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文檔簡介
魚類組織胚胎學(xué)
緒論一、組織胚胎學(xué)的研究內(nèi)容二、組織胚胎學(xué)的研究方法三、組織胚胎學(xué)課程的作用與學(xué)習(xí)要求
一、組織胚胎學(xué)的研究內(nèi)容組織胚胎學(xué)包括:組織學(xué)胚胎學(xué)組織肌肉組織上皮組織
結(jié)締組織神經(jīng)組織細(xì)胞細(xì)胞間質(zhì)器官和系統(tǒng)機(jī)體細(xì)胞
組織器官系統(tǒng)細(xì)胞:是機(jī)體形態(tài)結(jié)構(gòu)的基本單位,是新陳代謝、生長發(fā)育和增殖分化的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。組織:是由許多在結(jié)構(gòu)和功能上密切相關(guān)的細(xì)胞,借細(xì)胞間質(zhì)結(jié)合在一起所構(gòu)成的細(xì)胞群體。組織根據(jù)其來源、功能和結(jié)構(gòu)特點(diǎn),通常將機(jī)體所有的組織分為四大類,即上皮組織、結(jié)締組織、肌組織和神經(jīng)組織,統(tǒng)稱為基本組織。器官:是由幾種不同的組織按一定的規(guī)律結(jié)合而成,如心、肝、脾、肺、腎等。每一器官各有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu)和特定的生理機(jī)能。系統(tǒng):由許多功能相關(guān)的器官聯(lián)合在一起構(gòu)成。每個(gè)系統(tǒng)在體內(nèi)執(zhí)行特定的相對(duì)獨(dú)立的功能。(二)胚胎學(xué)(Embryology)
概念:研究(魚體)胚胎發(fā)育的科學(xué)。胚胎發(fā)育是指從受精卵開始到幼體的形成并破膜而出(孵出)或脫離母體(產(chǎn)出)的整個(gè)過程。研究內(nèi)容:包括胚前發(fā)育、胚胎發(fā)育、胚后發(fā)育三個(gè)部分。
精細(xì)胞卵細(xì)胞受精卵
胚胎
幼體
1664年,英國學(xué)者RobertHooke自制的放大鏡觀察軟木薄片,發(fā)現(xiàn)了許多小格,把它命名為“cell”,即細(xì)胞荷蘭學(xué)者Leeuwenhoek用高倍放大鏡發(fā)現(xiàn)了精子、紅細(xì)胞、肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等。組織培養(yǎng)術(shù)、細(xì)胞融合術(shù)、免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)術(shù)、放射自顯影術(shù)、熒光和激光術(shù)、原位雜交術(shù)、圖像分析和立體計(jì)量術(shù)等。17世紀(jì)50年代,英國學(xué)者Harvey提出“一切生命皆來自卵”的假設(shè)。隨后,荷蘭學(xué)者Leeuwenhoek和Graaf分別發(fā)現(xiàn)精子與卵泡,提出“先成論”學(xué)說18世紀(jì)中葉,德國學(xué)者Wolff提出了“漸成論”學(xué)說,認(rèn)為胚胎是經(jīng)歷了由簡單到復(fù)雜的漸變過程而形成的。1885年,德國學(xué)者Remark提出了胚胎發(fā)育的三胚層學(xué)說。20世紀(jì)的70年代,試管嬰兒誕生,90年代克隆動(dòng)物問世。二、組織胚胎學(xué)的研究方法研究組織胚胎學(xué)的常用方法有:光鏡技術(shù)電鏡技術(shù)組織化學(xué)技術(shù)光鏡技術(shù)
.石蠟切片技術(shù)(H.E染色)取材和固定;脫水和包埋;切片和染色;封片。組織切片染色法-HE染色
蘇木精(Hematoxylin):堿性染料,使C核內(nèi)的染色質(zhì)及C質(zhì)內(nèi)的核糖體染成藍(lán)紫色。伊紅(Eosin):酸性染料,使C質(zhì)和C外基質(zhì)中的成分染成紅色。染色過程:二甲苯酒精染色脫水透明封片脫蠟脫二甲苯魚的膽管
魚的腎臟
血液神經(jīng)組織
掃描電鏡觀察組織或細(xì)胞表面的立體結(jié)構(gòu)。
1、透射電鏡:
2、掃描電鏡:
(三)組織化學(xué)技術(shù):
是應(yīng)用化學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)或分子生物學(xué)原理和技術(shù),與組織學(xué)技術(shù)相結(jié)合而產(chǎn)生的綜合技術(shù),能在組織切片定性、定位、定量地顯示某種物質(zhì)的存在與否以及分布狀態(tài)。
暗視野顯微鏡術(shù)暗視野顯微鏡與普通光鏡相比,其主要特點(diǎn)是分辨率較高。其內(nèi)部裝有暗視野集光器,視野內(nèi)不能直接看到照明光線而呈黑暗狀態(tài)。由于被檢物體表面衍射或散射的光亮,可以觀察物體的外形和運(yùn)動(dòng),如細(xì)胞核、線粒體和纖毛的運(yùn)動(dòng)。熒光顯微鏡術(shù)熒光顯微鏡是用來觀察標(biāo)本中的自發(fā)熒光物質(zhì)或以熒光素染色或標(biāo)記的細(xì)胞和結(jié)構(gòu)。相差顯微鏡術(shù)相差顯微鏡用于觀察組織培養(yǎng)中活細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)。活細(xì)胞無色透明,一般光鏡下不易分辨細(xì)胞輪廓及其結(jié)構(gòu)。相差顯微鏡能將活細(xì)胞不同厚度及細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)對(duì)光產(chǎn)生的不同折射作用,轉(zhuǎn)換為光密度差異即明暗差而可辨認(rèn)。IATIA公司的QPM定量分析相差顯微鏡系統(tǒng)
共焦激光掃描顯微鏡術(shù)
