氣相色譜基礎(chǔ)知識講議

氣相色譜講座1氣相色譜講座

第一章氣相色譜根底2

氣相色譜儀裝置主要由四個部份組成：

１、氣源局部，２、進樣裝置，３、色譜柱，４、檢測器和記錄器：FID〔氫火焰離子化檢測器〕ECD〔電子捕獲檢測器〕TCD〔熱導檢測器〕1、氣相色譜的分析裝置32、氣相色譜的分析過程

氣相色譜首先是一種別離技術(shù)。實際工作中要分析的樣品往往是多組分的混合物。對含有未知組分的樣品，首先必須將其別離，然后才能對有關(guān)組分進行進一步的分析。氣相色譜主要是利用物質(zhì)的沸點、極性和吸附性質(zhì)的差異來實現(xiàn)混合物的別離。42、氣相色譜的分析過程氣相色譜別離過程如以下圖：52、氣相色譜圖62、氣相色譜的根本原理73、氣相色譜別離常用的根本公式a:別離度R=2〔tR2-tR1〕/W1+W2

tR為相鄰兩峰的保存時間W為相鄰兩峰的峰寬83、氣相色譜別離常用的根本公式b：理論塔板數(shù)n=5.54(tR/Wh/2)2

tR為主峰的保存時間Wh/2為主峰的半頂峰寬93、氣相色譜別離定量常用的根本公式c:外標法含量〔CX〕=CR×AX/AR

CX為供試品濃度AX為供試品峰面積CR為對照品濃度AR為對照品峰面積103、氣相色譜別離定量常用的根本公式d:內(nèi)標法校正因子〔f〕=AS×CR/CS×AR含量〔CX〕=f×AX×CS/ASAX為供試品峰面積CX為供試品濃度AR為對照品峰面積CR為對照品濃度AS為內(nèi)標峰面積CS為內(nèi)標濃度

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但凡以氣相作為流動相的色譜技術(shù)，通稱為氣相色譜?？砂匆韵聨追矫娣诸悾?/p>

1．按色譜柱分:可分為填充柱和開管柱。填充柱內(nèi)要填充上一定的填料，它是“實心〞的，而開管柱那么是“空心〞的，其固定相是附著在柱管內(nèi)壁上的。GC初期使用的都是填充柱，1958年才出現(xiàn)了毛細管柱。而毛細管柱的普遍使用那么是1979年出現(xiàn)了彈性石英柱后才開始的。

4、氣相色譜的分類12開管柱又常被稱為毛細管柱，但毛細管柱并不總是開管柱。事實上，毛細管柱也有填充型和開管型之分，只是人們習慣上將開管柱叫做毛細管柱而已。毛細管柱比填充柱有更高的別離效率。這是因為毛細管柱內(nèi)沒有固體填料，氣阻比填充柱小得多，故可采用較長的柱管和較小的柱內(nèi)徑，以及較高的載氣流速。

4、氣相色譜的分類134、氣相色譜的分類再加上采用較薄的固定液膜又在一定程度上抵消了由于載氣流速增大而引起的傳質(zhì)阻力增大、一般來說，一根30m長的毛細管柱很容易到達100000的總理論塔板數(shù)．而—根3m長的填充柱卻最多只有4500的總柱效。144、氣相色譜的分類2．按固定相狀態(tài)分：按固定相狀態(tài)分可分為氣固色譜和氣液色譜。前者采用固體固定相，其別離主要是基于吸附機理。后者那么為液體固定相，別離主要基于分配機理，在實際GC分析中，90%以上的應用為氣液色譜。3、按進樣方式分：按進樣方式分可分為常規(guī)色譜、頂空色譜和裂解色譜等。15氣相色譜講座

第二章氣相色譜儀器及操作

16第—節(jié)儀器的根本配置1、氣路系統(tǒng)包括載氣和檢測器所用氣體的氣源(氮氣、氫氣、壓縮空氣或氣體發(fā)生器，氣流管線)以及氣流控制裝置(壓力表、針型閥、電子流量計)2、進樣系統(tǒng)其作用是有效地將樣品導入色譜柱進行別離，如手動進樣，自動進樣器，頂空進樣器。

