動物實驗概述和天然抗氧化物

藥物（Drug）是用于預防、治療、診斷疾病和幫助機體恢復正常功能的物質。藥品質量的優(yōu)劣直接影響到藥品的安全性和有效性，關系到用藥者的健康與生命安危。食物、藥物、毒物關系食物藥物毒物現在是1頁\一共有36頁\編輯于星期五

在醫(yī)學教學、科研和醫(yī)療工作中，不論是從事基礎醫(yī)學還是臨床醫(yī)學或預防醫(yī)學，都需要用實驗動物來進行各種實驗。通過對動物實驗的觀察、分析，來研究需要解決的問題，動物實驗方法已成為研究工作中必不可少的重要手段?，F在是2頁\一共有36頁\編輯于星期五

生命科學

制藥工業(yè)

農業(yè)畜牧業(yè)環(huán)保行為科學軍事國防醫(yī)學

動物實驗

現在是3頁\一共有36頁\編輯于星期五

醫(yī)學動物實驗實驗動物模擬生理、病理特征

觀察揭示生命和疾病規(guī)律

探索生命奧秘控制疾病延緩衰老推廣現在是4頁\一共有36頁\編輯于星期五實驗動物基本知識實驗動物是指經人工培育，對其攜帶的微生物實行控制，遺傳背景明確，來源清楚，可用于科學實驗、藥品、生物制品的生產和檢定及其他科學研究的動物。實驗動物是醫(yī)藥學，生命科學研究的基礎和重要支撐條件?，F在是5頁\一共有36頁\編輯于星期五實驗動物分類（一）遺傳學分類1、近交系動物：一般稱為純系動物，經連續(xù)20代以上的全同胞兄妹交配（或者親代與子親交配）培育而成，近交系數大于99%。近交系特點：實驗結果比較準確，誤差小近交系動物遺傳背景明確，每個品系的生物學特性、生理學特點、易感病原等都有完整的背景材料近交衰退，生活力弱，對生產環(huán)境要求高、產仔少、營養(yǎng)要求高。如小鼠近交系：C57BL/6J、BALB/c、C3H、DBA等?，F在是6頁\一共有36頁\編輯于星期五2、突變系動物：保有特殊的突變基因的品系動物，即正常染色體發(fā)生變異、具有各種遺傳缺陷的品系動物。突變系動物特點：變異的遺傳基因等位點可遺傳下去，或者即使沒有明確的遺傳基因等位點，但是經過淘汰和選拔后，仍能維持穩(wěn)定的遺傳性質?？梢宰匀煌蛔兓蚴侨斯ざㄏ蛲蛔儭，F在是7頁\一共有36頁\編輯于星期五3、雜交群動物：又稱異系雜交，是由不同品系雜交所產生的品系。兩個不同近交系雜交所生的第一代動物稱為雜交一代動物或F1代。雜交群動物特點：個體間遺傳均一，能取得一致的實驗結果表現雙親的顯狀性狀環(huán)境適應性強④具有雜種優(yōu)勢?，F在是8頁\一共有36頁\編輯于星期五4、封閉群動物：又稱遠交系，在一定群體內，以非近親交配方式育成的動物品系，連續(xù)15代以上不從外部引入新的動物種群，或者來源于近交系的種群，在封閉條件下至少經過4代繁殖的動物?，F在是9頁\一共有36頁\編輯于星期五同基因型：近交系動物、突變系動物、雜交F1代動物等

不同基因：遠交系動物和封閉群動物現在是10頁\一共有36頁\編輯于星期五（二）按微生物學控制原理分類無菌動物：就是指不能檢出任何活的微生物和寄生蟲的動物。悉生動物：指機體內帶著已知微生物（動物或植物）的動物。此種動物原是無菌動物，系人為的將指定微生物叢投給其體內，例如使大腸桿菌定居在無菌小鼠體內，在進行微生物檢查時，僅能檢出大腸桿菌。無特定病原體動物：動物是指機體內無特定的微生物和寄生蟲存在的動物，但非特定的微生物和寄生蟲是容許存在的。普通動物：是未經積極的微生物學控制，普遍地飼養(yǎng)在開放衛(wèi)生環(huán)境里的動物?，F在是11頁\一共有36頁\編輯于星期五常用的實驗動物主要包括：小鼠、大鼠、家兔、狗、猴、豬、山羊、綿羊、雞、鴿子、鵪鶉、馬、牛等?，F在是12頁\一共有36頁\編輯于星期五動物實驗常用方法現在是13頁\一共有36頁\編輯于星期五現在是14頁\一共有36頁\編輯于星期五

