核桃研究進展

經(jīng)濟林木研究進展1.1核桃概述核桃(JuglansregiaL.)又名胡桃屬于胡桃科(Juglandaceae)核桃屬(Juglans)，為胡桃科落葉喬木。與扁桃、腰果、榛子并稱為世界著名四大干果(郗榮庭和張毅萍,1996)。核桃是重要的果材兼用樹種之一，也是中國重要的出口農(nóng)產(chǎn)品。按照FAO(2021)統(tǒng)計數(shù)據(jù)，2021年，我國種植核桃面積為40萬公頃，帶殼堅果產(chǎn)量為165.6萬噸，占世界核桃總產(chǎn)量的48%，位居世界第一位。我國核桃育種工作者于20世紀(jì)60年代開始實生選種、雜交育種，80年代開始從國外引種，到目前已有超過100個品種在生產(chǎn)中應(yīng)用。由于受環(huán)境條件限制和品種要求的影響，只有一部分品種被大面積推廣，但很少有品種能占到絕對優(yōu)勢。特別是由于我國核桃產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展，種植者不考慮品種的合理配置，生產(chǎn)中栽培品種多而混雜，許多實生繁殖的苗木時?；煊谄渲?。除此之外，由于四川品種間親緣關(guān)系很近，有些苗木很難區(qū)分，也是造成品種混雜的原因之一。品種雜亂、種植中配置又不夠合理，造成收獲的堅果質(zhì)量層次不齊、形狀各異，加工品質(zhì)不一，對果實的加工、分選都造成障礙，不僅無力參與競爭，也難以滿足市場對核桃品質(zhì)的需求，建立一種合適的品種鑒定的體系，合理選擇生產(chǎn)用的品種尤為重要和迫切。堅果是核桃種植中最主要的目標(biāo)產(chǎn)品，在栽培中合理配置品種，選用相同品種或堅果形狀相近的品種對果實分選和加工有重要意義。過去的研究證實在核桃不同基因型堅果特征中(比如：堅果大小、果形、果殼厚度、核仁顏色等)存在豐富的變異(Cosmulescu&Botu,2021)。而且，堅果形狀，也就是內(nèi)果皮形狀，是一種穩(wěn)定可遺傳的特性，能夠在種質(zhì)收集中通用(Trujilloetal.,2021)。堅果形狀特征也己被國際新品種保護聯(lián)盟(UPOV)作為核桃DUS測試指南中的描述符被應(yīng)用。可是，僅用果實是很難區(qū)分所有品種，特別是由于許多品種的親緣關(guān)系很近，許多堅果形狀十分相近。因此，需要用一種有效并且明確的遺傳指紋作為形態(tài)評價的補充來清楚的區(qū)分每一個品種。1.1.1核桃的起源核桃原產(chǎn)于中亞，包括中國新疆、哈薩克斯坦、烏茲別克斯坦和吉爾吉斯斯坦的部分區(qū)域，從尼泊爾、中國西藏、印度北部和巴基斯坦的山區(qū)往西到阿富汗、土庫曼尼亞和印度，再到阿塞拜疆、亞美尼亞、格魯吉亞和土耳其東部地區(qū)(McGranahan&Leslie,2021)，在我國的分布遍及南北。泡核桃起源于云南、四川、西藏等省(自治區(qū))，其中地處云南大理州的漾濞縣占有重要位置。20世紀(jì)80年代，有學(xué)者對泡核桃分布區(qū)考察后發(fā)現(xiàn)，在西藏和云南省，特別是瀾滄江流域，泡核桃的種質(zhì)資源也十分豐富，既有野生類型，也有栽培類型，還有半野生狀態(tài)的中間類型。在西藏，目前仍存在著許多核桃和泡核桃的原始群落。1.1.2核桃的種類核桃屬植物包含23個種，被分為四組，即：核桃組(SectionJuglans)、核桃楸組(SectionCardiocaryon)、黑核桃組(SectionRhysocaryon)和灰核桃組(SectionTrachycaryon)(郗榮庭,1990)，主要分布在北溫帶，但對亞熱帶、熱帶山地森林氣候也有廣泛的適應(yīng)性。據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織年鑒資料，2021年世界上生產(chǎn)核桃的國家有54個(FAO,2021)。我國是核桃的原產(chǎn)地之一，現(xiàn)有核桃屬植物9個種，其中原產(chǎn)于我國的有5個種，分別為核桃、核桃楸、野核桃、泡核桃和麻核桃；其中廣泛栽培的是核桃和泡核桃，種質(zhì)資源十分豐富，僅《中國核桃種質(zhì)資源》一書記載的核桃品種、實生農(nóng)家類型、優(yōu)良無性系、優(yōu)良單株和特異種質(zhì)資源就有223個，泡核桃的47個(裴東和魯新政,2021)。1.1.3核桃的分布據(jù)相關(guān)資料顯示，目前核桃的分布和栽培遍及世界五大洲中40多個國家及地區(qū)，栽培總面積達到200萬公頃以上(毅萍,2021)，我們國家作為核桃的原產(chǎn)地之一，除了黑龍江省、上海市、廣東省、海南省、臺灣省等省市外,全國其他省市地區(qū)均有栽培種植核桃，主要產(chǎn)區(qū)主要有云南、山西、陜西、河北、甘肅、河南、四川、北京、浙江、貴州、山東、新疆和遼寧省。