17第—節(jié)儀器的根本配置3、柱系統(tǒng):包括柱加熱箱、色譜柱以及與進樣口和檢測器的接頭。其中色譜柱本身的性能是別離成敗的關(guān)鍵。4、檢測系統(tǒng):用各種檢測器檢測色譜柱的流出物，如熱導檢測器(TCD)、火焰離子化檢測器(FID)、氮磷檢測器(NPD)、電子俘獲檢測器(ECD)等。5、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng):即對GC原始數(shù)據(jù)進行處理，畫出色譜圖，并獲得相應的定性定量數(shù)據(jù).18氣相色譜儀的氣路系統(tǒng)，是一個載氣連續(xù)運行、管路密閉的系統(tǒng)。GC常用的氣體有：氮氣、氦氣、氫氣、壓縮空氣等，都要求使用高純度〔99.99%〕，這是因為氣體中雜質(zhì)會使檢測器的噪聲增大，還可能對色譜柱的性能有影響，嚴重的會污染檢測器。通常這些氣體都要經(jīng)過凈化、穩(wěn)壓和控制、測量流量?？傊?，氣路系統(tǒng)關(guān)鍵的問題就是要保證氣路系統(tǒng)中各個接頭部位不要漏氣。第二節(jié)氣路系統(tǒng)

19進樣就是有效地將分析樣品定量的加到色譜柱進行別離。進樣量的大小，進樣時間的長短，試樣氣化速度，試樣濃度等都會影響色譜別離效率，以及定量結(jié)果的準確度和重現(xiàn)性。一、氣化室溫度。氣化室的作用，是將所進樣品在此氣化室溫度下讓其瞬間氣化為蒸氣而不分解。氣化室溫度一般比柱溫高10-50℃即可。第三節(jié)進樣系統(tǒng)

20二、進樣口隔墊和襯管1、進樣口隔墊：使用時間長了有老化漏氣的問題，所以，要注意選擇適當耐高溫的隔墊，并定期檢查是否漏氣，需要時要及時更換，以保證分析的正常進行。第三節(jié)進樣系統(tǒng)21第三節(jié)進樣系統(tǒng)〔隔墊〕市售隔墊一般有三種類型，普通型(可耐溫200℃)、優(yōu)質(zhì)型(可耐溫300℃)和高溫型(可耐溫400℃)。耐高溫或抗老化性能越好、壽命越長，價格就越高。常規(guī)分析實驗室(汽化溫度不超過300℃)選擇優(yōu)質(zhì)型隔墊就可以了，做高溫GC分析時最好用高溫型隔墊。

22第三節(jié)進樣系統(tǒng)〔襯管〕2、進樣口襯管：多為玻璃或石英材料制成。這里強調(diào)幾個普遍性的問題：

23第三節(jié)進樣系統(tǒng)〔襯管〕①襯管能起到保護色譜柱的作用。在分流／不分流進樣時，不揮發(fā)的樣品組分會滯留在襯管中而不進入色譜柱。如果這些污染物在襯管內(nèi)積存一定量后，就會對分析產(chǎn)生直接影響。比方，它會吸附極性樣品組分而造成峰拖尾，甚至峰分裂，還會出現(xiàn)鬼峰。因此，一定要保持襯管干凈，注意及時清洗和更換。24第三節(jié)進樣系統(tǒng)〔襯管〕②襯管中是否應填充填料，要依具體情況而定。一般填少量經(jīng)硅烷化處理的石英玻璃毛可防止注射器針尖的歧視作用，加速樣品汽化；還可防止顆粒物質(zhì)堵塞色譜柱。25第三節(jié)進樣系統(tǒng)〔手動進樣〕1．手動進樣應注意的問題：(1)注射速度快：注射速度慢時會使樣品的汽化過程變長，導致樣品進入色譜柱的初始譜帶變寬。正確注射方法是：取樣后，一手持注射器(防止汽化室的高氣壓將針芯吹出)，另一只手保護針尖(防止插入隔墊時彎曲)，先小心地將注射針頭穿過隔墊，隨即以最快的速度將注射器插到底，與此同時迅速將樣品注入汽化室(注意不要使針芯彎曲)，然后快速拔出注射器。注射樣品所用時間及注射器在汽化室中停留的時間越短越好，且每次注射的過程越重現(xiàn)越好。