動物模型的含義對原形的某些特征進行模擬和刻畫。通過對模型的實驗研究，將結論類推到原形，從而達到認識原形的目的。模型

動物模型中的“動物”：包括整體動物，也包括動物的某一部分，如器官、組織、細胞等。目前生物模型已經從動物、微生物發(fā)展到細胞，但是最基本、最常用的是動物模型，即以哺乳動物為主，如猴、狗、兔、貓、鼠等的動物模型?，F在是15頁\一共有36頁\編輯于星期五

在人為因素的作用下，使實驗動物接受一定的損傷，如機械、物理、化學、生物等因素，造成實驗動物組織器官或全身一定的損害，出現類似于人類疾病狀態(tài)下的機能、代謝或形態(tài)結構等方面的變化。人類特定病理狀態(tài)的發(fā)生、發(fā)展和結局等規(guī)律

模擬動物模型是醫(yī)學動物實驗中重要的方法疾病的預防、治療，以及藥物篩選、新藥開發(fā)等從而觀察實驗依據現在是16頁\一共有36頁\編輯于星期五人類的自然壽命應該是多少呢？？根據生物學原理，人類的生理特點，人的自然壽命應該是120歲?，F在是17頁\一共有36頁\編輯于星期五實際上，能活到100歲以上的很少！人類衰老的原因是多方面的，包括自由基說，生理功能、代謝失調說，生物鐘理論等。普遍認為自由基的氧化破壞是造成機體早衰及某些慢性疾病的主要原因?，F在是18頁\一共有36頁\編輯于星期五天然植物的抗氧化作用1、自由基自由基(freeradicals)是任何包含一個未成對電子的原子或原子團。未成對電子，指那些在原子或分子軌道中未與其它電子配對而獨占一個軌道的電子，生物體內的自由基主要有超氧陰離子自由基(O2-?)、羥基自由基(?OH)、烷過氧基自由基(ROO?)和一氧化氮自由基(NO?)等?，F在是19頁\一共有36頁\編輯于星期五大量自由基生成損傷蛋白質DNA脂質導致心腦血管疾病N.S退行性改變帕金森病阿爾茨海默病老年性斑變及白內障糖尿病癌癥炎癥自身免疫性疾病如風濕、類風濕自由基與疾病的關系現在是20頁\一共有36頁\編輯于星期五癌變過程中自由基氧化作用O2··OHH2O2激活原癌基因產物的大量異常表達細胞異常增殖癌變氧自由基幾乎和人類大部分常見疾病都有關系,從死亡率最高的心腦血管疾病，到人類最恐懼的癌癥，以及近年來對人類造成巨大威脅的艾滋病，無一不和氧自由基有著密切的關系。現在是21頁\一共有36頁\編輯于星期五2、天然植物的抗氧化成分在生物體內活性氧不斷地通過非酶反應與酶反應產生，但在抗氧化酶及外源性和內源性抗氧化劑的協同作用下不斷地被清除，在生理情況下活性氧可維持于有利無害的極低水平?，F在是22頁\一共有36頁\編輯于星期五多酚類物質多酚類化合物的抗氧化作用是向脂質過氧化自由基(LOO?)提供一個電子而使之成為較穩(wěn)定的過氧化脂質(LOOH)，而自身則成為酚氧自由基或其同系物。多酚類物質就其化學結構的不同，可分為單聚體和多聚體兩大類?，F在是23頁\一共有36頁\編輯于星期五類黃酮物質是多酚類物質中種類最多、存在最廣泛的物質，可進一步分為黃酮類、黃酮醇類等，大多數都有較強的抗自由基作用?，F在是24頁\一共有36頁\編輯于星期五多糖由10個或10個以上單糖基通過苷鍵(主要是縮醛結構)連接而成的直糖鏈或支糖鏈的聚糖稱為多糖。中藥中的多糖具有抗氧化活性人參多糖、黃芪多糖