分布于中國西南地區(qū)(四川、云南和貴州)的核桃屬3個種，不僅對世界核桃屬植物的起源、系統(tǒng)進化有著重要作用(路安民,1982)，而且對世界核桃屬資源的保護和可持續(xù)利用也具有重要的作用。核桃在四川自然分布極為廣泛，遍及全省各地，同時也是該省的主要經(jīng)濟樹種之一。1.1.4核桃的價值核桃是一種營養(yǎng)價值、藥用價值、經(jīng)濟價值以及文化價值都很高的珍奇果木。其中部分種的堅果具有極高的食用價值而被廣泛栽培和利用，其種仁除含脂肪、蛋白質(zhì)、碳水化合物外，還含鈣、磷、鐵、胡蘿卜素、硫胺素、核黃素和尼克酸等多種成分(高煥章等,2021)。有關(guān)研究報道(郝艷賓等,2021)每100g核桃仁中含有蛋白質(zhì)14.6g-19g，脂肪63g-70g，碳水化合物5.4g-10.7g，鈣85mg-108mg，磷280mg-329mg，鐵2.6mg-3.2mg，硫胺素0.32mg，核黃素0.11mg，尼克酸1.0mg。而且所含的脂肪中有著豐富的必需脂肪酸——亞油酸，以及對人體健康有益的脂肪酸、褪黑激素、生育酚以及抗氧化劑等化合物，具有很高的營養(yǎng)和藥用價值，能夠有效減緩和預(yù)防心臟病、糖尿病、高血壓、肥胖癥以及抑郁癥等疾病的發(fā)生(李敏等,2021)。此外從核桃枝和皮中的提取的化學(xué)物質(zhì)5-羥基-1,4-萘醌又名胡桃醌，研究表明在抗癌、抗菌作用中它起著重要功效的作用。核桃對于大多數(shù)消費者來說主要在于食用核桃仁上，不過現(xiàn)今的核桃市場已不單單在食用核桃仁這一項上，近年來有報道(王豐俊等,2021)一種核桃仁榨油后的殘渣，即核桃粕，可以用來作為蛋白原料進行核桃督油的生產(chǎn)，且這種核桃醬油的品質(zhì)好，這使核桃資源得以充分利用，對于核桃的綜合利用未來前景大好,而且核桃醬油的開發(fā)也對健全和建立健康的中國調(diào)味品市場，有著深遠的意義。核桃殼(王豐俊等,2021)也一度被作為棄物處理，然而有研究發(fā)現(xiàn)，用處理過的核桃殼顆粒來制造的過濾器，在石油行業(yè)中得到了良好的應(yīng)用，此外核桃殼顆粒還適用于氣流沖洗操作的研磨劑，并且將核桃殼顆粒添加在涂料中，能夠增加涂料的鮮活立體感，如若在炸藥中添加了核桃殼顆粒還能夠增加威力，也可應(yīng)用于化妝品行業(yè)，增加清潔效果。1.2果樹種質(zhì)資源鑒別技術(shù)的研究現(xiàn)狀1.2.1我國果樹種質(zhì)資源的收集保存現(xiàn)狀果樹種質(zhì)資源指的是具有利用價值的果樹遺傳物質(zhì)的總體，是植物保存和改良利用的物質(zhì)基礎(chǔ)，包括栽培品種、半栽培品種、野生類型及人工創(chuàng)造的新類型。人們可以直接利用種質(zhì)資源創(chuàng)造出新品種，也可以將其作為雜交親本，進一步綜合親本有力基因來改良現(xiàn)有的植物品種，或做砧木材料間接加以利用，或通過誘變等方法來創(chuàng)造新的基因類型。大多數(shù)果樹種質(zhì)資源是遺傳上高度雜合的多年生木本植物，背景極為復(fù)雜，許多重要的農(nóng)藝性狀，如產(chǎn)量、品質(zhì)、抗逆性等，多為微效多基因控制的數(shù)量性狀。中國果樹資源豐富，是世界上最大的果樹原產(chǎn)中心之一，素有“園林之母”的美稱，是許多果樹種類如海棠果、西府海棠、蘋果、沙梨、杜梨、秋子梨、桃、核桃、泡核桃、柿、山楂、枇杷、獼猴桃、甜橙、中國李、杏、板栗、棗、酸棗、荔枝、龍眼、梅等的原產(chǎn)國或起源中心，是果樹種質(zhì)資源最為豐富的國家之一(慕茜等,2021;任國慧等,2021)。此外還有不少尚待馴化的栽培果樹的近緣種、野生種和砧木資源，以及從世界各地引種的果樹資源。引種的果樹資源經(jīng)過長期的栽培選擇，形成了許多適應(yīng)本地自然和栽培條件的生態(tài)類型和地方品種。中國的果樹資源也為世界果樹生產(chǎn)發(fā)展和品種改良作出了貢獻。如桃、柑橘、杏、梨、甜橙等已經(jīng)在世界各地栽培，溫州蜜柑和中華獼猴桃也已分別在日本和新西蘭廣泛栽培。板栗、梨、山櫻桃、毛桃、核桃楸等提供了抗病、抗寒育種的材料。我國果樹種質(zhì)資源工作者經(jīng)過多年艱苦奮斗，在果樹種質(zhì)資源的評價、利用等方面作出了卓越的成就。上世紀(jì)60年代到80年代的開展了全國性果樹資源普查，自1980年開始根據(jù)自然區(qū)劃、樹種分布，先后建立了17個國家種質(zhì)資源圃，包括蘋果、梨、葡萄、桃、柿、核桃、草莓、龍眼等重要果樹的種質(zhì)圃，以及專門保存珍貴少有果樹類型的公主嶺寒地果樹圃和新疆名特果樹圃等，截止2021年底，17個國家種質(zhì)資源圃共保存種質(zhì)14720份，其中鄭州葡萄、桃圃保存1777份，保存份數(shù)最多；泰安核桃、板栗圃保存種質(zhì)741份(王力榮,2021)，到2021年底，泰安核桃、板栗圃已保存來自全國各地以及日本、美國等國家核桃屬種質(zhì)資源10個種的375份種質(zhì)資源(劉慶忠和陳新,2021)。