(complement)受體的檢測(cè)（EAC花環(huán)）

sRBC+溶血素（EA）+C（補(bǔ)體）--EAC～B細(xì)胞亞群（CD）檢測(cè)（FACS）第50頁(yè)/共70頁(yè)AssayforthesurfacemarkersofNKcellsNaturalKiller(NK)cellsexpressneitherTcellnorBcellantigenreceptors.CD16andCD56moleculeareimportantmarkereofNKcells.ADCC(抗體依賴細(xì)胞毒性)(antibody-dependentcellularcytotoxicity)第51頁(yè)/共70頁(yè)AssaysofCellularimmuneTunction第52頁(yè)/共70頁(yè)LymphocyteTransformationTestPrinciple:Antigensormitogens(suchasPHAandConA)areincubatedwithTlymphocytesinculturemedium,allowingstimulationofTlymphocyteactivitytotransformintolymphoblasts.Methods:morphologiccounting

3H-thymidineincorporationMTTcolorimetry第53頁(yè)/共70頁(yè)Lymphocyteproliferationrate:Blastcellcount=-------------------------------×100%Smalllymphocyte+Blastcellcount(200)Referencevalue：～70%第54頁(yè)/共70頁(yè)3H-thymidineincorporation

3H標(biāo)記的胸腺嘧啶核苷（3H–TdR)+細(xì)胞培養(yǎng)液中,轉(zhuǎn)化淋巴母細(xì)胞的DNA合成增加,增加的DNA中有3H–TdR。檢測(cè)培養(yǎng)后淋巴細(xì)胞內(nèi)放射性核素量，通過計(jì)算判斷淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化程度（SI）。SI（stimulatingindex）=PHA刺激管cpm均值/對(duì)照管cpm均值

★（cpm指每分鐘脈沖數(shù)）第55頁(yè)/共70頁(yè)MTTcolorimetry

一種噻唑鹽，化學(xué)名3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide)。MTT作為細(xì)胞內(nèi)線粒琥珀酸脫氫酶的底物參與反應(yīng)，形成藍(lán)黑色的甲潛顆粒沉積于細(xì)胞內(nèi)。

+鹽酸異丙醇/二甲亞砜—溶細(xì)胞，釋放—A570nm測(cè)吸光值，以刺激指數(shù)（SI）判斷淋巴細(xì)胞增殖程度。

SI=試驗(yàn)孔A570nm均值/對(duì)照孔A570nm均值

第56頁(yè)/共70頁(yè)Tcell-mediatedcytotoxicityT細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性是細(xì)胞毒T細(xì)胞（CTL）的特性，即致敏的T細(xì)胞再次接觸同抗原的靶細(xì)胞（targetcell），可表現(xiàn)出對(duì)Targetcell的破壞（裂解或凋亡）。Apoptosisisahighlyorderedprocessinwhichcellsaresystematicallydisassembled.Morphology（凋亡小體）

Electrophoresis（DNA梯狀圖譜）

FACSorELISA第57頁(yè)/共70頁(yè)Enzyme-linkedimmunespot,ELISPOT酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法:

用抗原包被固相載體,+(刺激原-待檢細(xì)胞)

分泌的抗體-固相抗原結(jié)合(使細(xì)胞吸附于固相)+酶標(biāo)二抗+底物顯色,鏡下計(jì)數(shù)著色斑點(diǎn)。應(yīng)用：檢測(cè)抗體分泌細(xì)胞和其分泌抗體的量特點(diǎn)：穩(wěn)定、特異；定性、定量。第58頁(yè)/共70頁(yè)Skintestinvivo正常機(jī)體對(duì)某種抗原建立了細(xì)胞免疫后，如用相同的抗原做皮膚試驗(yàn)時(shí)，常出現(xiàn)陽(yáng)性的遲發(fā)型超敏反應(yīng)。本試驗(yàn)不僅可以檢查受試者是否對(duì)某種抗原具有特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答能力，而且可以檢查受試者總體細(xì)胞免疫狀態(tài)。第59頁(yè)/共70頁(yè)B細(xì)胞功能減低或缺陷，可表現(xiàn)為體內(nèi)Ig和血型抗體量下降或缺如，患者對(duì)外源性抗原的應(yīng)答能力減弱或缺如，僅產(chǎn)生極低或不能產(chǎn)生特異性抗體。故臨床定量測(cè)定受檢者血清中各種Ig量和相應(yīng)血型抗體可判斷B細(xì)胞功能，也是診斷體液免疫缺陷的重要指標(biāo)。反之，如血清中一種或多種Ig或輕、重鏈片段異常增高，表明B細(xì)胞產(chǎn)生Ig的功能異常增高。第60頁(yè)/共70頁(yè)SkintestinvivoIntradermalinjectionImmediate～(within20min)Late～(at4-12hours)Delayed～(24-48hours)第61頁(yè)/共70頁(yè)AssaysforPhagocytefunction

Phagocytefunction:

指吞噬細(xì)胞的吞噬活力—

趨化（chemotaxis）吞噬（takeninto～）胞內(nèi)消化（digest）

第62頁(yè)/共70頁(yè)Chemo