26第三節(jié)進樣系統(tǒng)〔手動進樣〕(2)取樣準確而重現(xiàn)：即取樣量要準確，抽取樣品的速度要重現(xiàn)，以保證進樣的重現(xiàn)性。特別是黏度大的樣品，要防止在注射器中形成氣泡。這跟護士打針時防止將空氣注射進體內(nèi)的道理是一樣的。也是這樣倒置注射器，使視線與針管中的液面處于同一水平上，然后推壓針芯到所需刻度。至于針尖外面粘附的一局部樣品，可用一片濾紙快速檫拭而除去(注意不能讓濾紙吸去針管內(nèi)的樣品)。27第三節(jié)進樣系統(tǒng)〔手動進樣〕(3)防止樣品之間的相互干擾：如果進樣時注射器內(nèi)有上一個樣品的殘留組分，就會干擾下一個樣品的分析，帶來定量誤差。在色譜中這叫做記憶效應，是必須消除的。具體方法是洗針。取樣前先用樣品溶劑洗針至少3次(抽滿針管的三分之二，再排出)。再用要分析的樣品洗針至少3次，然后取樣(屢次上下抽動)，這樣根本上可消除記憶效應。28第三節(jié)進樣系統(tǒng)2、自動進樣器自動進樣器實現(xiàn)了進樣量的重現(xiàn)，防止了很多人為誤差。但它的缺點就是價格比較貴。29第四節(jié)色譜柱系統(tǒng)色譜柱是色譜別離的心臟，應該說是氣相色譜分析過程中最重要的組成局部。在氣相色譜分析中，某一多組份混合物能否完全別離開，主要取決于色譜柱的效能和選擇性，后者在很大程度上取決于固定相選擇是否得當。因此，固定相的選擇就成為色譜分析中的關(guān)鍵問題。30第四節(jié)色譜柱系統(tǒng)〔固定相〕氣相色譜固定相大致分為兩類：即液體固定相和固體固定相。而液體固定相又是由固定液和載體組成的，在氣相色譜分析中液體固定相應用較為廣泛。31第四節(jié)色譜柱系統(tǒng)〔固定液〕二、固定液的分類：按固定液的化學類型分類。1、烴類：包括烷烴和芳烴，是極性最弱的一類固定液。烷烴，常用的有角鯊烷、石蠟油等，屬非極性固定液。2、醇類和醚類：是一類極性很強的固定液。聚乙二醇分子中含有醚基，故屬于氫鍵型固定液。商品名有Carbowax-20M。32第四節(jié)色譜柱系統(tǒng)〔固定液〕3、硅氧烷類：是目前使用最為廣泛的色譜固定液。屬弱極性固定液，商品名有SE-30，OV-1等。苯基硅氧烷：由于硅原子上引入了苯基，故對芳香性組份溶解度增大，對極性組份保存值升高。按照引入苯基的含量〔%〕不同，又可分為低苯基硅氧烷如SE-52，中苯基硅氧烷如OV-17，高苯基硅氧烷如OV-25。隨苯基的含量增高，固定液極性也增高4、酯類：是一類中強極性的固定液。包括酯類和聚酯類。如丁二酸二乙二醇酯，它含有極性和非極性基團，是線型脂肪族固定液。商品名有DEGS。33第四節(jié)色譜柱系統(tǒng)〔填充柱〕(1)填充柱：內(nèi)徑2～4毫米，長度1～10米，常用1～3米柱?？捎刹讳P鋼、玻璃和聚四氟乙烯管制成。因玻璃柱價格廉價，透明，便于觀察到填充的固定相分布狀態(tài)，光滑易于填充成密實的高效柱，故較常用。34第四節(jié)色譜柱系統(tǒng)〔填充柱〕要制備一根別離效能較高的色譜柱，必須把載體涂上一層薄而均勻的液膜，再把涂好的固定相均勻而緊密地填充到色譜柱中。由于目前市場上已有涂漬好的各種類型的固定相商品，我們只需要買來自已裝一下柱子就成了。35第四節(jié)色譜柱系統(tǒng)〔毛細管柱〕四、毛細管色譜柱的類型與選擇：毛細管色譜柱，內(nèi)徑～毫米，長度30～300米，其柱材料大多用熔融石英，即所謂彈性石英柱。柱內(nèi)徑越小，別離效率越高，但細的色譜柱柱容量小，容易超載。就常規(guī)分析來說，內(nèi)徑的毛細管柱沒有太大差異。大口徑柱〔〕是一類特殊的毛細管柱，它的液膜厚度一般較大，故有較大的柱容量，不少人傾向于用大口徑柱替代填充柱。大口徑柱的局限性可能是柱本錢較填充柱高。