隨著經(jīng)濟的發(fā)展，又不斷的選擇和創(chuàng)造出許多果樹新品種。它們不僅是果樹生產(chǎn)和科研的物質(zhì)基礎(chǔ)，還是果樹產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的前提和保障。為了保護我國名、優(yōu)、特種質(zhì)及育種者的知識產(chǎn)權(quán)，加強和規(guī)范果樹苗木市場管理，更好的利用已有資源,建立有效種質(zhì)鑒別和品種鑒定評價體系十分必要。從直觀的形態(tài)學(xué)觀察到細胞學(xué)和分子水平的檢測，許多方法被成功應(yīng)用于果樹種質(zhì)資源的起源、演化、分類和品種鑒定中。1.2.2果樹種質(zhì)資源的傳統(tǒng)鑒定方法形態(tài)學(xué)性狀是植物最直觀的可以進行描述的外部特征，通過比較植物學(xué)形態(tài)特征的差異來達到種質(zhì)鑒定的目的。因為方法操作簡單，依據(jù)所研究樹種的最顯著的形態(tài)特征如葉、花、果等進行區(qū)分、分類和命名，我國果樹種質(zhì)資源的評價主要停留在表型性狀上。形態(tài)性狀特別是營養(yǎng)器官容易受到環(huán)境變化的影響，而且由于受育種親本的限制，許多新品種形態(tài)上愈加相似，無法用形態(tài)學(xué)方法對品種進行鑒定，也就不能進行品種純度的檢測。依據(jù)果實特征差異的品種鑒定要等到果樹結(jié)果之后，周期較長，所以形態(tài)學(xué)標(biāo)記已經(jīng)難以滿足對越來越多自然選育和人工培育的果樹品種進行鑒定的要求(王國榮和吳府勝,2021)。細胞學(xué)鑒定利用染色體核型分析，實驗條件相對簡單，尤其是結(jié)合分帶技術(shù)可以揭示出大量染色體結(jié)構(gòu)的變異，但是由于染色體制片技術(shù)和分辨率的限制，核型分析在種的分類中應(yīng)用較多，穆英林和郗榮庭(1988)根據(jù)核型特點，將供試的核桃屬7個種分為三組，并討論了組間及組內(nèi)進化的親緣演化關(guān)系。但將核型分析應(yīng)用于品種鑒定還有一定的難度，尤其對于大多數(shù)具有小染色體和結(jié)構(gòu)差異較小的果樹來說，染色體核型分析還不足以達到進行品種鑒定的目的(宋婉,2021)。孢粉學(xué)鑒定主要根據(jù)植物花粉的形狀、花粉的長寬比、花粉孔的大小和數(shù)量、花粉壁形狀、花粉壁厚等對果樹種、品種分類鑒定的方法?；ǚ鄣男螒B(tài)特征因為受植物基因型控制不被外界條件影響，結(jié)果比較穩(wěn)定。該方法已成功用于桃(汪祖華和周建濤,1990)、板栗(謝治芳等,2021)、核桃(任列花等,2021)等果樹的分類和品種鑒定中。但是實驗條件和花粉制備方法不同會對鑒定的結(jié)果有影響，造成同一品種的花粉粒之間會存在個體差異，還會因為敗育等影響造成花粉粒干癟，所以以個別花粉形狀的差異，作為鑒定依據(jù)，有時并不可靠，必須結(jié)合其它指標(biāo)進行評定。等位酶進行果樹資源鑒定曾受到廣泛的關(guān)注，其研究幾乎涉及所有種類的樹種，取得的結(jié)果也較為理想。但等位酶活性會受時空影響，在植物的生殖、發(fā)育的不同階段會有差異，而且在非正常生長環(huán)境或逆境的條件下，可以誘導(dǎo)植物合成新的特異性蛋白，導(dǎo)致酶譜的改變，用于果樹種質(zhì)資源鑒定中，顯然是有缺陷的。除此之外，由于果樹的生長周期較長，并且長期通過嫁接等無性方式繁殖，加上不同地域間的相互引種，造成果樹中同名異物和同物異名現(xiàn)象十分普遍，這更為果樹品種的鑒定和分類增加了難度。因此，DNA分子標(biāo)記一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，因為反映核苷酸水平的差異，不受發(fā)育階段、組織差異以及環(huán)境條件影響，且變異豐富等眾多優(yōu)勢，很快的應(yīng)用于果樹種質(zhì)研宄的方方面面。1.2.3分子標(biāo)記在果樹種質(zhì)資源鑒定中的應(yīng)用RFLP標(biāo)記在品種鑒定中的應(yīng)用最早，但RFLP操作相對麻煩，因此RAPD一誕生，因為簡便迅速、不受種屬限制、有眾多的隨機引物可供篩選使用，很快成為品種鑒定的常用手段。RAPD標(biāo)記已成功地應(yīng)用于桃、杏、李、櫻桃、梅、草莓、獼猴桃、蘋果、香蕉、橄欖、梨、葡萄、番木瓜、芒果、無花果等多種果樹上(薛淮等,2021)。而于華平等(2021)對RAPD技術(shù)在鑒定果樹品種中的科學(xué)性進行了技術(shù)上的驗證與分析得出，不同果樹中RAPD引物體現(xiàn)出譜帶清晰度以及數(shù)量等方面的特點不同：堿基數(shù)為9、10與11的引物在杏、桃、李和梅上的多態(tài)性較高且譜帶清晰，蘋果、梨和葡萄更適合應(yīng)用11個堿基的引物。