免疫增強作用香菇、豬苓多糖

抗腫瘤作用銀耳多糖

保護肝細胞作用蘆薈多糖

抗腫瘤和抗艾滋病毒作用研究發(fā)現多糖可通過直接清除活性氧(ROS)、絡合產生ROS所必需的金屬離子等途徑實現抗氧化作用?，F在是25頁\一共有36頁\編輯于星期五皂苷皂苷由甾體或三萜連接糖基組成，分子中含有較多的羥基，具有較大的極性，是中藥中一類重要的活性物質，許多中藥如人參、知母、麥門冬、柴胡、桔梗、紅景天等均含有皂苷，是很好的抗氧化劑?，F在是26頁\一共有36頁\編輯于星期五④其他除了以上幾大中藥成分在自由基清除中起著重要作用外，其它具有抗氧化作用的成分包括：生物堿類、蛋白質、木質素、維生素類、鞣質類、蒽醌類和酶類以及微量元素等。生物堿類鞣質類蒽醌類維生素VC，VE及其衍生物等鳥氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、色氨酸等五倍子、沒食子、石榴果皮等蓼科、豆科、茜草科和低等植物地衣類和菌類的代謝產物現在是27頁\一共有36頁\編輯于星期五3、抗氧化劑活性測定方法抗氧化劑抗氧化活性的測定方法有體內和體外兩種方法。體內抗氧化實驗：體內評價抗氧化劑抗氧化活性的方法有動物實驗和人體研究。動物實驗主要通過測量血液中和組織勻漿中脂質過氧化物（不飽和脂肪酸鏈經自由基或活性氧作用后形成帶有過氧基的脂質）和SOD活性（肝蛋白）及含量來評價其抗氧化活性。人體研究主要是考察一些已經批準生產的中藥制劑在疾病治療中對氧化作用的影響。體內實驗法比較靈敏，但與體外實驗法相比周期長、成本大、實驗繁瑣，因此大量樣品的抗氧化活性篩選仍有賴于體外實驗法?，F在是28頁\一共有36頁\編輯于星期五體外抗氧化實驗：體外測定抗氧化劑的抗氧化活性主要表現在抑制脂質過氧化、清除自由基、抑制促氧化劑和還原能力等幾方面。評價抗氧化劑抑制脂質過氧化能力的方法主要有：過氧化值法、共軛二烯氫過氧化物法、硫氰酸鐵法、硫代巴比妥酸法(TBARS)等?，F在是29頁\一共有36頁\編輯于星期五評價抗氧化劑抗自由基活性所用的自由基主要有：?OH、O2-?、DPPH?。產生?OH的方法主要有：離子輻射：輻射水可以產生?OH；過氧化氫和金屬離子的反應，典型的是Fenton反應：Fe2++H202→Fe3++?OH+OH-，Cu+和H202也可發(fā)生類似的反應：由臭氧產生：臭氧在水溶液中，特別是在堿性條件下，可以生?OH?，F在是30頁\一共有36頁\編輯于星期五產生O2-?的方法主要有：鄰苯三酚自氧化體系：鄰苯三酚在堿性條件下能迅速氧化，生成并積累O2-?；光照核黃素：光照核黃素EDTA體系可以產生很高濃黃嘌呤一黃嘌呤氧化酶(XO)體系可產生O2-?；④甲硫氨酸作用于VB2可產生O2-?；⑤二甲基亞砜在堿性條件下可產生O2-?；⑥KO2在有機溶劑中可產生O2-?；⑦輻射分解和光化學方法、電化學方法產生O2-?；⑧多形核白細胞受到某些刺激時，產生呼吸爆發(fā)，能釋放O2-??，F在是31頁\一共有36頁\編輯于星期五評價抗氧化劑還原能力的方法主要有：鐵離子還原抗氧化劑能力法(FRAP)和高鐵鹽-鐵氰化鉀法等。FRAP法原理：在低pH下，抗氧化劑將Fe3+-三吡啶三嗪還原成Fe2+-三吡啶三嗪，Fe2+-TPTZ呈藍色，在593nm處有強吸收，測得吸光度值越大，說明還原能力越強；高鐵鹽-鐵氰化鉀法原理：Fe3+被還原成Fe2+后，Fe2+與鐵氰化鉀生成可溶性藍色配合物KFe[Fe(CN)6]，于700nm處有最大吸收，測得吸光度值越大，說明還原能力越強。現在是32頁\一共有36頁\編輯于星期五常見的體外抗氧化實驗體系：Fenton體系、鄰苯三酚自氧化體系、DPPH?體系、還原體系、抗卵黃脂質過氧化體系現在是33頁\一共有36頁\編輯于星期五Fenton體系采用比色法測定抗氧化類化合物對由Fenton體系產生?OH清除作用。原理：Fenton反應產生?OH，將鄰二氮菲-Fe2+水溶液氧化為鄰二氮菲-Fe3+，導致鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失，據此可推知體系中?OH數量的變化?，F在是34頁\一共有36頁\編輯于星期五鄰苯三酚自氧化體系采用比色法測定丹酚酸類化合物對由鄰苯三酚自氧化體系產生的O2-?清除作用原理：鄰苯三酚在堿性條件下能迅速氧化，不斷生成并積累O2-?，同時生成在420nm處有強烈吸收的有色中間產物，吸光度在反應開始后一段時間內隨時間變化呈線性增加，抗氧化物質的加入可以阻止中間產物的積累，據此可測定清除O2-?