36第四節(jié)色譜柱系統(tǒng)〔毛細管柱〕毛細管柱的選擇原那么同填充柱。一般來說，有這樣四根柱子：OV-1，SE-54，OV-17，PEG-20M，就可以應付95%的GC分析任務。所以，我們建議有GC色譜儀的實驗室起碼要購置這幾根毛細管柱。下表為不同廠商毛細管色譜柱的牌號對照?，F(xiàn)在市場上的毛細管柱多為固定液交聯(lián)的色譜柱，熱穩(wěn)定性好。37第四節(jié)色譜柱系統(tǒng)〔毛細管柱〕38第四節(jié)色譜柱操作本卷須知1、色譜柱安裝：當把毛細管柱安裝在色譜儀上時，需要將其兩端分別與進樣口和檢測器相連接。原理都是用一個石墨密封墊，通過接頭壓緊而到達固定和密封的目的。安裝時將石墨墊套在柱頭后，應將柱頭截去l~2cm。儀器帶有專門的柱切割器，在柱管上輕輕劃一下，然后用手別斷。這樣做可以保證柱端是整潔的，又防止了柱頭污染物對分析的干擾。39第四節(jié)色譜柱操作本卷須知第二，柱端伸出密封墊的長度，不同儀器有不同的規(guī)定，應嚴格按儀器說明書規(guī)定。檢測器一端那么是柱出口盡量接近檢測點〔如FID的火焰〕，以防止死體積造成的柱外效應。第三，接頭不要擰得太緊，以免將色譜柱壓裂或壓碎。原那么上每次安裝色譜柱都要用新的石墨墊，不過同一色譜柱拆下再安裝，可重復使用石墨墊，但重復使用的次數(shù)不要超過3次，否那么會失去密封性。40第四節(jié)色譜柱的維護①色譜柱在使用時，要輕拿輕放，防止斷裂。②當開GC儀器時，一定要記住先開載氣，如在沒有載氣流動的情況下，在較高溫度下加熱色譜柱，很短的時間內(nèi)就可使色譜柱報廢。

41第四節(jié)色譜柱的維護③安裝新色譜柱后，都要在進樣前進行老化。老化方法是：先接通載氣，然后將柱溫從50℃左右以5-10℃／min的速率程序升溫到色譜柱的最高使用溫度以下30℃，并在高溫時恒溫30-120分鐘。④當色譜柱內(nèi)殘留一些高沸點組分時，這時基線可能出現(xiàn)波動或出鬼峰。解決此問題的方法也是老化。42第四節(jié)色譜柱的維護⑤暫時不用的色譜柱從儀器上卸下后，柱兩端應當用一塊硅橡膠墊堵上。⑥每次關(guān)機前都應將柱溫箱溫度降到100℃以下，然后再關(guān)電源和載氣。溫度高時切斷載氣，可能會因空氣〔氧化〕擴散進入柱管中而造成固定液的氧化降解。⑦每次新安裝了色譜柱都應當記著重新設定柱子的最高使用溫度。當超過了柱子的最高使用溫度時，儀器會自動停止柱溫箱加熱。以確保柱溫箱溫度不超過色譜柱的最高使用溫度，對色譜柱起到保護作用。43第四節(jié)色譜柱的修理

色譜柱壽命完結(jié)的主要標志是固定液流失太多而失去了別離能力。柱管堵塞或斷裂也是導致色譜柱失效的原因。當色譜柱別離能力不好時，可先用在高溫下老化柱子的方法，用載氣將污染物沖洗出來。假設這樣柱效仍不能恢復時，可將柱頭載去10cm或更長，因為柱頭是最容易被污染的地方，再安裝上測試。這是常用的柱性能恢復措施。如還不起作用，修復就比較麻煩了。如色譜柱不小心斷裂了，那修理就更不容易，所以在使用時要盡量注意上面我們講到的一些本卷須知，以延長色譜柱的使用壽命。44第五節(jié)檢測器系統(tǒng)