在目前已有的分子標(biāo)記中，SSR因其高度的多態(tài)性和可重復(fù)性高，被越來越多的用于果樹旳種質(zhì)資源鑒定中。Kimura等(2021)用9個SSR標(biāo)記區(qū)分了6個梨屬的60個基因型，Galli等(2021)用6個SSR標(biāo)記區(qū)分了66個蘋果品種，Cheng和Huang(2021)用7個SSR標(biāo)記區(qū)分了中國32個桃品種，每個品種都有獨一無二的SSR指紋，可見SSR技術(shù)在用于果樹品種鑒定中的有效性。為了迅速并可靠的進行品種鑒定，Aranzana等(2021)利用AFLP和SSR兩種多態(tài)性標(biāo)記，對100個桃品種進行鑒定，其中9個引物組合的40個AFLP標(biāo)記可區(qū)分97個基因型，7個SSR標(biāo)記的32個等位基因可以鑒別78個基因型，如果將兩種標(biāo)記結(jié)合則可以鑒定99個基因型。由此可見，DNA分子標(biāo)記無疑為果樹種質(zhì)鑒定提供了一種強有力的技術(shù)。除此之外，它們在遺傳研究和果樹生產(chǎn)中也有非常廣泛的實際應(yīng)用。UPOV已將DNA分子標(biāo)記鑒定納入農(nóng)作物品種DUS測試內(nèi)容，并在分子生物學(xué)技術(shù)(BMT)測試指南草案中，將構(gòu)建DNA指紋數(shù)據(jù)庫所使用的標(biāo)記方法確定為SSR和SNP。其中，SSR標(biāo)記因具有多態(tài)性高、重復(fù)性好、共顯性優(yōu)點，被UPOV生物化學(xué)和分子技術(shù)工作組驗證為植物新品種保護最廣泛應(yīng)用的標(biāo)記體系(張靖國等,2021)。但值得注意的是，由于不同的育種機構(gòu)保存、繁殖和選育標(biāo)準(zhǔn)的差別，有些同名品種間，無論在形態(tài)上還是在DNA指紋上，都存在一定的差異，這給用DNA指紋鑒定的一致性也造成了困難(滕海濤等,2021)。近5年，研宄者綜合不同標(biāo)記系統(tǒng)，主要將形態(tài)學(xué)標(biāo)記和生化標(biāo)記、分子標(biāo)記結(jié)合起來使用，綜合的評判種質(zhì)資源的多樣性以及品種的分類。特別是形態(tài)學(xué)同DNA分子標(biāo)記技術(shù)的結(jié)合，為種質(zhì)資源提供了更為客觀的評價。Malvolti等(2021)結(jié)合ISSR標(biāo)記、種子形態(tài)特征(果形指數(shù)和單果重)和果實成分(總油、脂肪酸和維生素E)分析意大利十個不同地區(qū)的核桃種質(zhì)，用基因分型的結(jié)果與形態(tài)學(xué)和果實生化分析的結(jié)果相互印證，認為坎帕尼亞的丘陵地區(qū)和阿布魯佐的山區(qū)的基因型具有不同的遺傳、形態(tài)和生化特征，是優(yōu)異的育種的資源。Ebrahimi等(2021)用形態(tài)學(xué)指標(biāo)和SSR標(biāo)記分析了35個核桃基因型，認為伊朗的基因型SSR位點和形態(tài)學(xué)特征都具有很高的多樣性。Trujillo等(2021)用33個SSR標(biāo)記和11個內(nèi)果皮特征對世界油橄欖資源庫中的499份材料進行的區(qū)分，結(jié)果顯示在鑒定的332個品種中驗證了200個，它們有獨一無二的SSR基因分型和內(nèi)果皮特征。Fendri等(2021)也用SSR標(biāo)記結(jié)合內(nèi)果皮特征對突尼斯油橄攬資源圃的種質(zhì)資源進行了區(qū)分。類似的研宄在其它果樹也被開展(Ganopoulosetal.,2021)。分子標(biāo)記具有眾多的優(yōu)越性，但它們不能預(yù)測是否不同基因型之間存在形態(tài)學(xué)或農(nóng)業(yè)性狀的差異。因此，分子標(biāo)記只能作為形態(tài)學(xué)的重要補充，在植物新品種DUS測試中應(yīng)用(Gunjacaetal.,2021)，這充分說明將不同標(biāo)記系統(tǒng)結(jié)合來評價種質(zhì)資源是順應(yīng)科學(xué)發(fā)展的新思路。1.2.4果樹核心種質(zhì)的鑒定與評價果樹種質(zhì)資源在長期自然選擇和人工引種栽培過程中，形成了豐富的種質(zhì)資源。隨著生產(chǎn)技術(shù)水平的提高，人們越來越注重種質(zhì)資源的收集和保存，急切的想要保護因墾荒造地、丘陵山坡開荒等，導(dǎo)致流失甚至瀕臨滅絕的資源。加之各國各地資源不斷積累交換，種質(zhì)資源數(shù)量也急劇增加。大量的種質(zhì)資源在為果樹品種選育提供豐富的遺傳基礎(chǔ)的同時，也在一定程度上給種質(zhì)資源的收集、評價、研究和利用帶來了困難。