蟾蜍坐骨神經(jīng)干

蟾蜍坐骨神經(jīng)干第1頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四實(shí)驗(yàn)?zāi)康臏y(cè)定蛙坐骨神經(jīng)的動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度學(xué)習(xí)蛙類(lèi)離體坐骨神經(jīng)干的單相、雙相動(dòng)作電位的記錄方法及與強(qiáng)度的關(guān)系。

判別、分析神經(jīng)干動(dòng)作電位的基本波形、測(cè)量其幅值以及時(shí)程。學(xué)會(huì)制作坐骨神經(jīng)標(biāo)本的方法第2頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四實(shí)驗(yàn)原理（一）

將蛙的神經(jīng)標(biāo)本放在任氏液中，其興奮性在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)可保持不變。若給神經(jīng)一次適宜刺激，可在神經(jīng)上產(chǎn)生一個(gè)動(dòng)作電位。生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)標(biāo)本來(lái)觀(guān)察神經(jīng)興奮性的規(guī)律。蛙坐骨神經(jīng)標(biāo)本制作第3頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四實(shí)驗(yàn)原理（二）本實(shí)驗(yàn)將兩個(gè)引導(dǎo)電極置于正常完整的神經(jīng)干表面，當(dāng)神經(jīng)干的一端興奮之后，興奮波會(huì)先后通過(guò)兩個(gè)引導(dǎo)電極，可記錄到兩個(gè)相反方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱(chēng)為雙相動(dòng)作電位。如果兩個(gè)引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)組織有損傷，興奮波只能通過(guò)一個(gè)引導(dǎo)電極，不能傳導(dǎo)至第二個(gè)引導(dǎo)電極，則只能記錄到一個(gè)方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱(chēng)為單向動(dòng)作電位。蛙坐骨神經(jīng)雙相、單相動(dòng)作電位與強(qiáng)度法則第4頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四第5頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四實(shí)驗(yàn)原理（三）

動(dòng)作電位在神經(jīng)干上傳導(dǎo)具有一定的速度蟾蜍的坐骨神經(jīng)是混合神經(jīng)，由許多粗細(xì)不等的有髓和無(wú)髓神經(jīng)纖維構(gòu)成，其中以Aɑ類(lèi)纖維為主，傳導(dǎo)速度約為35—40m/s。神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)速度（v）是指動(dòng)作電位在單位時(shí)間（t）內(nèi)傳導(dǎo)的距離（s）神經(jīng)動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度的測(cè)定

第6頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四儀器與器械（一）普通剪刀、手術(shù)剪、組織剪、眼科鑷金屬探針、蛙板、蛙釘玻璃分針瓷碗、細(xì)線(xiàn)、培養(yǎng)皿、滴管第7頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四實(shí)驗(yàn)方法與步驟1.破壞腦、脊髓

（雙毀髓）

枕骨大孔第8頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四2.剪除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟坐骨神經(jīng)第9頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四坐骨神經(jīng)的走行第10頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四3.剝皮

剝完皮膚后，將標(biāo)本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。

4.洗干凈雙手及使用過(guò)的全部手術(shù)器械。5.分離兩腿6.游離坐骨神經(jīng)標(biāo)本第11頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四注意事項(xiàng)1.破壞腦脊髓要徹底，防止蟾酥射入操作者眼中或污染實(shí)驗(yàn)標(biāo)本。2.操作時(shí)避免壓擠、損傷和用力牽拉標(biāo)本，不可用金屬器械觸碰神經(jīng)干。

3.操作過(guò)程中，應(yīng)給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影響標(biāo)本的興奮性。

4.標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘,使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定,再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)效果會(huì)較好。第12頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四儀器與器械（二）計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)RM6240神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒第13頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四實(shí)驗(yàn)方法與步驟1.坐骨神經(jīng)標(biāo)本的制備2.儀器及標(biāo)本的連結(jié)坐骨神經(jīng)干放置于神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒內(nèi)神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒與RM6240系統(tǒng)連接刺激電極引導(dǎo)電極s+s_r1r1’r2r2’接地電極第14頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四（1）引導(dǎo)雙相神經(jīng)動(dòng)作電位3.啟動(dòng)BL410系統(tǒng)，進(jìn)入系統(tǒng)軟件，點(diǎn)擊“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”菜單，選擇“神經(jīng)肌肉生理實(shí)驗(yàn)”。點(diǎn)擊“神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)”，引導(dǎo)出一個(gè)雙相動(dòng)作電位。第15頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四

②仔細(xì)觀(guān)察雙相動(dòng)作電位的波形。讀出最大刺激時(shí)雙相動(dòng)作電位上下相的振幅和整個(gè)動(dòng)作電位持續(xù)時(shí)間數(shù)值。①自動(dòng)調(diào)節(jié)刺激強(qiáng)度，觀(guān)察動(dòng)作電位波形的變化。讀出波寬為某一數(shù)值時(shí)的閾刺激和最大刺激。（2）觀(guān)察和測(cè)定雙相動(dòng)作電位第16頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四⑶測(cè)定神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)速度①分別測(cè)量?jī)蓚€(gè)動(dòng)作電位起始點(diǎn)之間的時(shí)間差（t），為神經(jīng)沖動(dòng)從第一對(duì)引導(dǎo)電極傳導(dǎo)到第二對(duì)引導(dǎo)電極所需要的時(shí)間。②測(cè)量神經(jīng)屏蔽盒內(nèi)兩對(duì)電極之間的距離（s）即為神經(jīng)干的長(zhǎng)度。（2㎝）③按公式v=s/t(m/s）計(jì)算神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)的速度。第17頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四用鑷子將兩個(gè)引導(dǎo)電極r1,r1’之間的神經(jīng)夾傷，記錄單相動(dòng)作電位。⑷觀(guān)察和測(cè)定單相動(dòng)作電位第18頁(yè)，共20頁(yè)，2023年，2月20日，星期四注意事項(xiàng)制備標(biāo)本時(shí)，神經(jīng)干應(yīng)盡可能分離長(zhǎng)一些，上自脊柱附近的主干，下至踝關(guān)節(jié)附近。分離過(guò)程中勿損傷神經(jīng)組織，以免影響其興奮性。將神經(jīng)干搭在引導(dǎo)電極上時(shí)，神經(jīng)干不能與標(biāo)本盒壁相接觸，盡量將其拉成水平線(xiàn)，不要下垂或斜向放置。3.刺激強(qiáng)度在開(kāi)始時(shí)不要過(guò)強(qiáng)，先由弱強(qiáng)度開(kāi)始，逐步加大強(qiáng)度，以免剌激傷害神經(jīng)標(biāo)本。4.經(jīng)常滴加任氏液，保持神經(jīng)標(biāo)本濕潤(rùn)。5.實(shí)驗(yàn)完畢神經(jīng)糟應(yīng)仔細(xì)清洗，擦干，以免殘留的鹽液導(dǎo)致電極腐蝕生銹。