如果說色譜柱是色譜別離的心臟，那么檢測器就是色譜儀的眼睛。無論色譜峰別離的效果多么好，假設沒有好的檢測器就“看〞不到別離結(jié)果。因此，高靈敏度、高選擇性的檢測器一直是色譜儀開展的關(guān)鍵技術(shù)。45第五節(jié)檢測器系統(tǒng)藥品檢驗中最常用的是FID和ECD檢測器。下面我們分別介紹。FID檢測器：是利用氫火焰作電離源，使有機物電離，產(chǎn)生微電流而響應的檢測器。它突出的優(yōu)點是對幾乎所有的有機物均有響應，特別是對烴類靈敏度高且響應與碳原子數(shù)成正比。它對水、二氧化碳、和二硫化碳等無機物不敏感。主要缺點是需要三種氣源及流速控制系統(tǒng)。46第五節(jié)檢測器系統(tǒng)ECD檢測器：是靈敏度最高的氣相色譜檢測器，同時也是最早出現(xiàn)的選擇性檢測器。它僅對含有電負性比較大的元素的化合物敏感，如鹵代烴，含N、O和S等雜原子的化合物有響應。主要用于有機氯農(nóng)藥殘留檢查。47FID使用本卷須知〔1〕FID是用氫氣和空氣中燃燒所產(chǎn)生的火焰使被測物質(zhì)離子化的，故應注意平安問題。在未接上色譜柱時，不要翻開氫氣閥門，以免氫氣漏入柱溫箱中，發(fā)生爆炸。同理，在卸色譜柱前，要檢查一下，氫氣是否已關(guān)。提示：在卸換色譜柱時，最好是在未開機的情況下卸換。48FID使用本卷須知〔3〕FID的靈敏度與氫氣、空氣和氮氣的比例有直接關(guān)系，因此要注意優(yōu)化。一般三者的比例應接近或等于1：10：1，如氫氣30-40ml/min，空氣300-400ml/min，氮氣30-40ml/min。49FID使用本卷須知〔4〕為防止檢測器被污染，檢測器溫度設置不應低于色譜柱實際工作的最高溫度，F(xiàn)ID溫度設定一般都大于150℃。一旦檢測器被污染，輕那么靈敏度明顯下降或噪聲增大，重那么點不著火。消除污染的方法是清洗，主要是清洗噴嘴外表和氣路管道。50第七節(jié)氣相色譜工作者的良好習慣〔1〕按儀器說明書規(guī)程操作：認真閱讀有關(guān)說明書，嚴格按操作規(guī)程操作。這是做好儀器分析的前提條件?！?〕及時更換毛細管柱密封墊：石墨密封墊漏氣是GC最常見的故障之一。一定不要在不同的柱上重復使用同一密封墊。如果裝上色譜柱后發(fā)現(xiàn)漏氣再來更換密封墊，就要花費更多的時間。51第七節(jié)氣相色譜工作者的良好習慣〔3〕使用高純度的氣體：載氣一定要用高純級的，以防止干擾分析和污染色譜柱或檢測器?！?〕使用性能可靠的壓力調(diào)節(jié)閥：裝在鋼瓶上的減壓閥一定要用質(zhì)量好的。有些新閥也會有漏氣的情況，所以，經(jīng)常檢漏，隨時發(fā)現(xiàn)問題是一個好的習慣。52第七節(jié)氣相色譜工作者的良好習慣〔5〕定期更換進樣口隔墊：進樣口隔墊漏氣是另一個GC常見故障。儀器假設有自動檢漏功能當然好一些，但也不能保證發(fā)現(xiàn)微小的漏氣，更別說無自動檢漏功能的儀器了。隔墊使用太久，隔墊的老化降解也會給分析帶來干擾。比方其碎屑掉進汽化室內(nèi)就可能導致鬼峰。53第七節(jié)氣相色譜工作者的良好習慣至于多長時間換一次隔墊，那么要看所分析的樣品性質(zhì)和分析條件而定。無論如何，一個隔墊的連續(xù)使用時間不要超過一周?！?〕及時清洗注射器：干凈的注射器能防止樣品的交叉干擾。更換樣品時要清洗。一支注射器暫時不用時(比方下班)，更要徹底清洗，否那么殘留在其中的樣品可能將針芯粘牢，造成注射器報廢。使用自動進樣器的用戶也應注意此間題，最好是經(jīng)常更換和清洗注射器。54第七節(jié)氣相色譜工作者的良好習慣〔7〕定期檢查并清洗進樣口襯管：儀器長期使用后，會發(fā)現(xiàn)襯管內(nèi)積有焦油狀物質(zhì)，這是樣品中的不揮發(fā)成分造成的。此外還會有顆粒狀物質(zhì)積存(隔墊碎屑、樣品中的固體物質(zhì))，這些都會干擾分析的正常進行。因此要定期檢查，及時清洗。〔8〕保存完整的儀器使用記錄：這是儀器的履歷，應逐日記錄，包括操作者、分析樣品及條件、儀器工作狀態(tài)等。一旦儀器出現(xiàn)問題，這是查找原因的重要資料。55氣相色譜講座第三章其它56第一節(jié)程序升溫氣相色譜法