如何對其保存、更新和鑒定，從豐富的種質(zhì)資源中快速、準(zhǔn)確地鑒定出育種上迫切需要的優(yōu)異基因，對其進行創(chuàng)新和有效利用。Brown(1989)提出的核心種質(zhì)的概念，為種質(zhì)的保存、評價和利用提供便利。它用一定的方法選擇種質(zhì)總保存資源中最小的資源數(shù)量和遺傳重復(fù)性，最大程度地代表整個遺傳資源的多樣性(Brown,1989)。目前，在許多果樹上已開展了核心種質(zhì)構(gòu)建工作，并取得了一定進展。比如在蘋果(劉遵春等,2021;2021)、桃(沈志軍等,2021)、核桃(王紅霞等,2021)、橄欖(Belajetal.,2021)等樹種中都己建立了核心種質(zhì)。但其中大多數(shù)都停留在初期核心種質(zhì)階段，且多是用DNA分子標(biāo)記統(tǒng)計分析并抽樣，沒有專用的果樹核心種質(zhì)的基地。只有少數(shù)樹種運用了多種評價、鑒定方法相結(jié)合的方式進入了更高的層次的核心種質(zhì)，如蘋果(劉遵春等,2021)整合農(nóng)藝性狀和分子標(biāo)記數(shù)據(jù)構(gòu)建核心種質(zhì)，所得的結(jié)果可能更具有利用價值。1.3核桃種質(zhì)資源研究1.3.1我國核桃屬植物資源多樣性我國是世界上核桃屬遺傳多樣性最為豐富的國家之一，蘊藏著眾多優(yōu)良基因源，如抗病、抗蟲、抗逆、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)等(郗榮庭和張毅萍,1992)。特別是新疆、西藏產(chǎn)區(qū)，核桃種質(zhì)資源十分豐富，存在大量的野生種及栽培種類型，且栽培地域十分廣泛。嚴兆福和尚新業(yè)(1987)早期對新疆核桃進行分類時發(fā)現(xiàn)，新疆核桃種內(nèi)類型多樣，包括薄殼、厚殼、早熟、晚熟、早實、晚實、麻面、小果等多樣類型；種群內(nèi)核殼厚薄、熟期早晚以及童期長短都包括多種類型；在早實核桃類群中，喀什、和田兩地區(qū)的早實株數(shù)占該區(qū)總株數(shù)5%左右，阿克蘇地區(qū)的占該區(qū)總株數(shù)15%左右，烏什縣稍多。郝艷賓(2021)用53個表型數(shù)據(jù)對核桃資源的起源、植物學(xué)特征、生物學(xué)特性等性狀進行描述，構(gòu)建了50份核桃資源的種質(zhì)資源庫；根據(jù)資源實用性、代表性、多樣性等原則，篩選出‘薄殼香’、‘香玲’、‘遼寧5號’和‘北京746’4份優(yōu)異核桃資源。曾斌等(2021)利用SSR評價，認為新疆核桃的遺傳多樣性水平較高，并揭示了新疆核桃屬植物的遺傳變異、群體擴散及其地理系統(tǒng)發(fā)育進化等方面的規(guī)律，認為在進行遺傳多樣性保護和種質(zhì)資源的保存時，應(yīng)充分重視群體內(nèi)不同類型個體的保存，同時也要在分布區(qū)不同區(qū)域內(nèi)保存不同的群體。由于我國核桃分布地域廣闊，品種類型繁多，許多特異的種質(zhì)資源在逐步的研究中被發(fā)掘出來，比如分布于我國陜西省的串子核桃，耐寒、抗晚霜、青果以串狀著生；紅瓤核桃因其堅果核仁皮色為鮮紅而得名；三棱核桃有3條縫合線；五蕾核桃青果聚集成簇狀著生；烏米核桃仁皮為黑褐色；橡子核桃堅果特小、似橡子。還有一些如雞蛋皮核桃、尖尖核桃、尖尾巴核桃、尖嘴核桃、露仁核桃、圓核桃、紙皮核桃等極為形象的描述了其堅果的特點。這些復(fù)雜的名稱，形象的反映了我國核桃品種類型的多樣性，以及豐富的種質(zhì)資源。但是以植物特征進行的命名，造成許多種質(zhì)同名異物或同物異名，這給核桃種質(zhì)資源的收集、保存和評價都帶來一定的困難。因此，建立簡單有效的核桃種質(zhì)資源的分類和鑒定方法，對核桃資源的利用和新品種選育十分必要。1.3.2核桃種質(zhì)創(chuàng)新核桃主要育種途徑有實生選種、引種和雜交育種。引種主要受品種本身適應(yīng)能力，特別是生態(tài)環(huán)境條件的影響，但成本低操作簡單；而雜交育種則由于核桃樹樹體大，不易操作，需要很大的人力、物力，而且周期長，見效慢，但雜交育種可把雙親的優(yōu)良特性綜合在一起，可以針對特定的性狀進行育種，因此仍然是核桃品種改良的重要手段。以美國的核桃育種為例，加州大學(xué)戴維斯分校從1948年開始進行核桃育種，實生選育了‘Ashley’、‘Chico’、‘Chandler’、‘Howard’、‘Sunland’、‘Hartley’等早實、豐產(chǎn)品種。近年來，通過人工控制授粉，又培育了產(chǎn)量高、抗病性強、仁色淺、熟期早的三個品種‘Sexton’、‘Gillet’、‘Forde’，并應(yīng)用雜交和回交的方式培育抗病及抗線蟲品種(McGranahan&Leslie,2021)。