共焦激光掃描顯微鏡是20世紀(jì)80年代研制成的一種高光敏度、高分辨率的新型生物學(xué)儀器。它以激光為光源,采用共焦成像系統(tǒng)和電子光學(xué)系統(tǒng),經(jīng)過微機(jī)圖像分析系統(tǒng)對(duì)組織或細(xì)胞進(jìn)行二維和三維分析處理。CLSM可用于細(xì)胞內(nèi)各種熒光標(biāo)記物的微量分析,細(xì)胞的受體移動(dòng)和膜電位變化,酶活性和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的測定,DNA的精確分析等。微分干涉差顯微鏡1952年,Nomarski在相差顯微鏡原理的基礎(chǔ)上發(fā)明了微分干涉差顯微鏡。DIC顯微鏡又稱Nomarski相差顯微鏡,其優(yōu)點(diǎn)是能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影影像。與相差顯微鏡相比,其標(biāo)本可略厚一點(diǎn),折射率差別更大,故影像的立體感更強(qiáng)。DIC顯微鏡下的硅藻(偽彩色)
倒置顯微鏡組成和普通顯微鏡一樣,只不過物鏡與照明系統(tǒng)顛倒,前者在載物臺(tái)之下,后者在載物臺(tái)之上,用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞,具有相差物鏡免疫組織化學(xué)是利用抗原抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)原理,以檢測組織、細(xì)胞中某種肽類、蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的分布。其方法是抗原注入使其產(chǎn)生相應(yīng)的特異性抗體,從動(dòng)物的血清提取該抗體,以熒光素、酶、鐵蛋白或膠體金等標(biāo)記。放射自顯影術(shù)放射自顯影術(shù)亦稱同位素示蹤術(shù),將放射性核素或其標(biāo)記物注入動(dòng)物體內(nèi)或細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi),取某部位組織制成切片或取細(xì)胞培養(yǎng)液制成涂片,在暗室中將切片涂以薄層感光乳膠,存在于細(xì)胞內(nèi)的放射性核素產(chǎn)生的射線作用于乳膠中的溴化銀,還原為銀粒,經(jīng)顯影和定影后,便可在光鏡或電鏡下觀察標(biāo)記物的數(shù)量及分布情況。組織培養(yǎng)術(shù)組織培養(yǎng)術(shù)亦稱體外培養(yǎng),是在無菌條件下取機(jī)體的活組織或活細(xì)胞,在體外適宜的環(huán)境中培養(yǎng)成活。細(xì)胞在體外培養(yǎng)需要與體內(nèi)基本相同的條件,研究各種理化因子對(duì)活細(xì)胞的直接影響,并可觀察記錄細(xì)胞的增殖、分化、運(yùn)動(dòng)、吞噬、致病、癌變等動(dòng)態(tài)變化,動(dòng)物早期胚胎發(fā)育過程。形態(tài)計(jì)量術(shù)形態(tài)計(jì)量術(shù)是利用圖像分析儀,亦稱圖像分析系統(tǒng),運(yùn)用數(shù)學(xué)和統(tǒng)汁學(xué)原理對(duì)組織和細(xì)胞進(jìn)行二維和三維的形態(tài)測量研究,可使組織、細(xì)胞中各種成分的數(shù)量、形態(tài)、分布、體積、表面積等以精確的數(shù)據(jù)顯示出來,從而促進(jìn)形態(tài)學(xué)研究由定性走向定量,把形態(tài)計(jì)量技術(shù)由平面測量而推論出立體結(jié)構(gòu)。原位雜交術(shù)原位雜交術(shù)是一種分子生物學(xué)技術(shù),用已知堿基序列并帶有標(biāo)記物的核酸探針,檢測細(xì)胞內(nèi)mRNA和DNA序列片段,原位研究細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達(dá),從分子水平探討細(xì)胞功能的表達(dá)及其調(diào)節(jié)的機(jī)制。胚胎工程胚胎工程是指對(duì)胚胎發(fā)育過程機(jī)理的研究和人為干預(yù)胚胎發(fā)育過程而言。廣義的胚胎學(xué)研究方法,其包含內(nèi)容很廣,即有胚胎收集、胚胎保存、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植,研究胚胎發(fā)育機(jī)理和人為干預(yù)發(fā)育的方法,包括胚胎分割、胚胎嵌合、胚胎性別鑒定、胚胎干細(xì)胞、體外受精又稱試管動(dòng)物、細(xì)胞核移植又稱克隆動(dòng)物以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等。三、組織胚胎學(xué)課程的作用與學(xué)習(xí)要求
(一)課程作用
魚類組織胚胎學(xué)是水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)專業(yè)的重要專業(yè)基礎(chǔ)課之一,與其他專業(yè)基礎(chǔ)課和專業(yè)課有密切聯(lián)系。其中魚類組織學(xué)與魚類生理學(xué)和魚病學(xué)更為密切;魚類胚胎學(xué)與魚類遺傳育種學(xué)有著密切關(guān)系。(二)學(xué)習(xí)要求
1·把握好兩個(gè)學(xué)習(xí)環(huán)節(jié)
理論教學(xué):重點(diǎn)掌握各種組織的組成、分布、分類與構(gòu)造特點(diǎn),以及胚胎發(fā)育過程的分期和不同發(fā)育時(shí)期的分化與構(gòu)造特點(diǎn)。為方便學(xué)習(xí)我們將采取全程多媒體教學(xué),并將所有課程資料上網(wǎng)。2.實(shí)
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