程序升溫是重要的色譜技術(shù)之一。一臺較好的色譜儀大都帶有程序升溫控制器，使其應用范圍更廣。氣相色譜過程中，如試驗時柱溫是固定不變的，叫恒溫色譜。對于一個分析樣品，各組份都有一個最正確柱溫，在填充柱上，大約在組份的沸點左右，在毛細管柱上，大約比沸點低50℃左右為最正確柱溫。如果樣品組份較少，沸點范圍不大，一般都采用恒溫操作，效果良好57第一節(jié)程序升溫氣相色譜法但是對于沸程很寬，組份數(shù)目較多的樣品，柱溫只能選在其平均沸點左右。顯然這是一種折衷方法。而所選擇的柱溫對于大局部組份，不是太高就是太低。其結(jié)果是低沸點組份因柱溫太高很快流出，色譜峰重疊，緊擠在一起，分不開。而高沸點組份那么因柱溫太低，流出時間很長，峰很寬且矮平，有的甚至在一次分析中不能流出，而在隨后的分析中作為基線噪音出現(xiàn)，或作為無法說明的“鬼峰〞出現(xiàn)，增加了測量、鑒定的困難。58第一節(jié)程序升溫氣相色譜法程序升溫色譜法主要的特點和優(yōu)點就是通過選擇適當?shù)纳郎厮俾?，而使高溫和低溫的成分都獲得良好的別離和漂亮的峰形，縮短總分析時間。59第二節(jié)頂空氣相色譜法一、頂空氣相色譜的概念：頂空氣相色譜(GCheadspaceAnalysis)是指對液體或固體中的揮發(fā)性成分進行氣相色譜分析的一種間接測定法，它是在熱力學平衡的蒸氣相與被分析樣品同時存在于一個密閉系統(tǒng)中進行的。例如測定血液中的乙醇，把血樣置于一個密閉恒溫的樣品瓶中，測定恒溫后樣品瓶蒸氣相中的乙醇濃度，通過校準曲線計算血樣中的乙醇含量。這一方法從氣相色譜儀角度講，是一種進樣系統(tǒng)，即“頂空進樣系統(tǒng)〞。60第二節(jié)頂空氣相色譜法頂空氣相色譜分析用一個簡單的玻璃瓶就可以進行分析，要求的全部條件只是兩相(液-氣，或固-氣)間到達平衡，以及在取樣時仍能保持這種平衡。但一般來講作定量分析時在每個頂空瓶中只能取一次樣。如果再取第二次，結(jié)果就會不同于第一次的分析結(jié)果，這是因為第一次取樣后樣品組成已經(jīng)發(fā)生了變化。這就是靜態(tài)頂空氣相色譜分析的缺點，即在日常分析時要處理大量的玻璃器皿，另外要到達平衡就要有一定的等待時間。61第二節(jié)頂空氣相色譜法在殘留溶劑測定中我們常采用靜態(tài)頂空這種進樣方式。如2004二部藥典增補本收載品種鹽酸左氧氟沙星測定二氯甲烷和甲苯殘留量就是用靜態(tài)頂空氣相色譜進樣分析的。見試驗附圖。62鹽酸左氧氟沙星甲苯與二氯甲烷測定色譜條件：進樣口溫度：150℃，檢測器溫度：180℃，柱溫：40℃—保持3分—20℃/min升溫至150℃—保持3分。理論板數(shù):按甲苯與二氯甲烷峰計算均應不低于10000。別離度：別離度應大于標準規(guī)定：甲苯、二氯甲烷的含量分別不得過0.089%與0.06%63鹽酸左氧氟沙星甲苯與二氯甲烷測定內(nèi)標溶液的制備：精密稱取無水乙醇適量，加水制成每1ml中含的溶液作為內(nèi)標溶液。對照溶液的制備：分別取甲苯、二氯甲烷適量，精密稱定，加內(nèi)標溶液制成每1ml中含甲苯與二氯甲烷的溶液，作為對照溶液。供試品溶液的制備：取本品適量，精密稱定，加內(nèi)標溶液制成每1ml中約含100mg的溶液,作為供試品溶液。測定法：分別精密量取供試品溶液及對照溶液5ml，分置20ml頂空瓶中，密封，85℃平衡30分鐘，取樣注入氣相色譜儀，記錄色譜圖；按內(nèi)標法以峰面積比值計算，即得。64鹽酸左氧氟沙星甲苯與二氯甲烷測定色譜圖65第三節(jié)試驗實例順便我們也附上常規(guī)進樣或稱直接進樣方法的試驗舉例。如二部藥典收載品種復方地塞米松乳膏中樟腦、薄荷腦的測定以及一部藥典收載品種冰片中冰片的含量測定等。見試驗附圖。66冰片〔合成龍腦〕含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以聚乙二醇〔PEG〕-20M為固定相，涂布濃度為10%；柱溫為140℃。理論板數(shù)按龍腦峰計算應不低于1900。標準規(guī)定：本品含龍腦〔C10H18O〕不得少于55.0%。67冰片〔合成龍腦〕含量測定校正因子測定：取水楊酸甲酯適量，精密稱定，加醋酸乙酯制成每1ml含5mg的溶液，作為內(nèi)標溶液。另取龍腦對照品50mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加內(nèi)標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取1μl，注入氣相色譜儀，計算校正因子。測定法：取本品約50mg，精密稱定，置10ml量瓶中，用內(nèi)標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取1μl，注入氣相色譜儀，測定，即得。