特別有成效的是種間雜交種‘奇異核桃’的培育，它以北加州黑核桃為母本，以核桃為父本通過自然雜交獲得種子后而得到的，到目前為止，在很多試驗表明奇異核桃的雜種生長勢強于純種，并對核桃黑線病有明顯的抗性，不但是優(yōu)良的砧木類型，還是優(yōu)秀的用材用品種。波蘭、捷克、保加利亞等國家也主要是通過實生選種培育新品種，他們首先進行資源調(diào)査，然后從中選出優(yōu)株、優(yōu)系，鑒定后予以推廣(郗榮庭和張毅萍,1992)。西歐國家如西班牙、法國等國主要是對美國選育出的品種進行引進、試驗并進行推廣，比如西班牙通過對核桃品種‘Serr’的實生后代進行篩選，選育出了抗根癌農(nóng)桿菌的砧木類型(Frutosetal.,2021)。在我國，從1959年新疆早實核桃被引入北京地區(qū)后，全國許多省份開始引種新疆核桃，并在其實生后代中選育早實豐產(chǎn)的核桃良種。中國林業(yè)科學(xué)研究院、遼寧經(jīng)濟林研究所、山東省農(nóng)科院果樹所等單位還先后將新疆核桃與當(dāng)?shù)睾颂译s交育種，培育出了‘中林1號’、‘中林5號’、‘遼寧1號’、‘香玲’、‘魯光’等良種。林業(yè)部1989年鑒定的我國北方地區(qū)16個早實核桃新品種中，約80%與新疆核桃有淵源，其中有3個品種是新疆直接選送的，另有10個品種是其他省份從新疆核桃的實生后代中選育或利用新疆核桃為親本或親本之一與當(dāng)?shù)睾颂译s交培育的。方文亮等(1991)在國內(nèi)率先開展種間雜交，用泡核桃與新疆早實核桃進行種間雜交，獲得了早實、豐產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)和抗病的云新系列新品種5個。這些新品種的培育為推動我國核桃良種化奠定了堅實的基礎(chǔ)。近年來，隨著核桃產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展，不同省份間的種質(zhì)資源交流也更加頻繁。此外，通過基因工程技術(shù)改良進行核桃遺傳改良也是一條有效的途徑。湯浩茹等(2021)通過根癌農(nóng)桿菌C58CIATHVRifR介導(dǎo)法，將哈茲木霉幾丁質(zhì)酶ThEn-42基因?qū)牒颂殷w細胞胚，獲得了遺傳轉(zhuǎn)化的核桃植株。方宏筠和王關(guān)林(2021)以黑核桃幼胚和幼葉為外植體誘導(dǎo)出體細胞胚狀體，并通過根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)將nptⅡ和gus基因轉(zhuǎn)入體細胞胚，建立了黑核桃體細胞胚基因轉(zhuǎn)化體系。這些研究為我國核桃種質(zhì)創(chuàng)新奠定了基礎(chǔ)。1.3.3國內(nèi)外分子標(biāo)記運用于核桃研究的動態(tài)與比較目前，分子標(biāo)記技術(shù)在我國核桃遺傳多樣性及品種鑒定研究中的應(yīng)用，主要是運用同功酶(楊自湘等,1989)和RAPD技術(shù)對核桃種群進行地理生態(tài)型評價(吳燕民等a,2021)、遺傳結(jié)構(gòu)和遺傳多樣性評價(王正加等,2021;王滑等,2021)、種屬鑒定(吳燕民等b,2021)以及尋找與核桃目標(biāo)性狀連鎖的遺傳基因(王國安等,2021)。國外分子標(biāo)記在核桃上的應(yīng)用主要有品種(基因型)鑒定、系譜分析、遺傳多樣性評價、分子標(biāo)記輔助育種等方面，主要包括同功酶(Ninotetal.,2021)，RFLPs(Fjellstrometal.,1994)，RAPDs(Conneretal.,2021)，ISSRs(Potteretal.,2021)，SSRS(Foronietal.,2021)和AFLP(Maetal.,2021)等。Kafkas等(2021)利用AFLP和SAMPL(selectiveamplificationofmicrosatellitepolymorphicloci)分子標(biāo)記技術(shù)對土耳其的21種核桃基因型的遺傳關(guān)系進行了測定，采用8個引物，其中，6個用于AFLP，2個用于SAMPL。結(jié)果顯示，230條擴增帶譜呈多態(tài)性，占總數(shù)的50.4%。同時表明，與AFLP技術(shù)相比，SAMPL技術(shù)更能有效地區(qū)分遺傳關(guān)系很近的核桃基因型。Dangl等(2021)根據(jù)可評性和多態(tài)性位點的數(shù)量，從147個微衛(wèi)星標(biāo)記中篩選出14個對47份核桃種質(zhì)和1份奇異核桃(Paradox)種質(zhì)進行研究，分析了每份種質(zhì)相互間的遺傳距離，運用UPGMA構(gòu)建了遺傳關(guān)系的系統(tǒng)樹圖，揭示了每份種質(zhì)的家譜和起源。1.4SNP技術(shù)的原理、特點及應(yīng)用SSR由于高多態(tài)性、共顯性等優(yōu)點可以傳遞更多的信息量(Madhouetal,2021)。