整理慢病毒穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株步驟_第1頁
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#/5(穩(wěn)轉(zhuǎn))等調(diào)控元件(2)包組信號少:LTR-少通過包裝細(xì)胞的RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄為RNA,通過小信號起始包裝(3)啟動子、酶切位點(diǎn)和抗性基因 (amp氨茉青霉素puro喋吟霉素)(4)stuffer:目的基因插入位點(diǎn)(慢病毒載體可插入 5kbp左右)⑸GFP:greenfluorescentprotein綠色熒光蛋白WPRE:WoodchuckHepatitisVirus(WHP)PosttranscriptionalRegulatoryElement炎病毒轉(zhuǎn)錄后調(diào)控元件。轉(zhuǎn)錄后可形成三級結(jié)構(gòu),促進(jìn)基因的表達(dá)cPPT/CTS:逆轉(zhuǎn)錄病毒順式作用區(qū)域,其中該cPPT和CTS區(qū)域誘導(dǎo)三鏈DNA結(jié)構(gòu)a -產(chǎn)演pF?terpLKO.l-TRC:OTOLbEizBiff?唆nr/CTSa -產(chǎn)演pF?terpLKO.l-TRC:OTOLbEizBiff?唆nr/CTSXbal(2-27§).“Mhel122c4]FcuRIm》皿BniuHl超3。?,Mud(zJ14"(更新于2018。11)?2?包裝質(zhì)粒(1元a8基因編碼病毒的核心蛋白基質(zhì)蛋白、衣殼蛋白、核衣殼蛋白等pol基因編碼病毒復(fù)制所需的酶類,如反轉(zhuǎn)錄酶、整合酶、蛋白酶pro基因則編碼切割蛋白前體所需的蛋白酶(4)多種酶切位點(diǎn)和巨細(xì)胞病毒啟動子Amp善.s)iii1:q卜的岫Atrl膈w申爐,wIV7|Ni*Nn;?3?包膜載體6基因,用于代替已口丫基因6基因,用于代替已口丫基因**tz\11|(Z)Mw1⑶卜$ty1(21)//fjm11I133)117G)殍“INW,1453P71s/v582KbpNNf(3KK2).S/itRiifti11]《沁6mbata--Srv1b&ta-glabinpAyloblnInirarA'mRI(L4iG)C7h1(1+"0)5/\1(32(M)品”糖IAr(A-I人爐71sKMIS"I(S5f4)\naBl<517>NBIt2f14roSty1

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