68冰片含量測定色譜圖69第三節(jié)試驗中常遇到的問題排除方法

可能的原因及應采用的排除方法一、不出峰

1.注射器有毛病，用新注射器驗證。

2.未接入檢測器，或檢測器不起作用，檢查設定值

3.汽化室溫度太低，樣品不能汽化，檢查溫度，升高汽化溫度

4.柱箱溫度太低，檢查溫度，并根據(jù)需要調(diào)整

70第三節(jié)試驗中常遇到的問題排除方法5.無載氣流，檢查壓力調(diào)節(jié)器，并檢查泄漏，假設載氣管路堵塞，需疏通管路，假設載氣鋼瓶氣用盡，那么更換鋼瓶。6.柱斷裂，如果柱斷裂是在柱進口端或檢測器末端，是可以補救的，切去柱斷裂局部，重新安裝7、檢測器、放大器或記錄器電源開關(guān)未開或引線脫落。翻開電源或把引線接好。8、氫焰滅火，重新點火71第三節(jié)試驗中常遇到的問題排除方法二、前沿峰

1.柱超載，減少進樣量

2.兩個化合物共洗脫，提高靈敏度和減少進樣量，使溫度降低10-20度，以使峰分開

3.樣品冷凝，檢查進樣口和柱溫，如有必要可升溫

4.樣品分解，采用失活化進樣器襯管或調(diào)低進樣器溫度72第三節(jié)試驗中常遇到的問題排除方法三、拖尾峰

1.進樣器襯管或柱吸附活性樣品：更換襯管。如不能解決問題，就將柱進氣端去掉1-2圈，再重新安裝

2.柱或進樣口溫度太低：升溫〔不要超過柱最高溫度〕。進樣口溫度應比樣品最高沸點高25度

3.兩個化合物共洗脫：提高靈敏度，減少進樣量，使溫度降低10-20度，以使峰分開

4.柱污染：從柱進口端去掉1-2圈，再重新安裝7