Woeste等(2021)以黑核桃的基因組，建立了一個富含(GA/CT)微衛(wèi)星重復(fù)序列的基因庫，選出1500個克隆的側(cè)翼序列設(shè)計并最終篩選出了30對多態(tài)性高的SSR引物，從此，黑核桃引物又在以后的應(yīng)用中不斷增加。SSR技術(shù)應(yīng)用核桃屬植物研宄中涉及最多的是遺傳結(jié)構(gòu)、遺傳多樣性和親緣關(guān)系鑒定的研究。Victory等(2021)和Ross-Davis等(2021)分別對美國黑核桃和美國白核桃的遺傳結(jié)構(gòu)和遺傳多樣性進行研究，證明了此方法的可行性。1.4.1SNP的原理微衛(wèi)星DNA又名簡單重復(fù)序列(SimpleSequenceRepeat，SSR)，是指基因組中由1~6個核苷酸組成的基本單位重復(fù)多次構(gòu)成的一段DNA，其長度較短，一般在l00bp以內(nèi)，廣泛分布于基因組的不同位置。SSR符合孟德爾遺傳規(guī)律，并且在單個微衛(wèi)星位點可以做共顯性分析。SSR標(biāo)記利用基因組中某一特定微衛(wèi)星的側(cè)翼序列保守性較強的特點，根據(jù)微衛(wèi)星的側(cè)翼序列人工合成引物進行PCR擴增，從而將單個微衛(wèi)星位點擴增出來。(鄒喻蘋等,2021;趙春梅,2021.)。1.4.2SNP標(biāo)記的特點微衛(wèi)星中重復(fù)單位的數(shù)目存在高度變異，表現(xiàn)為微衛(wèi)星數(shù)目的整倍性變異或出現(xiàn)重復(fù)單位中序列的變異，因而造成位點的多態(tài)性。由于單個微衛(wèi)星位點重復(fù)單元在數(shù)量上的變異，從而產(chǎn)生了DNA片段長度多態(tài)性，每一擴增位點就代表了這一位點的一對等位基因。通過對基因組的深入研究發(fā)現(xiàn)，不同生物體的基因組之間存在一定程度的相似性(GMCordeiro,2021)。微衛(wèi)星DNA位點在屬內(nèi)種間，甚至在科內(nèi)屬間是保守的。因此，人們可以共享近緣物種SSR引物對的信息。周涵稻等(2021)用5對甘藍型油菜(BrassicanapusL.)的SSR引物(Bn92A、Bn6A2、Bn72A、Bn83/3、Bn38A)對分屬不同物種的12份材料進行擴增。其中包括2個水稻品種、1個棉花品種、2個芥菜品種、1個白菜品種、2個玉米品種、2個甘藍型油菜品種、1個柑橘品種以及1種十字花科野生植物Moricandia.nitens。PCR擴增結(jié)果顯示，所有12份材料用5對SSR引物擴增出的主帶片段大小一致，說明各物種基因組間存在著很大程度的相似性。因此，SSR分子標(biāo)記在不同物種之間是具有一定的通用性的。由于SSR重復(fù)數(shù)目變化很大，所以SSR標(biāo)記能揭示比RFLP高得多的多態(tài)性，因而成為遺傳標(biāo)記研究的熱點。1.4.3SNP用于品種鑒定在品種鑒定中，該SSR標(biāo)記也發(fā)揮了巨大的作用(Dangletal,2021)。張銳(2021)采用EST-SSR分子標(biāo)記對新疆核桃種質(zhì)資源遺傳多樣性進行評估，認為新疆核桃群體內(nèi)的多態(tài)性較低，群體間的多態(tài)性水平差異較小，初步推斷新疆栽培種的母本起源相同。周貝貝等(2021)還用黑核桃的引物進行了‘魯果2號’的親子鑒定研究，證實‘上宋6號’和‘魯香’為其親本，而同時用AFLP未能鑒定出親本。Foroni等(2021)運用SSR標(biāo)記探討了意大利幾個主要核桃栽培品種與當(dāng)?shù)貙嵣N‘Sorrento’的親緣關(guān)系。近年來，越來越多的研究者注重將不同標(biāo)記系統(tǒng)結(jié)合起來，對研究對象進行更加綜合的評價。研究者將形態(tài)學(xué)特征和SSR結(jié)合對不同品種的遺傳多樣性和遺傳關(guān)系進行評價(Ebrahimietal.,2021;Mahmoodietal.,2021;Popetal.,2021)，結(jié)果提供了形態(tài)學(xué)特征的描述，但由于其可變性不能明確的估計出核桃的遺傳關(guān)系，結(jié)合SSR標(biāo)記系統(tǒng)，伊朗等地核桃基因型較高的遺傳多樣性。這些SSR引物已被證明能有效地應(yīng)用于核桃基因組的擴增，然而，SSR引物在轉(zhuǎn)移應(yīng)用時多態(tài)性往往會降低(Dangl,2021;Karimietal.,2021)。因此，齊建勛等(2021)、Zhang等(2021)、Zhang等(2021)分別以核桃的EST文庫為來源，篩選出了多態(tài)性較高的SSR引物，證明了EST-SSR的可行性和有效性，并在引物轉(zhuǎn)移應(yīng)用方面做了很多努力。但許多研究都證實，EST-SSR因為處在基因編碼區(qū)，相對基因組SSR而言較為保守(文明富等.2021)。Wu等(2021)構(gòu)建的兩個BAC文庫可為SSR的開發(fā)提供數(shù)據(jù)支持。通過核桃基因組BAC文庫的分析，BAC末端序列(BES)總長度31.2Mb，覆蓋了核桃基因組的5.1%。通過序列分析表明，BES序列中的SSR比EST中豐富，該文庫是目前可利用最大的基因庫。1.4.4BES-SSRSSR分子標(biāo)記是在物種進化過程中形成的，在種屬間重復(fù)次數(shù)不同，存在于基因組的編碼區(qū)和非編碼區(qū)，即來自于轉(zhuǎn)錄組區(qū)域的SSR，稱為EST-SSR和非轉(zhuǎn)錄區(qū)域的SSR，也稱gSSR。并且在非編碼區(qū)中更加豐富，多態(tài)性也更高(Lietal.,2021)。由于具有多位點性、遺傳共顯性、高度變異性、基因覆蓋率高、可自動化和和高通量基因分型等特點，己經(jīng)成為目前植物遺傳育種中應(yīng)用最為廣泛的分子標(biāo)記(Paridaetal.,2021)。目前報道的核桃SSR引物多來源于核桃基因組編碼區(qū)，通過檢索核桃EST序列開發(fā)，它們在相關(guān)物種間應(yīng)用具有很高旳可轉(zhuǎn)移性，然而，由于EST-SSR來源于表達序列，序列較為保守，多態(tài)性比基因組DNA-SSR低，因此在鑒定高相關(guān)基因型、進行指紋圖譜構(gòu)建或品種鑒定中沒有基因組DNA-SSR效率高(Varshneyetal.,2021)。SSR近年在核桃屬植物的遺傳分析中的應(yīng)用，大多數(shù)仍使用的Woeste等(2021)開發(fā)的黑核桃SSR引物，核桃BAC文庫的構(gòu)建為非編碼區(qū)SSR的開發(fā)提供豐富的資源。2研究目的與意義、技術(shù)路線

論大學(xué)生寫作能力寫作能力是對自己所積累的信息進行選擇、提取、加工、改造并將之形成為書面文字的能力。積累是寫作的基礎(chǔ)，積累越厚實，寫作就越有基礎(chǔ)，文章就能根深葉茂開奇葩。沒有積累，胸?zé)o點墨，怎么也不會寫出作文來的。寫作能力是每個大學(xué)生必須具備的能力。從目前高校整體情況上看，大學(xué)生的寫作能力較為欠缺。一、大學(xué)生應(yīng)用文寫作能力的定義那么，大學(xué)生的寫作能力究竟是指什么呢？葉圣陶先生曾經(jīng)說過，“大學(xué)畢業(yè)生不一定能寫小說詩歌，但是一定要寫工作和生活中實用的文章，而且非寫得既通順又扎實不可。”對于大學(xué)生的寫作能力應(yīng)包含什么，可能有多種理解，但從葉圣陶先生的談話中，我認為：大學(xué)生寫作能力應(yīng)包括應(yīng)用寫作能力和文學(xué)寫作能力，而前者是必須的，后者是“不一定”要具備，能具備則更好。眾所周知，對于大學(xué)生來說，是要寫畢業(yè)論文的，我認為寫作論文的能力可以包含在應(yīng)用寫作能力之中。大學(xué)生寫作能力的體現(xiàn)，也往往是在撰寫畢業(yè)論文中集中體現(xiàn)出來的。本科畢業(yè)論文無論是對于學(xué)生個人還是對于院系和學(xué)校來說，都是十分重要的。如何提高本科畢業(yè)論文的質(zhì)量和水平，就成為教育行政部門和高校都很重視的一個重要課題。如何提高大學(xué)生的寫作能力的問題必須得到社會的廣泛關(guān)注，并且提出對策去實施解決。二、造成大學(xué)生應(yīng)用文寫作困境的原因：（一）大學(xué)寫作課開設(shè)結(jié)構(gòu)不合理。就目前中國多數(shù)高校的學(xué)科設(shè)置來看，除了中文專業(yè)會系統(tǒng)開設(shè)寫作的系列課程外，其他專業(yè)的學(xué)生都只開設(shè)了普及性的《大學(xué)語文》課。學(xué)生寫作能力的提高是一項艱巨復(fù)雜的任務(wù)，而我們的課程設(shè)置僅把這一任務(wù)交給了大學(xué)語文教師，可大學(xué)語文教師既要在有限課時時間內(nèi)普及相關(guān)經(jīng)典名著知識，又要適度提高學(xué)生的鑒賞能力，且要教會學(xué)生寫作規(guī)律并提高寫作能力，任務(wù)之重實難完成。（二）對實用寫作的普遍性不重視?！按髮W(xué)語文”教育已經(jīng)被嚴重地“邊緣化”。目前對中國語文的態(tài)度淡漠，而是呈現(xiàn)出全民學(xué)英語的大好勢頭。中小學(xué)如此，大學(xué)更是如此。對我們的母語中國語文，在大學(xué)反而被漠視，沒有相關(guān)的課程的設(shè)置，沒有系統(tǒng)的學(xué)習(xí)實踐訓(xùn)練。這其實是國人的一種偏見。應(yīng)用寫作有它自身的規(guī)律和方法。一個人學(xué)問很大，會寫小說、詩歌、戲劇等，但如果不曉得應(yīng)用文寫作的特點和方法，他就寫不好